Fluorescent Labeling of Antibodies for Imaging Low Abundance Proteins in Drosophila

Pour commencer, ajoutez 110 microlitres du mélange d’anticorps dans le tube contenant le colorant Alexa fluor 594. Retournez le tube plusieurs fois pour bien mélanger les composants. Incuber le tube sur un rotateur pendant une heure à température ambiante.

Assemblez ensuite la colonne de purification du kit de conjugaison et préparez un lit de résine de 1,5 millilitre. Centrifugez la colonne à 1100G pendant trois minutes à température ambiante pour éliminer l’excès de liquide de la résine. Ajouter le mélange de réaction goutte à goutte en haut de la colonne de résine.

Centrifuger à 1100G pendant cinq minutes à quatre degrés Celsius pour recueillir l’anticorps marqué.