Pour commencer, clampez le tube de 3 x 8 pouces juste avant le port aortique pour arrêter l’écoulement de perfusat. Positionnez le cœur de porc préparé avec sa paroi postérieure face à l’opérateur et inclinez la chambre de l’organe à environ 20 degrés. Ensuite, placez la canule aortique à un angle de 90 degrés par rapport au port aortique et défixez lentement la ligne aortique.
Désaérez la canule aortique en laissant le perfusat s’y écouler progressivement. Maintenant, diminuez lentement l’angle de la canule aortique jusqu’à ce qu’elle s’aligne avec le port aortique, puis connectez-la complètement à la ligne aortique. Une fois complètement connecté, massez doucement le cœur par intermittence pour éviter la distension due au remplissage ventriculaire gauche.
Ventilez le ventricule gauche par l’oreillette gauche ouverte pendant cette période. Démarrez l’acquisition des données et lancez l’écoulement de l’adénosine à 333 microlitres par minute. Ensuite, connectez les fils de stimulation au boîtier de stimulation et réglez-le sur 60 battements par minute pour une stimulation de secours.
En cas de fibrillation, défibrillez le cœur à l’aide de 30 palettes JUULs. Une fois qu’un rythme organisé est présent, arrêtez la ventilation manuelle et placez les sondes ECG directement sur le cœur à l’aide d’aiguilles à crochet. Connectez la canule à angle droit à l’orifice auriculaire de la chambre de l’organe.
Une fois connecté, clampez la canule et relâchez la pince Hoffman dans la ligne entre l’oxygénateur et le réservoir de chargement pour permettre au fluide de pénétrer dans le réservoir de chargement. Ensuite, remplissez le réservoir de chargement jusqu’à ce que la pression atteigne 15 à 20 millimètres de mercure. Augmentez le débit de la pompe pour maintenir la pression aortique et auriculaire.
Ensuite, insérez la moitié de l’embout métallique à angle droit dans l’oreillette gauche, l’embout pointant vers l’appendice pour favoriser la compétence de la valve mitrale. Insérez le capteur de pression à l’intérieur du ventricule gauche pour enregistrer la pression ventriculaire gauche. Après cela, relâchez la pince de la canule pour permettre à l’oreillette gauche de se remplir.
Une fois désaéré, utilisez les sutures et les collets de garrot précédemment placés pour fermer complètement l’ouverture de l’oreillette gauche. Ajustez la canule et les collets au besoin pour minimiser les fuites de liquide. Après avoir fixé la canule dans l’oreillette gauche, clampez la ligne de l’oxygénateur au sac de vent-kayak pour arrêter complètement la perfusion rétrograde vers l’aorte.
Enfin, déplacez l’adénosine goutte à goutte de la conduite menant au sac de guindage jusqu’à la ligne entre le réservoir de chargement et l’orifice auriculaire. La résistance vasculaire, le taux d’absorption d’oxygène, l’accumulation de lactate, la consommation de glucose et l’accumulation de potassium n’ont montré aucune différence statistique tout au long de la période de perfusion. De même, aucune différence n’a été observée dans le gain de poids des greffons.
Cependant, la fréquence cardiaque des greffes défaillantes a diminué régulièrement après deux heures de temps de charge, la zone sous la courbe ne montrant aucune différence statistiquement significative jusqu’à trois heures de perfusion. De plus, les mesures dépendantes de la charge suggèrent une perte de la fonction cardiaque dès 30 minutes après le début du temps de chargement, la mesure de la contractilité étant la première mesure à indiquer une perte de fonction. Comme pour la fréquence cardiaque, la pression du pouls ventriculaire gauche a diminué régulièrement après deux heures de perfusion en charge, avec des différences statistiquement significatives entre les greffons, la pression du pouls et la relaxation observées après 1,5 heure de perfusion.
