Cette méthode est très importante pour répondre aux questions clés dans les domaines de l’oncologie, de la neurobiologie, de la cardiologie et du développement fœtal, et bien sûr aussi elle est importante dans le domaine de la recherche reproductive. Les principaux avantages de cette technique sont qu’elle est non invasive, indolore, facile, rapide et permet le suivi des fœtus à des moments gestationnels pertinents tout au long de la grossesse. Au moins une demi-heure avant la procédure d’imagerie, allumez le système d’échographie, la plate-forme chauffée et le chauffe-gel.
Ouvrez une nouvelle étude ou une nouvelle série dans une étude existante dans le navigateur. Entrez toutes les informations requises dans la fenêtre d’information de l’étude. Cliquez sur OK et confirmez que la fenêtre d’imagerie en mode B apparaît.
Lorsque l’échographie est prête, confirmer un manque de réponse au pincement des pieds chez une souris anesthésiée, et appliquer de l’onguent sur les yeux de l’animal. Placez une goutte de gel électro sur chacune des 4 sections de cuivre de la plate-forme chauffée, et fixez les pattes aux sections recouvertes de gel électro de la plate-forme. Retirer les cheveux de l’abdomen de l’animal avec de la crème depilatory et un coton-tige, laver la crème de la peau dépilée après une minute avec une compresse imbibé d’eau.
Appliquez ensuite du gel à ultrasons préchauffé sur la zone exposée. Une raison de faible intensité du signal peut être la faible quantité de gel placé entre la souris et le faisceau ultrasonique. D’après notre expérience, une quantité assez importante de gel est nécessaire pour une bonne qualité de signal.
Lorsque l’animal est prêt, placez le transducteur sur la vessie pour l’utiliser comme point de référence, et déplacez la table de plate-forme chauffante vers les côtés gauche et droit de l’abdomen pour tracer les implantations fœtales en mode B 2D, en ajustant le transducteur ou la plate-forme au besoin jusqu’à ce que la première implantation soit visible à l’écran, à sa plus grande taille. Sélectionnez l’étiquette d’image et entrez un nom pour le fichier d’image. Ajustez la position de l’image, jusqu’à ce que le flux sanguin dans l’otérine ombilicalis du placenta soit en vue, et stockez un seul cadre ou cineloop pour les mesures placentes.
Pour la couleur Doppler imagerie pour déterminer la direction du flux sanguin, appuyez sur le bouton Couleur, et utilisez le trackball pour déplacer la boîte de couleur à la position appropriée, en cliquant sur Mise à jour pour ajuster la taille de la boîte si nécessaire. Lorsque la boîte est de la bonne taille, cliquez sur Sélectionnez et stockez l’image comme expérimentalement appropriée. Pour la quantification doppler d’onde pulsée du flux sanguin à travers les vaisseaux, localisez la région d’intérêt pour le mode d’acquisition doppler couleur et cliquez sur Pulse Wave.
Une ligne pointillée apparaîtra. Déplacez la ligne vers le vaisseau sanguin d’intérêt et utilisez le bouton d’angle Doppler pour ajuster l’angle de la ligne pour s’aligner avec le flux sanguin. Pour les mesures doppler d’onde pulsée, il est important de regarder l’angle entre la direction du flux sanguin et le faisceau d’ultrasons.
Des angles trop élevés, ou des angles différents entre les animaux dans la même expérience peuvent conduire à des mesures de vitesse inexactes. Ensuite, cliquez sur Mise à jour et stockez le cinéloop des lignes Doppler apparaissantes dans la fenêtre d’acquisition doppler à ondes pulsées. Pour examiner les données, cliquez sur Gestion de l’étude, faites défiler l’image miniature d’intérêt, et cliquez deux fois sur Mise à jour, puis cliquez à nouveau sur Gestion de l’étude, et cliquez sur Fermer pour fermer la fenêtre du navigateur, pour terminer l’acquisition de données et enregistrer une série enregistrée.
Pour exporter les données, connectez un disque dur, cliquez sur Export To, pour marquer une ou plusieurs séries de données, et sélectionnez l’espace de stockage pour copier les données sur le disque dur. Ici, des images échographiques représentatives acquises en mode B aux jours gestationnels 5, 8, 10 et 12, et leurs résultats correspondants de mesure de zone d’implantation sont montrés, révélant une réduction significative de la zone d’implantation chez les souris anti-CD122 traitées déficientes en mastocytes à partir du jour gestationnel 10. L’imagerie en mode B facilite l’imagerie et la mesure des différentes parties d’une implantation.
Par exemple, les animaux déficients en mastocytes traités anti-CD122 démontrent une réduction significative de la zone placentaire, de l’épaisseur et du diamètre par rapport aux souris non traitées aux jours gestationnels 10 et 12. En revanche, la zone placentaire et le diamètre sont semblables entre les groupes au jour gestationnel 14, et l’épaisseur placentaire, une augmentation significative des animaux transgéniques traités anti-CD122 comparés aux souris non traitées au jour gestationnel 14. L’imagerie doppler d’onde pulsée de l’utérus d’arteria pour la mesure de la vitesse systolique maximale et de la vitesse diastolique, et l’indice calculé de résistance, révèlent des valeurs semblables entre les animaux traités et non traités.
L’indice de résistance de l’ombibilicalis d’arteria dans les animaux déficients de mastocyte traités anti-CD122, cependant, est sensiblement augmenté comparé aux souris non traitées. Tout en essayant cette procédure, il est important de garder à l’esprit, que vous devriez le faire tous les deux jours plutôt que tous les jours, pour éviter le stress, et le risque de narcotisation répétitive des animaux. Après cette procédure, d’autres mesures, comme la mesure 3D, la visualisation et la quantification du mouvement des tissus au fil du temps, des mesures de la pression artérielle, ainsi que des injections guidées par ultrasons peuvent être effectuées.
Après son développement, cette méthode a ouvert la voie aux médecins et aux chercheurs dans le domaine des soins obstétricaux et prénatals, car il est possible de suivre le développement fœtal et de reconnaître les anomalies possibles pendant la grossesse.
