The authors would like to thank the MSKCC Tissue Procurement Service Team (TPS), specifically, Maria Corazon Mariano, Priscilla McNeil, Anas Idelbi, Daniel Navarrete and Katrina Allen, in all of their efforts in the successful pursuit of this project and funding from the following sources: 5 R21 CA158609-02 and the Conquer Cancer Foundation and the Breast Cancer Research Foundation. In addition, the authors would like to thank Eric Cottington PhD, Vice President of the Office of Research and Project Administration, the Office of Technology Development, Research Outreach and Compliance and RTM Information Systems Support, in the support of the submission of this manuscript.

REMARQUE: l&#39;obtention de tissus des patients a été autorisé par l&#39;examen institutionnel (CISR) -approved des échantillons biologiques et des protocoles cliniques (numéros de protocole 09-121 et 11-041, respectivement) au Memorial Sloan Kettering Cancer Center. 1. tissus achats <ol><li> Achat de patients tumeur primaire / métastases NOTE: A ce jour, ce protocole a été effectuée sur les types enlevés chirurgicalement pancréatiques, gastriques et tumeurs du sein, ainsi que, les métastases de lymphome. <ol><li> Diriger l&#39;équipe chirurgicale de livrer l&#39;échantillon par courrier ou par système de tube pneumatique au département de pathologie dans étanche et stérile sac d&#39;échantillons de plastique étanche dans le conteneur anti-éclaboussures stérile. Diriger l&#39;équipe chirurgicale pour transporter les échantillons à l&#39;état frais sans formol ou fixateur. </li><li> Diriger le pathologiste ou un pathologiste assistant de récolter les échantillons frais en utilisant une technique stérile, qui incl&#39;utilisation de gants de ludes et des instruments stériles sous une hotte à flux laminaire. </li><li> Noter le temps de la récolte de l&#39;échantillon d&#39;un marché, qui est tenue rigoureuse de moins de 30 minutes de la fin de la procédure chirurgicale. En tenant compte des effets de l&#39;ischémie froide, ne pas prendre des échantillons de pièces de résection chirurgicale avec un temps d&#39;ischémie froide&gt; 30 min 18. </li><li> Diriger le personnel Département de Pathologie de retirer un échantillon de tumeurs primaires d&#39;environ 0,5 cm3 à 1,0 cm 3 sous une hotte à flux laminaire afin de maintenir un environnement stérile. Lorsque cela est possible, choisir un tissu tumoral à partir de la périphérie de la lésion d&#39;indice pour éviter la nécrose centrale (mort cellulaire) franc potentiel. NOTE: Le tissu nécrotique peut être grossièrement reconnaissable par l&#39;un des critères suivants: perte de la couleur ou la pâleur des tissus; perte de force dans laquelle les tissus nécrosés est douce et friable; une ligne de démarcation nette entre le tissu nécrotique et viable. </li><li> Diriger le pathologier ou le pathologiste assistant pour fournir les tissus périphériques qui est en excès (rejets chirurgicale) après prélèvement immédiat de la tumeur pour une évaluation diagnostique. Placer l&#39;échantillon dans un tube à centrifuger conique de 15 ml stérile contenant environ 5 ml de milieu essentiel minimum (MEM) contenant 1% d&#39;antibiotiques (pénicilline et streptomycine). </li><li> Si elle est disponible (par exemple, les ganglions lymphatiques axillaires de la queue de l&#39;échantillon ayant subi une mastectomie), se procurer un échantillon nettement positifs des ganglions lymphatiques associés de la même taille (0,5 cm3 à 1,0 cm 3) et comparer à la réponse aux médicaments de la tumeur primitive. Comme les échantillons de tumeurs primaires, de placer l&#39;échantillon de ganglion lymphatique associé à un tube à centrifuger conique de 15 ml stérile contenant environ 5 ml de milieu essentiel minimum (MEM) contenant 1% d&#39;antibiotiques (pénicilline et