Pour commencer, tirez des capillaires en verre borosilicaté d’un diamètre extérieur de deux millimètres et d’un diamètre intérieur de 1,56 millimètre, en suivant les réglages appropriés. Avant de remplir le capillaire avant chaque expérience, utilisez une pince à épiler fine pour ouvrir l’extrémité du capillaire. Pour charger le capillaire, utilisez la solution stimulante à trois à cinq fois la concentration normale du stimulant requise.
À l’aide d’une fine pipette de transfert en plastique, injectez lentement la solution stimulante dans le capillaire jusqu’à ce que les 3/4 de sa longueur soient remplis. Éliminez les bulles d’air qui pourraient se former pendant le processus de remplissage en effleurant doucement le capillaire. Ensuite, montez le capillaire rempli sur le micromanipulateur.
Configurez les paramètres du système de distribution de cellule unique pour fournir une impulsion de 10 secondes à cinq psi. Connectez le capillaire en borosilicate monté sur le micromanipulateur au porte-pipette du système d’administration à cellule unique. Appliquez une brève bouffée de deux secondes à une pression de 20 psi, tout en observant l’extrémité capillaire pour confirmer que la solution est distribuée par l’extrémité de l’embout.
La configuration est maintenant prête à être utilisée avec la microscopie pour l’imagerie en temps réel d’un seul spermatozoïde de souris.
