Pour commencer, décongelez les flacons de vecteurs viraux sur de la glace pendant 20 minutes et diluez les particules d’AAV dans 100 microlitres de DPBS. Chargez la solution diluée d’AAV dans une seringue d’un millilitre avec une aiguille de calibre 28 à 30, en évitant les bulles d’air. Fixez la souris anesthésiée dans un dispositif de contention de l’illuminateur de queue.
Et utilisez un tampon de gaze pour nettoyer le site d’injection avec un antiseptique. Massez la queue avec deux doigts jusqu’à ce que la veine soit observée. Injectez ensuite le vecteur dans la veine de la queue à un angle faible et retirez l’aiguille.
À l’aide d’un doigt, appliquez une pression immédiate sur le site d’injection pour arrêter le saignement. Pour préparer le poloxamère 407, dissolvez-le dans du DPBS sur un rotateur pendant une nuit à quatre degrés Celsius dans une enceinte de sécurité biologique. Ensuite, retenez manuellement la souris sous une hotte, en positionnant sa tête et son corps vers le bas.
À l’aide d’un antiseptique, nettoyez le site d’injection dans le quadrant inférieur gauche de l’abdomen, latéralement à la ligne médiane. Pour injecter P407, insérez l’aiguille dans la cavité péritonéale à un angle de 45 degrés ou moins. Après quatre semaines d’induction de l’hyperlipidémie, l’échocardiographie a révélé une insuffisance cardiaque avec fraction d’éjection préservée, car le temps de relaxation intraventriculaire était prolongé.
Une augmentation du rapport entre la vitesse d’écoulement mitrale pauvre précoce et la vitesse diastolique précoce annulaire mitrale, ainsi qu’une diminution de la vitesse d’écoulement transmitral diastolique précoce à tardive ont été observées.