streptomycine). </li><li> Si la taille de permis de spécimens chirurgicaux (par exemple, l&#39;échantillon de mastectomie), supprimer (éloigné de la tumeur primaire) un échantillon de tissu normal (c&#39;est-à-parenchyme normale dense / fibreux sein) et le placer dans un tube à centrifuger conique de 15 ml stérile contenant environ 5 ml de milieu essentiel minimum (MEM) contenant 1% d&#39;antibiotiques à des fins de transfert. Après le transfert des équipements de laboratoire, transférer l&#39;échantillon «normal» à un, gel et magasin cryovial «de rupture» dans un congélateur à -80 ° C pour les analyses moléculaires futures. </li><li> Placez tous les échantillons sur la glace mouillée et transporter immédiatement à l&#39;espace de laboratoire ex vivo sectionnement de tissu frais. Ne section de l&#39;échantillon normal, mais plutôt stocker dans un congélateur à -80 ° C pour les analyses moléculaires futures. Transférer une partie de la tumeur primaire et les métastases associée à un, gel et magasin cryovial «de rupture» dans un congélateur à -80 ° C pour les analyses moléculaires futures. </li></ol></li><li> Le prélèvement de tissu à partir d&#39;études cliniques (par exemple, base facultative biopsies (CNB)) NOTE: Nous obtenons les tissus tumoraux de patientsinscrits sur les protocoles cliniques qui donnent leur consentement à subir une CNB d&#39;une métastase de la tumeur accessible avant le début de la thérapie. CNB, à ce jour, ont été réalisées sur des patients atteints sein, le lymphome de la zone marginale, lymphome à cellules du manteau, paragangliome métastatique, col de l&#39;utérus (cellules squameuses) et des ovaires. <ol><li> Ont le personnel clinique de radiologie interventionnelle ou département concerné effectuent un noyau biopsie à l&#39;aiguille de pré-traitement et le spécimen dans un tube de 15 ml à centrifuger conique stérile contenant environ 5 ml de milieu essentiel minimum (MEM) contenant 1% d&#39;antibiotiques (pénicilline et la streptomycine). </li><li> La biopsie sur la glace mouillée et transporter immédiatement à l&#39;espace de laboratoire ex vivo sectionnement de tissu frais. </li></ol></li></ol> 2 Préparation du matériel pour les paramètres de sectionnement et Vibratome <ol><li> Préparation du matériel pour la coupe <ol><li> Faire une solution d&#39;agarose à 4% par addition de 4 g de agarose de 100 ml de PBS. Autoclave (paramètres du cycle: liquides, 121 ° C, 30 min, 15 livres par pouce carré), la solution avant la première utilisation. Pour les utilisations ultérieures, placez le 4% d&#39;agarose dans un micro-ondes pour liquéfier (température élevée des intervalles de 30 s) avant chaque utilisation et laisser refroidir de manière appropriée à ~ 25 ° C (c&#39;est à dire, chaud au toucher) conscient que agarose se solidifie à température ambiante. </li><li> Utilisez les 4% d&#39;agarose comme un média enrobage de tissus non-permanent. Lorsque le 4% d&#39;agarose a suffisamment refroidi et est encore à l&#39;état liquide, avec des pinces stériles placer l&#39;échantillon de tissu dans un moule et versez l&#39;intégration dans les 4% d&#39;agarose. </li><li> Placer l&#39;échantillon de tissu à proximité (~ 2 mm de distance), mais pas directement sur la paroi de la surface de coupe du moule enrobage. L&#39;agarose 4% va commencer à se solidifier rapidement, donc positionner de manière appropriée l&#39;échantillon de tissu rapidement. Pendant la coupe, gardez le 4% d&#39;agarose dans un bain-marie à 55 ° pour rester en solution. </li><li> Pour une plaque de 24 puits pour l&#39;analyse de l&#39;article, ajouter 1 ml of milieu complet (c.