Transférez une pastille immunitaire enrichie en cerveau de souris d’un tube de 15 millilitres vers une plaque à fond rond de 96 puits. Après avoir centrifugé la plaque à 500 G pendant cinq minutes, retirez le surnageant en effleurant. Remettre les cellules en suspension dans 100 microlitres de tampon FACS, puis transférer 10 microlitres de chaque puits dans les puits témoins.
Centrifuger à 500 g pendant cinq minutes. Après avoir retiré le surnageant des cellules centrifugées, ajoutez 50 microlitres de bloc FC à double concentration. Incuber pendant 10 minutes sur de la glace.
Ajoutez maintenant 50 microlitres du mélange maître d’anticorps au double de la concentration finale souhaitée et incubez-le sur de la glace dans l’obscurité. Ensuite, ajoutez 200 microlitres du tampon FACS dans chaque puits et centrifugez à 500 G pendant cinq minutes. Jetez le surnageant en le feuilletant, puis lavez les cellules dans 300 microlitres de tampon FACS.
Centrifuger et remettre les cellules en suspension dans 200 microlitres de tampon FACS. Enfin, transvasez la suspension dans un tube de tri contenant 300 microlitres de tampon FACS.
