We thank Dr. Roger Hopper and the Wyoming Department of Agriculture, Analytical Services Lab for the mass spectroscopy analysis of our samples. We would like to express our gratitude to the University of Wyoming, School of Pharmacy for allowing us to video this protocol in their laboratories. We would also like to thank the Theodore O. and Dorothy S. King Endowed Professorship Agreement for their graduate assistantship (SC), the University of Wyoming for the Graduate Assistantship support (JRS), and the Science Posse (NSF GK-12 Project # 084129) for the teaching fellowship (JRS). We would also like to thank Uranium One for allowing us to obtain samples and assisting us with questions. This work was supported by the School of Energy Resources, University of Wyoming.

Tous les échantillons ont été prélevés dans le bâtiment de traitement de liquide de l&#39;uranium d&#39;une installation d&#39;ISR de l&#39;uranium dans le Wyoming. 1. Production de purge de l&#39;eau (PBW) <ol><li> Recueillir deux types d&#39;échantillons d&#39;eau provenant d&#39;une installation d&#39;uranium ISR: PBW et l&#39;osmose (RO) de l&#39;eau inverser. Recueillir PBW partir d&#39;un robinet de suivi après le processus d&#39;échange d&#39;ions, mais avant osmose inverse décontamination. Prélever des échantillons RO après la PBW est décontaminé par un traitement par osmose inverse. REMARQUE: agent de lixiviation est transporté dans des canalisations des champs de puits multiples à la construction de traitement de liquide de l&#39;uranium, où elle est recueillie dans une colonne et préparé pour l&#39;échange d&#39;ions. Environ 1-3% de l&#39;agent de lixiviation après l&#39;échange d&#39;ions est retiré du circuit et appelée eau de purge de production (pep). PBW est réutilisée dans les procédés d&#39;extraction et de décontaminer / déminéralisée avec filtration RO. </li><li> Prélever des échantillons d&#39;eau en polyéthylène haute densité (PEHD) bouteilles avec zéro espace de tête selonles procédures d&#39;exploitation normalisées pour la collecte et l&#39;analyse du Département Wyoming of Environmental Quality (WYDEQ) 23 échantillon. </li><li> Mesurer la température et du pH sur place et transporter les échantillons sur la glace pour les garder au frais. </li><li> PBW de magasin à 4 ° C. Conserver la solution PBW frais jusqu&#39;à ce que après que les médias essentielle (EMEM-10x) minimum du concentré d&#39;Eagle est ajouté lors de la préparation des médias comme indiqué dans le protocole suivant. NOTE: PBW est une solution oxydée qui va précipiter si on les laisse geler ou réchauffé à température ambiante. Après dilution, la solution est suffisamment dilué PBW qu&#39;il ne précipite pas lorsqu&#39;il est chauffé à 37 ° C avant l&#39;application sur les cellules et pendant l&#39;incubation. </li></ol> 2. Préparation de nanoparticules de CuO (CuO-PN) <ol><li> Moissonneuse une solution éthanolique pur contenant 250 ml de 0,2 M de CuCl 2 • 2H 2 O, 250 ml d&#39;hydroxyde de sodium 0,4 M (NaOH), et 5 g de polyethylene glycol (PEG) dans un ballon à fond rond avec six mm boules de verre borosilicate. </li><li> Placer la solution dans un four à micro-ondes modifié et lui permettre de réagir sous reflux à la pression de l&#39;air ambiant pendant 10 min à 20% de puissance (intervalles de 6 secondes à 24 secondes éteint). </li><li> Refroidir la solution à la température ambiante (20 ° C), puis décanté dans 50 ml tubes coniques, en laissant les billes de verre. </li><li> Centrifugeuse la solution dans les 50 ml tubes coniques à 1000 g pendant 30 min, décanté, puis laver le CuO-IP avec une séquence de 300 ml d&#39;eau chaude (60-65 ° C), 100 ml d&#39;éthanol et 100 ml d&#39;acétone. </li><li> Sécher le CuO-IP à la température ambiante (20 ° C) dans les 50 ml tubes coniques. </li><li> Grattez la CuO-IP de leurs tubes dans un mortier. Couvrir le CuO-IP avec une feuille d&#39;étain et de chauffer le CuO-IP à 110 ° C dans un four pour retirer le liquide restant. Combinez CuO-IP dans un lot et peser le CuO-IP. NOTE: La préparation de CuO-IP et le traitement CuO-NP de PBW ont été menées dans l&#39;eau Quallité Laboratoire de science des écosystèmes et de la gestion, Université du Wyoming. CuO-NP synthèse suit la procédure de Martinson et Reddy (2009) 11. </li></ol> 3. Traitement des PBW avec CuO-IP <ol><li> Ajouter 50 mg (1 mg / ml) de CuO-NP à un tube conique de 50 ml puis 50 ml d&#39;PBW. Scellez le tube et on fait réagir pendant 30 min sur un banc haut agitateur orbital à 250 rpm. </li><li> Échantillons Tubes à centrifuger à 250 g pendant 30 min puis filtrer le surnageant à l&#39;aide d&#39;un filtre à seringue de 0,45 um. Modifier la vitesse de la centrifugeuse et le temps peut dépendre de la nanoparticule d&#39;assurer la CuO-IP devient compact dans le tube de centrifugation. </li></ol> 4. Analyse élémentaire <ol><li> Préparer non traitée (témoin) et des échantillons PBW CuO-NP-traités pour l&#39;analyse élémentaire comme suit. </li><li> Acidifier aliquotes (40 ml) de CuO-NP-traitées et non traitées PBW avec de l&#39;acide nitrique de qualité trace métallique à un pH de 2,0. Analyser aliquotes PBW acidifiés pour les cations par coupl inductifed plasma spectroscopie de masse (ICP-MS) comme décrit dans Reddy et Roth (2012) 13. </li><li> Préparer des aliquots non acidifiés (20 ml) de CuO-NP-traitées et non traitées PBW et analyser les aliquotes non acidifiés pour anions par chromatographie ionique (IC) tel que décrit dans Reddy et Roth (2012) 13. NOTE: Des aliquotes ont été analysées par le Département des services analytiques Wyoming Agriculture, Laramie WY 82070. Une description de la procédure IC et ICP-MS peut être trouvée dans Reddy et Roth, (2012) 13. </li></ol> 5. Préparation de culture cellulaire supports Utilisation PBW <ol><li> Utilisez la commande à deux (EMEM-1x et RO + médias) et huit solutions médias de test PBW (quatre concentrations de chaque PBW non traitée et les médias CuO-NP-traitée) dans les études de viabilité. Tour d&#39;Horizon des solutions sont les suivantes: <ol><li> Pour le contrôle EMEM-1x, acheter des supports essentiel minimum (EMEM-1x) de Eagle avec L-glutamine et de bicarbonate de sodium déjà