-à-MEM + 10% de sérum foetal bovin + 1% d&#39;antibiotique) à chaque puits. Conservez la plaque de 24 puits à température ambiante (~ 25 ° C) pendant toute la durée de la coupe. </li></ol></li><li> Préparation des paramètres Vibratome <ol><li> Utilisation du microtome vibrant, régler la vitesse à laquelle la lame se rapproche de l&#39;échantillon [0 (0,00 mm / s) à 10 (2,5 mm / s)] et la fréquence de la lame [0 (0 Hz) et 10 (100 Hz) ]. Ajustez les paramètres en fonction de la texture du tissu (c&#39;est à dire, la densité / fermeté). </li><li> Pour une tumeur du sein primaire de carcinome canalaire invasif, ajuster les paramètres à 6 et 3, respectivement la vitesse et la fréquence. Pour le tissu tumoral moins dense / entreprise, réduire la vitesse et augmenter la fréquence en conséquence. </li><li> Réglez l&#39;épaisseur de coupe dans les limites de l&#39;instrument (1 - 999 um). Pour ces analyses, définir l&#39;épaisseur de coupe à 200 um. </li><li> Placer l&#39;échantillon d&#39;agarose-intégré à l&#39;aide d&#39;une fine couche de colle liquide sur le disque de tha échantillont est immergé dans un réservoir de médias qui est enfermé dans la glace mouillée. </li></ol></li></ol> 3. tissus sectionnement, traitement et analyses <ol><li> Retirez les sections de précision tranché immédiatement après la coupe à l&#39;aide de pinces stériles et les placer dans une plaque multi-puits avec 1 ml de milieu complet. Lorsque les sections suffisantes sont acquises pour une réponse et des analyses corrélatives, placer la plaque multi-puits pour la réponse au traitement dans un incubateur de culture de tissu fixé à des conditions de culture de tissu standard. </li><li> Prendre plusieurs sections de contrôle que les serre-livres sections traitées en vue de confirmer la réponse dose-dépendante par rapport à des objets en culture. Effectuer tissu coupe rapidement (~ 30 - 40 min), bien en deçà des effets néfastes de temps froid ischémique (~ 2 - 4 heures) 18. Effectuer le traitement des sections uniquement après une période d&#39;acclimatation de 1 heure. </li><li> Après la période d&#39;acclimatation d&#39;une heure, ajouter des doses croissantes (thérapeutiquement pertinent; <em.&gt; Par exemple, 0 - 10 uM concentrations) de drogue vers les sections et la maison dans des conditions de culture de tissu standard pour la période de traitement. Pour cette étude, utiliser 24 et / ou 48 périodes d&#39;évaluation de h. Toutefois, des coupes de tissus de contrôle (véhicule seulement) restent viables, comme testé dans cette étude, pour des périodes allant jusqu&#39;à et y compris les périodes d&#39;évaluation de 96 h. </li><li> Après le traitement, supprimer toutes les sections dans des conditions stériles et le formol fix en plaçant la coupe de tissu dans un tube contenant soit 10% de formaline tamponnée au lieu et à TA O / N ou à un tube contenant du paraformaldéhyde 4% (dilution de 16% de paraformaldéhyde à partir d&#39;un flacon avec du PBS à une concentration finale de 4%) et le mettre à la température ambiante pendant 2 heures. <ol><li> Fixer des coupes de tissus plus grandes (par exemple., ~ 6 mm x 4 mm) 200 um d&#39;épaisseur sur 10% de formol tamponné O / N à la température ambiante. Fixer sections plus petites (par ex., 1 mm x 1 mm) de 200 um d&#39;épaisseur dans du paraformaldéhyde 4% pendant 2 heures à température ambiante. REMARQUE: Pour une pénétration efficace de fixateur le volume de fixative convient 20X le volume du tissu. Etant donné que ce protocole conduit à de très petites tailles (par exemple des tissus, des tissus de 6 mm 3 de volume = 6 pi), pour garantir l&#39;utilisation d&#39;une fixation appropriée ml de fixatif pour toutes les tailles de tissu. </li><li> Après fixation ont les échantillons de tissus inclus en paraffine par le personnel du ministère de pathologie. Section spécimen blocs de paraffine sur des lames chargées d&#39;être hématoxyline et éosine teinté et évalué par immunohistochimie (par exemple, l&#39;apoptose). </li></ol></li></ol>

