Pour commencer, placez 200 drosophiles adultes nouvellement écloses dans une cage en plastique en forme de cylindre. Scellez un côté de la cage avec un treillis métallique poreux pour la ventilation et l’autre avec une plaque de gélose à base de jus de fruits et de pâte de levure. Le jour de l’injection, remplacez la plaque de gélose de la cage par une plaque de jus de fruits contenant un minimum de pâte de levure.
Incubez la plaque à 25 degrés Celsius pendant une heure pour recueillir les embryons. Retirez ensuite la plaque de la cage pour arrêter la ponte et incubez à 25 degrés Celsius pendant deux heures supplémentaires pour obtenir des embryons âgés de deux à trois heures. Pour retirer la coquille d’œuf des embryons, introduisez deux millilitres de solution d’eau de Javel à 50 % dans l’assiette de jus de fruits.
À l’aide d’un pinceau, délogez doucement les embryons de la plaque et incubez la plaque pendant deux minutes tout en la faisant tourner toutes les 30 secondes pour améliorer l’efficacité de l’élimination de la coquille d’œuf. Versez ensuite le mélange d’embryon et d’eau de Javel dans une passoire à cellules en nylon de 70 micromètres. Rincez abondamment les embryons avec une bouteille d’eau pour éliminer les restes d’eau de Javel et de pâte de levure.
À l’aide d’une lame de rasoir propre, coupez un bloc d’agarose rectangulaire et positionnez-le sur une lame de verre. À l’aide d’un pinceau, transférez les embryons de la passoire vers le bloc de gel et répartissez-les uniformément le long de la ligne médiane du bloc en les brossant doucement. Maintenant, préparez une pince à épiler avec ses deux pattes solidement collées ensemble pour former une seule pointe pointue.
Sous un microscope à dissection, prélevez des embryons individuels à l’aide de la pince à épiler et alignez-les le long du bord étendu du bloc de gel. Pipeter 10 microlitres de colle heptane au milieu d’une lamelle de 24 par 50 millimètres. À l’aide d’une pointe de pipette, étalez la colle dans une zone rectangulaire de 0,5 centimètre sur 3 centimètre.
À l’aide d’une pince à épiler à pointe plate, soulevez la lamelle enduite de colle et maintenez-la fermement au-dessus des embryons, en veillant à ce que le côté de la colle fasse face aux embryons à environ 45 degrés. Appuyez doucement la lamelle contre le bloc de gel, permettant aux embryons de toucher la colle. Relâchez rapidement la pression et surélevez la lamelle.
Distribuez ensuite 10 microlitres d’eau au centre d’une lame de verre fraîche. Placez la lamelle de couverture porteuse d’embryon dessus, en veillant à ce que le côté embryon soit orienté vers le haut. Ensuite, appliquez 40 microlitres d’huile de carbone halo à une extrémité de la bandelette embryonnaire.
Inclinez la lame jusqu’à ce que l’huile de carbone halo recouvre la surface de l’embryon.
