Pour commencer, répartissez au hasard les souris dont la cavité buccale est négative pour la croissance du candida en neuf groupes, chacun correspondant à une concentration différente de curcuminoïdes avec ou sans lumière. Le premier jour, injecter par voie sous-cutanée le médicament immunosuppresseur prednisolone à tous les membres des groupes. Fournir du chlorhydrate de tétracycline à la concentration de 0,83 milligramme par millilitre dans l’eau potable du premier jour jusqu’à la fin de l’expérience.
Le deuxième jour, administrer du chlorure de chlorpromazine par voie intramusculaire sur chaque muscle de la cuisse pour endormir la souris en vue d’une inoculation intraorale. Ensuite, plongez un écouvillon stérile dans une suspension standardisée de candida albicans fraîchement préparée. Après avoir placé la souris en position couchée, frottez sa langue avec un coton-tige imbibé pendant 30 secondes.
Le cinquième jour, administrer une injection sous-cutanée gratuite de prednisolone pour maintenir l’immunosuppression. Le septième jour, avant le traitement, placez la souris anesthésiée en position couchée sur un dispositif d’AOMI équipé de fils. Enroulez le fil autour des incisives pour garder la bouche ouverte.
Distribuer 70 microlitres de photosensibilisateur sur le dos de la langue de chaque souris appartenant aux groupes C+L+. Ensuite, ramenez la langue à l’intérieur de la cavité buccale et gardez la souris dans un environnement sombre pendant 20 minutes comme période de pré-irradiation. Après la période de photosensibilisation, placez l’appareil LED sur le dos de la langue et allumez-le pendant sept minutes.
Appliquez le photosensibilisant aux groupes C+L comme démontré et gardez les souris dans l’obscurité pendant 27 minutes. Immédiatement après le traitement, écouvillonnez le dos de la langue pendant une minute, à l’aide d’un coton-tige stérile pour récupérer le candida albicans de la langue. Placez chaque écouvillon dans un tube contenant un millilitre de solution saline stérile et vortex pendant une minute pour remettre les cellules microbiennes en suspension.
Sans tarder, effectuer des dilutions en série de dix fois dans du PBS et des aliquotes de 25 microlitres sur des plaques de gélose au dextrose Sabouraud en double. Incuber les plaques en aérobie à 37 degrés Celsius pendant 48 heures. Après 48 heures, utilisez un compteur de colonies numérique pour déterminer le nombre de colonies de levures.
Calculez la charge de candida albicans pour chaque animal. Le huitième jour, après avoir correctement euthanasié l’animal, procédez à l’ablation chirurgicale de la langue, effectuez l’ablation de la langue avant les papilles circonvallées pour vous assurer que toute la langue est retirée. Enfin, procédez à l’analyse histopathologique de la langue isolée.
Le modèle murin de candidose buccale a montré des taches blanches typiques et des pseudo-membranes sur la langue des souris infectées. La thérapie photodynamique antimicrobienne a réduit la viabilité de candida albicans à une concentration de 80 micromolaires de curcuminoïdes. Les langues des animaux non infectés présentaient des tissus sains normaux, notamment : une lamina propria, une membrane basale et des papilles filiformes intactes.
Dans le groupe C-L, des levures et des filaments ont été observés dans la couche épithéliale kératinisée. Une légère réponse inflammatoire était présente dans le tissu conjonctif sous-jacent. En revanche, les souris traitées avec une thérapie photodynamique antimicrobienne médiée par 80 curcuminoïdes micromolaires avaient moins de cellules fongiques dans la couche kératinisée de l’épithélium de la langue.
