Pour commencer, obtenez le cervelet d’un bébé souris de 10 jours dans un tampon de dissection froid. Après avoir retiré l’excédent de tampon, positionnez le cervelet sur la plate-forme de coupe dans une orientation verticale. Effectuer un tranchage parasagittal à une épaisseur de tranche de 350 micromètres.
Séparez délicatement les tranches à l’aide d’une spatule à iris fine et placez-les dans un milieu de dissection froid. Sous les jumelles, utilisez deux spatules d’iris incurvées pour séparer soigneusement les tranches de tissu les unes des autres. Pour les cultures, utilisez des tranches dérivées du vermis cérébelleux situé dans la zone corticonucléaire médiale de l’organe.
À l’aide d’une spatule large, transférez chaque tranche de tissu sur un insert de culture. Déplacez chaque insert en portant une tranche de tissu dans un puits dans la plaque à six puits contenant le milieu préchauffé. Pendant l’incubation, aspirez le milieu utilisé à l’aide d’une pipette en verre stérile.
À l’aide d’une pipette sérologique de cinq millilitres, ajoutez un millilitre de beurre basal frais avec la pointe de la pipette appuyée contre la paroi du puits sans perturber les tissus.
