Pour commencer, prenez les cellules musculaires lisses de l’œsophage cultivées une fois qu’elles atteignent une fluidité de 80 %. Aspirez le milieu et lavez les cellules musculaires lisses endothéliales avec cinq millilitres de PBS. Ajoutez ensuite deux millilitres de trypsine-EDTA à 0,2 % dans le flacon et incubez pendant deux minutes pour digérer les cellules.
Ajoutez deux millilitres de DMEM pour terminer le processus de digestion et transférez la suspension cellulaire dans un tube à centrifuger de 15 millilitres. Centrifugez le tube à 675G pendant trois minutes. Aspirez soigneusement le surnageant et remettez en suspension la pastille cellulaire dans les bio-encres composites de gélatine méthacrylate et de méthacryloyle de fibroïne de soie.
Après la bio-impression et le lavage de la couche musculaire œsophagienne 3D avec du PBS, aspirez soigneusement le PBS et remplacez-le par trois millilitres de DMEM, complété par 10% de FBS, et 1% de pénicilline ou de streptomycine.