Pour commencer la préparation de l’échantillon pour le test de protéines de Bradford, diluez les échantillons de protéines pour obtenir des concentrations de protéines dans la plage de courbe standard de 0,025 à 1,0 milligramme par millilitre. Créez plusieurs dilutions d’échantillon par échantillon dans cette plage. Pour atteindre le point zéro protéique, ajouter 10 microlitres du tampon ou du milieu utilisé pour préparer les solutions étalons dans les puits désignés.
Ajoutez ensuite 10 microlitres de chaque solution étalon de protéines dans un ensemble de trois puits servant de triples dans une microplaque de 96 puits. Dans un ensemble séparé de puits sur la même microplaque de 96 puits, ajoutez 10 microlitres de chaque dilution d’échantillon en trois exemplaires. Ensuite, ajoutez 250 microlitres de réactif de dosage des protéines Bradford dans tous les puits.
Une mise en page de la configuration finale de la microplaque s’affiche à l’écran. Procéder à l’enregistrement des résultats dans une pièce bien éclairée dans les 5 à 15 minutes suivant l’ajout du réactif de dosage. À l’aide d’une main, tenez la microplaque sur un fond blanc uniforme, en vous assurant qu’elle est parallèle à l’établi.
Tout en utilisant l’autre main, tenez un smartphone parallèlement à la paillasse et à la microplaque. Procédez à la capture de plusieurs photos de l’ensemble de la microplaque. Pour les appareils iOS, activez l’option de grille dans les paramètres de l’appareil photo pour activer l’indicateur de niveau de l’appareil photo.
Pour les appareils Android, activez les lignes de grille dans les paramètres de l’appareil photo pour obtenir le même résultat. Bien qu’aucun appareil d’éclairage spécial ne soit nécessaire, restez prudent lorsque vous capturez correctement les images. Évitez d’ombrer la plaque ou l’arrière-plan et évitez les reflets excessifs.
Assurez-vous également de ne pas incliner la plaque. Inspectez l’image pour vérifier l’arrière-plan, l’uniformité, les ombres et les reflets. Vérifiez également l’angle des puits :Le centre de chaque puits doit être directement visible Si vous le souhaitez, lisez la microplaque dans un lecteur de microplaques pour comparer les données de couleur de l’image avec les lectures d’absorbance de la microplaque.