ajoutées. Ajouter sérum fœtal bovin (FBS) Et des antibiotiques par les instructions du fabricant. REMARQUE: EMEM-1x est acheté dilué à la concentration appropriée pour la croissance cellulaire et contenant de la L-glutamine et du bicarbonate de sodium. EMEM-1x nécessite l&#39;ajout de sérum fœtal bovin (FBS) et un mélange d&#39;antibiotiques de pénicilline et de la streptomycine (50 UI / ml de pénicilline et 50 pg / ml de streptomycine). EMEM-1x est utilisé comme un support de commande, car il est le milieu de croissance recommandée par le fabricant pour les deux types de cellules utilisées dans cette étude. Concentré EMEM-10x est dilué avec de l&#39;eau RO de l&#39;installation ou non traitée ou CuO-NP-traitée PBW pour produire les solutions d&#39;essai. Concentré EMEM-10x lors de l&#39;achat ne contient pas de L-glutamine ou du bicarbonate de sodium si ceux-ci sont ajoutés en plus du sérum bovin fœtal (FBS) et un mélange d&#39;antibiotiques de pénicilline et de streptomycine. </li><li> Pour la solution de contrôle RO RO utiliser l&#39;eau recueillis dans l&#39;installation d&#39;ISR. Utilisez le même protocole que les milieux d&#39;essai PBW seul substitut 100% RO water de l&#39;installation d&#39;ISR à la place de PBW. Pour diluer l&#39;eau non traitée et l&#39;utilisation de la solution CuO-NP-traitée RO ou ultrapure du laboratoire. </li><li> Diluer PBW non traité en quatre concentrations d&#39;essai avant le mélange avec les composants de milieux de culture cellulaire. Préparer les quatre concentrations différentes de solutions non traitées PBW en mélangeant traitée PBW avec RO (du laboratoire) dans les combinaisons suivantes: 100% (PBW pur + pas d&#39;eau de RO), 75% (187,5 ml de PBW + 62,5 ml eau RO), 50% (125 ml de PBW + 125 ml d&#39;eau RO) ou 25% (62,5 ml de PBW + 187,5 ml d&#39;eau RO). </li><li> Diluer CuO-NP-PBW traitée en quatre concentrations d&#39;essai avant le mélange avec les composants de milieux de culture cellulaire. Préparer les quatre concentrations différentes de solutions PBW CuO-NP-traités en mélangeant PBW (pré-traités avec 1 mg / ml CuO-NP pendant 30 minutes) avec RO (du laboratoire) dans les combinaisons suivantes: 100% (pur CuO- PBW NP-traitée + pas d&#39;eau de RO), 75% (187,5 ml de CuO-NP-traitée PBW + 62,5 ml d&#39;eau RO), 50% (125ml de CuO-NP-traitée PBW + 125 ml d&#39;eau RO) ou 25% (62,5 ml de PBW CuO-NP-traitée + 187,5 ml d&#39;eau RO). </li></ol></li><li> Préparez 250 ml de RO + médias, PBW non traitée + médias et PBW + concentration des médias CuO-NP-traitée par addition de 25 ml de concentré EMEM-10x à 190 ml de la RO 100% et 100%, 75%, 50% ou 25% des concentrations PBW préfabriqués non traitées ou CuO-NP-traités créés à l&#39;étape 6.1.3 et 6.1.4. </li><li> Ajuster le pH de chaque solution à 7,4 avec du NaOH ou du HCl. </li><li> Supplément chaque concentration de non traitée et CuO-NP-traitée PBW ainsi que RO + support avec les composants standards suivants: 25 ml (10%) de sérum bovin fœtal (FBS), 2,5 ml de L-glutamine, 0,55 g de NaHCO 3 et 1,25 ml Pen / Strep (50 UI / ml de pénicilline et 50 pg / ml de streptomycine). </li><li> Réglez l&#39;osmolalité de chaque concentration de PBW non traitée + médias, CuO-NP-traitée PBW + médias et RO + médias à 290-310 mOsm / kg par addition d&#39;eau RO et la mesure en utilisant un osmomètre. </li><li> Filtre à chaque solution en utilisantune unité de 0,22 um à vide de filtre, et conserver à 4 ° C. NOTE: En raison de légères variations dans la quantité d&#39;eau RO utilisé pour ajuster l&#39;osmolalité, varier la concentration des médias finales dans une fourchette de 5%, avec PBW non traitée + concentrations des médias à 56%, 44%, 29% et 16,5% et CuO-NP Les concentrations de PBW + médias traitée à 53%, 45%, 30% et 17%. </li></ol> 6. viabilité cellulaire NOTE: Étant donné que les reins et le foie sont des organes cibles de la toxicité des métaux lourds, emploient des cellules en culture de rein embryonnaire humain (HEK293) (HEK) et le carcinome hépatocellulaire humain (HepG2) cellules (HEP) de méthodes d&#39;essai 24-26. <ol><li> Préparer une culture de cellules HEK et HEP 2-3 jours avant l&#39;ensemencement des plaques à 96 puits utilisés dans l&#39;expérience par les instructions du fabricant. </li><li> Mesurer la viabilité des cellules en utilisant le [, 5-diméthylthiazol-2-yl-4] -2, le bromure de 5-diphényltétrazolium (MTT) 3- essai. REMARQUE: Le protocole de dosage de MTT a été modifié à partir de Meerloo et al. (2011) 27. <ol><li> Obtenir MTT sous forme de poudre. Ajouter un tampon phosphate salin (PBS) pour constituer une concentration stock de 50 mg / ml. Agiter la solution pendant 2 heures puis filtrer avec un filtre à seringue de 0,45 um et aliquote dans des tubes sécuritaires 1,5 ml de congélation. Protéger les tubes de la lumière et conserver à 4 ° C. </li></ol></li><li> Éliminer les cellules HEK et HEP de leurs boîtes de culture à l&#39;aide de trypsine, centrifuger à 1000 g pendant 5 min et décanter la trypsine. Ajouter 5 ml de PBS et les cellules mélanger pour obtenir une solution d&#39;une seule cellule. Ensuite, 20 ul d&#39;appliquer la solution à une seule cellule à un hémocytomètre pour obtenir un nombre de cellules par millilitre de solution. Centrifuger les cellules à nouveau à 1000 g pendant 5 min et décanter la PBS utilisée pour rincer les cellules. Ajouter la quantité appropriée de EMEM-1x pour ajuster la concentration de cellules à 500 cellules / 100 pi (100 pl / puits). </li><li> Remplir les puits périphériques de la plaque avec 200 ul de PBS pour contrôler l&#39;évaporation. </li><li> cellule de semencess à une densité de 500 cellules / puits en ajoutant 100 ul dans chaque puits, sauf les puits périphériques (qui ne sont pas étalées avec des cellules). REMARQUE: la densité de semis pour les cellules HEK et HEP est basée sur des courbes de croissance expérimentales qui permettent le pic de croissance de se produire autour de 4-5 jours. Préparer des courbes de croissance pour toutes les lignées cellulaires pour estimer la densité de semis. </li><li> Incuber les cellules pour 24 heures à 37 ° C leur permettant de récupérer (formulaire adhérences serrées à la plaque) avant