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Maintaining Wolbachia in Cell-free Medium

In this video protocol, procedures are demonstrated to (1) purify Wolbachia symbionts out of cultured mosquito cells, (2) use a fluorescent assay to ...

Johns Hopkins University

&#x514B;&#x6C0F; pipientis &#x662F;&#x9884;&#x7559;&#x7684;&#x80DE;&#x5185;&#x7EC6;&#x83CC;&#x5728;&#x8303;&#x56F4;&#x5E7F;&#x6CDB;&#x7684;&#x65E0;&#x810A;&#x690E;&#x52A8;&#x7269;&#x7C7B;&#x7FA4;&#x4E2D;&#x627E;&#x5230;&#x3002;&#x800C;&#x5BF9;&#x751F;&#x6001;&#x7684;&#x65F6;&#x95F4;&#x5C3A;&#x5EA6;&#x514B;&#x6C0F;&#x611F;&#x67D3;&#x5219;&#x4FDD;&#x6301;&#x4E25;&#x683C;&#x7684;&#x4EA7;&#x5987;&#x7EE7;&#x627F;&#x7684;&#x6C34;&#x5E73;&#x8F6C;&#x79FB;&#x4E8B;&#x4EF6;&#x662F;&#x5171;&#x540C;&#x5728;&#x8FDB;&#x5316;&#x7684;&#x8FC7;&#x7A0B;&#x3002;&#x8981;&#x6C34;&#x5E73;&#x8F6C;&#x79FB;&#x6709;&#x673A;&#x4F53;&#x4E4B;&#x95F4;&#xFF0C;&#x514B;&#x6C0F;&#x83CC;&#x5FC5;&#x987B;&#x901A;&#x8FC7;&#x4F20;&#x9012;&#x548C;&#x751F;&#x5B58;&#x80DE;&#x5916;&#x7684;&#x9636;&#x6BB5;&#x3002;&#x6211;&#x4EEC;&#x7528; BacLight &#x6D3B;&#x6B7B;&#x4EBA;&#x67D3;&#x8272;&#x3001; &#x805A;&#x5408;&#x9176;&#x94FE;&#x53CD;&#x5E94;&#x548C;&#x8367;&#x5149;&#x539F;&#x4F4D;&#x6742;&#x4EA4;&#x6280;&#x672F;&#x6765;&#x8BC4;&#x4F30;&#x7EAF;&#x51C0;&#x514B;&#x6C0F;&#x83CC;&#x5728;&#x65E0;&#x7EC6;&#x80DE;&#x57F9;&#x517B;&#x57FA;&#x4E2D;&#x751F;&#x5B58;&#x7684;&#x80FD;&#x529B;&#x3002;&#x6211;&#x4EEC;&#x53D1;&#x73B0;&#x7EAF;&#x51C0;&#x7684;&#x514B;&#x6C0F;&#x83CC;&#x80FD;&#x591F;&#x5B58;&#x6D3B; extracellularly &#x8FBE; 1 &#x5468;&#x4E0E;&#x751F;&#x5B58;&#x80FD;&#x529B;&#x6CA1;&#x6709;&#x51CF;&#x5C11;&#x3002;&#x6CA1;&#x6709;&#x590D;&#x5236;&#x5728;&#x7EC6;&#x80DE;&#x5916;&#x7684;&#x9636;&#x6BB5;&#x53D1;&#x73B0;&#xFF0C;&#x7EAF;&#x51C0;&#x7684;&#x514B;&#x6C0F;&#x83CC;&#x5374;&#x80FD;&#x591F;&#x6548;&#x4EFF;&#x7684;&#x5355;&#x5143;&#x683C;&#xFF0C;&#x5E76;&#x5EFA;&#x7ACB;&#x7A33;&#x5B9A;&#x7684;&#x611F;&#x67D3;&#xFF0C;&#x5728;&#x6240;&#x6709;&#x7684;&#x65F6;&#x95F4;&#x70B9;&#x3002;&#x514B;&#x6C0F;&#x83CC;&#x7684;&#x5916;&#x90E8;&#x5BBF;&#x4E3B;&#x7EC6;&#x80DE;&#x7684;&#x751F;&#x5B58;&#x80FD;&#x529B;&#x53EF;&#x80FD;&#x4F1A;&#x589E;&#x52A0;&#x6210;&#x529F;&#x7684;&#x6C34;&#x5E73;&#x8F6C;&#x79FB;&#x7684;&#x6982;&#x7387;&#x548C;&#x5F00;&#x53D1;&#x65B0;&#x7684;&#x751F;&#x6001;&#x4F4D;&#x3002;&#x6211;&#x4EEC;&#x7684;&#x65B9;&#x6CD5;&#x6765;&#x51C0;&#x5316;&#x548C;&#x7EF4;&#x6301;&#x53EF;&#x884C;&#x514B;&#x6C0F;&#x83CC;&#x4ECE;&#x57F9;&#x517B;&#x7EC6;&#x80DE;&#x7684;&#x53D1;&#x5C55;&#x5C06;&#x5BF9;&#x514B;&#x6C0F;&#x751F;&#x7269;&#x5B66;&#x7814;&#x7A76;&#x5176;&#x4ED6;&#x7814;&#x7A76;&#x4EBA;&#x5458;&#x6709;&#x7528;&#x3002;

