Après avoir placé la fibre de microdialyse dans l’avant-bras, placez la seringue à usage unique dans le plateau porte-seringue des pompes à micro-infusion. Pendant la phase d’hyperémie, perfusez les sonneries lactées, le sérum physiologique ou la solution de véhicule. Fixez l’unité de chauffage local à la peau, en veillant à ce qu’elle recouvre la membrane semi-perméable, à l’aide du disque adhésif de la sonde.
Insérez la sonde de débitmétrie laser Doppler dans l’ouverture au centre du réchauffeur local et commencez à enregistrer les valeurs de flux de globules rouges ou de globules rouges en cliquant sur Démarrer dans le logiciel d’acquisition de données. Placez un brassard de tensiomètre automatique sur le bras d’un sujet non instrumenté. Réglez les radiateurs locaux à 33 degrés Celsius pour maintenir une température de peau thermo neutre.
Pour ajouter un commentaire à l’enregistrement continu dans le logiciel d’acquisition de données, cliquez sur la zone de texte dans le coin supérieur droit de l’écran. Tapez un commentaire, sélectionnez le canal qui doit recevoir le commentaire, puis cliquez sur Ajouter. Commencez la collecte de données de référence une fois que le flux de globules rouges se stabilise à 33 degrés Celsius de chaleur locale en entrant le commentaire, commencez la ligne de base.
Mesurez et enregistrez la pression artérielle de base après cinq à 10 minutes de collecte de données de base. Entrez le commentaire, fin de la ligne de base dans le logiciel d’acquisition de données. Éteignez les pompes à micro-perfusion et remplacez les seringues de solution de sonnerie lactée par la seringue contenant la plus faible concentration d’acétylcholine.
Après avoir fixé les nouvelles seringues et confirmé la perfusion de liquide à travers la sonde, rallumez les pompes à micro-infusion. Entrez start moins 10 en tant que commentaire dans l’enregistrement du logiciel d’acquisition de données. Pendant la dernière minute de perfusion, mesurez et enregistrez la tension artérielle.
Une fois la perfusion d’une concentration donnée terminée, remplacez la seringue par la concentration la plus élevée suivante. Après la perfusion finale, augmentez la température du chauffage local à 43 degrés Celsius. Laissez le flux de globules rouges se stabiliser et remplacez la solution de sonnerie par du nitroprussiate de sodium.
Mesurez et enregistrez la pression artérielle environ toutes les trois minutes pendant cette phase de vasodilatation maximale. Une fois qu’un plateau de flux maximal de globules rouges s’est produit, sélectionnez Arrêter dans le coin inférieur droit du logiciel d’acquisition de données. Consigner la collecte de données de base comme indiqué précédemment.
En fonction des exigences du protocole, augmentez les chauffages locaux à 39 ou 42 degrés Celsius. Une fois que le flux de globules rouges a atteint un plateau en réponse à l’application locale de chaleur, perfusez le nom L à travers la sonde de microdialyse. Ensuite, réglez les radiateurs locaux à 43 degrés Celsius.
Ensuite, commencez la profusion de la sonde de microdialyse avec du nitroprussiate de sodium une fois que le flux de globules rouges a atteint un plateau à 43 degrés Celsius, ce qui permet au flux d’atteindre son plateau maximal. Une fois que la profusion de chaque dose a commencé, une augmentation continue du flux de globules rouges jusqu’à un pic a été observée, suivie d’un plateau induit par la chaleur et les SNP. La profusion de nitroprussiate de sodium a produit une vasodilatation locale maximale, décrite comme une augmentation du flux de globules rouges.
Un flux de globules rouges relativement plus faible a été observé en présence d’un inhibiteur de l’oxyde nitrique synthase. Au cours de la vasodilatation locale maximale, il y aura une augmentation exponentielle du flux de globules rouges, en raison de l’inhibition antérieure de l’oxyde nitrique synthase. Dans le protocole de chauffage local, le nom L a été perfusé après avoir atteint un plateau stable dans le flux de globules rouges.
Une baisse rapide du flux de globules rouges a été observée jusqu’à ce qu’il atteigne un nouveau plateau en réponse à L-Name. L’échauffement a produit une réponse supplémentaire de crête et de nadir dans le flux de globules rouges.
