measuring-the-induced-membrane-voltage-with-di-8-anepps

Measuring the Induced Membrane Voltage with Di-8-ANEPPS

Placement of a cell into an external electric field causes a local charge redistribution inside and outside of the cell in the vicinity of the cell ...

University of Ljubljana

&#x808C;&#x8089;&#x6536;&#x7F29;&#x76EE;&#x524D;&#x7535;&#x5316;&#x5B66;&#x6CBB;&#x7597;&#x75C5;&#x4EBA;&#x7684;&#x4E0D;&#x6109;&#x5FEB;&#x611F;&#x89C9;&#x7684;&#x4E3B;&#x8981;&#x6765;&#x6E90;&#x3002;&#x5B50;&#x5BAB;&#x6536;&#x7F29;&#x662F;&#x9AD8;&#x7535;&#x538B;&#x8109;&#x51B2;&#x4F20;&#x9012;&#x7684;&#x540E;&#x679C;&#x3002;&#x8FD9;&#x4E9B;&#x8109;&#x51B2; (1 Hz) &#x4E2D;&#x7684;&#x7ED3;&#x679C;&#x4E0E;&#x6BCF;&#x4E2A;&#x4EA4;&#x4ED8;&#x7684;&#x5355;&#x8109;&#x51B2;&#x5173;&#x8054;&#x7684;&#x5355;&#x72EC;&#x808C;&#x8089;&#x6536;&#x7F29;&#x7684;&#x76F8;&#x5BF9;&#x8F83;&#x4F4E;&#x7684;&#x91CD;&#x590D;&#x9891;&#x7387;&#x3002;&#x5B83;&#x5C06;&#x6709;&#x53EF;&#x80FD;&#x51CF;&#x5C11;&#x7684;&#x4EE4;&#x4EBA;&#x4E0D;&#x6109;&#x5FEB;&#x7684;&#x611F;&#x89C9;&#x901A;&#x8FC7;&#x589E;&#x52A0;&#x7684;&#x5F3A;&#x76F4;&#x6536;&#x7F29;&#x9891;&#x7387;&#x4EE5;&#x4E0A;&#x7684;&#x7535;&#x8109;&#x51B2;&#x7684;&#x9891;&#x7387;&#x63D0;&#x4F9B;&#x7684;&#x6297;&#x80BF;&#x7624;&#x4F5C;&#x7528;&#x7684;&#x7535;&#x5316;&#x5B66;&#x6CBB;&#x7597;&#x6548;&#x7387;&#x4FDD;&#x6301;&#x76F8;&#x540C;&#x3002;&#x8FD9;&#x4E9B;&#x5047;&#x8BBE;&#x662F;&#xFF0C;&#x672C;&#x6587;&#x4EF6;&#x7531;&#x808C;&#x8089;&#x626D;&#x77E9;&#x5728;&#x4E0D;&#x540C;&#x7684;&#x8109;&#x51B2;&#x91CD;&#x590D;&#x9891;&#x7387;&#x548C;&#x5927;&#x9F20;&#x4E2D;&#x7684;&#x4E24;&#x4E2A;&#x4E0D;&#x540C;&#x7684;&#x8109;&#x51B2;&#x632F;&#x5E45;&#x6D4B;&#x91CF;&#x548C;&#x7814;&#x7A76;&#x5728;&#x4E0D;&#x540C;&#x7684;&#x8109;&#x51B2;&#x91CD;&#x590D;&#x9891;&#x7387;&#x5BF9;&#x5C0F;&#x9F20;&#x80BF;&#x7624;&#x7535;&#x5316;&#x5B66;&#x6CBB;&#x7597;&#x80BF;&#x7624;&#x6548;&#x7387;&#x8FDB;&#x884C;&#x8C03;&#x67E5;&#x3002;&#x808C;&#x8089;&#x626D;&#x77E9;&#x7684;&#x6D4B;&#x91CF;&#x8BC1;&#x5B9E;&#x8BE5;&#x8109;&#x51B2;&#x9891;&#x7387;&#x7684;&#x5F3A;&#x76F4;&#x6536;&#x7F29;&#x9891;&#x7387;&#x4EE5;&#x4E0A; (&gt; 100 Hz&#xFF09; &#x51CF;&#x5C11;&#x4E2A;&#x522B;&#x6536;&#x7F29;&#x5230;&#x5355;&#x4E2A;&#x808C;&#x8089;&#x6536;&#x7F29;&#x7684;&#x6570;&#x76EE;&#x3002;&#x65E0;&#x8BBA;&#x8109;&#x51B2;&#x5E45;&#x5EA6;&#xFF0C;&#x4E0E;&#x65E5;&#x76CA;&#x589E;&#x52A0;&#x7684;&#x8109;&#x51B2;&#x9891;&#x7387;&#x808C;&#x8089;&#x626D;&#x77E9;&#x9010;&#x6E10;&#x589E;&#x5927;&#x5230; 100 &#x6216; 200 Hz &#x7684;&#x9891;&#x7387;&#x548C;&#x7C7B;&#x4F3C;&#x4E8E;&#x4E00;&#x4E2A;&#x503C;&#x7136;&#x540E;&#x51CF;&#x5C0F;&#x540E;&#x5E94;&#x7528;&#x7A0B;&#x5E8F; 1 Hz &#x7684;&#x8109;&#x51B2;&#x706B;&#x8F66;&#x3002;&#x7535;&#x5316;&#x5B66;&#x6CBB;&#x7597;&#x9AD8;&#x91CD;&#x590D;&#x9891;&#x7387;&#x4E0E;&#x4F53;&#x5185;&#x6291;&#x5236;&#x80BF;&#x7624;&#x751F;&#x957F;&#x548C;&#x5728;&#x6240;&#x6709;&#x8109;&#x51B2;&#x9891;&#x7387;&#x5BA1;&#x67E5; &#xFF08;1 Hz-5 kHz&#xFF09; &#x6548;&#x7387;&#x9AD8;&#x3002;&#x8FD9;&#x4E9B;&#x7ED3;&#x679C;&#x8868;&#x660E;&#x6709;&#x76F8;&#x5F53;&#x5927;&#x7684;&#x6F5C;&#x529B;&#xFF0C;&#x4E3A;&#x9AD8;&#x9891;&#x8109;&#x51B2;&#x5728;&#x7535;&#x5316;&#x5B66;&#x6CBB;&#x7597;&#x4E2D;&#x7684;&#x4E34;&#x5E8A;&#x5E94;&#x7528;&#x3002;

&#x5BF9;&#x808C;&#x8089;&#x7684;&#x6536;&#x7F29;&#x548C;&#x4E34;&#x5E8A;&#x7535;&#x5316;&#x5B66;&#x6CBB;&#x7597;&#x4E2D;&#x7684;&#x6F5C;&#x5728;&#x7528;&#x9014;&#x7684;&#x4F53;&#x5185;&#x7684;&#x6297;&#x80BF;&#x7624;&#x4F5C;&#x7528;&#x6548;&#x7387;&#x9AD8;&#x9891;&#x7535;&#x8109;&#x51B2;&#x7684;&#x5F71;&#x54CD;&#x3002;

Muscle contractions present the main source of unpleasant sensations for patients undergoing electrochemotherapy. The contractions are a consequence of high voltage pulse delivery. Relatively low repetition frequency of these pulses (1 Hz) results in separate muscle contractions associated with each single pulse that is delivered. It would be possible to reduce the number of unpleasant sensations by increasing the frequency of electric pulses above the frequency of tetanic contraction, provided that the antitumor efficiency of electrochemotherapy remains the same. These assumptions were investigated in the present paper by measuring the muscle torque at different pulse repetition frequencies and at two different pulse amplitudes in rats and studying the antitumor efficiency of electrochemotherapy at different pulse repetition frequencies on tumors in mice. Measurements of muscle torque confirmed that pulse frequencies above the frequency of tetanic contraction (>100 Hz) reduce the number of individual contractions to a single muscle contraction. Regardless of the pulse amplitude, with increasing pulse frequency muscle torque increases up to the frequency of 100 or 200 Hz and then decreases to a value similar to that after application of a 1 Hz pulse train. Electrochemotherapy in vivo with higher repetition frequencies inhibits tumor growth and is efficient at all pulse frequencies examined (1 Hz-5 kHz). These results suggest that there is a considerable potential for clinical use of high frequency pulses in electrochemotherapy.

The effect of high frequency electric pulses on muscle contractions and antitumor efficiency in vivo for a potential use in clinical electrochemotherapy.

Les contractions musculaires pr&#xE9;senter la principale source de sensations d&#xE9;sagr&#xE9;ables pour les patients subissant une &#xE9;lectrochimioth&#xE9;rapie. Les contractions sont une cons&#xE9;quence de la livraison d&#x26;#39;impulsions &#xE0; haute tension. Fr&#xE9;quence de r&#xE9;p&#xE9;tition relativement faible de ces impulsions (1 Hz) entra&#xEE;ne des contractions musculaires distinctes associ&#xE9;es &#xE0; chaque impulsion unique qui est livr&#xE9;. Il serait possible de r&#xE9;duire le nombre de sensation d&#xE9;sagr&#xE9;able en augmentant la fr&#xE9;quence d&#x26;#39;impulsions &#xE9;lectriques au-dessus de la fr&#xE9;quence de contraction t&#xE9;tanique, &#xE0; condition que l&#x26;#39;efficacit&#xE9; antitumorale de &#xE9;lectrochimioth&#xE9;rapie reste le m&#xEA;me. Ces hypoth&#xE8;ses ont &#xE9;t&#xE9; &#xE9;tudi&#xE9;es dans le pr&#xE9;sent document en mesurant le couple musculaire &#xE0; diff&#xE9;rentes fr&#xE9;quences de r&#xE9;p&#xE9;tition des impulsions et &#xE0; deux amplitudes d&#x26;#39;impulsion diff&#xE9;rentes chez le rat et l&#x26;#39;&#xE9;tude de l&#x26;#39;efficacit&#xE9; antitumorale de &#xE9;lectrochimioth&#xE9;rapie &#xE0; diff&#xE9;rentes fr&#xE9;quences de r&#xE9;p&#xE9;tition des impulsions sur les tumeurs chez la souris. Des mesures de couple musculaire confirm&#xE9; que les fr&#xE9;quences sup&#xE9;rieures &#xE0; la fr&#xE9;quence d&#x26;#39;impulsions de contraction t&#xE9;tanique (&#x26;gt; 100 Hz) r&#xE9;duire le nombre de contractions individuels &#xE0; une contraction du muscle cl&#xE9;. Ind&#xE9;pendamment de l&#x26;#39;amplitude d&#x26;#39;impulsion, avec un couple augmentant de fr&#xE9;quence d&#x26;#39;impulsion de muscle augmente jusqu&#x26;#39;&#xE0; la fr&#xE9;quence de 100 Hz ou 200 puis diminue &#xE0; une valeur similaire &#xE0; celle apr&#xE8;s l&#x26;#39;application d&#x26;#39;un train d&#x26;#39;impulsions 1 Hz. &#xC9;lectrochimioth&#xE9;rapie in vivo avec des fr&#xE9;quences de r&#xE9;p&#xE9;tition &#xE9;lev&#xE9;es inhibe la croissance tumorale et est efficace &#xE0; toutes les fr&#xE9;quences d&#x26;#39;impulsions examin&#xE9;s (1 Hz-5 kHz). Ces r&#xE9;sultats sugg&#xE8;rent qu&#x26;#39;il existe un potentiel consid&#xE9;rable pour une utilisation clinique des impulsions &#xE0; haute fr&#xE9;quence dans l&#x26;#39;&#xE9;lectrochimioth&#xE9;rapie.