&#x514B;&#x6C0F; pipientis &#x65E0;&#x7EC6;&#x80DE;&#x4ECB;&#x8D28;&#x4E2D;&#x7684;&#x751F;&#x5B58;&#x3002;

Wolbachia pipientis is an obligate intracellular bacterium found in a wide range of invertebrate taxa. While over ecological timescales Wolbachia infections are maintained by strict maternal inheritance, horizontal transfer events are common over evolutionary time. To be horizontally transferred between organisms, Wolbachia bacteria must pass through and survive an extracellular phase. We used BacLight live-dead staining, PCR, and fluorescence in situ hybridization to assess the ability for purified Wolbachia bacteria to survive in cell-free media. We found that purified Wolbachia bacteria were able to survive extracellularly for up to 1 week with no decrease in viability. While no replication was observed in the extracellular phase, purified Wolbachia bacteria were able to reinvade cells and establish stable infections at all time points. The ability of Wolbachia bacteria to survive outside host cells may increase the probability of successful horizontal transfer and the exploitation of new ecological niches. Our development of methods to purify and maintain viable Wolbachia bacteria from cultured cells will be useful for other researchers studying Wolbachia biology.

Survival of Wolbachia pipientis in cell-free medium.

Wolbachia est une bact&#xE9;rie pipientis intracellulaire obligatoire dans un large &#xE9;ventail de taxons d&#x26;#39;invert&#xE9;br&#xE9;s. Alors que plus de d&#xE9;lais &#xE9;cologiques infections &#xE0; Wolbachia sont maintenues par h&#xE9;r&#xE9;dit&#xE9; maternelle stricte, &#xE9;v&#xE9;nements de transfert horizontal sont communs au fil du temps &#xE9;volutif. Pour &#xEA;tre transf&#xE9;r&#xE9;es horizontalement entre les organismes, les bact&#xE9;ries Wolbachia doit passer par une phase de survivre et extracellulaire. Nous avons utilis&#xE9; BacLight live-morts coloration, PCR, et l&#x26;#39;hybridation fluorescente in situ pour &#xE9;valuer la capacit&#xE9; des bact&#xE9;ries Wolbachia purifi&#xE9; pour survivre dans la cellule sans les m&#xE9;dias. Nous avons constat&#xE9; que purifi&#xE9;s bact&#xE9;ries Wolbachia &#xE9;taient capables de survivre extracellulaire pour un maximum de 1 semaine sans diminution de la viabilit&#xE9;. Bien qu&#x26;#39;aucune r&#xE9;plication n&#x26;#39;a &#xE9;t&#xE9; observ&#xE9;e dans la phase extracellulaire, purifi&#xE9;s bact&#xE9;ries Wolbachia ont pu envahir &#xE0; nouveau les cellules et d&#x26;#39;&#xE9;tablir des infections stables &#xE0; tous les points dans le temps. La capacit&#xE9; des bact&#xE9;ries Wolbachia &#xE0; survivre &#xE0; l&#x26;#39;ext&#xE9;rieur des cellules h&#xF4;tes peuvent augmenter la probabilit&#xE9; de transfert horizontal de succ&#xE8;s et de l&#x26;#39;exploitation de nouvelles niches &#xE9;cologiques. Notre d&#xE9;veloppement de m&#xE9;thodes pour purifier et de maintenir bact&#xE9;ries Wolbachia viables &#xE0; partir de cellules cultiv&#xE9;es sera utile pour les chercheurs qui &#xE9;tudient d&#x26;#39;autres Wolbachia la biologie.

