Préparation des électrodes d’enregistrement et de la drosophile pour l’analyse des réponses des neurones gustatifs

Commencez par placer 10 à 15 mouches drosophiles nouvellement apparues dans des flacons de culture standard frais. Maintenez ces flacons à 25 degrés Celsius et à 60 % d’humidité relative dans un cycle de lumière et d’obscurité de 12 heures. Pour préparer un capillaire en verre pour retenir le stimulus, sélectionnez un capillaire en verre borosilicate et utilisez un instrument extracteur de pipette pour tirer le capillaire en verre.

Ensuite, prenez des tiges de tungstène pour les électrodes de référence et d’enregistrement. Trempez ces électrodes à plusieurs reprises pendant plusieurs secondes dans une solution de nitrate de potassium à 10 % ou une solution d’hydroxyde de potassium pour les aiguiser jusqu’à un diamètre de pointe d’un micromètre. Pour aspirer une seule mouche du flacon dans un aspirateur, retirez soigneusement l’aspirateur et placez un doigt sur l’extrémité de l’aspirateur pour piéger la mouche.

Maintenant, gardez l’extrémité de l’aspirateur dans l’embout de pipette de 200 microlitres et utilisez l’extrémité pour pousser la mouche vers l’avant la tête la première vers l’extrémité étroite de l’embout de la pipette. À l’aide d’une lame de rasoir, coupez les deux extrémités de la pointe de la pipette, à l’avant et à l’arrière de la mouche. À l’aide d’argile ou d’un petit morceau de coton, poussez davantage la mouche vers l’avant jusqu’à ce que la moitié de sa tête dépasse de l’extrémité de la pointe de la pipette taillée.

Utilisez une pince pour exposer doucement le labelle à l’avant de la tête. À l’aide d’un microscope stéréoscopique, placez le labelle latéralement sur une lamelle, en veillant à ce qu’un lobe avec ses 31 sensilles gustatives soit exposé.