L&#x26;#39;effet des impulsions &#xE9;lectriques &#xE0; haute fr&#xE9;quence sur les contractions musculaires et l&#x26;#39;efficacit&#xE9; antitumorale in vivo pour une utilisation potentielle dans &#xE9;lectrochimioth&#xE9;rapie clinique

Die Wirkung der hochfrequenten elektrischen Impulse an Muskelkontraktionen und antitumoraler Wirksamkeit in vivo f&#xFC;r eine m&#xF6;gliche Verwendung in der klinischen Elektrochemotherapie.

Contrazioni muscolari attualmente la principale fonte di sensazioni sgradevoli per i pazienti sottoposti a electrochemotherapy. Le contrazioni sono una conseguenza della consegna di impulsi ad alta tensione. Relativamente bassa frequenza di ripetizione di questi risultati di impulsi (1 Hz) in contrazioni muscolari separati associati a ogni singolo impulso che viene consegnato. Sarebbe possibile ridurre il numero delle sensazioni spiacevoli aumentando la frequenza degli impulsi elettrici di sopra della frequenza di contrazione tetanica, purch&eacute; l&#39;efficacia antitumorale di electrochemotherapy rimane lo stesso. Questi presupposti sono stati esaminati nel presente documento misurando la coppia muscolare a frequenze di ripetizione di impulso differenti e a due ampiezze di impulso differenti nei ratti e studiando l&#39;efficacia antitumorale di electrochemotherapy a frequenze di ripetizione impulsi differenti sui tumori nei topi. Le misurazioni della coppia muscolare ha confermato tale impulso le frequenze di sopra della frequenza di contrazione tetanica (&amp;gt; 100 Hz) ridurre il numero delle contrazioni individuale ad una contrazione muscolare singola. Indipendentemente dall&#39;ampiezza dell&#39;impulso, con muscolo di frequenza crescente impulso coppia aumenta fino alla frequenza di 100 o 200 Hz e quindi si riduce a un valore simile a che dopo l&#39;applicazione di un Hz 1 treno di impulsi. Electrochemotherapy in vivo con alte frequenze di ripetizione &egrave; efficiente a tutte le frequenze di impulso esaminate (1 Hz-5 kHz) e inibisce la crescita tumorale. Questi risultati suggeriscono che c&#39;&egrave; un notevole potenziale per l&#39;uso clinico di impulsi ad alta frequenza in electrochemotherapy.

L&#39;effetto degli impulsi elettrici ad alta frequenza su efficienza antitumorale in vivo per un potenziale utilizzo in clinica electrochemotherapy e contrazioni muscolari.

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&#x81E8;&#x5E8A;&#x96FB;&#x6C17;&#x5316;&#x5B66;&#x306E;&#x6F5C;&#x5728;&#x7684;&#x306A;&#x4F7F;&#x7528;&#x306E;&#x305F;&#x3081;&#x306B;&#x7B4B;&#x8089;&#x306E;&#x53CE;&#x7E2E;&#x304A;&#x3088;&#x3073;in vivo&#x3067;&#x6297;&#x816B;&#x760D;&#x52B9;&#x7387;&#x3067;&#x9AD8;&#x5468;&#x6CE2;&#x96FB;&#x6C17;&#x30D1;&#x30EB;&#x30B9;&#x306E;&#x52B9;&#x679C;

&#xADFC;&#xC721; &#xC218;&#xCD95; &#xD658;&#xC790; electrochemotherapy&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xBD88;&#xCF8C; &#xD55C; &#xB290;&#xB08C;&#xC758; &#xBA54;&#xC778; &#xC18C;&#xC2A4;&#xB97C; &#xC81C;&#xC2DC;. &#xC218; &#xCD95;&#xC744; &#xACE0;&#xC804;&#xC555; &#xD384;&#xC2A4; &#xC804;&#xB2EC;&#xC758; &#xACB0;&#xACFC;. &#xC0C1;&#xB300;&#xC801;&#xC73C;&#xB85C; &#xB0AE;&#xC740; &#xBC18;&#xBCF5; &#xC804;&#xB2EC; &#xB418;&#xB294; &#xAC01; &#xB2E8;&#xC77C; &#xD384;&#xC2A4;&#xC640; &#xAD00;&#xB828; &#xB41C; &#xBCC4;&#xB3C4; &#xADFC;&#xC721; &#xC218;&#xCD95;&#xC5D0; &#xC774;&#xB7EC;&#xD55C; &#xD384;&#xC2A4; (1 Hz)&#xC758; &#xC8FC;&#xD30C;&#xC218;. Electrochemotherapy antitumor &#xD6A8;&#xC728; &#xB3D9;&#xC77C; &#xD558; &#xAC8C; &#xC720;&#xC9C0; &#xD558; tetanic &#xC218;&#xCD95; &#xC8FC;&#xD30C;&#xC218; &#xC804;&#xAE30; &#xD384;&#xC2A4;&#xC758; &#xC8FC;&#xD30C;&#xC218;&#xB97C; &#xC99D;&#xAC00; &#xD558; &#xC5EC; &#xBD88;&#xCF8C; &#xD55C; &#xB290;&#xB08C;&#xC758; &#xC218;&#xB97C; &#xC904;&#xC77C; &#xC218; &#xC788;&#xC744; &#xAC83;. &#xC774;&#xB7EC;&#xD55C; &#xAC00;&#xC815;&#xC740; &#xB2E4;&#xB978; &#xD384;&#xC2A4; &#xBC18;&#xBCF5; &#xC8FC;&#xD30C;&#xC218;&#xC640; &#xC950;&#xC5D0; &#xB450; &#xAC1C;&#xC758; &#xC11C;&#xB85C; &#xB2E4;&#xB978; &#xD384;&#xC2A4; &#xC9C4;&#xD3ED; &#xADFC;&#xC721; &#xD1A0;&#xD06C; &#xCE21;&#xC815; &#xD558; &#xACE0; &#xC0DD;&#xC950;&#xC5D0; &#xC885;&#xC591;&#xC5D0; &#xB2E4;&#xB978; &#xD384;&#xC2A4; &#xBC18;&#xBCF5; &#xC8FC;&#xD30C;&#xC218;&#xC5D0;&#xC11C; electrochemotherapy&#xC758; antitumor &#xD6A8;&#xC728;&#xC131;&#xC744; &#xACF5;&#xBD80; &#xD558; &#xC5EC; &#xD604;&#xC7AC;&#xC758; &#xC885;&#xC774;&#xC5D0; &#xC870;&#xC0AC; &#xB418;&#xC5C8;&#xB2E4;. &#xADFC;&#xC721; &#xD1A0;&#xD06C; &#xCE21;&#xC815; &#xD655;&#xC778; &#xADF8; &#xD384;&#xC2A4; tetanic &#xC218;&#xCD95; &#xC8FC;&#xD30C;&#xC218; &#xC774;&#xC0C1;&#xC758; &#xC8FC;&#xD30C;&#xC218; (&amp;gt; 100 Hz) &#xB2E8;&#xC77C; &#xADFC;&#xC721; &#xC218;&#xCD95; &#xAC1C;&#xBCC4; &#xC218;&#xCD95; &#xC218;&#xB97C; &#xC904;&#xC785;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xD384;&#xC2A4; &#xC9C4;&#xD3ED;&#xC5D0; &#xAD00;&#xACC4; &#xC5C6;&#xC774; &#xC99D;&#xAC00; &#xD384;&#xC2A4; &#xC8FC;&#xD30C;&#xC218; &#xADFC;&#xC721; &#xD1A0;&#xD06C; &#xC99D;&#xAC00; 100 &#xB610;&#xB294; 200 Hz&#xC758; &#xC8FC;&#xD30C;&#xC218;&#xAE4C;&#xC9C0; &#xD558; &#xACE0; &#xAC10;&#xC18C; &#xBE44;&#xC2B7;&#xD55C; &#xAC12;&#xC5D0; 1 &#xD68C; &#xC2E0;&#xCCAD; &#xD6C4; &#xAE30;&#xCC28; &#xB9E5; &#xBC15;. Electrochemotherapy in vivo &#xB192;&#xC740; &#xBC18;&#xBCF5; &#xC8FC;&#xD30C;&#xC218;&#xB85C; &#xC885;&#xC591;&#xC758; &#xC131;&#xC7A5;&#xC744; &#xC5B5;&#xC81C;&#xC640; &#xAC80;&#xC0AC; &#xB41C; &#xBAA8;&#xB4E0; &#xD384;&#xC2A4; &#xC8FC;&#xD30C;&#xC218; (1 &#xD68C;-5 kHz)&#xC5D0;&#xC11C; &#xD6A8;&#xC728;&#xC801;&#xC785;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xC774; &#xACB0;&#xACFC; electrochemotherapy&#xC5D0;&#xC11C; &#xACE0;&#xC8FC;&#xD30C; &#xD384;&#xC2A4;&#xC758; &#xC784;&#xC0C1; &#xC0AC;&#xC6A9;&#xC744; &#xC704;&#xD55C; &#xC0C1;&#xB2F9;&#xD55C; &#xC7A0;&#xC7AC;&#xB825;&#xC744; &#xC81C;&#xC548;.

&#xADFC;&#xC721; &#xC218;&#xCD95; &#xBC0F; antitumor &#xD6A8;&#xC728; &#xC784;&#xC0C1; electrochemotherapy&#xC758; &#xC0AC;&#xC6A9; &#xAC00;&#xB2A5;&#xC131;&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; vivo&#xC5D0;&#xC11C; &#xACE0;&#xC8FC;&#xD30C; &#xC804;&#xAE30; &#xD384;&#xC2A4;&#xC758; &#xD6A8;&#xACFC;.

