Commencez par placer la souris en décubitus dorsal et fixez les membres avec des aiguilles. Appliquez 75% d’éthanol sur le front du corps de l’animal. Faites une coupe longitudinale à travers la peau et le fascia sur l’abdomen et le thorax.
Coupez les côtes parasternales et repliez le thorax pour avoir libre accès au cœur. Fixez le thorax plié vers le haut avec des aiguilles. Ouvrez l’oreillette droite à l’aide de ciseaux.
À l’aide d’une canule, appliquez 20 millilitres de PBS à usage unique dans le ventricule gauche pour évacuer le sang par l’oreillette droite incisée. Faites une coupe longitudinale en coupant la peau sur le dessus de la tête de la souris pour exposer le crâne et déplacer la peau autour de la tête à l’aide d’une pince. Inciser le crâne à l’aide d’un ciseau le long de la suture sagittale.
Insérez la pointe des ciseaux le long de la ligne d’incision pour ouvrir la calotte. Retirez les parties restantes de la calotte avec une pince afin que le cerveau soit complètement exposé. Retirez le cerveau avec précaution et placez-le dans une matrice cérébrale murine.
Coupez le cerveau en tranches sagittales d’un millimètre d’épaisseur à l’aide d’une lame de rasoir. À l’aide de ciseaux, coupez la colonne vertébrale juste au-dessus de la crête iliaque. Insérez une aiguille de calibre 20 attachée à une seringue de 20 millilitres contenant du PBS à usage unique dans le canal rachidien.
Rincez la moelle épinière du canal rachidien de la caudale vers le crâne. Coupez la moelle épinière en segments de 0,5 centimètre de long à l’aide d’un scalpel. Conservez la suspension cellulaire du SNC constituée du cerveau et de la moelle épinière correspondante dans une boîte de Pétri contenant trois millilitres de DPBS froid.
