Pour commencer, centrifugez le sang humain à 120 G pendant 20 minutes à température ambiante pour éliminer les cellules sanguines. Transférez ensuite la moitié supérieure du surnageant dans un nouveau tube. Ensuite, centrifugez le plasma riche en plaquettes pour éliminer les plaquettes et transférez la moitié supérieure du surnageant dans un nouveau tube.
Ensuite, retirez les débris cellulaires en centrifugeant la plaquette dans notre plasma à 13 000 G pendant deux minutes. Transférez la moitié supérieure du surnageant dans un nouveau tube. Allumez l’analyseur de caillot pour détecter la vésicule extracellulaire ou le temps de coagulation activé par EV, et préchauffez l’instrument à 37 degrés Celsius.
Installez la sonde jetable et le gobelet de test. Lancez ensuite la procédure de contrôle qualité de la machine. Après l’exécution du contrôle qualité, entrez les informations de l’échantillon dans le système.
Ajoutez ensuite 200 microlitres de plasma riche en VE dans la tasse de test, suivis de 20 millimolaires, 170 microlitres de chlorure de calcium. Cliquez sur le bouton de démarrage, fermez le couvercle et laissez la sonde détecter le changement de résistance de l’échantillon. Les échantillons de VE non qualifiés présentent un groupe distinct avec une taille de particule légèrement plus grande près de la porte de EV.In contraste, les échantillons qualifiés riches en VE ont montré la plupart des signaux à l’intérieur de la porte de VE en tant que groupe unique.
Une augmentation de la concentration de VE a raccourci le temps de coagulation activé par les VE, tandis qu’une diminution de la concentration de VE a prolongé le temps de coagulation activé par les VE. Les échantillons de plasma riches en EV provenant de patients atteints de prééclampsie, de fractures de la hanche et de cancer du poumon présentaient un temps de coagulation activé par EV significativement plus court que les volontaires sains.