<ol>
	<li>Abercrombie, M., Ambrose, E. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Interference+Microscope+Studies+of+Cell+Contacts+in+Tissue+Culture.">Interference Microscope Studies of Cell Contacts in Tissue Culture.</a> Experimental Cell Research. 15 (58), 332-345 (1958).</li><li>Coriell, L. L., McAllister, R. M., Wagner, B. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Criteria+for+Determining+Malignancy+in+Tissue-Culture+Cell+Lines+in+the+Albino+Rat.">Criteria for Determining Malignancy in Tissue-Culture Cell Lines in the Albino Rat.</a> New York Academy of Science. 5, 351-355 (1957).</li><li>Paul, J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+Cancer+Cell+in+Vitro:+A+Review.">The Cancer Cell in Vitro: A Review.</a> Cancer Research. 22, 431-440 (1962).</li><li>Dean, J. L., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Therapeutic+response+to+CDK4/6+inhibition+in+breast+cancer+defined+by+ex+vivo+analysis+of+human+tumors.">Therapeutic response to CDK4/6 inhibition in breast cancer defined by ex vivo analysis of human tumors.</a> Cell Cycle. 11 (14), 2756-2761 (2012).</li><li>Bray, K., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Bcl-2+Modulation+to+Activate+Apoptosis+in+Prostate+Cancer.">Bcl-2 Modulation to Activate Apoptosis in Prostate Cancer.</a> Molecular Cancer Research. 7 (9), 1487-1496 (2009).</li><li>Quail, D. F., Joyce, J. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Microenvironmental+regulation+of+tumor+progression+and+metastasis.">Microenvironmental regulation of tumor progression and metastasis.</a> Nature Medicine. 19 (11), 1423-1437 (2013).</li><li>Nakasone, E. S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Imaging+Tumor-Stroma+Interactions+during+Chemotherapy+Reveals+Contributions+of+the+Microenvironment+to+Resistance.">Imaging Tumor-Stroma Interactions during Chemotherapy Reveals Contributions of the Microenvironment to Resistance.</a> Cancer Cell. 21, 488-503 (1016).</li><li>Shi, Y., Hogue, J., Dixit, D., Koh, J., Olson, J. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Functional+and+genetic+studies+of+isolated+cells+from+parathyroid+tumors+reveal+the+complex+pathogenesis+of+parathyroid+neoplasia.">Functional and genetic studies of isolated cells from parathyroid tumors reveal the complex pathogenesis of parathyroid neoplasia.</a> PNAS. 111 (8), 3092-3097 (2014).</li><li>Vidal, S. J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Isolation+of+cancer+stem+cells+from+human+prostate+cancer+samples.">Isolation of cancer stem cells from human prostate cancer samples.</a> J. Vis. Exp. (85), e51332 (2014).</li><li>Wanping, X., Neckers, L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Targeting+the+Molecular+Chaperone+Heat+Shock+Protein+90+Provides+a+Multifaceted+Effect+on+Diverse+Cell+Signaling+of+Cancer+Cells.">Targeting the Molecular Chaperone Heat Shock Protein 90 Provides a Multifaceted Effect on Diverse Cell Signaling of Cancer Cells.</a> Clinical Cancer Research. 13, 1625-1629 (2007).</li><li>Moulick, K., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Affinity-based+proteomics+reveal+cancer-specific+networks+coordinated+by+Hsp90.">Affinity-based proteomics reveal cancer-specific networks coordinated by Hsp90.</a> Nature Chemical Biology. 7 (11), 818-826 (1038).</li><li>Alpaugh, M. L., Tomlinson, J. S., Ye, Y., Barsky, S. H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Relationship+of+sialyl-Lewis(x/a)+underexpression+and+E-cadherin+overexpression+in+the+lymphovascular+embolus+of+inflammatory+breast+cancer.">Relationship of sialyl-Lewis(x/a) underexpression and E-cadherin overexpression in the lymphovascular embolus of inflammatory breast cancer.</a> American Journal of Pathology. 161 (2), 619-628 (2002).</li><li>Chu, K., Boley, K. M., Moraes, R., Barsky, S. H., Robertson, F. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+paradox+of+E-cadherin:+role+in+response+to+hypoxia+in+the+tumor+microenvironment+and+regulation+of+energy+metabolism.">The paradox of E-cadherin: role in response to hypoxia in the tumor microenvironment and regulation of energy metabolism.</a> Oncotarget. 4 (3), 446-462 (2013).</li><li>Vaira, V., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Preclinical+model+of+organotypic+culture+for+pharmacodynamic+profiling+of+human+tumors.">Preclinical model of organotypic culture for pharmacodynamic profiling of human tumors.</a> PNAS. 107 (18), 8352-8356 (2010).</li><li>Centenera, M. M., Raj, G. V., Knudsen, K. E., Tilley, W. D., Butler, L. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Ex+vivo+culture+of+human+prostate+tissue+and+drug+development.">Ex vivo culture of human prostate tissue and drug development.</a> Nature Reviews Urology. 10, 483-487 (2013).</li><li>Jhaveri, K., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Heat+shock+protein+90+inhibitors+in+the+treatment+of+cancer:+current+status+and+future+directions.">Heat shock protein 90 inhibitors in the treatment of cancer: current status and future directions.</a> Expert Opinion on Investigational Drugs. 5, 611-628 (2014).</li><li>Gerecitano, J. F., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Using+124-PU-H71PET+imaging+to+predict+intratumoral+concentration+in+patients+on+a+phase+I+trial+of+PU-H71.">Using 124-PU-H71PET imaging to predict intratumoral concentration in patients on a phase I trial of PU-H71.</a> Journal of Clinical Oncology. 31, 11076-11 (2013).</li><li>Yildiz-Aktas, I., Dabbs, D. J., Bhargava, R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+effect+of+cold+ischemic+time+on+the+immunohistochemical+evaluation+of+estrogen+receptor,+progesterone+receptor,+and+HER2+expression+in+invasive+breast+carcinoma.">The effect of cold ischemic time on the immunohistochemical evaluation of estrogen receptor, progesterone receptor, and HER2 expression in invasive breast carcinoma.</a> Modern Pathology. 25, 1098-1105 (2012).</li></ol>