d&#39;effectuer des lectures de base de MTT de la densité cellulaire. </li><li> Effectuer des lectures de MTT base de la densité cellulaire en enlevant le support d&#39;ensemencement à partir de la première colonne (à l&#39;exclusion du périmètre) et en ajoutant 100 ul de MTT (5 mg / ml dans du milieu) dans les puits pendant 1 h. </li><li> Après une heure, enlever le MTT et ajouter 100 ul de diméthylsulfoxyde (DMSO) pour dissoudre le MTT-formazan produit par les cellules viables (20 min). </li><li> Lire la densité optique (DO) de la première colonne à une longueur d&#39;onde d&#39;absorption de 570 nm pour obtenir une basela lecture de la ligne. <ol><li> Utilisez des lectures de base pour assurer que toutes les plaques ont été ensemencées correctement et que les cellules sont en croissance constante entre les plaques. Retirez le DMSO de la colonne étant testés avant incubation pendant 24 heures suivantes. REMARQUE: si DMSO est laissé pendant une nuit à la plaque elle tire l&#39;humidité de la colonne adjacente, ce qui provoque une réduction du volume de support. </li></ol></li><li> Réchauffez les solutions de test (par exemple, l&#39;EMEM-1x, RO, PBW non traitée et de solutions PBW médias CuO-NP-traités) à 37 ° C dans un bain d&#39;eau. </li><li> Retirez le support d&#39;ensemencement du reste de la plaque (non compris le périmètre ou la première colonne qui a été utilisé pour la lecture de base) et remplacé par 100 pi de EMEM-1x, + médias, PBW non traitée + médias concentrations RO ou CuO-NP PBW -Traité + la concentration des médias (une solution par plaque). Incuber les cellules dans leurs concentrations des solutions d&#39;essai ou de contrôle pour un total de sept jours (jours 2-8). NOTE: Il 10 plaques totales: 1 GEMM-1x, 1 RO + médias, une de chaque concentration PBW + des médias non traité (56%, 44%, 29% et 16,5%) et une plaque de chaque concentration PBW + médias CuO-NP-traités (53%, 45% , 30% et 17%) par expérience par ligne cellulaire. </li><li> Chaque jour qui suit la ligne de base de lecture de MTT, retirez les solutions de contrôle et de test (figurant dans la note sous 6.11) de la colonne suivante de leur plaque respective (par exemple Jour 2 test et de contrôle des médias sont retirés de la ligne 3, les puits BG; Jour 3: rangée 4, puits BG etc.) et répéter le protocole de MTT comme décrit dans les étapes 06.07 à 06.09 ci-dessus. </li><li> Répéter le protocole chaque jour pendant sept jours. La moyenne des résultats de DO pour chaque ligne (6 puits) et rapporté contre le temps pour générer une courbe de croissance de sept jours. </li><li> Pour évaluer l&#39;effet de chélation du cuivre sur la viabilité des cellules dans PBW CuO-NP-traitées + supports suivent le même mode opératoire que ci-dessus, sauf ajouter 100 uM de D-pénicillamine de contrôler et de solutions d&#39;essai avant l&#39;addition des solutions à leurs plaques respectives. Effectuer anale de donnéesana- utilisant un logiciel graphique scientifique. </li></ol> 7. Modélisation géochimique <ol><li> Télécharger la version de Visual MINTEQ 3.0 / 3.1 un logiciel gratuit à partir du site Web suivant <a href="http://www2.lwr.kth.se/English/Oursoftware/vminteq/">http://www2.lwr.kth.se/English/Oursoftware/vminteq/</a> . Remarque: Visual MINTEQ est un modèle d&#39;équilibre chimique freeware pour le calcul de la spéciation des métaux, des équilibres de solubilité, etc. sorption pour les eaux naturelles. En outre, il est utilisé pour prédire la spéciation d&#39;ions, des activités d&#39;ions, d&#39;ions complexes et des indices de saturation qui est comparée à la concentration d&#39;éléments avant et après traitement (résultats de spectroscopie de masse) pour examiner les mécanismes possibles de l&#39;enlèvement de l&#39;élément 28. </li><li> Ouvrir le programme et les données d&#39;entrée de spectroscopie de masse provenant de l&#39;étape 4, y compris le pH, l&#39;alcalinité et la concentration des différents éléments dans le programme. NOTE: Étant donné que les eaux souterraines est oxydé au cours urani in situum processus d&#39;extraction, utilisez espèces oxydées de l&#39;arsenic, le vanadium, et de l&#39;uranium pour l&#39;entrée. </li></ol> 8. Concentration inhibitrice 50 (CI50) <ol><li> Calculer l&#39;IC 50 pour les PBW + médias concentrations non traités et CuO-NP-traitées d&#39;abord par la moyenne de la viabilité (moyennes de DO) au jour 5 de trois séries distinctes. </li><li> Soustraire jour, cinq moyennes de viabilité des médias PBW + concentrations non traités et CuO-NP-traités provenant de cinq jours des moyennes de viabilité de EMEM-1x pour calculer les différences de viabilité. Puis diviser les différences de viabilité de la viabilité moyenne sur 5 jours dans EMEM, et multiplier par 100 pour obtenir une inhibition pour cent. </li><li> Soustraire le pour cent d&#39;inhibition de 100 (EMEM-1x viabilité) pour obtenir la viabilité pour cent pour chaque PBW + concentration des médias non traitée et CuO-NP-traitée. </li><li> Entrée dans le logiciel graphique scientifique par la mise en EMEM-1x à une concentration de l&#39;un et un pour cent viabilité de 100; transformer toutes les concentrations en journaléchelle (X = Log (X)) et effectuer régression non linéaire avec moins l&#39;analyse de forme carrée. </li></ol> 9. Analyse des données <ol><li> Comparer les concentrations d&#39;éléments en non traité et CuO-NP-traité avec un PBW, jumelé, T-test de Student bilatéral. </li><li> Calculer les aires sous la courbe (AUC) en utilisant les données de la courbe de croissance recueillies sur sept jours et d&#39;analyser la variance avec analyses de mesures répétées de la variance (Anova), suivie par la poste hoc comparaison de Tukey entre tous les groupes (n = 3). </li><li> Calculer la IC 50 en utilisant des données de cinq jours de la courbe de croissance pour les deux PBW non traitée et CuO-NP-traitée + solutions médias (décrites ci-dessus). Les valeurs de P &lt;0,05 sont considérées comme significatives. NOTE: Aux fins de l&#39;analyse statistique, les valeurs de la spectroscopie de masse de la moitié de la limite de détection a été affecté à ions niveaux de concentration en dessous de cette limite 29. </li></ol>

