Pour commencer, placez une souris anesthésiée sur une table. Appliquez une goutte de gel oculaire sur les deux yeux. Placez l’animal dans un porte-tête pour sécuriser sa position.
Faites pivoter l’animal de 90 degrés de manière à ce que l’œil opéré soit orienté vers le plafond. Sécurisez l’éclat de l’animal pour dégager la zone autour de l’œil. Fixez le corps de l’animal pour minimiser les mouvements de la tête causés par la respiration.
Placez une lamelle circulaire horizontalement sur l’œil au-dessus du gel oculaire. Ajustez la tête de l’animal au besoin pour positionner correctement la lamelle. Ajoutez une goutte de PBS sur le dessus de la lamelle, puis placez soigneusement l’animal sur une platine de microscope.
Ajustez la tourelle d’objectif du microscope à la distance appropriée pour l’observation. Activez les lasers pour induire l’ablation du nerf cornéen. Une fois l’ablation nerveuse terminée, retirez l’animal du support de tête et placez-le dans une cage sur une plaque chauffante.
Le vortex était visiblement absent une semaine après l’ablation au laser. On a observé qu’un groupe de cellules immunitaires avait migré vers le site d’illumination. Les faisceaux de fibres stromales semblaient s’être amincis.