La survie des Wolbachia pipientis dans la cellule sans moyen

Wolbachia Pipientis ist ein obligat intrazellul&auml;res Bakterium gefunden in einer Vielzahl von Wirbellosen Taxa. W&auml;hrend &uuml;ber &ouml;kologische Zeitskalen Wolbachia Infektionen von strengen m&uuml;tterliche Vererbung gepflegt werden, sind horizontale &Uuml;bertragung Veranstaltungen gemeinsamen evolution&auml;ren Zeit. Um horizontal zwischen Organismen &uuml;bertragen werden, m&uuml;ssen die Wolbachia-Bakterien passieren und &Uuml;berleben eine extrazellul&auml;re Phase. Wir verwendeten BacLight Leben tot F&auml;rbung, PCR und Fluoreszenz in Situ Hybridisierung die F&auml;higkeit f&uuml;r gereinigte Wolbachia-Bakterien &Uuml;berleben in zellfreien Medien beurteilen. Wir fanden, dass gereinigte Wolbachia-Bakterien &uuml;berleben extracellularly f&uuml;r bis zu 1 Woche mit keine Abnahme der Lebensf&auml;higkeit. W&auml;hrend keine Replikation in der extrazellul&auml;ren Phase beobachtet wurde, konnten die gereinigte Wolbachia-Bakterien zu reinvade Zellen und stabile Infektionen zu allen Zeitpunkten. Die F&auml;higkeit von Wolbachia-Bakterien au&szlig;erhalb Wirtszellen &uuml;berleben kann die Wahrscheinlichkeit einer erfolgreichen horizontale &Uuml;bertragung und die Ausbeutung der neue &ouml;kologische Nischen erh&ouml;hen. Unsere Entwicklung von Methoden zur reinigen und pflegen von lebensf&auml;hige Wolbachia-Bakterien aus kultivierten Zellen werden n&uuml;tzlich f&uuml;r andere Forscher Wolbachia Biologie zu studieren.

&Uuml;berleben von Wolbachia Pipientis in zellfreien Medium.

Wolbachia pipientis &egrave; un batterio intracellulare obligato trovato in una vasta gamma di taxa di invertebrati. Mentre sulla tempistica ecologico Wolbachia infezioni sono mantenute dal rigoroso eredit&agrave; materna, gli eventi di trasferimento orizzontale sono comuni nel corso del tempo evolutivo. Per essere trasferito orizzontalmente tra organismi, batteri Wolbachia devono passare attraverso e sopravvivere una fase extracellulare. Abbiamo usato BacLight colorazione vivo-morto, PCR, fluorescenza e l&#39;ibridazione in situ per valutare la capacit&agrave; per purificato Wolbachia batteri di sopravvivere in media senza cellula. Abbiamo trovato che purificate Wolbachia batteri sono stati in grado di sopravvivere extracellularly per fino a 1 settimana con nessuna diminuzione della redditivit&agrave;. Mentre nessuna replica &egrave; stata osservata nella fase extracellulare, purificati Wolbachia batteri sono stati in grado di reinvade le cellule e stabilire infezioni stabile in tutti i punti di tempo. La capacit&agrave; dei batteri di Wolbachia di sopravvivere di fuori delle cellule ospite pu&ograve; aumentare la probabilit&agrave; di successo trasferimento orizzontale e lo sfruttamento di nuove nicchie ecologiche. Il nostro sviluppo di metodi per purificare e mantenere vitali Wolbachia batteri da cellule coltivate sar&agrave; utile per altri ricercatori studiando biologia Wolbachia.

