Préparation de nanoparticules magnétiques fonctionnalisées pour l’imagerie fluorescente résolue dans le temps

Pour commencer, ajoutez des nanoparticules fonctionnalisées de streptavidine dans les tubes pour la détection du TNF alpha, de l’interleukine-1 bêta et de l’interleukine-6. Diluez la streptavidine et les nanoparticules dans des volumes égaux de PBS. Ensuite, ajoutez les solutions d’anticorps de capture biotinylés dans des tubes et incubez pendant 30 minutes à température ambiante.

Ensuite, ajoutez 0,01 % de solution de D-biotine de 1 millimolaire dans chaque tube et incubez pendant cinq minutes. Ensuite, tenez un aimant en néodyme près du tube pour recueillir les particules. Jetez le surnageant transparent et remettez immédiatement les nanoparticules en suspension dans un mélange de Pluronic F-127 et de PBS et incubez pendant 30 minutes.

Après avoir incubé les particules pendant 30 minutes dans un tampon de stockage, remuez-les pour assurer un mélange uniforme. Immédiatement avant l’encapsulation, combinez les nanoparticules conjuguées pour l’interleukine-6, le TNF alpha et l’interleukine-1 bêta. Maintenant, lavez les particules avec un support complet à l’aide de l’aimant comme indiqué précédemment, et remettez les billes en suspension dans un support complet.

Ensuite, ajoutez des anticorps de détection pour l’interleukine-6, le TNF alpha et l’interleukine-1 bêta pour atteindre la concentration finale de 10 nanomolaires.