Pour commencer, ajoutez 40 microlitres de suspension de gel de protéine G dans le tube contenant l’échantillon de protéines. Faites pivoter l’échantillon pendant une heure sur un rotateur en cycles d’environ 30 secondes à quatre degrés Celsius. Ensuite, centrifugez l’échantillon à 12 000 G pendant 20 secondes à quatre degrés Celsius.
Placez le tube sur de la glace pendant une minute pour permettre aux billes de se stabiliser. Récupérez le surnageant et transférez-le dans un nouveau tube de 1,5 millilitre à faible absorption de protéines. Retirez l’aliquote pour l’introduire dans un tube séparé de 1,5 millilitre.
Ajoutez quatre fois le tampon d’échantillon concentré à l’entrée pour obtenir une dilution égale et chauffez à 98 degrés Celsius pendant 10 minutes. Ensuite, ajoutez 20 à 30 microlitres d’une boue d’épitope à un à un à l’échantillon. Faites pivoter l’échantillon pendant deux heures sur un rotateur en cycles d’environ 30 secondes à quatre degrés Celsius.