Sopravvivenza di Wolbachia pipientis in mezzo senza cellula.

&#x30DC;&#x30EB;&#x30D0;&#x30AD;&#x30A2;pipientis&#x306E;&#x306F;&#x3001;&#x7121;&#x810A;&#x690E;&#x52D5;&#x7269;&#x306E;&#x5E83;&#x3044;&#x7BC4;&#x56F2;&#x3067;&#x898B;&#x3064;&#x304B;&#x3063;&#x305F;&#x504F;&#x6027;&#x7D30;&#x80DE;&#x5185;&#x7D30;&#x83CC;&#x3067;&#x3042;&#x308B;&#x3002;&#x751F;&#x614B;&#x5B66;&#x7684;&#x306A;&#x30B9;&#x30B1;&#x30FC;&#x30EB;&#x306B;&#x308F;&#x305F;&#x3063;&#x3066;&#x30DC;&#x30EB;&#x30D0;&#x30AD;&#x30A2;&#x611F;&#x67D3;&#x306F;&#x53B3;&#x683C;&#x306A;&#x6BCD;&#x6027;&#x907A;&#x4F1D;&#x306B;&#x3088;&#x3063;&#x3066;&#x7DAD;&#x6301;&#x3055;&#x308C;&#x3066;&#x3044;&#x307E;&#x3059;&#x304C;&#x3001;&#x6C34;&#x5E73;&#x8EE2;&#x9001;&#x30A4;&#x30D9;&#x30F3;&#x30C8;&#x306F;&#x3001;&#x9032;&#x5316;&#x306E;&#x6642;&#x9593;&#x3092;&#x304B;&#x3051;&#x3066;&#x5171;&#x901A;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x6C34;&#x5E73;&#x65B9;&#x5411;&#x306E;&#x751F;&#x7269;&#x306E;&#x9593;&#x3067;&#x8EE2;&#x9001;&#x3055;&#x308C;&#x308B;&#x305F;&#x3081;&#x306B;&#x306F;&#x3001;&#x30DC;&#x30EB;&#x30D0;&#x30AD;&#x30A2;&#x83CC;&#x306F;&#x901A;&#x904E;&#x3057;&#x3066;&#x7D30;&#x80DE;&#x5916;&#x306E;&#x4F4D;&#x76F8;&#x3092;&#x4E57;&#x308A;&#x5207;&#x3089;&#x306A;&#x3051;&#x308C;&#x3070;&#x306A;&#x308A;&#x307E;&#x305B;&#x3093;&#x3002;&#x6211;&#x3005;&#x306F;&#x3001;&#x7121;&#x7D30;&#x80DE;&#x57F9;&#x5730;&#x4E2D;&#x3067;&#x751F;&#x304D;&#x6B8B;&#x308B;&#x305F;&#x3081;&#x306B;&#x30DC;&#x30EB;&#x30D0;&#x30AD;&#x30A2;&#x83CC;&#x3092;&#x7CBE;&#x88FD;&#x3059;&#x308B;&#x305F;&#x3081;&#x306E;&#x80FD;&#x529B;&#x3092;&#x8A55;&#x4FA1;&#x3059;&#x308B;in situ&#x30CF;&#x30A4;&#x30D6;&#x30EA;&#x30C0;&#x30A4;&#x30BC;&#x30FC;&#x30B7;&#x30E7;&#x30F3;BacLight&#x30E9;&#x30A4;&#x30D6;&#x6B7B;&#x8005;&#x67D3;&#x8272;&#x3001;PCR&#x3001;&#x86CD;&#x5149;&#x3092;&#x4F7F;&#x7528;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x307E;&#x3057;&#x305F;&#x3002;&#x6211;&#x3005;&#x306F;&#x3001;&#x7CBE;&#x88FD;&#x3057;&#x305F;