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Molecular, Clinical and Environmental Toxicology. 101, 133-164 (2012).</li><li>Meerloo, J., Kaspers, G., Cloos, J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Cell+Sensitivity+Assays:+The+MTT+Assay.">Cell Sensitivity Assays: The MTT Assay.</a> Cancer Cell Culture. 731, 237-245 (2011).</li><li>Gustafsson, J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=.">.</a> Visual MINTEQ. , (2010).</li><li>Hallab, N., Caicedo, M., McAllister, K., Skipor, A., Amstutz, H., Jacobs, J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Asymptomatic+prospective+and+retrospective+cohorts+with+metal-on-metal+hip+arthroplasty+indicate+acquired+lymphocyte+reactivity+varies+with+metal+ion+levels+on+a+group+basis.">Asymptomatic prospective and retrospective cohorts with metal-on-metal hip arthroplasty indicate acquired lymphocyte reactivity varies with metal ion levels on a group basis.</a> Journal of Orthopaedic Research. 31 (2), 173-182 (2013).</li><li>Goswami, A., Raul, P., Purkait, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Arsenic+adsorption+using+copper+(II)+oxide+nanoparticles.">Arsenic adsorption using copper (II) oxide nanoparticles.</a> Chemical Engineering Research and Design. 90 (9), 1387-1396 (2011).</li><li>Pillewan, P., Mukherjee, S., Roychowdhury, T., Das, S., Bansiwal, A., Rayalu, S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Removal+of+As(III)+and+As(V)+from+water+by+copper+oxide+incorporated+mesoporous+alumina.">Removal of As(III) and As(V) from water by copper oxide incorporated mesoporous alumina.</a> Journal of Hazardous Materials. 186 (1), 367-375 (2011).</li><li>Kroll, A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Cytotoxicity+screening+of+23+engineered+nanomaterials+using+a+test+matrix+of+ten+cell+lines+and+three+different+assays.">Cytotoxicity screening of 23 engineered nanomaterials using a test matrix of ten cell lines and three different assays.</a> Particle and fibre toxicology. 8 (9), 1-19 (2011).</li><li>Fahmy, B., Cormier, S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Copper+oxide+nanoparticles+induce+oxidative+stress+and+cytotoxicity+in+airway+epithelial+cells.">Copper oxide nanoparticles induce oxidative stress and cytotoxicity in airway epithelial cells.</a> Toxicology in vitro: an international journal published in association with BIBRA. 23 (7), 1365-1371 (2009).</li><li>Radike, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Distribution+and+accumulation+of+a+mixture+of+arsenic,+cadmium,+chromium,+nickel+and+vanadium+in+mouse+small+intestin,+kidney,+pancreas,+and+femur+following+oral+administration+in+water+or+feed.">Distribution and accumulation of a mixture of arsenic, cadmium, chromium, nickel and vanadium in mouse small intestin, kidney, pancreas, and femur following oral administration in water or feed.</a> Journal of Toxicology and Environmental Health, Part A. 65 (23), 2029-2052 (2002).</li><li>Barbier, O., Jacquillet, G., Tauc, M., Cougnon, M., Poujeol, P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Effect+of+heavy+metals+on,+and+handling+by,+the+kidney.">Effect of heavy metals on, and handling by, the kidney.</a> Nephron. Physiology. 99 (4), 105-110 (2005).</li><li>Zheng, X., Watts, G., Vaught, S., Gandolfi, A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Low-level+arsenite+induced+gene+expression+in+HEK293+cells.">Low-level arsenite induced gene expression in HEK293 cells.</a> Toxicology. 187 (1), 39-48 (2003).</li><li>Li, Z., Piao, F., Liu, S., Wang, Y., Qu, S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Subchronic+exposure+to+arsenic+trioxide-induced+oxidative+DNA+damage+in+kidney+tissue+of+mice.">Subchronic exposure to arsenic trioxide-induced oxidative DNA damage in kidney tissue of mice.</a> Experimental and Toxicologic Pathology. 62 (5), 543-547 (2010).</li><li>Farombi, E., Akintunde, J., Nzute, N., Adedara, I., Arojojoye, O. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Municipal+landfill+leachate+induces+hepatotoxicity+and+oxidative+stress+in+rats.">Municipal landfill leachate induces hepatotoxicity and oxidative stress in rats.</a> Toxicology and Industrial Health. 28 (6), 532-541 (2011).</li><li>Das, N. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Arsenic+exposure+through+drinking+water+increases+the+risk+of+liver+and+cardiovascular+diseases+in+the+population+of+West+Bengal.">Arsenic exposure through drinking water increases the risk of liver and cardiovascular diseases in the population of West Bengal.</a> India. BMC public health. 12 (1), 639-648 (2012).</li><li>Valko, M., Morris, H., Cronin, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Metals,+toxicity+and+oxidative+stress.">Metals, toxicity and oxidative stress.</a> Current Medicinal Chemistry. 12 (10), 1161-1208 (2005).</li><li>Horie, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Protein+Adsorption+of+Ultrafine+Metal+Oxide+and+Its+Influence+on+Cytotoxicity+toward+Cultured+Cells.">Protein Adsorption of Ultrafine Metal Oxide and Its Influence on Cytotoxicity toward Cultured Cells.</a> Chemical Research in Toxicology. 22 (3), 543-553 (2009).</li></ol>