Las contracciones musculares presentan la principal fuente de sensaciones desagradables para los pacientes sometidos a electroquimioterapia. Las contracciones son una consecuencia de la entrega de alta pulso de voltaje. Repetici&#xF3;n relativamente baja frecuencia de estos pulsos (1 Hz) resulta en contracciones musculares separados asociados con cada pulso &#xFA;nico que se entrega. Ser&#xED;a posible reducir el n&#xFA;mero de sensaciones desagradables al aumentar la frecuencia de impulsos el&#xE9;ctricos por encima de la frecuencia de contracci&#xF3;n tet&#xE1;nica, siempre que la eficacia antitumoral de electroquimioterapia sigue siendo el mismo. Estos supuestos fueron investigados en el presente documento mediante la medici&#xF3;n del par de torsi&#xF3;n muscular en diferentes frecuencias de repetici&#xF3;n de impulsos y en dos diferentes amplitudes de pulso en las ratas y el estudio de la eficacia antitumoral de electroquimioterapia a diferentes frecuencias de repetici&#xF3;n de pulso de tumores en ratones. Las mediciones de torsi&#xF3;n muscular confirm&#xF3; que las frecuencias de impulsos por encima de la frecuencia de contracci&#xF3;n tet&#xE1;nica (&#x26;gt; 100 Hz) reducir el n&#xFA;mero de contracciones individuales a una contracci&#xF3;n muscular clave. Independientemente de la amplitud del pulso, con una frecuencia creciente de impulsos de par m&#xFA;sculo aumenta hasta la frecuencia de 100 o 200 Hz y luego disminuye a un valor similar al que despu&#xE9;s de la aplicaci&#xF3;n de un tren de impulsos 1 Hz. Electroquimioterapia in vivo con frecuencias de repetici&#xF3;n m&#xE1;s altas inhibe el crecimiento tumoral y es eficaz en todas las frecuencias de impulsos examinados (1 Hz-5 kHz). Estos resultados sugieren que existe un potencial considerable para el uso cl&#xED;nico de impulsos de alta frecuencia en electroquimioterapia.

El efecto de los pulsos el&#xE9;ctricos de alta frecuencia de las contracciones musculares y de eficiencia antitumoral in vivo para un uso potencial en la cl&#xED;nica Electroquimioterapia

&#x901A;&#x900F;&#x6027;&#x589E;&#x52A0;&#x7EC6;&#x80DE;&#x819C;&#x7ED3;&#x679C;&#x5E94;&#x7528;&#x7684;&#x9AD8;&#x7535;&#x538B;&#x8109;&#x51B2;&#x4E2D;&#x589E;&#x52A0;&#x7684;&#x8DE8;&#x819C;&#x8FD0;&#x8F93;&#x7684;&#x5206;&#x5B50;&#xFF0C;&#x5426;&#x5219;&#x4E0D;&#x80FD;&#x8FDB;&#x5165;&#x7EC6;&#x80DE;&#x5185;&#x3002;&#x589E;&#x52A0;&#x7684;&#x7EC6;&#x80DE;&#x819C;&#x901A;&#x900F;&#x6027;&#x88AB;&#x4F34;&#x968F;&#x7740;&#x7535;&#x5BFC;&#x7387;&#x589E;&#x52A0;&#x7684;&#x819C; &#xFF1B;&#x56E0;&#x6B64;&#xFF0C;&#x901A;&#x8FC7;&#x6D4B;&#x91CF;&#x7535;&#x5BFC;&#x7387;&#x53EF;&#x4EE5;&#x5B9E;&#x65F6;&#x76D1;&#x6D4B;&#x7684;&#x900F;&#x6027;&#x5316;&#x7684;&#x7EC4;&#x7EC7;&#x7A0B;&#x5EA6;&#x3002;&#x5728;&#x8FD9;&#x7BC7;&#x6587;&#x7AE0;&#x7684;&#x7EC6;&#x80DE;&#x7535;&#x7A7F;&#x5B54;&#x5F15;&#x8D77;&#x7684;&#x9AD8;&#x7535;&#x538B;&#x8109;&#x51B2;&#x5BF9;&#x7EC6;&#x80DE;&#x60AC;&#x6DB2;&#x7684;&#x7535;&#x5BFC;&#x7387;&#x5F71;&#x54CD;&#x4E86;&#x7814;&#x7A76;&#x671F;&#x95F4;&#x7684;&#x7535;&#x6D41;&#x7535;&#x538B;&#x6D4B;&#x91CF;&#x548C;&#x963B;&#x6297;&#x6D4B;&#x91CF;&#x4E4B;&#x524D;&#x548C;&#x4E4B;&#x540E;&#x8109;&#x51B2;&#x5E94;&#x7528;&#x3002;&#x5728;&#x540C;&#x4E00;&#x65F6;&#x95F4;&#x88AB;&#x786E;&#x5B9A;&#x900F;&#x548C;&#x5B58;&#x6D3B;&#x7684;&#x7EC6;&#x80DE;&#x7684;&#x767E;&#x5206;&#x6BD4;&#x548C;&#x6E17;&#x900F;&#x80BF;&#x80C0;&#x7684;&#x7A0B;&#x5EA6;&#x6765;&#x8861;&#x91CF;&#x3002;&#x4E3A;&#x4E00;&#x5217;&#x706B;&#x8F66;&#x7684;&#x516B;&#x4E2A;&#x8109;&#x51B2;&#x77AC;&#x6001;&#x589E;&#x52A0;&#x7EC6;&#x80DE;&#x60AC;&#x6D6E;&#x6DB2;&#x7684;&#x7535;&#x5BFC;&#x7387;&#x5728;&#x83B7;&#x5F97;&#x5F7B;&#x5E95;&#x653E;&#x677E;&#x7684;&#x4E0E;&#x4F4E;&#x548C;&#x9AD8;&#x5BFC;&#x7535;&#x4ECB;&#x8D28;&#x4E2D;&#x7684;&#x901A;&#x900F;&#x6027;&#x589E;&#x9AD8;&#x9608;&#x503C;&#x4EE5;&#x4E0A; &lt; 1 s.&#x603B;&#x7535;&#x5BFC;&#x7387;&#x53D8;&#x5316;&#x4E0E;&#x963B;&#x6297;&#x6D4B;&#x91CF;&#x663E;&#x793A;&#x5F88;&#x5927;&#x7684;&#x53D8;&#x5316;&#x5728;&#x7531;&#x4E8E;&#x79BB;&#x5B50;&#x5916;&#x6392;&#x7684;&#x7535;&#x5BFC;&#x7387;&#x4F4E;&#x5BFC;&#x7535;&#x4ECB;&#x8D28;&#x548C;&#x80F6;&#x4F53;&#x6E17;&#x900F;&#x80BF;&#x80C0;&#x7684;&#x5A92;&#x4F53;&#x3002;&#x6211;&#x4EEC;&#x7684;&#x7ED3;&#x679C;&#x8868;&#x660E;&#x901A;&#x8FC7;&#x6D4B;&#x91CF;&#x7535;&#x5BFC;&#x7387;&#x5728;&#x8109;&#x51B2;&#x671F;&#x95F4;&#x6211;&#x4EEC;&#x53EF;&#x4EE5;&#x68C0;&#x6D4B;&#x9650;&#x5236;&#x901A;&#x900F;&#x6027;&#x589E;&#x9AD8;&#x9608;&#x503C;&#xFF0C;&#x4F46;&#x662F;&#x4E0D;&#x80FD;&#x76F4;&#x63A5;&#x4E00;&#x7EA7;&#x901A;&#x900F;&#x6027;&#x589E;&#x9AD8;&#xFF0C;&#x800C;&#x963B;&#x6297;&#x6D4B;&#x91CF;&#x7684;&#x79D2;&#x8109;&#x51B2;&#x5E94;&#x7528;&#x540E;&#x90FD;&#x4E0D;&#x9002;&#x5408;&#x3002;

&#x7EC6;&#x80DE;&#x7535;&#x7A7F;&#x5B54;&#x5BF9;&#x7EC6;&#x80DE;&#x60AC;&#x6DB2;&#x7684;&#x7535;&#x5BFC;&#x7387;&#x7684;&#x5F71;&#x54CD;&#x3002;

An increased permeability of a cell membrane during the application of high-voltage pulses results in increased transmembrane transport of molecules that otherwise cannot enter the cell. Increased permeability of a cell membrane is accompanied by increased membrane conductivity; thus, by measuring electric conductivity the extent of permeabilized tissue could be monitored in real time. In this article the effect of cell electroporation caused by high-voltage pulses on the conductivity of a cell suspension was studied by current-voltage measurements during and impedance measurement before and after the pulse application. At the same time the percentage of permeabilized and survived cells was determined and the extent of osmotic swelling measured. For a train of eight pulses a transient increase in conductivity of a cell suspension was obtained above permeabilization threshold in low- and high-conductive medium with complete relaxation in <1 s. Total conductivity changes and impedance measurements showed substantial changes in conductivity due to the ion efflux in low-conductive medium and colloid-osmotic swelling in both media. Our results show that by measuring electric conductivity during the pulses we can detect limit permeabilization threshold but not directly permeabilization level, whereas impedance measurements in seconds after the pulse application are not suitable.

Effect of cell electroporation on the conductivity of a cell suspension.

Une perm&#xE9;abilit&#xE9; &#xE0; l&#x26;#39;augmentation d&#x26;#39;une membrane cellulaire pendant l&#x26;#39;application de diff&#xE9;rentes impulsions de haute tension dans le transport transmembranaire accru de mol&#xE9;cules qui ne pourraient pas p&#xE9;n&#xE9;trer dans la cellule. Augmentation de la perm&#xE9;abilit&#xE9; de la membrane cellulaire est accompagn&#xE9;e par la conductivit&#xE9; membranaire accrue: ainsi, en mesurant la conductivit&#xE9; &#xE9;lectrique dans la mesure du tissu perm&#xE9;abilis&#xE9;es pourrait &#xEA;tre suivi en temps r&#xE9;el. Dans cet article pour effet de &#xE9;lectroporation des cellules provoqu&#xE9;e par impulsions haute tension sur la conductivit&#xE9; d&#x26;#39;une suspension cellulaire a &#xE9;t&#xE9; &#xE9;tudi&#xE9; par courant-tension mesures pendant et d&#x26;#39;imp&#xE9;dance de mesure avant et apr&#xE8;s l&#x26;#39;application d&#x26;#39;impulsions. Dans le m&#xEA;me temps le pourcentage de cellules perm&#xE9;abilis&#xE9;es et a surv&#xE9;cu a &#xE9;t&#xE9; d&#xE9;termin&#xE9; et la mesure du gonflement osmotique mesur&#xE9;e. Pour un train de huit impulsions une augmentation transitoire de la conductivit&#xE9; d&#x26;#39;une suspension cellulaire a &#xE9;t&#xE9; obtenue au dessus du seuil de perm&#xE9;abilisation en milieu &#xE0; faible et haute-conducteur avec une d&#xE9;tente parfaite dans &#x26;lt;1 s. Total des changements de conductivit&#xE9; et des mesures d&#x26;#39;imp&#xE9;dance ont montr&#xE9; des changements substantiels dans la conductivit&#xE9; dues &#xE0; l&#x26;#39;efflux d&#x26;#39;ions &#xE0; faible conducteur moyen et collo&#xEF;de osmotique gonflement dans les deux m&#xE9;dias. Nos r&#xE9;sultats montrent que, par mesure de la conductivit&#xE9; &#xE9;lectrique pendant les impulsions nous pouvons d&#xE9;tecter seuil de perm&#xE9;abilisation limite, mais pas au niveau de perm&#xE9;abilisation directement, tandis que des mesures d&#x26;#39;imp&#xE9;dance en quelques secondes apr&#xE8;s l&#x26;#39;application d&#x26;#39;impulsions ne sont pas adapt&#xE9;s.