&#x30DC;&#x30EB;&#x30D0;&#x30AD;&#x30A2;&#x83CC;&#x306F;&#x751F;&#x5B58;&#x7387;&#x306E;&#x4F4E;&#x4E0B;&#x3067;&#x3001;&#x6700;&#x5927;1&#x9031;&#x9593;&#x5916;&#x306B;&#x751F;&#x304D;&#x6B8B;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x304C;&#x3067;&#x304D;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x304C;&#x308F;&#x304B;&#x3063;&#x305F;&#x3002;&#x30EC;&#x30D7;&#x30EA;&#x30B1;&#x30FC;&#x30B7;&#x30E7;&#x30F3;&#x304C;&#x7D30;&#x80DE;&#x5916;&#x306E;&#x6BB5;&#x968E;&#x3067;&#x89B3;&#x5BDF;&#x3055;&#x308C;&#x306A;&#x304B;&#x3063;&#x305F;&#x3001;&#x7CBE;&#x88FD;&#x3055;&#x308C;&#x305F;&#x30DC;&#x30EB;&#x30D0;&#x30AD;&#x30A2;&#x83CC;&#x306F;&#x3001;&#x7D30;&#x80DE;&#x3092;reinvade&#x3001;&#x3059;&#x3079;&#x3066;&#x306E;&#x6642;&#x9593;&#x30DD;&#x30A4;&#x30F3;&#x30C8;&#x3067;&#x5B89;&#x5B9A;&#x3057;&#x305F;&#x611F;&#x67D3;&#x3092;&#x78BA;&#x7ACB;&#x3059;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x304C;&#x3067;&#x304D;&#x307E;&#x3057;&#x305F;&#x3002;&#x5BBF;&#x4E3B;&#x7D30;&#x80DE;&#x306E;&#x5916;&#x3067;&#x751F;&#x304D;&#x6B8B;&#x308B;&#x305F;&#x3081;&#x306B;&#x30DC;&#x30EB;&#x30D0;&#x30AD;&#x30A2;&#x83CC;&#x306E;&#x80FD;&#x529B;&#x306F;&#x3001;&#x6210;&#x529F;&#x3057;&#x305F;&#x6C34;&#x5E73;&#x8EE2;&#x9001;&#x3068;&#x65B0;&#x3057;&#x3044;&#x751F;&#x614B;&#x7684;&#x5730;&#x4F4D;&#x306E;&#x60AA;&#x7528;&#x306E;&#x53EF;&#x80FD;&#x6027;&#x3092;&#x9AD8;&#x3081;&#x308B;&#x53EF;&#x80FD;&#x6027;&#x304C;&#x3042;&#x308A;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x57F9;&#x990A;&#x7D30;&#x80DE;&#x304B;&#x3089;&#x751F;&#x30DC;&#x30EB;&#x30D0;&#x30AD;&#x30A2;&#x83CC;&#x3092;&#x6D44;&#x5316;&#x3057;&#x3001;&#x7DAD;&#x6301;&#x3059;&#x308B;&#x65B9;&#x6CD5;&#x306E;&#x6211;&#x3005;&#x306E;&#x958B;&#x767A;&#x3067;&#x306F;&#x3001;&#x30DC;&#x30EB;&#x30D0;&#x30AD;&#x30A2;&#x751F;&#x7269;&#x5B66;&#x3092;&#x52C9;&#x5F37;&#x3057;&#x3001;&#x4ED6;&#x306E;&#x7814;&#x7A76;&#x8005;&#x306B;&#x3068;&#x3063;&#x3066;&#x6709;&#x7528;&#x3067;&#x3042;&#x308D;&#x3046;&#x3002;