The authors have nothing to disclose.

Des études antérieures ont rapporté que CuO-IP retiré l&#39;arsenic des eaux souterraines 11,13,30,31. Cette étude confirme ces résultats antérieurs et rapporte que CuO-IP éliminer les contaminants supplémentaires de PBW également. Cette étude confirme également que les rapports précédents CuO-IP sont efficaces pour éliminer l&#39;arsenic, en dépit de la présence d&#39;autres contaminants et les ions concurrents potentiels 11. la modélisation de spéciation prédit que 97% des esp...

Environ 20% de l&#39;alimentation électrique des États-Unis est fournie par l&#39;énergie nucléaire et, basé en partie sur des incitatifs nationaux pour accroître l&#39;indépendance énergétique, la capacité nucléaire des États-Unis devrait augmenter de 1. Est également prévu la croissance mondiale de l&#39;énergie nucléaire à poursuivre, avec beaucoup de la croissance survenant à l&#39;extérieur des États-Unis 2. Dès 2013, 83% de l&#39;uranium a été importé des États-Unis, mais 952 544 tonnes de réserves existent dans les Etats-Unis 3,4. En 2013 il ya eu 7 nouvelles applications de l&#39;installation et des applications 14 redémarrage / dilatation entre le Wyoming, Nouveau-Mexique, et le Nebraska 5. Aux États-Unis, l&#39;uranium est principalement extrait par récupération in situ (ISR) dans les processus 6. ISR provoque moins de perturbations des sols et évite de créer des tas de résidus qui peuvent libérer des contaminants environnementaux 7. ISR utilise des solutions oxydantes à base d&#39;eau pour lixivier l&#39;uranium à partir du gisement souterrain, après quoi l&#39;uranium est extrait de la solution de lixiviation à traversun procédé d&#39;échange d&#39;ions 8. Pour maintenir un solde négatif de l&#39;eau dans le corps de minerai, une partie du lixiviat, appelé production saigner l&#39;eau (PBW), est saigné off. Une partie de la PBW est décontaminé par osmose inverse (OI) et ré-introduit dans le processus de l&#39;exploitation minière, mais PBW pourrait également avoir des usages industriels ou agricoles bénéfiques, si des contaminants toxiques peuvent être réduits à des niveaux acceptables déterminées par les organismes de réglementation de l&#39;État pour la surface et 9 souterraines. Actuellement, la plupart des installations d&#39;uranium ISR utilisent RO pour éliminer les contaminants de PBW. Cependant, le traitement RO est consommatrice d&#39;énergie et la saumure produit des déchets toxiques, ce qui nécessite l&#39;élimination réglementée. Beaucoup de méthodes de décontamination de l&#39;eau existent, y compris des adsorbants, des membranes, et l&#39;échange d&#39;ions. Parmi ceux-ci, l&#39;adsorption est le plus couramment utilisé, et les développements récents dans la synthèse de nanoparticules a renforcé les capacités de l&#39;eau en fonction de la décontamination adsorbant-processus 10. Oxi Cupricde nanoparticules (CuO-IP) avait auparavant pas été largement étudiés sur l&#39;uranium ISR PBW, mais dans des études récentes de l&#39;élimination des contaminants des eaux souterraines, CuO-IP ont été trouvés à avoir des propriétés uniques, y compris ne pas nécessiter d&#39;étapes de traitement de l&#39;eau (pré ou post par exemple, ajuster le pH ou potentiel redox) et qui fonctionne bien dans des compositions différentes de l&#39;eau (par exemple, dans différents pH, des concentrations de sel, ou ions concurrents) 11. En outre, CuO-IP sont facilement régénérés par lessivage avec de l&#39;hydroxyde de sodium (NaOH), après quoi le CuO-IP régénéré peut être réutilisé. Détails de CuO-NP capacités de filtrage de métaux traces dans les eaux naturelles ont déjà été publiés 11-14. Bien utile pour le traitement de l&#39;eau, des nanoparticules d&#39;oxyde de métal peuvent être toxiques pour les organismes vivants, mais la mesure de la toxicité dépend, en partie, sur les caractéristiques des nanoparticules et des constituants 10,15,16. Par conséquent, il est important d&#39;étudier simultdéménagements et de nanoparticules toxicités contaminants aneous avant applications sur le terrain. L&#39;étude actuelle a déterminé la capacité de CuO-IP pour éliminer les contaminants prioritaires PBW (y compris l&#39;arsenic, le sélénium, le vanadium et uranium), et d&#39;évaluer l&#39;effet du traitement CuO-NP sur PBW cytotoxicité. PBW été recueillies à partir d&#39;une installation d&#39;uranium ISR actif et utilisé pour déterminer l&#39;efficacité du traitement CuO-NP dans l&#39;élimination des contaminants de priorité. PBW cytotoxicité avant et après traitement CuO-NP a également été évaluée. PBW est une géologique complexe mélange (industrielle / de l&#39;environnement) et les deux de l&#39;Institut national de la santé environnementale et de la Science (NIEHS) et l&#39;Agence pour les Substances Toxiques &amp; Disease Registry (de ASTDR) sont mettant l&#39;accent sur l&#39;étude de la toxicité des mélanges pertinents pour l&#39;environnement, y compris les mélanges telles qu&#39;elles existent dans la nature ou les paramètres industriels, ainsi que dans la promotion de tests in vitro pour donner la priorité à des produits chimiques autres tests in vivo17-19. Les études de l&#39;exposition, de mélange à faible dose chroniques sont difficiles parce que l&#39;exposition chronique à un mélange à faible dose pas produire des effets évidents, du moins pas dans le court laps de temps de la plupart des études de laboratoire. De même, la plupart des études in vitro de mélanges chimiques exposer les cellules à un mélange de laboratoire faites défini de deux ou plusieurs métaux 20,21. Ces études fournissent des informations de base, mais des mélanges simplifiées ne reproduisent pas les interactions antagonistes et synergiques complexes qui peuvent survenir dans un échantillon environnemental natale, où la gamme complète des composants du mélange sont présents. Les objectifs de cette étude étaient d&#39;examiner les processus d&#39;élimination de contaminants de rechange pour PBW et d&#39;évaluer l&#39;effet de (CuO-NP) de traitement sur PBW cytotoxicité en utilisant des cellules humaines en culture. Les résultats pourraient profiter à l&#39;industrie de l&#39;uranium à travers le développement de méthodes plus efficaces ou respectueux de l&#39;environnement pour l&#39;élimination des contaminants. Cette étude fournitla première preuve que la réduction des contaminants prioritaires dans PBW par CuO-IP réduit la cytotoxicité des cellules de mammifères 22.

<table border="0" cellpadding="0" cellspacing="0" width="892">
	<tbody>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:216px;">Name of Material/ Equipment</td>
			<td style="width:243px;">Company</td>
			<td style="width:119px;">Catalog Number</td>
			<td style="width:315px;">Comments/Description</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:216px;">CuCl2</td>
			<td style="width:243px;">Sigma</td>
			<td align="right" style="width:119px;">203149</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:216px;">Borosilicate glass balls</td>
			<td style="width:243px;">VWR</td>
			<td>26396-639</td>
			<td>6 mm</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:216px;">Nitric Acid</td>
			<td style="width:243px;">Fisher</td>
			<td>A509-P500</td>
			<td>Trace metal grade</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">0.45 mm syringe filter</td>
			<td style="width:243px;">Fisher</td>
			<td style="width:119px;">SLHA 033S S</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:216px;">10X EMEM</td>
			<td style="width:243px;">Fisher</td>
			<td style="width:119px;">BW12-684F</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:216px;">Fetal Bovine Serum</td>
			<td style="width:243px;">ATCC</td>
			<td>30-2020</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:216px;">L-glutamine</td>
			<td style="width:243px;">Fisher</td>
			<td style="width:119px;">BP379-100</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:216px;">NaHCO3</td>
			<td style="width:243px;">Sigma</td>
			<td style="width:119px;">S5761</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:216px;">Penicillin/Streptomycin</td>
			<td style="width:243px;">ATCC</td>
			<td style="width:119px;">30-2300</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">0.22 mm vacuum filter unit</td>
			<td style="width:243px;">Fisher</td>
			<td style="width:119px;">09-740-28C</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:216px;">HEK293</td>
			<td style="width:243px;">ATCC</td>
			<td style="width:119px;">CRL-1573</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:216px;">HEPG2</td>
			<td style="width:243px;">ATCC</td>
			<td style="width:119px;">HB-8065</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:216px;">Trypsin</td>
			<td style="width:243px;">Sigma</td>
			<td style="width:119px;">SV3003101</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:216px;">MTT</td>
			<td style="width:243px;">Sigma</td>
			<td style="width:119px;">M2128</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:216px;">D-penicillamine</td>
			<td style="width:243px;">Fisher</td>
			<td style="width:119px;">ICN15180680</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:216px;">96-well plates</td>
			<td style="width:243px;">Fisher</td>
			<td style="width:119px;">07-200-92</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:216px;">DMSO</td>
			<td style="width:243px;">Fisher</td>
			<td style="width:119px;">D12814</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:216px;">Spectra Max 190</td>
			<td style="width:243px;">Molecular Devices</td>
			<td style="width:119px;"></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:216px;">Visual MINTEQ version 3.0</td>
			<td style="width:243px;">KTH Royal Institute of Technology</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:216px;">ICP-MS&#160;</td>
			<td style="width:243px;">Agilent</td>
			<td style="width:119px;"></td>
			<td>Details of instruments, models and detection limits were published in Reddy et al., 2013.&#160;</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:216px;">IC DIONEX DX 500</td>
			<td style="width:243px;">Dionex</td>
			<td style="width:119px;"></td>
			<td>Details of instruments, models and detection limits were published in Reddy et al., 2013.&#160;</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:216px;">VWR Incubator</td>
			<td style="width:243px;">VWR</td>
			<td style="width:119px;"></td>
			<td></td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

removal of trace elements by cupric oxide nanoparticles from uranium in situ recovery bleed water and its effect on cell viability

