Un abonnement à JoVE est nécessaire pour voir ce contenu.

English

Immunoprécipitation de la chromatine

Vue d'ensemble

Les histones sont des protéines qui aident à organiser l’ADN dans les noyaux eucaryotes en servant de « échafaudages » autour duquel l’ADN peut être enroulé, formant un complexe appelé « chromatine ». Ces protéines peuvent être modifiés par l’ajout de groupes de produits chimiques, et ces changements influent sur l’expression des gènes. Les chercheurs utilisent une technique appelée immunoprécipitation de la chromatine (ChIP) afin de mieux comprendre quelles régions d’ADN associent avec des modifications d’histone spécifique ou autre gène protéines régulatrices. Les anticorps sont utilisés pour isoler la protéine d’intérêt, et l’ADN lié est extraite pour l’analyse.

JoVE présente ici les principes qui sous-tendent la puce, discuter des modifications d’histone spécifique et leur relation avec l’expression des gènes et l’ADN organisation. Nous examinons ensuite comment effectuer un protocole de puce et explorer les moyens scientifiques utilisent actuellement cette technique.

Procédure

Immunoprécipitation de la chromatine, ou « ChIP », est une technique utilisée par les chercheurs à évaluer les interactions protéine-ADN. Facteurs protéiques jouent un rôle important dans la régulation des gènes ; non seulement ils organisent l’ADN dans les chromosomes, mais ils se lient également à des séquences d’ADN spécifiques — appelés sites réglementaires — pour activer ou réprimer l’expression. Au cours de la puce, la chromatine — qui se compose de l’ADN et les protéines associées — « immunoprecipitated, 

Log in or to access full content. Learn more about your institution’s access to JoVE content here

Nous utilisons des cookies afin d'améliorer votre expérience sur notre site web.

En continuant à utiliser notre site ou en cliquant sur le bouton ''continuer'', vous acceptez l'utilisation de cookies.