Pour commencer, allumez la respirométrie haute résolution et le système d’aspiration. Retirez les bouchons, puis, à l’aide d’un système de vide, retirez la solution de stockage d’éthanol à 70 %. Remplissez la chambre avec de l’eau moléculaire ultrapure.
Après le lavage final, ajoutez deux millilitres de MiRO5 sans créatine ni blebbistatine dans chaque chambre. Ouvrez le logiciel de respirométrie. Dans la boîte contextuelle, réglez la vitesse de l’agitateur de chambre sur 750 tr/min, la température sur 37 degrés Celsius et l’intervalle d’enregistrement des données sur deux secondes.
Réglez le gain sur un et la tension de polarisation sur 800 millivolts pour les capteurs d’oxygène. Cliquez sur Se connecter à Oxygraph pour établir la communication avec l’instrument. Dans la boîte de dialogue qui s’affiche, nommez et enregistrez le fichier expérimental avec les données actuelles et l’étalonnage.
Enregistrez la concentration d’oxygène pendant au moins 30 minutes pour permettre aux chambres de se réchauffer et d’enregistrer les signaux pour l’étalonnage de l’air. À la fin de l’étalonnage, maintenez la touche Maj et le bouton gauche de la souris enfoncés et faites glisser le curseur sur une région de la chronologie pour marquer une région de concentration d’oxygène stable. Accédez à Oxygraph, puis à Oxygen Calibration.
Pour l’étalonnage de l’air, sélectionnez le repère de concentration d’oxygène stable et cliquez sur Calibrer et copier dans le presse-papiers. Arrêtez l’enregistrement de l’étalonnage de l’air et sauvegardez le fichier.
