Pour commencer, placez une souris anesthésiée et intubée en position de décubitus latéral droit. Prenez les deux pattes avant dans le coin supérieur gauche et les pattes arrière dans les coins inférieurs. Désinfectez le thorax gauche avec de l’alcool à 70 % avant l’incision.
Après avoir incisé et ouvert la peau sur le quatrième espace intercostal, utilisez un stylo cautérisé portatif pour coaguler les vaisseaux sanguins visibles dans les couches sous-cutanées et musculaires. Avec les ciseaux, divisez les muscles grand dorsal et dentelé antérieur le long de l’incision cutanée. Soulevez soigneusement la quatrième côte à l’aide d’une paire de pinces fines et incurvées.
Faites une coupe précise juste au-dessus de la cinquième côte pour entrer dans le quatrième espace intercostal. Lorsque la pression négative de la cavité pleurale est perdue et que le poumon se rétracte de la paroi thoracique, étendez la thoracotomie vers l’avant et vers l’arrière dans le quatrième espace intercostal. Appliquez deux écarteurs de nervures pour ouvrir l’espace des nervures, en veillant à ce qu’une fenêtre de travail d’au moins un centimètre carré soit disponible pour la visualisation.
Utilisez deux applicateurs pointus trempés dans du coton pour élever les céphalades et mobiliser le poumon gauche. Ensuite, divisez brutalement le ligament pulmonaire inférieur translucide. Réfléchissez le poumon vers l’avant pour visualiser le hile pulmonaire postérieur gauche.
Coupez ensuite environ 10 centimètres d’une cravate en soie 6-0 et placez le point médian de la cravate derrière le hile. Maintenant, retournez le poumon gauche vers l’arrière sur l’attache et tirez les deux extrémités de l’attache vers l’avant. Tenez une pince à moustiques incurvée dans la main dominante et une paire de pinces dans l’autre main.
Tenez une extrémité libre A de l’attache avec la pince et enroulez son point médian sur la pince fermée une fois. Ensuite, saisissez le point médian de l’autre extrémité libre B avec la pince et tirez à deux mains pour serrer le nœud coulant. Après avoir fait le nœud, B doit avoir une boucle du nœud, tandis que A doit être droit.
Pour confirmer une occlusion adéquate de la bronche, obstruez manuellement la tubulure d’évacuation de la sonde endotrachéale vers le ventilateur. Cela n’entraînera pas de gonflement du poumon gauche. Ensuite, fermez l’incision cutanée avec un ou deux points de suture simples et interrompus faits avec une suture en nylon 6-0.
Après la période d’ischémie requise, tirez doucement sur l’extrémité B de l’attache pour libérer le nœud coulant. Démarrez immédiatement le muscle de reperfusion et obstruez le tube d’écoulement du tube endotrachéal vers le ventilateur pour regonfler le poumon. Pendant la reperfusion, fermez l’espace de la quatrième côte avec une suture en nylon 6-0 à point unique.
Placez la souris en position couchée 15 à 20 minutes avant la fin du temps de reperfusion. Fixez les quatre membres avec du ruban adhésif. Après avoir effectué une laparotomie sur la ligne médiane, étendez la laparotomie à gauche et à droite jusqu’à la ligne axillaire en suivant la courbe de la côte la plus inférieure.
À partir de l’abdomen, faites une incision sur le diaphragme antérieur pour pénétrer dans le thorax. Étendez ensuite l’incision à gauche et à droite de la ligne axillaire antérieure, le long de la côte la plus inférieure. Divisez les côtes bilatérales le long de la ligne axillaire antérieure.
Étendez-vous vers le haut pour créer une thoracotomie à clapet. Réfléchissez maintenant la paroi thoracique antérieure vers le haut pour exposer le cœur et les poumons bilatéraux. Appliquez ensuite une pince sur la paroi thoracique antérieure pour faciliter la rétraction.
Utilisez une pince anti-moustique incurvée sur la ligne médiane pour rétracter le diaphragme vers le bas afin d’une meilleure visualisation de la poitrine. Ensuite, rentrez le lobe de l’accessoire qui s’étend au-delà de la ligne médiane dans la poitrine gauche et dans la poitrine droite. À l’aide d’un applicateur à embout en coton et de ciseaux, divisez le ligament mince qui relie le lobe à la poitrine gauche, réfléchissez l’ensemble du poumon vers l’avant.
Placez ensuite une autre cravate en soie 6-0 à l’arrière du hile droit. Faites un nœud coulant autour du hile droit tout en vous assurant que les quatre lobes du poumon droit sont encerclés. Ensuite, enduisez une aiguille d’un demi-pouce de calibre 31 sur une seringue à tuberculine de 1 cc avec 200 microlitres d’héparine.
Après quatre minutes de clampage hilaire droit, prélevez le sang artériel du ventricule gauche dans la seringue. Inclinez l’aiguille vers le cou gauche. Plusieurs ponctions peuvent être nécessaires pour obtenir suffisamment de sang pour l’évaluation ABG.
Le clampage hilaire gauche a entraîné une réduction significative de la pression partielle d’oxygène dans le poumon gauche par rapport à la thoracotomie simulée. L’évaluation ABG a montré que la plupart des neutrophiles étaient intravasculaires après le clampage hilaire du poumon gauche.