No conflicts of interest disclosed.

biologistes du cancer font face à des défis importants en essayant de développer des stratégies thérapeutiques efficaces. Test de médicaments en développement sur ​​des lignées cellulaires de cancer établis ne peut pas refléter avec précision en réponse vivo et in vivo sur des modèles PDX sont laborieux et très coûteux. Compte tenu de ce qui précède, l&#39;application de techniques ex vivo de tumeurs primaires du patient 14, 15 est maintenant positionn?...

Développement de traitements efficaces contre le cancer s&#39;est avéré être extrêmement difficile. lignes de cancer des cellules et des explants de tumeur - ainsi que les xénogreffes ont été utilisées dans la recherche sur le cancer pour plus d&#39;un demi siècle 1,2,3. A ce jour, l&#39;analyse moléculaire de la sensibilité aux médicaments et la résistance dans les deux lignées de cellules cancéreuses établies et des xénogreffes provenant de patients (PDX) est indispensable. Cependant, le test de composés sur des lignées cellulaires de cancer établies n&#39;est pas souvent prédictifs de l&#39;efficacité in vivo, et correspondant à des études in vivo chez les animaux, en particulier dans les modèles PDX, est très coûteux et prend du temps. Les limites de ces systèmes modèles, à savoir l&#39;incapacité d&#39;informer sur l&#39;influence du micro-environnement natif dans la progression tumorale et la réponse à des stratégies thérapeutiques, a conduit le domaine de la recherche afin de développer des méthodes supplémentaires pour compléter ces analyses. Récente, une attention accrue est accordée à une analyse ex vivo de son tour maladeou explants 4, 5 en raison de la plus grande compréhension que la réponse thérapeutique du cancer n&#39;est pas exclusif à la composition moléculaire inhérente des cellules cancéreuses mais est fortement influencée par le microenvironnement des cellules tumorales 6, 7 une fonction qui ne peut être récapitulé par des méthodes de culture traditionnelles et / ou PDX. analyse ex vivo dans le contexte ci-dessus (c.-à-., l&#39;influence de la tumeur adjacente entourant cellule microenvironnement) l&#39;évaluation des sections tumeur / métastases primaires viables implique, plutôt que ex vivo l&#39;analyse d&#39;isolats cellulaires 8, 9. Nous rapportons ici sur une technique ex vivo (c.-à-., Sections de précision tranches fraîches tissus) des deux tumeurs primaires de patients et métastases associées (par exemple, les ganglions lymphatiques) qui informe fidèlement réponse (IC50), les effets hors-cible et permet de moléculaire analyse des mécanismes de résistance et de rétroaction. En outre, une analyse corrélative de therapeUTIC sensibilité / résistance en fonction de biomarqueurs et profil d&#39;expression génique peut être réalisée dans un effort pour identifier les patients les plus susceptibles de répondre à la drogue expérimentale d&#39;intérêt (c.-à-., la réponse médicamenteuse élevée correspond à des patients en particulier le profil biologique). Application de la technique et l&#39;évaluation ex vivo dans un mode multi-paramètre est un mouvement vers la sélection des patients et l&#39;amélioration globale des résultats cliniques. Analyse ex vivo de la réponse au traitement pourrait devenir un outil standard dans le développement préclinique et clinique de traitements contre le cancer et est envisagée comme une étape vers une approche de médecine personnalisée dans les stratégies de développement thérapeutique.