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Wolbachia pipientis &#xC758;&#xBB34; &#xC138;&#xD3EC;&#xB0B4; &#xBC15;&#xD14C;&#xB9AC;&#xC544; &#xBB34;&#xCC99; &#xCD94; &#xB3D9;&#xBB3C; taxa&#xC758; &#xB113;&#xC740; &#xBC94;&#xC704;&#xC5D0;&#xC11C; &#xBC1C;&#xACAC; &#xB429;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xC0DD;&#xD0DC; timescales &#xC774;&#xC0C1; Wolbachia &#xAC10;&#xC5FC; &#xC5C4;&#xACA9;&#xD55C; &#xBAA8;&#xC131; &#xC0C1;&#xC18D;&#xC5D0; &#xC758;&#xD574; &#xC720;&#xC9C0; &#xB429;&#xB2C8;&#xB2E4;, &#xD558;&#xB294; &#xB3D9;&#xC548; &#xAC00;&#xB85C; &#xC804;&#xC1A1; &#xC774;&#xBCA4;&#xD2B8; &#xC9C4;&#xD654; &#xC2DC;&#xAC04;&#xC774; &#xC9C0;&#xB0A8;&#xC5D0; &#xC77C;&#xBC18;&#xC801;&#xC785;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xC0DD;&#xBB3C; &#xC0AC;&#xC774;&#xC758; &#xC804;&#xC1A1; &#xAC00;&#xB85C;, &#xBC15;&#xD14C;&#xB9AC;&#xC544; Wolbachia &#xD1B5;&#xACFC; &#xD558; &#xACE0; &#xC0DD;&#xC874; &#xC138;&#xD3EC; &#xC678; &#xB2E8;&#xACC4; &#xD574;&#xC57C; &#xD569;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xC6B0;&#xB9AC; &#xB370; BacLight &#xC0B4;&#xACE0; &#xC8FD;&#xC740; &#xC5BC;&#xB8E9;, PCR, &#xBC0F; &#xD615;&#xAD11; &#xC81C;&#xC790;&#xB9AC; &#xAD50; &#xC7A1;&#xC5D0; &#xC140; &#xBB34;&#xB8CC; &#xBBF8;&#xB514;&#xC5B4;&#xC5D0;&#xC11C; &#xC0B4;&#xC544;&#xB0A8;&#xC73C;&#xB824;&#xBA74; Wolbachia &#xBC15;&#xD14C;&#xB9AC;&#xC544;&#xC758; &#xC815;&#xD654; &#xB2A5;&#xB825; &#xD3C9;&#xAC00;. &#xC6B0;&#xB9AC; &#xC815;&#xD654; Wolbachia &#xBC15;&#xD14C;&#xB9AC;&#xC544; extracellularly &#xC5C6;&#xB294; &#xC0DD;&#xC874; &#xB2A5;&#xB825; &#xAC10;&#xC18C;&#xC640; &#xCD5C;&#xB300; 1 &#xC8FC;&#xC77C; &#xB3D9;&#xC548; &#xC0B4;&#xC544;&#xB0A8;&#xC744; &#xC218; &#xC788;&#xC5C8;&#xB2E4; &#xBC1C;&#xACAC;. &#xBCF5;&#xC81C;&#xAC00; &#xC138;&#xD3EC; &#xC678; &#xB2E8;&#xACC4;&#xC5D0;&#xC11C; &#xAD00;&#xCC30; &#xB418;&#xC5C8;&#xB2E4;, &#xD558;&#xB294; &#xB3D9;&#xC548; &#xC815;&#xD654; Wolbachia &#xBC15;&#xD14C;&#xB9AC;&#xC544; &#xC140; reinvade &#xBC0F; &#xBAA8;&#xB4E0; &#xC2DC;&#xAC04; &#xC9C0;&#xC810;&#xC5D0;&#xC11C; &#xC548;&#xC815;&#xC801;&#xC778; &#xAC10;&#xC5FC;&#xC744; &#xC124;&#xC815;&#xD560; &#xC218; &#xC788;&#xC5C8;&#xB2E4;. Wolbachia &#xBC15;&#xD14C;&#xB9AC;&#xC544;&#xC758; &#xC678;&#xBD80; &#xD638;&#xC2A4;&#xD2B8; &#xC138;&#xD3EC; &#xC0DD;&#xC874; &#xB2A5;&#xB825; &#xC131;&#xACF5;&#xC801;&#xC778; &#xAC00;&#xB85C; &#xC591;&#xB3C4; &#xAC00;&#xB2A5;&#xC131;&#xACFC; &#xC0C8;&#xB85C;&#xC6B4; &#xC0DD;&#xD0DC; &#xD2C8;&#xC0C8;&#xC758; &#xCC29;&#xCDE8; &#xC99D;&#xAC00; &#xC2DC;&#xD0AC; &#xC218; &#xC788;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xC815;&#xD654; &#xBC0F; &#xBC30;&#xC591;&#xB41C; &#xC138;&#xD3EC;&#xC5D0;&#xC11C; &#xAC00;&#xB2A5;&#xD55C; Wolbachia &#xBC15;&#xD14C;&#xB9AC;&#xC544;&#xB97C; &#xC720;&#xC9C0; &#xD558;&#xB294; &#xBC29;&#xBC95; &#xC911; &#xC6B0;&#xB9AC;&#xC758; &#xAC1C;&#xBC1C; Wolbachia &#xC0DD;&#xBB3C;&#xD559;&#xC744; &#xACF5;&#xBD80; &#xD558; &#xACE0; &#xB2E4;&#xB978; &#xC5F0;&#xAD6C;&#xC790;&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xB3C4;&#xC6C0;&#xC774; &#xB420; &#xAC83;&#xC785;&#xB2C8;&#xB2E4;.

