Pour commencer, ajoutez 100 microlitres de nanobilles QD préparées à 200 microlitres de tampon phosphate. Ajoutez ensuite six microlitres d’EDC. Après cela, incubez le mélange pendant 30 minutes à température ambiante sur un mélangeur rotatif.
Centrifuger le mélange à 13 523 g pendant 10 minutes à température ambiante et jeter le surnageant. Ensuite, ajoutez 100 microlitres de tampon phosphate au précipité. Couvrez le tube avec son couvercle et plongez-le dans le bain-marie à ultrasons opérationnel jusqu’à ce que le précipité soit complètement dispersé.
Dispersez 100 microgrammes d’anticorps dans 200 microlitres de tampon phosphate et ajoutez la suspension de nanobilles QD activées à la solution d’anticorps. Incuber le mélange à température ambiante pendant 30 minutes avec une rotation continue. Retirer ensuite l’excès d’anticorps par centrifugation à 6 010 g pendant cinq minutes à température ambiante et jeter soigneusement le surnageant.
Pour bloquer les nanobilles, ajoutez 200 microlitres de solution de caséine à 1% au résidu. Couvrez le tube avec son couvercle et plongez-le dans le bain-marie à ultrasons opérationnel jusqu’à ce que le résidu soit complètement dispersé. Incuber le mélange à température ambiante pendant deux heures avec une rotation continue.
Ajoutez 100 microlitres de solution de conservation au mélange et conservez-le à quatre degrés Celsius pour une utilisation ultérieure.