Effet de la &#xE9;lectroporation de cellules sur la conductivit&#xE9; d&#x26;#39;une suspension cellulaire

Effekt der Elektroporation auf die Leitf&#xE4;higkeit einer Zellsuspension.

Un aumento della permeabilit&agrave; della membrana cellulare durante l&#39;applicazione di impulsi ad alta tensione si traduce in maggiore trasporto transmembrana di molecole che altrimenti non pu&ograve; penetrare nella cellula. Aumento della permeabilit&agrave; della membrana cellulare &egrave; accompagnato da conducibilit&agrave; di membrana maggiore; Pertanto, misurando la conducibilit&agrave; elettrica nella misura del tessuto permeabilized potrebbe essere monitorata in tempo reale. In questo articolo &egrave; stato studiato l&#39;effetto dell&#39;elettroporazione delle cellule causato da impulsi ad alta tensione sulla conducibilit&agrave; di una sospensione di cellule da misure di corrente-tensione durante e misurazione dell&#39;impedenza prima e dopo l&#39;applicazione di impulsi. Al tempo stesso che &egrave; stata determinata la percentuale delle cellule permeabilized e sopravvissute e la misura del rigonfiamento osmotico misurata. Per un treno di otto impulsi un temporaneo aumento della conduttivit&agrave; di una sospensione cellulare &egrave; stata ottenuta sopra soglia permeabilization nel medio basso e alto-conduttivo con completo rilassamento in &lt; 1 conduttivit&agrave; totale s. modifiche e misure di impedenza ha mostrato cambiamenti sostanziali nella conduttivit&agrave; a causa dell&#39;efflusso di ioni in mezzo basso-conduttivo e colloide-osmotico gonfiore in entrambi i media. I nostri risultati mostrano che misurando la conducibilit&agrave; elettrica durante gli impulsi possiamo rilevare soglia permeabilization ma non direttamente il livello permeabilization, considerando che le misure di impedenza in pochi secondi dopo l&#39;applicazione di impulsi non sono adatte.

Effetto di elettroporazione cella sulla conducibilit&agrave; di una sospensione di cellule.

&#x305D;&#x3046;&#x3067;&#x306A;&#x3051;&#x308C;&#x3070;&#x3001;&#x30BB;&#x30EB;&#x3092;&#x5165;&#x529B;&#x3059;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x306F;&#x3067;&#x304D;&#x307E;&#x305B;&#x3093;&#x5206;&#x5B50;&#x306E;&#x5897;&#x52A0;&#x8CAB;&#x901A;&#x8F38;&#x9001;&#x306E;&#x9AD8;&#x96FB;&#x5727;&#x30D1;&#x30EB;&#x30B9;&#x306E;&#x7D50;&#x679C;&#x306E;&#x9069;&#x7528;&#x6642;&#x306B;&#x3001;&#x7D30;&#x80DE;&#x819C;&#x306E;&#x900F;&#x904E;&#x6027;&#x306E;&#x5897;&#x5927;&#x3002;&#x7D30;&#x80DE;&#x819C;&#x306E;&#x900F;&#x904E;&#x6027;&#x306E;&#x5897;&#x52A0;&#x306F;&#x3001;&#x5897;&#x52A0;&#x3057;&#x305F;&#x819C;&#x306E;&#x5C0E;&#x96FB;&#x6027;&#x3092;&#x4F34;&#x3063;&#x3066;&#x3044;&#x308B;&#x3001;&#x3057;&#x305F;&#x304C;&#x3063;&#x3066;&#x3001;&#x96FB;&#x6C17;&#x4F1D;&#x5C0E;&#x5EA6;&#x3092;&#x6E2C;&#x5B9A;&#x3059;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x306B;&#x3088;&#x308A;&#x3001;&#x900F;&#x904E;&#x7D44;&#x7E54;&#x306E;&#x7BC4;&#x56F2;&#x306F;&#x3001;&#x30EA;&#x30A2;&#x30EB;&#x30BF;&#x30A4;&#x30E0;&#x3067;&#x76E3;&#x8996;&#x3059;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x304C;&#x3067;&#x304D;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x3053;&#x306E;&#x8A18;&#x4E8B;&#x3067;&#x306F;&#x3001;&#x7D30;&#x80DE;&#x61F8;&#x6FC1;&#x6DB2;&#x306E;&#x96FB;&#x6C17;&#x4F1D;&#x5C0E;&#x5EA6;&#x306E;&#x9AD8;&#x96FB;&#x5727;&#x30D1;&#x30EB;&#x30B9;&#x306B;&#x3088;&#x308B;&#x7D30;&#x80DE;&#x30A8;&#x30EC;&#x30AF;&#x30C8;&#x30ED;&#x30DD;&#x30EC;&#x30FC;&#x30B7;&#x30E7;&#x30F3;&#x306E;&#x52B9;&#x679C;&#x306F;&#x3001;&#x30D1;&#x30EB;&#x30B9;&#x5370;&#x52A0;&#x524D;&#x3068;&#x5F8C;&#x306E;&#x6E2C;&#x5B9A;&#x6642;&#x306B;&#x3001;&#x30A4;&#x30F3;&#x30D4;&#x30FC;&#x30C0;&#x30F3;&#x30B9;&#x306E;&#x96FB;&#x6D41; - &#x96FB;&#x5727;&#x6E2C;&#x5B9A;&#x306B;&#x3088;&#x308A;&#x691C;&#x8A0E;&#x3057;&#x305F;&#x3002;&#x540C;&#x6642;&#x306B;&#x900F;&#x904E;&#x3001;&#x751F;&#x304D;&#x6B8B;&#x3063;&#x305F;&#x7D30;&#x80DE;&#x306E;&#x30D1;&#x30FC;&#x30BB;&#x30F3;&#x30C6;&#x30FC;&#x30B8;&#x3092;&#x6C7A;&#x5B9A;&#x3057;&#x3001;&#x6D78;&#x900F;&#x5727;&#x81A8;&#x5F35;&#x306E;&#x7A0B;&#x5EA6;&#x3092;&#x6E2C;&#x5B9A;&#x3057;&#x305F;&#x3002; 8&#x30D1;&#x30EB;&#x30B9;&#x306E;&#x5217;&#x8ECA;&#x306E;&#x305F;&#x3081;&#x306B;&#x7D30;&#x80DE;&#x61F8;&#x6FC1;&#x6DB2;&#x306E;&#x5C0E;&#x96FB;&#x7387;&#x306E;&#x4E00;&#x6642;&#x7684;&#x5897;&#x52A0;&#x306F;&#x3001;&#x26;lt;1&#x79D2;&#x306E;&#x5B8C;&#x5168;&#x306A;&#x30EA;&#x30E9;&#x30AF;&#x30BC;&#x30FC;&#x30B7;&#x30E7;&#x30F3;&#x3092;&#x5099;&#x3048;&#x305F;&#x4F4E;&#x304A;&#x3088;&#x3073;&#x9AD8;&#x5C0E;&#x96FB;&#x6027;&#x306E;&#x5A92;&#x4F53;&#x4E2D;&#x306B;&#x6D78;&#x900F;&#x3059;&#x308B;&#x3057;&#x304D;&#x3044;&#x5024;&#x3092;&#x8D85;&#x3048;&#x3066;&#x5F97;&#x3089;&#x308C;&#x305F;&#x3002;&#x5408;&#x8A08;&#x5C0E;&#x96FB;&#x7387;&#x306E;&#x5909;&#x5316;&#x3068;&#x30A4;&#x30F3;&#x30D4;&#x30FC;&#x30C0;&#x30F3;&#x30B9;&#x6E2C;&#x5B9A;&#x306F;&#x3001;&#x4E21;&#x65B9;&#x306E;&#x30E1;&#x30C7;&#x30A3;&#x30A2;&#x306E;&#x4F4E;&#x5C0E;&#x96FB;&#x6027;&#x5A92;&#x4F53;&#x304A;&#x3088;&#x3073;&#x30B3;&#x30ED;&#x30A4;&#x30C9;&#x6D78;&#x900F;&#x81A8;&#x6F64;&#x306B;&#x304A;&#x3051;&#x308B;&#x30A4;&#x30AA;&#x30F3;&#x6D41;&#x51FA;&#x306B;&#x8D77;&#x56E0;&#x3059;&#x308B;&#x5C0E;&#x96FB;&#x6027;&#x306E;&#x5927;&#x5E45;&#x306A;&#x5909;&#x5316;&#x3092;&#x793A;&#x3057;&#x305F;&#x3002;&#x6211;&#x3005;&#x306E;&#x7D50;&#x679C;&#x306F;&#x3001;&#x30D1;&#x30EB;&#x30B9;&#x5370;&#x52A0;&#x5F8C;&#x306E;&#x79D2;&#x6570;&#x3067;&#x30A4;&#x30F3;&#x30D4;&#x30FC;&#x30C0;&#x30F3;&#x30B9;&#x6E2C;&#x5B9A;&#x304C;&#x9069;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x306A;&#x3044;&#x306E;&#x306B;&#x5BFE;&#x3057;&#x3001;&#x30D1;&#x30EB;&#x30B9;&#x306E;&#x9593;&#x306E;&#x96FB;&#x6C17;&#x4F1D;&#x5C0E;&#x5EA6;&#x3092;&#x6E2C;&#x5B9A;&#x3059;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x306B;&#x3088;&#x3063;&#x3066;&#x3001;&#x6211;&#x3005;&#x306F;&#x3001;&#x5236;&#x9650;&#x900F;&#x904E;&#x6027;&#x306E;&#x3057;&#x304D;&#x3044;&#x5024;&#x3067;&#x306F;&#x306A;&#x304F;&#x76F4;&#x63A5;&#x900F;&#x904E;&#x30EC;&#x30D9;&#x30EB;&#x3092;&#x691C;&#x51FA;&#x3059;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x304C;&#x3067;&#x304D;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x3092;&#x793A;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x308B;&#x3002;

&#x7D30;&#x80DE;&#x61F8;&#x6FC1;&#x6DB2;&#x306E;&#x4F1D;&#x5C0E;&#x5EA6;&#x306B;&#x53CA;&#x307C;&#x3059;&#x7D30;&#x80DE;&#x30A8;&#x30EC;&#x30AF;&#x30C8;&#x30ED;&#x30DD;&#x30EC;&#x30FC;&#x30B7;&#x30E7;&#x30F3;&#x306E;&#x52B9;&#x679C;