&#xD734;&#xB300; &#xBB34;&#xB8CC; &#xB9E4;&#xCCB4;&#xC5D0;&#xC11C; Wolbachia pipientis&#xC758; &#xC0DD;&#xC874;.

Wolbachia pipientis es una bacteria intracelular obligado, se encuentra en una amplia gama de taxones de invertebrados. Mientras que en escalas de tiempo ecol&#xF3;gicas infecciones Wolbachia son mantenidos por herencia materna estricta, eventos de transferencia horizontal son comunes durante el tiempo evolutivo. Que se transferir&#xE1;n horizontalmente entre los organismos, la bacteria Wolbachia debe pasar a trav&#xE9;s y sobrevivir en una fase extracelular. Se utiliz&#xF3; BacLight en vivo-muerto tinci&#xF3;n, PCR, y la fluorescencia de hibridaci&#xF3;n in situ para evaluar la capacidad de purificar la bacteria Wolbachia para sobrevivir en la celda sin los medios de comunicaci&#xF3;n. Se encontr&#xF3; que la bacteria Wolbachia purificadas fueron capaces de sobrevivir extracelularmente hasta por 1 semana sin disminuci&#xF3;n de la viabilidad. Si bien no se observ&#xF3; la replicaci&#xF3;n en la fase extracelular, purificadas bacteria Wolbachia fueron capaces de reinvadir c&#xE9;lulas y establecer infecciones estables en todos los puntos. La capacidad de la bacteria Wolbachia para sobrevivir fuera de las c&#xE9;lulas hu&#xE9;sped puede aumentar la probabilidad de &#xE9;xito de la transferencia horizontal y la explotaci&#xF3;n de nuevos nichos ecol&#xF3;gicos. El desarrollo de m&#xE9;todos para purificar y mantener las bacterias viables Wolbachia partir de c&#xE9;lulas cultivadas ser&#xE1;n de utilidad para otros investigadores que estudian la biolog&#xED;a de Wolbachia.

Courtney Gamston

Malaria Research Institute,
Bloomberg School of Public Health,
Malaria Research Institute, Bloomberg School of Public Health

Johns Hopkins University

Maintaining Wolbachia in Cell-free Medium

Courtney Gamston

Malaria Research Institute,Bloomberg School of Public Health,Malaria Research Institute, Bloomberg School of Public Health

Johns Hopkins University

Maintaining Wolbachia in Cell-free Medium

Malaria Research Institute,
Bloomberg School of Public Health,
Malaria Research Institute, Bloomberg School of Public Health