Pour commencer, placez les lames avec les coupes d’endomètre colorées immunohistochimiquement sur le support de lames d’un scanner d’images pathologiques panoramiques. Ensuite, placez le rack dans le compartiment de numérisation des lames de l’instrument pour lancer la numérisation. Une fois la numérisation terminée, lancez le logiciel d’analyse d’images et créez un nouveau dossier.
Importez les images qui nécessitent une analyse. Pour construire un classificateur de tissus, marquez plusieurs tissus ainsi qu’une annotation vierge pour établir un classificateur qui identifie les zones de tissu et de blanc. Utilisez le réglage en temps réel pour observer la capacité de reconnaissance du logiciel pendant l’annotation de la marque.
Pour créer un algorithme d’analyse, sélectionnez l’algorithme IHC multiplex standard dans le logiciel et choisissez les pixels négatifs et positifs pour définir les paramètres de couleur de la reconnaissance cellulaire. Établissez les paramètres du noyau, du cytoplasme et de la membrane cellulaire jusqu’à ce que les paramètres optimaux de l’image soient trouvés. Maintenant, définissez le seuil de reconnaissance cellulaire positive et optimisez-le jusqu’à ce qu’un seuil approprié soit atteint.
Ensuite, sélectionnez le classificateur de tissus dans l’algorithme. Vérifiez la partie tissulaire qu’elle contient pour identifier les cellules en fonction des tissus. Sélectionnez la zone d’analyse, puis utilisez l’algorithme établi pour analyser les images.
Une fois l’analyse terminée, vérifiez manuellement la précision de la reconnaissance tissulaire, négative et positive. Si la reconnaissance d’image est inexacte, ajustez à nouveau l’algorithme et les seuils de paramètres. Exécutez l’analyse d’image jusqu’à ce qu’elle réussisse.
Ensuite, exportez les résultats de l’analyse. Définissez les différents paramètres d’analyse en fonction de l’expression des différents marqueurs immunitaires de l’endomètre. Utilisez le logiciel pour calculer la proportion de cellules immunitaires de l’endomètre.
Après le calcul, utilisez les valeurs pour évaluer les niveaux de diverses cellules immunitaires dans l’endomètre des patientes présentant des fausses couches à répétition. Différentes cellules immunitaires ont été colorées immunohistochimiquement en fonction de leur expression individuelle de différents marqueurs. La tache brune représente les cellules immunitaires positives et la tache bleue représente le noyau.
Différentes cellules immunitaires ont été exprimées chez les femmes ayant des fausses couches à répétition. Les cellules CD56 semblent prédominantes à 16,76 %, les cellules CD1a et Foxp3 représentant 0,11 à 0,12 % de la population de cellules immunitaires.