&#xADF8;&#xB807;&#xC9C0; &#xC54A;&#xC73C;&#xBA74; &#xC140; &#xC785;&#xB825;&#xD560; &#xC218; &#xC5C6;&#xB294; &#xBD84;&#xC790;&#xC758; &#xC99D;&#xAC00; &#xB9C9; &#xD6A1;&#xB2E8; &#xC218;&#xC1A1; &#xACE0;&#xC555; &#xD384;&#xC2A4; &#xACB0;&#xACFC; &#xC801;&#xC6A9; &#xD558;&#xB294; &#xB3D9;&#xC548; &#xC138;&#xD3EC; &#xB9C9;&#xC758; &#xC99D;&#xAC00; &#xCE68;&#xD22C;&#xC131;. &#xC138;&#xD3EC; &#xB9C9;&#xC758; &#xCE68;&#xD22C;&#xC131;&#xC744; &#xC99D;&#xAC00; &#xC99D;&#xAC00; &#xB9C9; &#xC804;&#xB3C4;&#xB3C4;; &#xB3D9;&#xBC18; &#xD558;&#xB294; &#xB530;&#xB77C;&#xC11C;, &#xC804;&#xAE30; &#xC804;&#xB3C4;&#xB3C4; &#xCE21;&#xC815; &#xD558; &#xC5EC; permeabilized &#xC870;&#xC9C1; &#xC815;&#xB3C4; &#xC2E4;&#xC2DC;&#xAC04;&#xC73C;&#xB85C; &#xBAA8;&#xB2C8;&#xD130;&#xB9C1;&#xD560; &#xC218; &#xC788;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xC774; &#xBB38;&#xC11C;&#xC5D0;&#xC11C;&#xB294; &#xC140; &#xC11C; &#xC2A4; &#xD39C; &#xC158;&#xC758; &#xC804;&#xB3C4;&#xB3C4;&#xC5D0; &#xACE0;&#xC555; &#xD384;&#xC2A4;&#xC5D0; &#xC758;&#xD574; &#xBC1C;&#xC0DD; &#xD558;&#xB294; &#xC140; electroporation &#xD6A8;&#xACFC; &#xC911; &#xC804;&#xB958; &#xC804;&#xC555; &#xCE21;&#xC815; &#xBC0F; &#xC784;&#xD53C;&#xB358;&#xC2A4; &#xCE21;&#xC815; &#xD558;&#xAE30; &#xC804;&#xACFC; &#xD6C4; &#xD384;&#xC2A4; &#xC751;&#xC6A9; &#xD504;&#xB85C;&#xADF8;&#xB7A8; &#xC5F0;&#xAD6C; &#xD588;&#xB2E4;. &#xB3D9;&#xC2DC; permeabilized &#xBC0F; &#xC0B4;&#xC544;&#xB0A8;&#xC740; &#xC138;&#xD3EC;&#xC758; &#xBC31;&#xBD84;&#xC728;&#xC744; &#xACB0;&#xC815; &#xD588;&#xB2E4; &#xACE0; &#xC0BC; &#xD22C; &#xBD93;&#xAE30;&#xC758; &#xBC94;&#xC704;&#xC5D0;&#xC11C; &#xCE21;&#xC815; &#xB429;&#xB2C8;&#xB2E4;. 8 &#xAE30;&#xCC28; &#xC140; &#xC11C; &#xC2A4; &#xD39C; &#xC158;&#xC758; &#xC804;&#xB3C4;&#xB3C4;&#xC5D0; &#xC77C;&#xC2DC;&#xC801;&#xC778; &#xC99D;&#xAC00; &#xD384;&#xC2A4;&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xC644;&#xC804; &#xD55C; &#xD734;&#xC2DD;&#xC73C;&#xB85C; &#xB0AE;&#xC740; &#xB192;&#xC740; &#xC804;&#xB3C4;&#xC131; &#xB9E4;&#xCCB4;&#xC5D0;&#xC11C; permeabilization &#xC784;&#xACC4;&#xAC12; &#xC774;&#xC0C1; &#xC5BB;&#xC740; &lt; 1 &#xBBF8; &#xCD1D; &#xC804;&#xB3C4;&#xC131; &#xBCC0;&#xD654; &#xBC0F; &#xC784;&#xD53C;&#xB358;&#xC2A4; &#xCE21;&#xC815; &#xC774;&#xC628; &#xACBD;&#xACFC; &#xC778;&#xD574; &#xC804;&#xB3C4;&#xC131; &#xB0AE;&#xC740; &#xC804;&#xB3C4;&#xC131; &#xB9E4;&#xCCB4;&#xC640; &#xBBF8;&#xB514;&#xC5B4; &#xBAA8;&#xB450; &#xAD50; &#xC9C8; &#xC0BC; &#xD22C; &#xBD93;&#xAE30;&#xC5D0; &#xC0C1;&#xB2F9;&#xD55C; &#xBCC0;&#xD654; &#xBCF4;&#xC600;&#xB2E4;. &#xC6B0;&#xB9AC;&#xC758; &#xACB0;&#xACFC; &#xC784;&#xD53C;&#xB358;&#xC2A4; &#xCE21;&#xC815; &#xD384;&#xC2A4; &#xC751;&#xC6A9; &#xD504;&#xB85C;&#xADF8;&#xB7A8; &#xD6C4; &#xCD08;&#xC5D0; &#xC801;&#xD569; &#xD558;&#xC9C0; &#xC54A;&#xC740; &#xBC18;&#xBA74; &#xD384;&#xC2A4; &#xB3D9;&#xC548; &#xC804;&#xAE30; &#xC804;&#xB3C4;&#xB3C4; &#xCE21;&#xC815; &#xD558; &#xC5EC; &#xC6B0;&#xB9AC;&#xAC00; &#xAC80;&#xC0C9;&#xD560; &#xC218; &#xC788;&#xB294;&#xC9C0; &#xC81C;&#xD55C; permeabilization &#xC784;&#xACC4;&#xAC12; &#xD558;&#xC9C0;&#xB9CC; &#xC9C1;&#xC811; permeabilization &#xC218;&#xC900;&#xC744; &#xBCF4;&#xC5EC; &#xC90D;&#xB2C8;&#xB2E4;.

&#xC140; &#xC11C; &#xC2A4; &#xD39C; &#xC158;&#xC758; &#xC804;&#xB3C4;&#xB3C4;&#xC5D0; &#xC140; electroporation&#xC758; &#xD6A8;&#xACFC;.

Un aumento de la permeabilidad de una membrana celular durante la aplicaci&#xF3;n de alto voltaje resultados legumbres en el transporte transmembrana aumento de mol&#xE9;culas que de otro modo no puede entrar en la c&#xE9;lula. Aumento de la permeabilidad de una membrana celular est&#xE1; acompa&#xF1;ado por un aumento de conductividad membrana, por lo que, mediante la medici&#xF3;n de la conductividad el&#xE9;ctrica en la medida de tejido permeabilizaron podr&#xED;a ser monitoreado en tiempo real. En este art&#xED;culo, el efecto de la electroporaci&#xF3;n de c&#xE9;lulas causada por pulsos de alta tensi&#xF3;n en la conductividad de una suspensi&#xF3;n de c&#xE9;lulas fue estudiado por corriente-voltaje durante las mediciones de impedancia y medici&#xF3;n antes y despu&#xE9;s de la aplicaci&#xF3;n de impulsos. Al mismo tiempo el porcentaje de c&#xE9;lulas permeabilizadas y sobrevivieron se determin&#xF3; y se midi&#xF3; el grado de hinchamiento osm&#xF3;tico. Para un tren de ocho pulsos un aumento transitorio en la conductividad de una suspensi&#xF3;n celular se obtuvo por encima del umbral de permeabilizaci&#xF3;n en el medio de baja y alta conductividad, con una completa relajaci&#xF3;n en &#x26;lt;1 s. Total de las variaciones de la conductividad y las mediciones de impedancia mostraron cambios sustanciales en la conductividad debido a la emanaci&#xF3;n de iones de baja conductividad media y la hinchaz&#xF3;n de coloide-osm&#xF3;tica en ambos medios. Nuestros resultados muestran que mediante la medici&#xF3;n de la conductividad el&#xE9;ctrica durante los pulsos que puede detectar el umbral l&#xED;mite de permeabilizaci&#xF3;n, pero no directamente en el nivel de permeabilizaci&#xF3;n, mientras que las mediciones de impedancia en cuesti&#xF3;n de segundos despu&#xE9;s de la aplicaci&#xF3;n de impulsos no son adecuados.

Efecto de la electroporaci&#xF3;n de la c&#xE9;lula en la conductividad de una suspensi&#xF3;n celular

