Un mois après l’exposition au LISW, effectuez un examen pathologique de la cochlée de la souris. Commencer l’hémoperfusion avec la solution de Ringer lactate, suivie d’une perfusion transcardiaque avec 4% de paraformaldéhyde. Après la décapitation de la souris, retirez la cochlée et perfuser directement avec 4% de paraformaldéhyde à quatre degrés Celsius pendant la nuit.
Après avoir acquis l’image complète de la cochlée, à l’aide du logiciel ImageJ, calculez la carte de fréquence cochléaire pour localiser précisément les régions cochléaires spécifiques à différentes fréquences. À l’aide de la formule donnée, calculez le taux de survie des cellules ciliées à chaque fréquence. Après avoir acquis des images haute résolution de la pile Z des cellules ciliées internes, calculez le nombre de synapses.
Visualisez les coupes de cochlée colorées à l’hématoxyline et à l’éosine et comptez le nombre de neurones ganglionnaires spiralés dans la tour médiane du canal de Rosenthal pour calculer la survie des neurones ganglionnaires spiralés par contrôle. Par rapport au contrôle, l’immunocoloration fluorescente a montré des structures cochléaires intactes sans perte significative de cellules ciliées ou de fibres nerveuses dans tous les groupes. Cependant, des évaluations quantitatives ont indiqué que la survie des cellules ciliées externes était significativement plus faible dans le groupe de 2,5 joules par centimètre carré.
Pendant ce temps, la survie des cellules ciliées internes était cohérente entre les groupes. Le nombre de rubans synaptiques a été considérablement réduit dans les groupes à haute fréquence. Cela a été parallèle à une diminution de la densité des neurones du ganglion spiral dans le groupe de 2,5 joules par centimètre carré, indiquant que la dégénérescence cochléaire dépend de l’exposition à l’énergie LISW.
