Pour commencer, procurez-vous tous les matériaux nécessaires pour M-ROSE et placez l’ensemble complet des solutions de coloration Diff-Quik ou DQ dans des bocaux de coloration en verre avec couvercles scellés. Pour la préparation des lames de rouleau, extrayez les particules de tissu à l’aide d’une aiguille de seringue jetable de 2,5 à cinq millilitres. Étalez ensuite une zone circulaire d’épaisseur modérée de l’intérieur vers l’extérieur 1/3 de la section de la lame de cytologie.
Immergez la lame dans la solution Diff-A pendant 10 à 30 secondes. Pour éliminer l’excès de solution de Diff-A, placez la lame dans le bain de colorant PBS et balancez-la légèrement de haut en bas. Ensuite, secouez doucement le tampon restant.
Immergez la diapositive dans la solution Diff-B pendant 20 à 40 secondes. Ensuite, placez le toboggan dans la cuve de teinture à l’eau et balancez-le légèrement de haut en bas. Enfin, à l’aide d’un papier absorbant, essuyez le liquide résiduel de la lame et procédez à un examen microscopique.
M-ROSE d’un échantillon de biopsie bronchoscopique du patient utilisant la coloration DQ a identifié Pneumocystis, caractérisé par une structure claire, un contraste net et un ASCUS.