Pour commencer, ajoutez un millilitre d’aigle moyen basal dans chaque puits de la plaque à six puits. Et à l’aide d’une pince stérile, placez un seul insert de culture cellulaire dans chaque puits. Incuber la plaque dans un incubateur à 37 degrés Celsius, 5% de dioxyde de carbone pendant au moins deux heures.
Après avoir mis en place la zone de dissection dans une hotte biologique, lavez les outils chirurgicaux avec de l’éthanol à 70 %, suivi de PBS. Ensuite, positionnez l’animal euthanasié dans la zone de dissection et faites une petite incision avec des ciseaux en éloignant le cervelet pour exposer le cerveau. À l’aide d’une pince à épiler aux extrémités arrondies, décollez doucement le crâne et retirez le crâne en petits morceaux pour éviter d’endommager le tissu cérébelleux.
Exposez le tissu cérébral pour extraire le cervelet et déconnectez les trois paires de pédoncules à l’aide d’une fine spatule à iris incurvée pour séparer le cortex cérébelleux du tronc cérébral. Ensuite, glissez la spatule entre le cervelet, le colliculus supérieur et le tronc cérébral pour récupérer le cervelet.
