Pour commencer, placez tous les tubes microfuges stériles de 1,5 millilitre et les cuvettes d’électroporation stériles sur de la glace. Placez ensuite la bouteille d’eau stérile, qui a été stockée à quatre degrés Celsius, sur de la glace. Transférez 1,5 millilitre de la culture bactérienne de nuit dans l’un des tubes microfuges de 1,5 millilitre et centrifugez à 13 000 G pendant deux minutes pour granuler les cellules.
À l’aide d’une pipette d’un millilitre, prélever tout le surnageant sans perturber la pastille cellulaire. Ajouter 1,5 millilitre de culture bactérienne dans le même tube de microfuge, centrifuger à 13 000 G pendant deux minutes et retirer le surnageant. Ajoutez un millilitre d’eau stérile glacée à la pastille cellulaire et remettez-la en suspension avec un pipetage doux jusqu’à ce que la pastille ne repose plus au fond du tube de la microfuge.
Centrifuger les cellules remises en suspension à 13 000 G pendant deux minutes et retirer délicatement le surnageant à l’aide d’une pipette d’un millilitre. Remettez doucement en suspension la pastille de cellule finale dans 200 microlitres d’eau stérile glacée et transférez 100 microlitres de la suspension cellulaire finale dans le deuxième tube de microfuge glacé de 1,5 millilitre.
