Pour commencer, prenez un fil de suture en soie tressé et séparez-le en un seul fil. Utilisez deux pinces Dumont 5 avec des pointes micro émoussées et une pince pour faire une double boucle autour de la pointe de l’autre pince. Avec la pince à boucle, saisissez l’extrémité libre de la suture et tirez-la soigneusement à travers les deux boucles.
Utilisez des ciseaux à ressort vannas pour couper les sutures en excès de chaque côté. Après avoir décapité le rat euthanasié, faites une coupe dans le sens de la longueur le long de la ligne médiane de la paroi abdominale. Puis extériorisez le mésentère.
Coupez la connexion juste en dessous du sphincter pylorique, à environ deux à trois centimètres au-dessus du cæcum, ainsi que la connexion au rectum. Ensuite, rincez les mésentères entiers disséqués dans 200 millilitres de solution saline physiologique glacée. Ensuite, transférez-les et fixez-les dans une boîte de Pétri doublée de silicone contenant une solution saline physiologique glacée.
À l’aide d’un stéréomicroscope, des pinces fines Dumont 5 inox et des ciseaux à ressort vannas dissèquent les vaisseaux lymphatiques mésentériques de deuxième ordre de la graisse et du tissu conjonctif environnants. Maintenant, transférez le vaisseau lymphatique disséqué dans la chambre de profusion vasculaire pour la canulation sur des canules en verre. Glissez un seul joli nœud sur chaque canule en verre en vue de fixer le récipient sur les canules plus tard.
À l’aide d’un petit morceau de graisse, orientez le vaisseau lymphatique dans la direction et canulez l’extrémité distale sur P1. Faites glisser le nœud le long de la canule et serrez-le pour fixer le vaisseau lymphatique. Ensuite, pressurisez le vaisseau lymphatique pour fortifier les millimètres de mercure dans la chambre de perfusion. Placez une pierre bouillonnante avec 7% de dioxyde de carbone et 93% d’oxygène dans la chambre de bain pour maintenir le pH physiologique.
Connectez la chambre au régulateur de température et réglez-la à 37 degrés Celsius.
