Pour commencer, décongelez un flacon contenant un millilitre de cellules T-ALL de poisson-zèbre congelées marquées à la GFP dans un bain d’eau à 37 degrés Celsius en secouant doucement. Pipetez lentement le contenu du flacon dans un tube conique de 15 millilitres, contenant quatre millilitres de milieu de poisson sur de la glace. Faites tourner les cellules à 2 500 g pendant cinq minutes à quatre degrés Celsius et jetez le surplomb avant de remettre la pastille en suspension dans 0,5 millilitre de milieu de pêche.
Ajoutez 10 microlitres de suspension cellulaire dans le tube de microcentrifugation contenant 10 microlitres de colorant bleu trypan. Mélangez bien et transférez 10 microlitres sur un hémocytomètre et comptez les cellules au microscope. Ensuite, tenez le poisson-zèbre CG1 adulte anesthésié avec le côté ventral vers le haut.
À l’aide d’une microseringue Hamilton, injectez cinq à six microlitres de suspension cellulaire dans l’espace intrapéritonéal. Environ 21 à 28 jours après la greffe, évaluez le pourcentage de cellules leucémiques marquées à la GFP provenant de poissons-zèbres anesthésiés. Pour récolter des cellules de leucémie, déplacez le poisson-zèbre euthanasié dans une nouvelle boîte de Pétri et ajoutez un millilitre de milieu de poisson pour servir de tampon pour les cellules.
À l’aide d’une lame de rasoir, décapitez d’abord le poisson-zèbre, puis faites macérer le tissu. Pipette de haut en bas pour déloger de gros amas de cellules. Passez la suspension cellulaire à travers une crépine cellulaire de 40 microns dans un tube conique de 50 millilitres pour se dissocier en une suspension unicellulaire.