&#x8FD9;&#x4EFD;&#x8C03;&#x67E5;&#x5BF9;&#x7EC6;&#x80DE;&#x819C; electropermeabilization &#x7EC6;&#x80DE;&#x5BC6;&#x5EA6;&#x7684;&#x5F71;&#x54CD;&#x3002;&#x5BC6;&#x7EC6;&#x80DE;&#x60AC;&#x6D6E; (&#x8FBE; 400 x 10(6) &#x7EC6;&#x80DE;/ml&#xFF09;&#xFF0C;&#x8FD9;&#x662F;&#x4E00;&#x4E2A;&#x7B80;&#x5355;&#x7684;&#x6A21;&#x578B;&#x7814;&#x7A76; electropermeabilization &#x7684;&#x7EC4;&#x7EC7;&#x4E0A;&#x8FDB;&#x884C;&#x4E86;&#x8BD5;&#x9A8C;&#x3002;&#x4E0E;&#x8367;&#x5149;&#x6D4B;&#x8BD5;&#x4F7F;&#x7528;&#x7898;&#x5316;&#x4E19;&#x952D;&#x6765;&#x83B7;&#x53D6;&#x900F;&#x6027;&#x5316;&#x7EC6;&#x80DE; (&#x5373;&#x79EF;&#x6781;&#x7684;&#x8367;&#x5149;) &#x7684;&#x5E73;&#x5747;&#x6570;&#xFF0C;&#x6BCF;&#x4E2A;&#x5355;&#x5143;&#x683C;&#x4E2D; &#xFF08;&#x52A0;&#x8F7D;&#x67D3;&#x6599;&#x7684;&#x91CF;&#xFF09; &#x7684;&#x5E73;&#x5747;&#x8367;&#x5149;&#x6D4B;&#x5B9A;&#x901A;&#x900F;&#x6027;&#x589E;&#x9AD8;&#x3002;&#x5728;&#x6211;&#x4EEC;&#x7684;&#x7814;&#x7A76;&#xFF0C;&#x4F5C;&#x4E3A;&#x7EC6;&#x80DE;&#x5BC6;&#x5EA6;&#x589E;&#x81F3; 10 x 10(6) x 10(6) &#x7EC6;&#x80DE;/ml&#xFF0C;&#x900F;&#x6027;&#x5316;&#x7EC6;&#x80DE;&#x51CF;&#x5C11;&#x4E86;&#x7EA6; 50%&#x7684;&#x5206;&#x6570; 400 &#x7684;&#x3002;&#x6211;&#x4EEC;&#x8BA4;&#x4E3A;&#xFF0C;&#x56E0;&#x4E3A;&#x8FD9;&#x4E2A;&#x5730;&#x65B9;&#x7535;&#x573A;&#x8BF1;&#x5BFC;&#x7684;&#x8DE8;&#x819C;&#x7535;&#x538B;&#x7684;&#x632F;&#x5E45;&#x51CF;&#x5C11;&#x6240;&#x5BFC;&#x81F4;&#x7684;&#x53D8;&#x5316;&#x3002;&#x82E5;&#x8981;&#x83B7;&#x53D6;&#x540C;&#x4E00;&#x5206;&#x6570;&#x4E0E; 10 x 10(6) &#x548C; 400 x 10(6)&#xFF0C;&#x6BCF;&#x6BEB;&#x5347;&#x7EC6;&#x80DE;&#x60AC;&#x6D6E;&#x6DB2;&#x4E2D;&#x7684;&#x7EC6;&#x80DE;&#x901A;&#x900F;&#x6027;&#x589E;&#x9AD8;&#xFF0C;&#x540E;&#x8005;&#x6682;&#x505C;&#x4E0D;&#x5F97;&#x4E0D;&#x5C06;&#x4E0E;&#x66F4;&#x9AD8;&#x7684;&#x8109;&#x51B2;&#x5E45;&#x5EA6;&#xFF0C;&#x6570;&#x503C;&#x8BA1;&#x7B97;&#x4E0E;&#x5B9A;&#x6027;&#x534F;&#x8BAE;&#x662F;&#x901A;&#x900F;&#x6027;&#x7684;&#x6539;&#x53D8;&#x3002;&#x5355;&#x5143;&#x683C;&#x7684; electroloading &#x4E5F;&#x4E0B;&#x964D;&#x4E0E;&#x7EC6;&#x80DE;&#x5BC6;&#x5EA6;&#x3002;&#x51CF;&#x5C11;&#x662F;&#x660E;&#x663E;&#x5927;&#x4E8E;&#x9884;&#x671F;&#x4EC5;&#x4ECE;&#x900F;&#x6027;&#x5316;&#x7684;&#x7EC6;&#x80DE;&#x5F62;&#x6001;&#x4E0A;&#x7684;&#x5DEE;&#x5F02;&#x3002;&#x8367;&#x5149;&#x7684;&#x989D;&#x5916;&#x51CF;&#x5C11;&#x4E3B;&#x8981;&#x662F;&#x7531;&#x4E8E;&#x540E;&#x51CF;&#x5C11;&#x5230;&#x900F;&#x819C;&#x80DE;&#x5916;&#x67D3;&#x6599;&#x53EF;&#x7528;&#x6027;&#x548C;&#x963B;&#x788D;&#x67D3;&#x6599;&#x6269;&#x6563;&#x8FDB;&#x5165;&#x7EC6;&#x80DE;&#x7684;&#x901A;&#x900F;&#x6027;&#x589E;&#x9AD8;&#xFF0C;&#x7EC6;&#x80DE;&#x80BF;&#x80C0;&#x3002;&#x6211;&#x4EEC;&#x8FD8;&#x6CE8;&#x610F;&#x5230;&#x91CD;&#x65B0;&#x5C01;&#x88C5;&#x7684;&#x7EC6;&#x80DE;&#x4F3C;&#x4E4E;&#x662F;&#x6162;&#x6D53;&#x60AC;&#x6D6E;&#x6DB2;&#xFF0C;&#x8FD9;&#x53EF;&#x4EE5;&#x5F52;&#x548E;&#x4E3A;&#x7EC6;&#x80DE;&#x80BF;&#x80C0;&#x9020;&#x6210;&#x7684; electropermeabilization &#x4E2D;&#x3002;

Electropermeabilization &#x6D53;&#x7EC6;&#x80DE;&#x60AC;&#x6D6E;&#x6DB2;&#x3002;

This paper investigates the influence of cell density on cell membrane electropermeabilization. The experiments were performed on dense cell suspensions (up to 400 x 10(6) cells/ml), which represent a simple model for studying electropermeabilization of tissues. Permeabilization was assayed with a fluorescence test using Propidium iodide to obtain the mean number of permeabilized cells (i.e. fluorescence positive) and the mean fluorescence per cell (amount of loaded dye). In our study, as the cell density increased from 10 x 10(6) to 400 x 10(6) cells/ml, the fraction of permeabilized cells decreased by approximately 50%. We attributed this to the changes in the local electric field, which led to a decrease in the amplitude of the induced transmembrane voltage. To obtain the same fraction of cell permeabilization in suspensions with 10 x 10(6) and 400 x 10(6) cells/ml, the latter suspension had to be permeabilized with higher pulse amplitude, which is in qualitative agreement with numerical computations. The electroloading of the cells also decreased with cell density. The decrease was considerably larger than expected from the differences in the permeabilized cell fractions alone. The additional decrease in fluorescence was mainly due to cell swelling after permeabilization, which reduced extracellular dye availability to the permeabilized membrane and hindered the dye diffusion into the cells. We also observed that resealing of cells appeared to be slower in dense suspensions, which can be attributed to cell swelling resulting from electropermeabilization.

Electropermeabilization of dense cell suspensions.

Cet article &#xE9;tudie l&#x26;#39;influence de la densit&#xE9; cellulaire sur &#xE9;lectroperm&#xE9;abilisation membrane cellulaire. Les exp&#xE9;riences ont &#xE9;t&#xE9; effectu&#xE9;es sur des suspensions cellulaires denses (jusqu&#x26;#39;&#xE0; 400 x 10 (6) cellules / ml), qui repr&#xE9;sentent un mod&#xE8;le simple pour &#xE9;tudier &#xE9;lectroperm&#xE9;abilisation des tissus. Perm&#xE9;abilisation a &#xE9;t&#xE9; test&#xE9;e avec un test de fluorescence en utilisant l&#x26;#39;iodure de propidium pour obtenir le nombre moyen de cellules perm&#xE9;abilis&#xE9;es (c.-&#xE0;-fluorescence positive) et la moyenne de fluorescence par cellule (quantit&#xE9; de colorant charg&#xE9;). Dans notre &#xE9;tude, comme la densit&#xE9; de cellules a augment&#xE9; de 10 x 10 (6) de 400 x 10 (6) cellules par ml, la fraction de cellules perm&#xE9;abilis&#xE9;es ont diminu&#xE9; d&#x26;#39;environ 50%. Nous avons attribu&#xE9; cela aux changements dans le champ &#xE9;lectrique local, ce qui a conduit &#xE0; une diminution de l&#x26;#39;amplitude de la tension transmembranaire induite. Pour obtenir la m&#xEA;me fraction de perm&#xE9;abilisation cellulaire dans des suspensions de 10 x 10 (6) et 400 x 10 (6) cellules par ml, la suspension-ci devait &#xEA;tre perm&#xE9;abilis&#xE9;es avec une amplitude d&#x26;#39;impulsion plus &#xE9;lev&#xE9;e, ce qui est en accord qualitatif avec des calculs num&#xE9;riques. Le electroloading des cellules a &#xE9;galement diminu&#xE9; avec la densit&#xE9; cellulaire. La diminution a &#xE9;t&#xE9; beaucoup plus importante que pr&#xE9;vu des diff&#xE9;rences dans les fractions cellulaires perm&#xE9;abilis&#xE9;es seuls. La diminution suppl&#xE9;mentaire de la fluorescence est due principalement &#xE0; gonflement des cellules apr&#xE8;s perm&#xE9;abilisation, ce qui a r&#xE9;duit la disponibilit&#xE9; de colorant extracellulaire de la membrane perm&#xE9;abilis&#xE9;es et entrav&#xE9; la diffusion du colorant dans les cellules. Nous avons &#xE9;galement observ&#xE9; que les cellules de fermeture de a sembl&#xE9; &#xEA;tre plus lente dans les suspensions denses, qui peuvent &#xEA;tre attribu&#xE9;s &#xE0; un gonflement des cellules r&#xE9;sultant de &#xE9;lectroperm&#xE9;abilisation.

&#xC9;lectroperm&#xE9;abilisation de suspensions cellulaires denses

Dieses Paper untersucht den Einfluss der Zelldichte auf Zellmembran Electropermeabilization. Die Experimente wurden auf dichten Zellsuspensionen (bis zu 400 X 10 6 Zellen/ml), durchgef&uuml;hrt, die ein einfaches Modell f&uuml;r die Untersuchung von Electropermeabilization Gewebe darstellen. Permeabilization wurde mit einem Fluoreszenz-Test mit Propidium Jodid um zu erhalten die mittlere Anzahl an permeabilized Zellen (d.h. Fluoreszenz positiv) und die mittlere Fluoreszenz pro Zelle (Menge der geladenen Farbstoff) normalisiert. In unserer Studie als die Zelldichte von 10 X 10 6 bis 400 x 10 6 Zellen/ml, der Bruch der permeabilized Zellen sanken um etwa 50 % erh&ouml;ht. Wir zur&uuml;ckzuf&uuml;hren dies auf die &Auml;nderungen in der lokalen elektrischen Feld f&uuml;hrte zu einem R&uuml;ckgang der Amplitude der Transmembran-induzierte Spannung. Um den gleichen Bruchteil der Zelle Permeabilization in Suspensionen mit 10 X 10 6 und 400 X 10 6 Zellen/ml zu erhalten, musste die letztere Aussetzung mit h&ouml;heren Impuls-Amplitude, permeabilized werden die qualitativen zustimmen numerische Berechnungen ist. Die Electroloading der Zellen verringert auch mit Zelldichte. Der R&uuml;ckgang war erheblich gr&ouml;&szlig;er als die Unterschiede in den Bruchteilen permeabilized Zelle allein erwarten. Der weitere R&uuml;ckgang der Fluoreszenz resultierte haupts&auml;chlich aus Zelle Swelling nach Permeabilization, das geringere extrazellul&auml;re Farbstoff Verf&uuml;gbarkeit auf die permeabilized Membrane und behindert die Diffusion von Farbstoff in die Zellen. Wir beobachteten auch, dass Neuversiegeln Zellen offenbar langsamer in dichten Aufh&auml;ngungen, die auf Handy-Schwellung infolge Electropermeabilization zur&uuml;ckzuf&uuml;hren sind.

Electropermeabilization des dichten Zellsuspensionen.

