Procédez à l’exécution du test d’exposition. Une fois qu’un nombre suffisant de cellules sont récoltées pour la même chose, tapotez doucement la paroi du ballon contenant les cellules pour les répartir uniformément et transférez les suspensions cellulaires dans un tube à centrifuger de 15 millilitres. Diluez la suspension cellulaire avec du DMEM en combinaison avec la cytométrie pour obtenir la densité cellulaire souhaitée.
Tapotez doucement la paroi du ballon pour assurer une répartition uniforme des cellules. Ensuite, ajoutez 100 microlitres de PBS dans les puits extérieurs de la plaque à 96 puits pour éviter que le milieu de culture ne s’évapore en raison de l’effet de bord. Ajoutez 100 microlitres de suspension cellulaire dans les puits gauches de la plaque et laissez-le reposer pendant 10 minutes.
Incuber les cellules à 37 degrés Celsius avec 5% de dioxyde de carbone pendant 48 heures. Après avoir retiré la plaque à 96 puits de l’incubateur, jetez le milieu de culture. Pour établir un groupe de métabolites de pesticides, ajoutez 100 microlitres des différentes solutions d’exposition aux résidus de pesticides préparées dans chaque puits désigné.
Ajoutez ensuite 100 microlitres des différentes solutions d’exposition aux pesticides préparées pour les parents dans chaque puits désigné à des fins de comparaison afin d’établir un groupe de parents de pesticides. Pour la mise en place d’un contrôle à blanc, ajoutez 100 microlitres de DMEM contenant 0,3 % de DMSO dans chaque puits désigné. Incuber les cellules à 37 degrés Celsius avec 5% de dioxyde de carbone pendant 24 heures.