Dans la récupération in situ (ISR) est la principale méthode d&#39;extraction de l&#39;uranium aux États-Unis. Pendant ISR, l&#39;uranium est lessivé à partir d&#39;un gisement de minerai et extrait par échange d&#39;ions. La purge de l&#39;eau résultant production (pep) contient des impuretés telles que l&#39;arsenic et d&#39;autres métaux lourds. Des échantillons de PBW à partir d&#39;une installation d&#39;uranium ISR actifs ont été traités avec des nanoparticules d&#39;oxyde de cuivre (CuO-IP). Traitement CuO-NP de PBW réduite contaminants prioritaires, y compris l&#39;arsenic, le sélénium, l&#39;uranium, et le vanadium. Essai non traitée et traitée CuO-NP PBW a été utilisé comme le composant liquide du milieu de croissance des cellules et les variations de viabilité ont été déterminées par le MTT (3- (4,5-diméthylthiazol-2-yl) -2,5-diphényltétrazolium de) dans le rein embryonnaire humain (HEK 293) et le carcinome hépatocellulaire humain (Hep G2) des cellules. Traitement CuO-NP a été associée à l&#39;amélioration de HEK et HEP viabilité cellulaire. Les limites de ce procédé comprennent la dilution de PBW par des composants de milieu de croissance et pendant osmolréglage de nalité ainsi que l&#39;ajustement du pH nécessaire. Ce procédé est limité dans son contexte plus large du fait des effets de dilution et des changements dans le pH de la PBW qui est traditionnellement cependant légèrement acide; cette méthode pourrait avoir une utilisation plus large évaluation de traitement CuO-NP dans les eaux plus neutres.

Concentrations de composants PBW et pH non traitée et dans CuO-NP-traitée PBW sont présentés au tableau 1. Martinson et Reddy (2009), ont indiqué que le point de charge nulle du CuO-NP est estimée à 9,4 ± 0,4. Étant donné que le pH de 7.2 à 7.4 PBW était, dans ces conditions, un don de l&#39;eau à protons CuO-IP, ce qui provoque la surface des nanoparticules à charger positivement permettant l&#39;adsorption d&#39;espèces chargées négativement. Traitement CuO-NP supprimé contaminants p...

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Removal of Trace Elements by Cupric Oxide Nanoparticles from Uranium In Situ Recovery Bleed Water and Its Effect on Cell Viability

Production bleed water (PBW) was treated with cupric oxide nanoparticles (CuO-NPs) and cellular toxicity was assessed in cultured human cells. The goal of this protocol was to integrate the native environmental sample into a cell culture format assessing the changes in toxicity due to CuO-NP treatment.

Suppression des éléments traces par Cupric nanoparticules d&#39;oxyde de Uranium<em&gt; In Situ</em&gt; Récupération de l&#39;eau de ressuage et son effet sur la viabilité cellulaire

In situ recovery (ISR) is the predominant method of uranium extraction in the United States. During ISR, uranium is leached from an ore body and extracted ...

removal-trace-elements-cupric-oxide-nanoparticles-from-uranium-situ

Research

JoVE Journal

Environment

Removal of Trace Elements by Cupric Oxide Nanoparticles from Uranium In Situ Recovery Bleed Water and Its Effect on Cell Viability

9.7K vues.  University of New Mexico. Production bleed water (PBW) was treated with cupric oxide nanoparticles (CuO-NPs) and cellular toxicity was assessed in cultured human cells. The goal of this protocol was to integrate the native environmental sample into a cell culture format assessing the changes in toxicity due to CuO-NP treatment.

Vidéo: Removal of Trace Elements by Cupric Oxide Nanoparticles from Uranium In Situ Recovery Bleed Water and Its Effect on Cell Viability

Laboratory Estimation of Net Trophic Transfer Efficiencies of PCB Congeners to Lake Trout (Salvelinus namaycush) from Its Prey

A technique for laboratory estimation of net trophic transfer efficiency (&#947;) of polychlorinated biphenyl (PCB) congeners to piscivorous fish from their prey is described herein. During a 135-day laboratory experiment, we fed bloater (Coregonus hoyi) that had been caught in Lake Michigan to lake trout (Salvelinus namaycush) kept in eight laboratory tanks. Bloater is a natural prey for lake trout. In four of the tanks, a relatively high flow rate was used to ensure relatively high activity by the lake trout, whereas a low flow rate was used in the other four tanks, allowing for low lake trout activity. On a tank-by-tank basis, the amount of food eaten by the lake trout on each day of the experiment was recorded. Each lake trout was weighed at the start and end of the experiment. Four to nine lake trout from each of the eight tanks were sacrificed at the start of the experiment, and all 10 lake trout remaining in each of the tanks were euthanized at the end of the experiment. We determined concentrations of 75 PCB congeners in the lake trout at the start of the experiment, in the lake trout at the end of the experiment, and in bloaters fed to the lake trout during the experiment. Based on these measurements, &#947; was calculated for each of 75 PCB congeners in each of the eight tanks. Mean &#947; was calculated for each of the 75 PCB congeners for both active and inactive lake trout. Because the experiment was replicated in eight tanks, the standard error about mean &#947; could be estimated. Results from this type of experiment are useful in risk assessment models to predict future risk to humans and wildlife eating contaminated fish under various scenarios of environmental contamination.

Laboratory Estimation of Net Trophic Transfer Efficiencies of PCB Congeners to Lake Trout Salvelinus namaycush from Its Prey

A technique for laboratory estimation of net trophic transfer efficiency of polychlorinated biphenyl (PCB) congeners to piscivorous fish from their prey is presented. To maximize applicability of the laboratory results to the field, the piscivorous fish should be fed prey fish that are typically eaten in the field.

Laboratoire Estimation des gains en efficience de transfert net trophiques des congénères de PCB dans le lac Trout (<em&gt; Salvelinus namaycush</em&gt;) De sa proie

A technique for laboratory estimation of net trophic transfer efficiency (&#947;) of polychlorinated biphenyl (PCB) congeners to piscivorous fish from ...

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Environnement

Laboratory-determined Phosphorus Flux from Lake Sediments as a Measure of Internal Phosphorus Loading

Eutrophication is a water quality issue in lakes worldwide, and there is a critical need to identify and control nutrient sources. Internal phosphorus (P) loading from lake sediments can account for a substantial portion of the total P load in eutrophic, and some mesotrophic, lakes. Laboratory determination of P release rates from sediment cores is one approach for determining the role of internal P loading and guiding management decisions. Two principal alternatives to experimental determination of sediment P release exist for estimating internal load: in situ measurements of changes in hypolimnetic P over time and P mass balance. The experimental approach using laboratory-based sediment incubations to quantify internal P load is a direct method, making it a valuable tool for lake management and restoration.
Laboratory incubations of sediment cores can help determine the relative importance of internal vs. external P loads, as well as be used to answer a variety of lake management and research questions. We illustrate the use of sediment core incubations to assess the effectiveness of an aluminum sulfate (alum) treatment for reducing sediment P release. Other research questions that can be investigated using this approach include the effects of sediment resuspension and bioturbation on P release.
The approach also has limitations. Assumptions must be made with respect to: extrapolating results from sediment cores to the entire lake; deciding over what time periods to measure nutrient release; and addressing possible core tube artifacts. A comprehensive dissolved oxygen monitoring strategy to assess temporal and spatial redox status in the lake provides greater confidence in annual P loads estimated from sediment core incubations.

