Pour commencer, lacez la souris anesthésiée en décubitus dorsal dans le système d’imagerie avec le museau dans un cône nasal. Positionnez la souris de manière à ce que le bas des jambes soit étendu et que les genoux soient légèrement pointés en l’air. Ouvrez le logiciel compatible sur l’ordinateur du système de création d’images.
Depuis le panneau de contrôle d’acquisition, cliquez sur initialiser pour réchauffer le système, et attendez que le voyant de température devienne vert. Cliquez ensuite sur Assistant d’imagerie. Après avoir cliqué sur la paire de filtres, assurez-vous que le paramètre est configuré pour l’épi-illumination.
Appuyez ensuite sur suivant. Dans la liste déroulante, recherchez la sonde qui vous intéresse pour sélectionner les paramètres d’excitation et d’émission corrects, puis cliquez sur Suivant. Choisissez la souris pour photographier le sujet.
Dans les paramètres d’exposition, assurez-vous que les paramètres automatiques sont cochés et que les options de fluorescence et de photographie sont sélectionnées. Dans la liste de contrôle du champ de vision, sélectionnez D à 22,6 centimètres et appuyez sur suivant. Après avoir confirmé que tous les paramètres sont corrects, appuyez sur le bouton d’acquisition de séquence et confirmez que l’image a obtenu une exposition adéquate.
Pour analyser l’image, placez un cercle de région d’intérêt de taille constante sur chaque articulation du genou sur l’image en noir et blanc. Calculez l’efficacité radiante totale et l’efficacité radiante moyenne pour chaque articulation du genou. Si l’efficacité radiante est également calculée sur les jambes controlatérales, normalisez les données en divisant la mesure de l’efficacité radiante de la jambe blessée par celle de la jambe controlatérale.
L’imagerie par réflectance de fluorescence a montré une activité protéase significativement plus élevée dans les articulations blessées des souris par rapport aux souris non blessées. Les articulations blessées ont montré une efficacité radiante moyenne supérieure de 43 % à celle des articulations controlatérales et des articulations de souris non blessées. Une efficacité radiante supérieure de 30 à 80 % a été observée dans les articulations blessées, par rapport aux articulations controlatérales deux semaines après la blessure.
En revanche, les articulations opérées chirurgicalement présentaient une efficacité radiante supérieure de 300 % à la quatrième semaine par rapport aux articulations controlatérales, suggérant un effet de confusion notable de la chirurgie.
