Passage de cellules Caco-2 pour évaluer la cytotoxicité des métabolites de pesticides à partir de cal de carotte traité aux pesticides

Procédez au passage des cellules après les avoir cultivées jusqu’à ce qu’elles atteignent une densité cellulaire supérieure à 80%Après avoir jeté le milieu de culture, lavez les cellules trois fois avec du PBS. Ajoutez ensuite un millilitre de solution de trypsine-EDTA dans le ballon et étalez-le uniformément pour un contact complet avec les cellules. Une fois que les cellules passent d’une forme adhérente à de petits points ronds, comme observé au microscope à un grossissement de 100X, retirez la solution digestive.

Tapotez doucement la paroi de la fiole pour détacher les cellules. Ajoutez deux millilitres de DMEM et rincez à nouveau 10 fois la paroi du ballon. Tapotez doucement la paroi de la fiole et transférez un millilitre de suspension cellulaire dans une autre fiole en verre.

Ajoutez cinq millilitres de DMEM dans chaque flacon en verre. Tapotez doucement la paroi de la fiole pour répartir uniformément les cellules. Cultivez les cellules à 37 degrés Celsius avec 5 % de dioxyde de carbone jusqu’à ce que la densité cellulaire soit supérieure à 80 %