Pour commencer, prenez une boucle d’inoculation pour prélever une colonie monoclonale de candida albicans dans une plaque YPD. Transférez la colonie dans cinq millilitres de milieu liquide YPD, complété par 50 microgrammes par millilitre de carbénicilline. Secouez les cellules à une vitesse constante de 220 tr/min à 30 degrés Celsius pendant la nuit.
Centrifugez ensuite la suspension cellulaire à 400 g pendant cinq minutes à température ambiante. Après avoir éliminé le surnageant, remettre les cellules en suspension dans une solution saline normale et ajuster la concentration cellulaire en faisant correspondre la turbidité de la suspension cellulaire à une norme de McFarland de 0,5. Pour créer une solution saline normale à 0,9 %, pesez 0,9 gramme de chlorure de sodium et dissolvez-le dans 100 millilitres d’eau déminéralisée.
Ensuite, autoclavez les instruments chirurgicaux dans du fil d’alliage de titane et de nickel à 121 degrés Celsius pendant 30 minutes avant utilisation. Ensuite, divisez au hasard 30 souris mâles C57BL/6 en un groupe témoin, un implant vierge et un groupe PJI. Après avoir anesthésié les souris, retirez les poils du membre postérieur gauche et utilisez de l’iode pour désinfecter la zone rasée.
Vérifier la profondeur de l’anesthésie en observant la perte du réflexe de redressement. Pour les souris du groupe témoin, n’administrer aucun traitement. Pour les souris de l’implant vierge et du groupe PJI, utilisez une lame numéro 10 pour créer une incision longitudinale de cinq millimètres sur le genou du membre postérieur gauche afin d’exposer les articulations pour d’autres procédures.
Maintenant, insérez une aiguille de seringue stérile pour créer un trou de cinq millimètres de long dans le canal intramédullaire fémoral. Insérez délicatement un fil en alliage de nickel-titane dans le trou avant de le couper avec des ciseaux. Ensuite, administrez deux microlitres de YPD medium goutte à goutte le long du fil d’alliage nickel-titane pour les souris du groupe d’implants vierges.
À l’aide d’une suture en nylon, refermez la plaie couche par couche. Ensuite, inoculez deux microlitres de cellules de candida albicans dans l’espace articulaire des souris le long du fil d’alliage nickel-titane du groupe PJI. À l’aide d’une suture en nylon, refermez la plaie couche par couche.
Hébergez les souris avec un accès gratuit à l’eau et à la nourriture pendant 14 jours.