Lake eutrophication is a water quality issue worldwide, making the need to identify and control nutrient sources critical. Laboratory determination of phosphorus release rates from sediment cores is a valuable approach for determining the role of internal phosphorus loading and guiding management decisions.

Déterminé en laboratoire Phosphore Flux de sédiments lacustres en tant que mesure de phosphore interne Chargement en cours

Eutrophication is a water quality issue in lakes worldwide, and there is a critical need to identify and control nutrient sources. Internal phosphorus (P) ...

EPA Method 1615. Measurement of Enterovirus and Norovirus Occurrence in Water by Culture and RT-qPCR. I. Collection of Virus Samples

EPA Method 1615 was developed with a goal of providing a standard method for measuring enteroviruses and noroviruses in environmental and drinking waters. The standardized sampling component of the method concentrates viruses that may be present in water by passage of a minimum specified volume of water through an electropositive cartridge filter. The minimum specified volumes for surface and finished/ground water are 300 L and 1,500 L, respectively. A major method limitation is the tendency for the filters to clog before meeting the sample volume requirement. Studies using two different, but equivalent, cartridge filter options showed that filter clogging was a problem with 10% of the samples with one of the filter types compared to 6% with the other filter type. Clogging tends to increase with turbidity, but cannot be predicted based on turbidity measurements only. From a cost standpoint one of the filter options is preferable over the other, but the water quality and experience with the water system to be sampled should be taken into consideration in making filter selections.

EPA Method 1615 uses an electropositive filter to concentrate enteroviruses and noroviruses in environmental and drinking waters. This manuscript describes the procedure for collecting samples for Method 1615 analyses.

Méthode EPA 1615. Mesure de entérovirus et Norovirus présence dans l&#39;eau par Culture et RT-qPCR. I. Prélèvement des échantillons de virus

EPA Method 1615 was developed with a goal of providing a standard method for measuring enteroviruses and noroviruses in environmental and drinking waters. ...

EPA Method 1615. Measurement of Enterovirus and Norovirus Occurrence in Water by Culture and RT-qPCR. Part III. Virus Detection by RT-qPCR

EPA Method 1615 measures enteroviruses and noroviruses present in environmental and drinking waters. This method was developed with the goal of having a standardized method for use in multiple analytical laboratories during monitoring period 3 of the Unregulated Contaminant Monitoring Rule. Herein we present the protocol for extraction of viral ribonucleic acid (RNA) from water sample concentrates and for quantitatively measuring enterovirus and norovirus concentrations using reverse transcription-quantitative PCR (RT-qPCR). Virus concentrations for the molecular assay are calculated in terms of genomic copies of viral RNA per liter based upon a standard curve. The method uses a number of quality controls to increase data quality and to reduce interlaboratory and intralaboratory variation. The method has been evaluated by examining virus recovery from ground and reagent grade waters seeded with poliovirus type 3 and murine norovirus as a surrogate for human noroviruses. Mean poliovirus recoveries were 20% in groundwaters and 44% in reagent grade water. Mean murine norovirus recoveries with the RT-qPCR assay were 30% in groundwaters and 4% in reagent grade water.

Here we present a procedure to quantify enterovirus and norovirus in environmental and drinking waters using reverse transcription-quantitative PCR. Mean virus recovery from groundwater with this standardized procedure from EPA Method 1615 was 20% for poliovirus and 30% for murine norovirus.

Méthode EPA 1615. Mesure des entérovirus et Norovirus présence dans l&#39;eau par la culture et RT-qPCR. Partie III. Détection de virus par RT-qPCR

EPA Method 1615 measures enteroviruses and noroviruses present in environmental and drinking waters. This method was developed with the goal of having a ...

A CO2 Concentration Gradient Facility for Testing CO2 Enrichment and Soil Effects on Grassland Ecosystem Function

Continuing increases in atmospheric carbon dioxide concentrations (CA) mandate techniques for examining impacts on terrestrial ecosystems. Most experiments examine only two or a few levels of CA concentration and a single soil type, but if CA can be varied as a gradient from subambient to superambient concentrations on multiple soils, we can discern whether past ecosystem responses may continue linearly in the future and whether responses may vary across the landscape. The Lysimeter Carbon Dioxide Gradient Facility applies a 250 to 500 &#181;l L-1 CA gradient to Blackland prairie plant communities established on lysimeters containing clay, silty clay, and sandy soils. The gradient is created as photosynthesis by vegetation enclosed in in temperature-controlled chambers progressively depletes carbon dioxide from air flowing directionally through the chambers. Maintaining proper air flow rate, adequate photosynthetic capacity, and temperature control are critical to overcome the main limitations of the system, which are declining photosynthetic rates and increased water stress during summer. The facility is an economical alternative to other techniques of CA enrichment, successfully discerns the shape of ecosystem responses to subambient to superambient CA enrichment, and can be adapted to test for interactions of carbon dioxide with other greenhouse gases such as methane or ozone.

A CO2 Concentration Gradient Facility for Testing CO2 Enrichment and Soil Effects on Grassland Ecosystem Function

The Lysimeter Carbon Dioxide Gradient Facility creates a 250 to 500 &#181;l L-1 linear carbon dioxide gradient in temperature-controlled chambers housing grassland plant communities on clay, silty clay, and sandy soil monoliths. The facility is used to determine how past and future carbon dioxide levels affect grassland carbon cycling.

Un CO<sub&gt; 2</sub&gt; Facilité Concentration de Gradient pour les essais CO<sub&gt; 2</sub&gt; Enrichissement et du sol Effets sur l&#39;écosystème de prairie Fonction

Continuing increases in atmospheric carbon dioxide concentrations (CA) mandate techniques for examining impacts on terrestrial ecosystems. Most ...

Evaluating the Effect of Environmental Chemicals on Honey Bee Development from the Individual to Colony Level

The presence of pesticides in the beekeeping environment is one of the most serious problems that impacts the life of a honey bee. Pesticides can be brought back to the beehive after the bees have foraged on flowers that have been sprayed with pesticides. Pesticide contaminated food can be exchanged between workers which then feed larvae and therefore can potentially affect the development of honey bees. Thus, residual pesticides in the environment can become a chronic damaging factor to honey bee populations and gradually lead to colony collapse. In the presented protocol, honey bee feeding methods are described and applied to either an individual honey bee or to a colony. Here, the insect growth regulator (IGR) pyriproxyfen (PPN), which is widely used to control pest insects and is harmful to the development of honey bee larvae and pupae, is used as the pesticide. The presenting procedure can be applied to other potentially harmful chemicals or honeybee pathogens for further studies.

Herein we present a method to feed pesticide contaminated food to both an individual honey bee and a beehive colony. The procedure evaluates the pesticide effect on individual honey bees by in vivo feeding of basic larval diet and also on the natural condition of beehive colony.

Évaluation de l&#39;incidence des produits chimiques sur l&#39;environnement Miel de développement Abeille de l&#39;individu à la colonie Niveau

The presence of pesticides in the beekeeping environment is one of the most serious problems that impacts the life of a honey bee. Pesticides can be ...

Determination of Inorganic Arsenic in a Wide Range of Food Matrices using Hydride Generation - Atomic Absorption Spectrometry.

