Pour commencer, maintenez solidement la tête des souris nouveau-nées euthanasiées en place. À l’aide de ciseaux de micro-opération, ouvrez le cuir chevelu le long de la suture sagittale. Ensuite, séparez et immobilisez le cuir chevelu bilatéralement avec les doigts.
Utilisez des ciseaux pour sectionner le crâne et retournez-le vers l’avant pour accéder au crâne. Utilisez un petit élévateur périosté pour extraire le cerveau, puis utilisez la pointe des ciseaux pour gratter doucement le cerveau, révélant la base du crâne. Maintenant, examinez les os temporaux bilatéraux à la base du crâne.
Utilisez des ciseaux pour inciser la base du crâne le long de la ligne médiane. Ensuite, grattez la peau et éliminez tout os inutile. Conservez et transférez les os temporaux dans des boîtes de Pétri stériles de 35 millimètres remplies d’HBSS frais.
Ensuite, utilisez une paire de pinces à 5 pointes numériques pour éliminer le bola et les tissus environnants de la partie pétreuse de l’os temporal. Tenez la pince d’une main pour stabiliser la partie semi-circulaire de l’os temporal. Utilisez l’autre main pour insérer l’extrémité inférieure de la pince dans la niche ronde de la fenêtre, séparant l’os latéral de la cochlée de l’écaille du vestibule.
Retirez soigneusement la partie pétreuse de l’os temporal sans entrer en contact avec l’épithélium de l’organe de Corti. Ensuite, détachez et extrayez méticuleusement le labyrinthe osseux de la cochlée, en partant de l’extrémité basale jusqu’à l’extrémité apicale. À l’aide d’une pince à 5 pointes, micro-isoler soigneusement l’épithélium sensoriel de l’organe de Corti du modiolus.
Ensuite, utilisez des pinces micro-opératoires pour maintenir le ligament spiral et séparez-le doucement de la strie vasculaire. Transférez l’épithélium auditif propre, à l’aide d’une pipette de 200 microlitres, dans une boîte de culture stérile de trois millimètres contenant du HBSS. Placez l’épithélium auditif isolé dans une boîte de Pétri stérile de 100 millimètres remplie d’HBSS pour les étapes de préparation suivantes.
