Pour commencer, ajoutez de la résine époxy pure dans le sillon du moule d’enrobage jusqu’aux deux tiers de son volume. À l’aide d’un cure-dent, vous pouvez prélever des organoïdes rétiniens et les transférer dans le moule d’enrobage, équipé de résine époxy pure. Remplissez ensuite la rainure avec de la résine époxy pure jusqu’à ce qu’elle dépasse légèrement ou gonfle.
Ajustez la position des organoïdes aux deux extrémités du moule d’enrobage pour un enrobage directionnel. Installez le bloc d’enrobage dans le support de montage de l’échantillon et vissez le boulon avec un tournevis en L. Installez ensuite les couteaux en verre sur le support à couteaux et serrez l’écrou manuellement.
Coupez l’excès de résine jusqu’à ce que la zone souhaitée soit exposée. Remplissez l’auge du couteau en verre avec de l’eau. À l’aide d’un microtome semi-fin, coupez des tranches semi-minces d’une épaisseur d’un micron et posez-les sur une lame de microscope à l’aide d’une aiguille.
Ajoutez 50 microlitres de bleu de toluidine à 1% pour teindre les tranches semi-fines et incubez pendant une minute à 95 degrés Celsius sur la plaque chauffante. Rincez à l’eau distillée pendant deux minutes. Utilisez un microscope optique ordinaire 20x pour observer la structure des sections.
