Pour commencer, intégrez le tissu pulmonaire dans de l’agarose. Pour préparer le tissu pulmonaire à la section, fixez d’abord chaque bloc de tissu au disque d’échantillon du vibratome avec de la super colle et ajoutez de la glace dans le bain environnant. Ensuite, installez soigneusement le disque d’échantillon dans le plateau tampon et remplissez-le de PBS.
Ensuite, réglez les paramètres du vibratome, en maintenant l’épaisseur à 200 micromètres, la fréquence à 100 hertz, l’amplitude de la pale à 1,3 millimètre et la vitesse d’avancement de la lame entre 0,02 et 0,03 millimètres par seconde. Commencer la section du tissu pulmonaire. Une fois que suffisamment de tranches ont été créées, utilisez un pinceau pour soulever délicatement la tranche de tissu du plateau du vibratome.
Transférez les tranches sur une plaque à 24 puits avec une solution d’azoture PBS. Conservez les tranches de poumon à quatre degrés Celsius.