Pour commencer, isolez des lymphocytes vivants à partir de tissus lymphoïdes secondaires de souris et visualisez les cellules au microscope optique avec un objectif 4X ou 10X. À l’aide d’une pipette d’un millilitre, perturbez les cellules activées et transférez-les dans un nouveau tube conique de 15 millilitres. Écorchez les cellules et ajoutez un milieu de séparation des lymphocytes pour séparer les cellules vivantes des cellules mortes.
Pour la microscopie à intervalle de temps, plaquez une fois dix à la cinquième cellule CD8+T dans le milieu dans une chambre à 37 degrés Celsius. Après avoir effectué le blocage de l’intégrine, acquérez des images en fond clair et fluorescentes toutes les 10 à 60 secondes pendant 10 à 60 minutes. Dans l’imagerie en accéléré, les cellules T CD8+ activées présentaient une vitesse moyenne, un déplacement et un indice de méandre supérieurs à ceux des cellules naïves.