Questo libro indaga l&#39;influenza della densit&agrave; delle cellule sulla membrana delle cellule electropermeabilization. Gli esperimenti sono stati eseguiti su sospensioni cellulari denso (fino a 400 x 10 cellule/ml), che rappresentano un modello semplice per studiare electropermeabilization dei tessuti. Permeabilization &egrave; stata analizzata con un test di fluorescenza utilizzando ioduro di Propidium per ottenere il numero medio di cellule permeabilized (cio&egrave; fluorescenza positiva) e la media di fluorescenza per ogni cella (quantit&agrave; di colorante caricato). Nel nostro studio, come la densit&agrave; cellulare &egrave; aumentata da 10 x 10 a 400 x 10 cellule/ml, la frazione di celle permeabilized sono diminuiti di circa il 50%. Abbiamo attribuito questo ai cambiamenti nel campo elettrico locale, che ha condotto ad una diminuzione dell&#39;ampiezza della tensione indotta transmembrana. Per ottenere la stessa frazione di permeabilization cella in sospensioni con 10 x 10 e 400 x 10 cellule/ml, la sospensione di quest&#39;ultima doveva essere permeabilized con maggiore ampiezza di impulso, che &egrave; qualitativa d&#39;accordo con i calcoli numerici. La electroloading delle cellule &egrave; diminuito anche con la densit&agrave; delle cellule. La diminuzione &egrave; stata notevolmente maggiore rispetto al previsto dalle differenze nelle frazioni permeabilized cella da solo. L&#39;ulteriore diminuzione in fluorescenza era principalmente a causa del gonfiore delle cellule dopo il permeabilization, ridotta disponibilit&agrave; di tintura extracellulare alla membrana permeabilized e ostacolato la diffusione del colorante nelle cellule. Abbiamo anche osservato che una chiusura delle cellule sembrava essere pi&ugrave; lento in sospensioni dense, che possono essere attribuite alla cella gonfiore derivante da electropermeabilization.

Electropermeabilization delle sospensioni di cellule denso.

&#x672C;&#x8AD6;&#x6587;&#x3067;&#x306F;&#x3001;&#x7D30;&#x80DE;&#x819C;electropermeabilization&#x4E0A;&#x3067;&#x306E;&#x7D30;&#x80DE;&#x5BC6;&#x5EA6;&#x306E;&#x5F71;&#x97FF;&#x3092;&#x8ABF;&#x67FB;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x5B9F;&#x9A13;&#x306F;&#x3001;&#x7D44;&#x7E54;&#x306E;electropermeabilization&#x3092;&#x7814;&#x7A76;&#x3059;&#x308B;&#x305F;&#x3081;&#x306E;&#x5358;&#x7D14;&#x306A;&#x30E2;&#x30C7;&#x30EB;&#x3092;&#x8868;&#x73FE;&#x3059;&#x308B;&#x7DFB;&#x5BC6;&#x306A;&#x7D30;&#x80DE;&#x61F8;&#x6FC1;&#x6DB2;&#xFF08;&#x6700;&#x5927;400&#xD7;10&#xFF08;6&#xFF09;&#x7D30;&#x80DE;/ ml&#xFF09;&#x3067;&#x884C;&#x308F;&#x308C;&#x305F;&#x3002;&#x900F;&#x904E;&#x306F;&#x3001;&#x819C;&#x900F;&#x904E;&#x3057;&#x305F;&#x7D30;&#x80DE;&#x306E;&#x5E73;&#x5747;&#x6570;&#xFF08;&#x6B63;&#x3059;&#x306A;&#x308F;&#x3061;&#x86CD;&#x5149;&#xFF09;&#x3068;&#x7D30;&#x80DE;&#x3042;&#x305F;&#x308A;&#x306E;&#x5E73;&#x5747;&#x86CD;&#x5149;&#xFF08;&#x30ED;&#x30FC;&#x30C9;&#x3055;&#x308C;&#x305F;&#x8272;&#x7D20;&#x306E;&#x91CF;&#xFF09;&#x3092;&#x53D6;&#x5F97;&#x3059;&#x308B;&#x305F;&#x3081;&#x306B;&#x30E8;&#x30A6;&#x5316;&#x30D7;&#x30ED;&#x30D4;&#x30B8;&#x30A6;&#x30E0;&#x3092;&#x7528;&#x3044;&#x305F;&#x86CD;&#x5149;&#x30C6;&#x30B9;&#x30C8;&#x3067;&#x6E2C;&#x5B9A;&#x3057;&#x305F;&#x3002;&#x7D30;&#x80DE;&#x5BC6;&#x5EA6;&#x304C;400&#xD7;10&#xFF08;6&#xFF09;&#x7D30;&#x80DE;/ ml&#x306B;10&#xD7;10&#xFF08;6&#xFF09;&#x304B;&#x3089;&#x5897;&#x52A0;&#x3057;&#x305F;&#x3068;&#x3057;&#x3066;&#x3001;&#x672C;&#x7814;&#x7A76;&#x3067;&#x306F;&#x3001;&#x819C;&#x900F;&#x904E;&#x3057;&#x305F;&#x7D30;&#x80DE;&#x306E;&#x5272;&#x5408;&#x306F;&#x7D04;50&#xFF05;&#x6E1B;&#x5C11;&#x3057;&#x305F;&#x3002;&#x6211;&#x3005;&#x306F;&#x3001;&#x8A98;&#x5C0E;&#x8CAB;&#x901A;&#x96FB;&#x5727;&#x306E;&#x632F;&#x5E45;&#x306E;&#x6E1B;&#x5C11;&#x306B;&#x3064;&#x306A;&#x304C;&#x3063;&#x305F;&#x5C40;&#x6240;&#x7684;&#x306A;&#x96FB;&#x754C;&#x306E;&#x5909;&#x5316;&#x306B;&#x3053;&#x308C;&#x3092;&#x8D77;&#x56E0;&#x3059;&#x308B;&#x3002; 10&#xD7;10&#xFF08;6&#xFF09;&#x3001;400&#xD7;10&#xFF08;6&#xFF09;&#x7D30;&#x80DE;/ ml&#x306E;&#x61F8;&#x6FC1;&#x6DB2;&#x4E2D;&#x306E;&#x7D30;&#x80DE;&#x900F;&#x904E;&#x6027;&#x306E;&#x540C;&#x3058;&#x5272;&#x5408;&#x3092;&#x53D6;&#x5F97;&#x3059;&#x308B;&#x306B;&#x306F;&#x3001;&#x5F8C;&#x8005;&#x306E;&#x61F8;&#x6FC1;&#x6DB2;&#x306F;&#x3001;&#x6570;&#x5024;&#x8A08;&#x7B97;&#x3068;&#x5B9A;&#x6027;&#x7684;&#x306B;&#x4E00;&#x81F4;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x308B;&#x3088;&#x308A;&#x9AD8;&#x3044;&#x30D1;&#x30EB;&#x30B9;&#x306E;&#x632F;&#x5E45;&#x3068;&#x306E;&#x900F;&#x904E;&#x6027;&#x306B;&#x3059;&#x308B;&#x5FC5;&#x8981;&#x304C;&#x3042;&#x308A;&#x307E;&#x3057;&#x305F;&#x3002;&#x7D30;&#x80DE;&#x306E;electroloading&#x306F;&#x307E;&#x305F;&#x3001;&#x7D30;&#x80DE;&#x5BC6;&#x5EA6;&#x304C;&#x6E1B;&#x5C11;&#x3057;&#x305F;&#x3002;&#x6E1B;&#x5C11;&#x306F;&#x3001;&#x5358;&#x72EC;&#x3067;&#x900F;&#x904E;&#x30BB;&#x30EB;&#x753B;&#x306E;&#x9055;&#x3044;&#x304B;&#x3089;&#x3001;&#x4E88;&#x60F3;&#x3088;&#x308A;&#x304B;&#x306A;&#x308A;&#x5927;&#x304D;&#x304B;&#x3063;&#x305F;&#x3002;&#x86CD;&#x5149;&#x306E;&#x8FFD;&#x52A0;&#x306E;&#x6E1B;&#x5C11;&#x306F;&#x3001;&#x900F;&#x904E;&#x819C;&#x3078;&#x306E;&#x7D30;&#x80DE;&#x5916;&#x8272;&#x7D20;&#x306E;&#x53EF;&#x7528;&#x6027;&#x3092;&#x4F4E;&#x4E0B;&#x3055;&#x305B;&#x3001;&#x7D30;&#x80DE;&#x5185;&#x3078;&#x306E;&#x67D3;&#x6599;&#x62E1;&#x6563;&#x3092;&#x59A8;&#x3052;&#x900F;&#x904E;&#x5F8C;&#x306E;&#x816B;&#x308C;&#x306E;&#x30BB;&#x30EB;&#x306B;&#x3057;&#x305F;&#x3053;&#x3068;&#x306A;&#x3069;&#x306B;&#x3088;&#x308B;&#x3082;&#x306E;&#x3067;&#x3059;&#x3002;&#x6211;&#x3005;&#x306F;&#x307E;&#x305F;&#x3001;&#x7D30;&#x80DE;&#x306E;&#x518D;&#x5C01;&#x9396;&#x304C;electropermeabilization&#x304B;&#x3089;&#x5F97;&#x3089;&#x308C;&#x305F;&#x7D30;&#x80DE;&#x306E;&#x81A8;&#x6F64;&#x306B;&#x8D77;&#x56E0;&#x3059;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x304C;&#x3067;&#x304D;&#x307E;&#x3059;&#x9AD8;&#x5BC6;&#x5EA6;&#x61F8;&#x6FC1;&#x6DB2;&#x306B;&#x9045;&#x3044;&#x3088;&#x3046;&#x306B;&#x898B;&#x3048;&#x305F;&#x3053;&#x3068;&#x3092;&#x89B3;&#x5BDF;&#x3057;&#x305F;&#x3002;

&#x9AD8;&#x5BC6;&#x5EA6;&#x306E;&#x7D30;&#x80DE;&#x61F8;&#x6FC1;&#x6DB2;&#x306E;Electropermeabilization

