Pour commencer, positionnez la souris sur un plateau de dissection équipé d’un cône nasal pour l’administration de l’anesthésie. Vérifiez les réflexes de l’animal, comme la rétraction de la patte, pour confirmer que l’anesthésie a atteint une profondeur appropriée. Ensuite, positionnez la souris pour exposer la peau dorsale.
Humidifiez la peau avec suffisamment d’éthanol à 70 % pour éviter le décollement des poils. Faites une incision le long du dos, en commençant par la partie inférieure du thorax et prolongez-la jusqu’au cou. À l’aide d’une pince à pointe courbée, soulevez doucement le tissu adipeux brun interscapulaire et coupez soigneusement le tissu attaché.
Soulevez le coussinet adipeux vers la tête et continuez à couper les tissus attachés pour ouvrir soigneusement la région jusqu’à ce que la veine de Sulzer soit exposée. Maintenant, coupez soigneusement la veine du Sulzer. À l’aide d’un embout de pipette de 200 microlitres et d’une pipette P100, prélevez environ 40 microlitres de sang et conservez le sang recueilli dans un tube de prélèvement sanguin.
Gardez le tube sur de la glace jusqu’au processus de collecte du sérum. Humidifiez généreusement la peau ventrale avec 70% d’éthanol pour éviter le décollement des poils. À l’aide de ciseaux, ouvrez délicatement la cavité thoracique pour exposer le cœur.
À l’aide d’une seringue d’un millilitre munie d’une aiguille d’un demi-pouce de calibre 29, percez avec précision la zone apex du ventricule gauche. Insérez les deux tiers de l’aiguille à environ trois à cinq millimètres à l’horizontale droite de l’apex du cœur et tirez la seringue vers l’arrière pour recueillir le sang du ventricule gauche. Ensuite, centrifugez les échantillons de sang à 10 000 g pendant 10 minutes à quatre degrés Celsius.
À l’aide d’une pipette, prélever le surnageant et procéder à l’extraction et à l’analyse des métabolites.
