Pour commencer, placez les seringues à insuline d’un millilitre de calibre 30 dans un réfrigérateur à quatre degrés Celsius pour les refroidir. Conservez le mélange de gel matriciel fraîchement préparé contenant des cellules vasculaires sur de la glace jusqu’à ce que la souris soit prête pour l’injection. Ensuite, placez la souris correctement anesthésiée sur la planche d’opération en position couchée et fixez ses membres sur la planche à l’aide de ruban adhésif.
Chargez une seringue à insuline pré-refroidie avec 300 microlitres du mélange de gel matriciel, en évitant la formation de bulles. Désinfectez la peau sur le dos de la souris à l’aide de tampons à 75 % d’alcool, puis injectez par voie sous-cutanée 300 microlitres du mélange de gel matriciel dans la seringue dans un côté du dos de l’animal. Retirez délicatement l’aiguille du site d’injection pour éviter toute fuite du mélange de gel.
Assurer la formation d’une petite bosse au site d’injection. Placez la souris sur un coussin chauffant pendant deux minutes pour permettre au mélange de gel matriciel de coaguler et de former un bouchon. Répétez les étapes illustrées pour créer une prise de l’autre côté du dos de la souris.
Marquez les bords de la bosse à l’aide d’un marqueur. Hébergez l’animal dans un laboratoire d’expérimentation sans agent pathogène spécifique à 20 à 24 degrés avec des cycles de lumière de 12 heures et d’obscurité de 12 heures pendant sept jours.
