Procédez au prélèvement du cerveau de la tête précédemment isolée du fœtus sous un microscope à dissection. À l’aide d’une pince incurvée, tenez le museau et utilisez une pince numéro cinq pour décoller soigneusement la peau de la calotte crânienne, en la maintenant attachée au museau pour faciliter la tenue. En tenant à environ 75 degrés par rapport au cerveau, passez la pince le long de la ligne médiane jusqu’à la membrane claire des parties du crâne en développement de chaque côté.
Déplacez la pince parallèlement au crâne, insérez-la sous la calotte crânienne, puis pincez et pelez d’un côté. Une fois qu’un côté a été retiré, saisissez le côté restant avec la pince et pelez-le de l’autre côté. À l’aide d’une microcuillère, retirez délicatement le cerveau du crâne.
Transférez le cerveau dans une parabole fraîche de 60 millimètres contenant du PBS froid. À l’aide de la pince incurvée, tenez le cerveau à la jonction du cerveau postérieur et du cerveau antérieur avec la main non dominante. Avec la main dominante, tenez le scalpel avec la lame parallèle à la surface du cerveau.
Appuyez ensuite fermement sur la région corticale moyenne. Toujours en tenant le cerveau postérieur, faites une deuxième incision devant le cerveau postérieur pour le séparer du cerveau antérieur. Dans la section médiane, recherchez un petit espace linéaire sur la surface ventrale, qui est le troisième ventricule.
À l’aide de la pince numéro cinq, pincez soigneusement la muqueuse de chaque côté de la surface ventriculaire, puis transférez-la dans un tube de microcentrifugation frais et propre de 1,5 millilitre. Placez rapidement le tube dans un récipient cryo-safe d’azote liquide.
