Mise en place de cultures d’interface air-liquide (ALI) dérivées de patients à partir de biopsies de l’œsophage

Pour commencer, prélevez des cellules isolées de biopsies de l’œsophage et mettez-les en suspension dans quatre millilitres de KSFM avec 10 micromolaires Y27632. Transférez les cellules dans une fiole de culture cellulaire T25. Une fois que les kératinocytes forment une monocouche avec une confluence de 60 à 80 %, les cellules P1 sont acheminées.

Ensuite, ensemencez les kératinocytes primaires P2 dans des inserts TRANSWELL pour la culture à l’interface air-liquide. Pour effectuer un transport aérien le septième jour, remplacez le milieu dans la chambre inférieure par du KSFM à haute teneur en calcium et aspirez le milieu de la chambre supérieure.