The European Food Safety Authority (EFSA) underlined in its Scientific Opinion on Arsenic in Food that in order to support a sound exposure assessment to inorganic arsenic through diet, information about distribution of arsenic species in various food types must be generated. A method, previously validated in a collaborative trial, has been applied to determine inorganic arsenic in a wide variety of food matrices, covering grains, mushrooms and food of marine origin (31 samples in total). The method is based on detection by flow injection-hydride generation-atomic absorption spectrometry of the iAs selectively extracted into chloroform after digestion of the proteins with concentrated HCl. The method is characterized by a limit of quantification of 10 &#181;g/kg dry weight, which allowed quantification of inorganic arsenic in a large amount of food matrices. Information is provided about performance scores given to results obtained with this method and which were reported by different laboratories in several proficiency tests. The percentage of satisfactory results obtained with the discussed method is higher than that of the results obtained with other analytical approaches.

The usefulness of an analytical method to determine inorganic arsenic in a wide range of food matrices is demonstrated. The method consists of selective extraction of inorganic arsenic into chloroform with a final determination by hydride generation-atomic absorption spectrometry.

Dosage de l’Arsenic inorganique dans une gamme large de Matrices alimentaires à l’aide d’hydrure - spectrométrie d’Absorption atomique.

The European Food Safety Authority (EFSA) underlined in its Scientific Opinion on Arsenic in Food that in order to support a sound exposure assessment to ...

Experimental Column Setup for Studying Anaerobic Biogeochemical Interactions Between Iron (Oxy)Hydroxides, Trace Elements, and Bacteria

Fate and speciation of trace elements (TEs), such as arsenic (As) and mercury (Hg), in aquifers are closely related to physio-chemical conditions, such as redox potential (Eh) and pH, but also to microbial activities that can play a direct or indirect role on speciation and/or mobility. Indeed, some bacteria can directly oxidize As(III) to As(V) or reduce As(V) to As(III). Likewise, bacteria are strongly involved in Hg cycling, either through its methylation, forming the neurotoxin monomethyl mercury, or through its reduction to elemental Hg&#176;. The fates of both As and Hg are also strongly linked to soil or aquifer composition; indeed, As and Hg can bind to organic compounds or (oxy)hydroxides, which will influence their mobility. In turn, bacterial activities such as iron (oxy)hydroxide reduction or organic matter mineralization can indirectly influence As and Hg sequestration. The presence of sulfate/sulfide can also strongly impact these particular elements through the formation of complexes such as thio-arsenates with As or metacinnabar with Hg.
Consequently, many important questions have been raised on the fate and speciation of As and Hg in the environment and how to limit their toxicity. However, due to their reactivity towards aquifer components, it is difficult to clearly dissociate the biogeochemical processes that occur and their different impacts on the fate of these TE.
To do so, we developed an original, experimental, column setup that mimics an aquifer with As- or Hg-iron-oxide rich areas versus iron depleted areas, enabling a better understanding of TE biogeochemistry in anoxic conditions. The following protocol gives step by step instructions for the column set-up either for As or Hg, as well as an example with As under iron and sulfate reducing conditions.

Experimental Column Setup for Studying Anaerobic Biogeochemical Interactions Between Iron OxyHydroxides, Trace Elements, and Bacteria

Fate and speciation of arsenic and mercury in aquifers are closely related to physio-chemical conditions and microbial activity. Here, we present an original experimental column setup that mimics an aquifer and enables a better understanding of trace element biogeochemistry in anoxic conditions. Two examples are presented, combining geochemical and microbiological approaches.

Installation de colonne expérimental pour l’étude anaérobies biogéochimiques entre les hydroxydes de fer (Oxy), oligo-éléments et les bactéries

Fate and speciation of trace elements (TEs), such as arsenic (As) and mercury (Hg), in aquifers are closely related to physio-chemical conditions, such as ...

Bioindication Testing of Stream Environment Suitability for Young Freshwater Pearl Mussels Using In Situ Exposure Methods

Knowledge of habitat suitability for freshwater mussels is an important step in the conservation of this endangered species group. We describe a protocol for performing in situ juvenile exposure tests within oligotrophic river catchments over one-month and three-month periods. Two methods (in both modifications) are presented to evaluate the juvenile growth and survival rate. The methods and modifications differ in value for the locality bioindication and each has its benefits as well as limitations. The sandy cage method works with a large set of individuals, but only some of the individuals are measured and the results are evaluated in bulk. In the mesh cage method, the individuals are kept and measured separately, but a low individual number is evaluated. The open water exposure modification is relatively easy to apply; it shows the juvenile growth potential of sites and can also be effective for water toxicity testing. The within-bed exposure modification needs a high workload but is closer to the conditions of a natural juvenile environment and it is better for reporting the real suitability of localities. On the other hand, more replications are needed in this modification due to its high-hyporheic environment variability.

Bioindication Testing of Stream Environment Suitability for Young Freshwater Pearl Mussels Using In Situ Exposure Methods

In situ bioindications enable determination of the suitability of an environment for endangered mussel species. We describe two methods based on the juvenile exposure of freshwater pearl mussels in cages to oligotrophic river habitats. Both methods are implemented in variants for open water and hyporheic water environments.

Bioindication de vérification des flux environnement qualités pour jeunes d’eau douce perles de moules à l’aide de méthodes In Situ de l’exposition

Knowledge of habitat suitability for freshwater mussels is an important step in the conservation of this endangered species group. We describe a protocol ...

Assessing the Particulate Matter Removal Abilities of Tree Leaves

Based on the conventional cleaning methods (water cleaning (WC) + brush cleaning (BC)), this study evaluated the influence of ultrasonic cleaning (UC) on collecting various sized particulate matter (PM) retained on leaf surfaces. We further characterized the retention efficiency of leaves to various sized PM, which will help to assess the abilities of urban trees to remove PM from ambient air quantitatively. 
Taking three broadleaf tree species (Ginkgo biloba, Sophora japonica, and Salix babylonica) and two needleleaf tree species (Pinus tabuliformis and Sabina chinensis) as the research objects, leaf samples were collected 4 days (short PM retention period) and 14 days (long PM retention period) after the latest rainfall. PM retained on the leaf surfaces was collected by means of WC, BC, and UC in sequence. Then, retention efficiencies of leaves (AEleaf) to three types of the various sized PM, including easily removable PM (ERP), difficult-to-remove PM (DRP), and totally removable PM (TRP), were calculated. Only around 23%-45% of the total PM retained on leaves could be cleaned off and collected by WC. When the leaves were cleaned through WC+BC, the underestimation of the PM retention capacity of different tree species was in the range of 29%-46% for various sized PM. Almost all PM retained on leaves could be removed if UC was supplemented to WC+BC. 
In conclusion, if the UC was complemented after the conventional cleaning methods, more PM on leaf surfaces could be eluted and collected. The procedure developed in this study can be used for assessing the PM removal abilities of different tree species.

The ultrasonic cleaning method was applied to elute the particulate matter (PM) retained on leaf surfaces after PM was eluted by the conventional cleaning methods (water cleaning only or water cleaning plus brush cleaning). The methodology can help to improve the estimation accuracy for PM retention capacity of leaves.

Évaluer les capacités d’enlèvement de matière particulaire d’arbre feuilles

Based on the conventional cleaning methods (water cleaning (WC) + brush cleaning (BC)), this study evaluated the influence of ultrasonic cleaning (UC) on ...