<table border="0" cellpadding="0" cellspacing="0" width="598">
	<tbody>
		<tr height="43">
			<td height="43" style="height:43px;width:216px;">Name of Material/ Equipment</td>
			<td style="width:96px;">Company</td>
			<td style="width:119px;">Catalog Number</td>
			<td style="width:167px;">Comments/Description</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:216px;">Vibratome Leica VT1000s</td>
			<td style="width:96px;">Leica</td>
			<td style="width:119px;">14047235613</td>
			<td style="width:167px;"></td>
		</tr>
		<tr height="42">
			<td height="42" style="height:42px;width:216px;">UltraPure agarose</td>
			<td style="width:96px;">Invitrogen</td>
			<td style="width:119px;">16500500</td>
			<td style="width:167px;">Prepare 4% and 6% before use</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:216px;">Injector blade</td>
			<td style="width:96px;">Ted Pella</td>
			<td style="width:119px;">121-4</td>
			<td style="width:167px;"></td>
		</tr>
		<tr height="63">
			<td height="63" style="height:63px;width:216px;">MEM with Penicillin&#160; + Streptomycin</td>
			<td style="width:96px;">Media Core Facilities (MSKCC)</td>
			<td style="width:119px;"></td>
			<td style="width:167px;">The media is prepared at Memorial Sloan Kettering Cancer Center&#160;</td>
		</tr>
		<tr height="42">
			<td height="42" style="height:42px;width:216px;">Scalpel no. 10</td>
			<td style="width:96px;">Thermo Scientific</td>
			<td style="width:119px;">31-200-32</td>
			<td style="width:167px;"></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:216px;">Disposable forceps</td>
			<td style="width:96px;">Cole-Parmer</td>
			<td style="width:119px;">84011182</td>
			<td style="width:167px;"></td>
		</tr>
		<tr height="63">
			<td height="63" style="height:63px;width:216px;">Embedding mold</td>
			<td style="width:96px;">Electron Microscopy Science</td>
			<td style="width:119px;">70181</td>
			<td style="width:167px;"></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:216px;">FBS (heat inactivated)</td>
			<td style="width:96px;">Gemini</td>
			<td style="width:119px;">100106</td>
			<td style="width:167px;"></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:216px;">24 well plates</td>
			<td style="width:96px;">Corning</td>
			<td style="width:119px;">3524</td>
			<td style="width:167px;"></td>
		</tr>
		<tr height="42">
			<td height="42" style="height:42px;width:216px;">Formalin (10%)</td>
			<td style="width:96px;">Sigma Diagnostics</td>
			<td style="width:119px;">SDHT501128&#160;</td>
			<td style="width:167px;"></td>
		</tr>
		<tr height="42">
			<td height="42" style="height:42px;width:216px;">16% Formaldehyde solution</td>
			<td style="width:96px;">Thermo Scientific</td>
			<td style="width:119px;">28908</td>
			<td style="width:167px;"></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:216px;">Embedding microsettes</td>
			<td style="width:96px;">Simport</td>
			<td style="width:119px;">M503-2</td>
			<td style="width:167px;"></td>
		</tr>
		<tr height="42">
			<td height="42" style="height:42px;width:216px;">Ethanol (70%)</td>
			<td style="width:96px;">Fisher Scientific</td>
			<td style="width:119px;">A405P-4</td>
			<td style="width:167px;"></td>
		</tr>
		<tr height="42">
			<td height="42" style="height:42px;width:216px;">Waterbath</td>
			<td style="width:96px;">Fisher Scientific</td>
			<td style="width:119px;">15-462-2SQ</td>
			<td style="width:167px;"></td>
		</tr>
		<tr height="42">
			<td height="42" style="height:42px;width:216px;">Microwave</td>
			<td style="width:96px;">General Electric</td>
			<td style="width:119px;">ModelJES2051DNBB</td>
			<td style="width:167px;"></td>
		</tr>
		<tr height="42">
			<td height="42" style="height:42px;width:216px;">Adhesive (Ethyl Cyanoacrylate)</td>
			<td style="width:96px;">Sigma-Aldrich</td>
			<td style="width:119px;">E1505-5G</td>
			<td style="width:167px;"></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:216px;">10mm dishes</td>
			<td style="width:96px;">BD Falcon</td>
			<td style="width:119px;">353003</td>
			<td style="width:167px;"></td>
		</tr>
		<tr height="22">
			<td height="22" style="height:22px;width:216px;">15ml tubes</td>
			<td style="width:96px;">BD Falcon</td>
			<td style="width:119px;">352096</td>
			<td style="width:167px;"></td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

