Préparation d’échantillons pour l’imagerie d’embryons précoces de poisson-zèbre dans un chorion intact à l’aide d’un microscope à feuillet de lumière

Pour commencer, retirez le tube d’agarose préparé avec les perles ajoutées d’un bain-marie à 37 degrés Celsius. Versez les 10 millilitres entiers d’agarose sur une boîte de Pétri de six centimètres. Une fois que la température descend en dessous de 33 degrés Celsius, transférez 10 à 15 embryons dans la solution d’agarose.

Faites tourner la boîte de Pétri de manière à ce que le peu de tampon qui aurait été transféré soit bien dispersé. Ensuite, prenez une micropipette de 200 microlitres avec une pointe de pipette appropriée et insérez un tube droit propre sorti du tube de microcentrifugation dans la pointe de la pipette. À l’aide de la micropipette, aspirez un peu d’agarose dans le tube, suivi de deux à trois embryons.

Sans relâcher la pression de la pipette, détachez le tube de la pointe de la pipette et placez-le sur le couvercle de la boîte de Pétri remplie d’E3 afin que l’agarose puisse se solidifier. Une fois que l’agarose s’est solidifié, transférez les tubes dans un tube de microcentrifugation de deux millilitres rempli d’E3.