ex vivo treatment response of primary tumors and/or associated metastases for preclinical and clinical development of therapeutics

The molecular analysis of established cancer cell lines has been the mainstay of cancer research for the past several decades. Cell culture provides both direct and rapid analysis of therapeutic sensitivity and resistance. However, recent evidence suggests that therapeutic response is not exclusive to the inherent molecular composition of cancer cells but rather is greatly influenced by the tumor cell microenvironment, a feature that cannot be recapitulated by traditional culturing methods. Even implementation of tumor xenografts, though providing a wealth of information on drug delivery/efficacy, cannot capture the tumor cell/microenvironment crosstalk (i.e., soluble factors) that occurs within human tumors and greatly impacts tumor response. To this extent, we have developed an ex vivo (fresh tissue sectioning) technique which allows for the direct assessment of treatment response for preclinical and clinical therapeutics development. This technique maintains tissue integrity and cellular architecture within the tumor cell/microenvironment context throughout treatment response providing a more precise means to assess drug efficacy.

Pour cette étude, la technique ex vivo a été utilisé dans une analyse de corrélation thérapeutique sensibilité / résistance d&#39;un inhibiteur de la protéine de choc thermique 90 (Hsp90i). Dans une évaluation préclinique de cette Hsp90i, la tumeur primaire de cancer du sein, un ER + carcinome canalaire invasif (IDC), et associé métastase des ganglions lymphatiques ont été analysés ex vivo de la réponse au traitement &#160; (Figure 1). Plusieurs 200 um...

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Ex Vivo Treatment Response of Primary Tumors and/or Associated Metastases for Preclinical and Clinical Development of Therapeutics

Lignées de cellules cancéreuses établies et les xénogreffes ont été le pilier de la recherche sur le cancer au cours des dernières décennies. Cependant, des données récentes suggèrent que la réponse thérapeutique est fortement influencée par le micro-environnement des cellules tumorales. Par conséquent, nous avons développé une analyse ex vivo des échantillons de tumeurs primaires à des fins de développement de médicaments.

La réponse au traitement ex vivo de tumeurs primaires et / ou métastases associées préclinique et développement clinique de la thérapeutique

The molecular analysis of established cancer cell lines has been the mainstay of cancer research for the past several decades. Cell culture provides both ...

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Research

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Medicine

Ex Vivo Treatment Response of Primary Tumors and/or Associated Metastases for Preclinical and Clinical Development of Therapeutics

14.6K vues.  Memorial Sloan Kettering Cancer Center.  Lignées de cellules cancéreuses établies et les xénogreffes ont été le pilier de la recherche sur le cancer au cours des dernières décennies. Cependant, des données récentes suggèrent que la réponse thérapeutique est fortement influencée par le micro-environnement des cellules tumorales. Par conséquent, nous avons développé une analyse ex vivo des échantillons de tumeurs primaires à des fins de développement de médicaments. 