&#xC774; &#xC885;&#xC774; &#xC138;&#xD3EC; &#xB9C9; electropermeabilization&#xC5D0; &#xC140; &#xBC00;&#xB3C4;&#xC758; &#xC601;&#xD5A5;&#xC744; &#xC870;&#xC0AC; &#xD588;&#xB2E4;. &#xACE0;&#xBC00;&#xB3C4; &#xC138;&#xD3EC; &#xC815;&#xC9C0; (&#xCD5C;&#xB300; 400 x &#xC2DC;&#xBBFC;&#xAD8C;&#xC774; &#xC140;/ml), &#xC870;&#xC9C1; electropermeabilization &#xC5F0;&#xAD6C;&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xAC04;&#xB2E8;&#xD55C; &#xBAA8;&#xB378;&#xC744; &#xB300;&#xD45C; &#xD558;&#xB294; &#xC2E4;&#xD5D8; &#xC218;&#xD589; &#xD588;&#xB2E4;. Permeabilization&#xC740; Propidium &#xC694;&#xC624;&#xB4DC; &#xD654;&#xB97C; &#xC0AC;&#xC6A9; &#xD558; &#xC5EC; permeabilized &#xC140; (&#xC989;, &#xD615;&#xAD11; &#xAE0D;&#xC815;&#xC801;&#xC778;) &#xB73B; &#xC218; &#xBC0F; &#xC140; (&#xB85C;&#xB4DC; &#xB41C; &#xC5FC;&#xB8CC; &#xC591;&#xC758;) &#xB2F9; &#xD3C9;&#xADE0; &#xD615;&#xAD11; &#xD615;&#xAD11; &#xD14C;&#xC2A4;&#xD2B8;&#xC640; &#xBD84;&#xC11D; &#xD588;&#xB2E4;. &#xC140; &#xBC00;&#xB3C4; &#xC99D;&#xAC00; 10 &#xBC30; &#xC2DC;&#xBBFC;&#xAD8C;&#xC774;&#xC5D0;&#xC11C; &#xC2DC;&#xBBFC;&#xAD8C;&#xC774; &#xC140;/ml, permeabilized &#xC138;&#xD3EC;&#xAC00; &#xC57D; 50% &#xAC10;&#xC18C;&#xC758; &#xBD84;&#xC218; x 400&#xC73C;&#xB85C; &#xC6B0;&#xB9AC;&#xC758; &#xC5F0;&#xAD6C;. &#xC6B0;&#xB9AC;&#xB294; &#xB9C9; &#xD6A1;&#xB2E8; &#xC720;&#xB3C4; &#xC804;&#xC555;&#xC758; &#xC9C4;&#xD3ED; &#xAC10;&#xC18C;&#xB97C; &#xC8FC;&#xB3C4; &#xB85C;&#xCEEC; &#xC804;&#xAE30;&#xC7A5;&#xC758; &#xBCC0;&#xD654;&#xC5D0; &#xC774;&#xAC83;&#xC744; &#xB3CC;&#xB838;&#xB2E4;. 400 X &#xC2DC;&#xBBFC;&#xAD8C;&#xC774; &#xC140;/ml&#xC640; 10 x &#xC2DC;&#xBBFC;&#xAD8C;&#xC774; &#xC815;&#xC9C0;&#xC5D0; &#xC140; permeabilization &#xAC19;&#xC740; &#xC77C;&#xBD80; &#xC5BB;&#xC73C;&#xB824;&#xACE0; &#xD6C4;&#xC790;&#xC758; &#xC815;&#xC9C0; &#xC22B;&#xC790; &#xACC4;&#xC0B0;&#xC73C;&#xB85C; &#xC9C8;&#xC801; &#xACC4;&#xC57D;&#xC5D0; &#xB192;&#xC740; &#xD384;&#xC2A4; &#xC9C4;&#xD3ED;&#xACFC; permeabilized &#xD588;&#xB2E4;. &#xC140;&#xC758; electroloading &#xC140; &#xBC00;&#xB3C4; &#xB610;&#xD55C; &#xAC10;&#xC18C; &#xD588;&#xB2E4;. &#xAC10;&#xC18C; &#xD63C;&#xC790; permeabilized &#xC140; &#xBD84;&#xC218;&#xC758; &#xCC28;&#xC774;&#xC5D0;&#xC11C; &#xC608;&#xC0C1; &#xBCF4;&#xB2E4; &#xC0C1;&#xB2F9;&#xD788; &#xD07D;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xD615;&#xAD11;&#xC758; &#xCD94;&#xAC00; &#xAC10;&#xC18C; permeabilization permeabilized &#xB9C9; &#xC138;&#xD3EC; &#xC678; &#xC5FC;&#xB8CC; &#xAC00;&#xC6A9;&#xC131; &#xAC10;&#xC18C; &#xD558; &#xACE0; &#xC138;&#xD3EC;&#xC5D0; &#xC5FC;&#xB8CC; &#xD655;&#xC0B0;&#xC744; &#xBC29;&#xD574; &#xD558;&#xB294; &#xD6C4; &#xC140; &#xBD93;&#xAE30; &#xB54C;&#xBB38; &#xC774;&#xC5C8;&#xB2E4;. &#xC6B0;&#xB9AC;&#xB294; &#xB610;&#xD55C; &#xADF8; &#xBD93;&#xAE30;&#xAC00; electropermeabilization&#xC5D0;&#xC11C; &#xACB0;&#xACFC; &#xC140;&#xC5D0; &#xD45C;&#xC2DC; &#xB420; &#xC218; &#xC788;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4; &#xBC00;&#xB3C4;&#xAC00; &#xC815;&#xC9C0;&#xC5D0;&#xC11C; &#xC18D;&#xB3C4;&#xAC00; &#xB290;&#xB824;&#xC9C8; &#xC218; &#xB4F1;&#xC7A5; &#xC140; resealing &#xAD00;&#xCC30; &#xD588;&#xB2E4;.

&#xACE0;&#xBC00;&#xB3C4; &#xC138;&#xD3EC; &#xC815;&#xC9C0;&#xC758; Electropermeabilization&#xC785;&#xB2C8;&#xB2E4;.

En este trabajo se investiga la influencia de la densidad celular en electropermeabilization de la membrana celular. Los experimentos se realizaron en suspensiones celulares densas (hasta 400 x 10 (6) c&#xE9;lulas / ml), que representan un modelo simple para estudiar electropermeabilization de los tejidos. Permeabilizaci&#xF3;n se ensay&#xF3; con una prueba de fluorescencia utilizando yoduro de propidio para obtener el n&#xFA;mero medio de c&#xE9;lulas permeabilizadas (es decir fluorescencia positiva) y la fluorescencia media por c&#xE9;lula (cantidad de tinte cargado). En nuestro estudio, como la densidad celular aument&#xF3; de 10 x 10 (6) a 400 x 10 (6) c&#xE9;lulas / ml, la fracci&#xF3;n de c&#xE9;lulas permeabilizadas disminuido en aproximadamente un 50%. Se atribuy&#xF3; a los cambios en el campo el&#xE9;ctrico local, lo que condujo a una disminuci&#xF3;n en la amplitud de la tensi&#xF3;n inducida transmembrana. Para obtener la misma fracci&#xF3;n de permeabilizaci&#xF3;n de c&#xE9;lulas en suspensi&#xF3;n con 10 x 10 (6) y 400 x 10 (6) c&#xE9;lulas / ml, la &#xFA;ltima suspensi&#xF3;n tuvo que ser permeabilizaron con mayor amplitud del pulso, que est&#xE1; de acuerdo con c&#xE1;lculos num&#xE9;ricos cualitativo. El electroloading de las c&#xE9;lulas tambi&#xE9;n se redujo con la densidad celular. La disminuci&#xF3;n fue considerablemente mayor que el esperado a partir de las diferencias en las fracciones celulares permeabilizadas solos. La reducci&#xF3;n adicional de la fluorescencia se debi&#xF3; principalmente a la celda de la inflamaci&#xF3;n despu&#xE9;s de la permeabilizaci&#xF3;n, que redujo la disponibilidad de medio de contraste extracelular de la membrana permeabilized y ha obstaculizado la difusi&#xF3;n de contraste en las c&#xE9;lulas. Tambi&#xE9;n se observ&#xF3; que resellado de las c&#xE9;lulas que parec&#xED;a ser m&#xE1;s lento en suspensiones densas, que pueden ser atribuidos a la hinchaz&#xF3;n de la c&#xE9;lula resultante de electropermeabilization.

Electropermeabilization de suspensiones celulares densas

&#x7898;&#x5316;&#x4E19;&#x952D;&#x5230; electropermeabilized &#x4E2D;&#x56FD;&#x4ED3;&#x9F20;&#x5375;&#x5DE2;&#x7EC6;&#x80DE;&#x7684;&#x8FD0;&#x8F93;&#x76D1;&#x6D4B;&#x4E0E;&#x5149;&#x7535;&#x500D;&#x589E;&#x7BA1;&#x671F;&#x95F4;&#x548C;&#x4E4B;&#x540E;&#x7684;&#x7535;&#x8109;&#x51B2;&#x3002;&#x4ECE; 200 &#x6B21;&#x51B3;&#x8BAE;&#x8C03;&#x67E5;&#x4E86;&#x5BF9;&#x8FD0;&#x8F93;&#x52A8;&#x529B;&#x5B66;&#x8109;&#x51B2;&#x5E45;&#x5EA6;&#x548C;&#x6301;&#x7EED;&#x65F6;&#x95F4;&#x7684;&#x5F71;&#x54CD;&#x4ECE; 8 &#x5230; 400 &#x5FAE;&#x7C73;&#x4E3A; 4 &#x6BEB;&#x79D2;&#x7684;&#x65F6;&#x95F4;&#x95F4;&#x9694;&#x5728; ns s&#x3002;&#x8FD0;&#x8F93;&#x6210;&#x4E3A;&#x63A2;&#x6D4B;&#xFF0C;&#x56E0;&#x4E3A;&#x65E9;&#x5728; 60 &#x5FAE;&#x7C73;&#x7684;&#x8109;&#x640F;&#xFF0C;&#x5F00;&#x59CB;&#x540E;&#x6301;&#x7EED;&#x6570;&#x5341;&#x79D2;&#x540E;&#x8109;&#x640F;&#xFF0C;&#x4E14;&#x901F;&#x5EA6;&#x66F4;&#x5FEB;&#x548C;&#x66F4;&#x5927;&#x66F4;&#x9AD8;&#x7684;&#x8109;&#x51B2;&#x632F;&#x5E45;&#x548C; &#xFF08;&#x6216;&#xFF09; &#x8F83;&#x957F;&#x7684;&#x8109;&#x51B2;&#x6301;&#x7EED;&#x65F6;&#x95F4;&#x3002;&#x4E0E;&#x56FA;&#x5B9A;&#x7684;&#x8109;&#x51B2;&#x53C2;&#x6570;&#xFF0C;&#x8FD0;&#x8F93;&#x5230;&#x5408;&#x6D41;&#x5355;&#x5206;&#x5B50;&#x819C;&#x7684;&#x7EC6;&#x80DE;&#x662F;&#x6BD4;&#x6210;&#x60AC;&#x6D6E;&#x7EC6;&#x80DE;&#x7684;&#x8FD0;&#x8F93;&#x901F;&#x5EA6;&#x6162;&#x3002;&#x4E0D;&#x540C;&#x65F6;&#x95F4;&#x8BFE;&#x7A0B;&#x7684;&#x8367;&#x5149;&#x589E;&#x52A0;&#x4E86;&#x671F;&#x95F4;&#x548C;&#x5728;&#x4E0D;&#x540C;&#x7684;&#x65F6;&#x95F4;&#x540E;&#x53EF;&#x89C2;&#x5BDF;&#x5230;&#x8109;&#x640F;&#xFF0C;&#x53CD;&#x6620;&#x4E86;&#x6B63;&#x5728;&#x8FDB;&#x884C;&#x819C;&#x5F00;&#x62C6;&#x548C;&#x4E0D;&#x540C;&#x7684;&#x4F20;&#x8F93;&#x673A;&#x5236;&#x3002;&#x6570;&#x636E;&#x4E0E;&#x7406;&#x8BBA;&#x9884;&#x6D4B;&#x7684;&#x80FD;&#x65AF;&#x7279;-&#x666E;&#x6717;&#x514B;&#x65B9;&#x7A0B;&#x4E86;&#x5BF9;&#x6BD4;&#x3002;&#x5EF6;&#x8FDF;&#x540E;&#x7684; 60 &#x5FAE;&#x7C73;&#xFF0C;&#x8367;&#x5149;&#x8109;&#x51B2;&#x671F;&#x95F4;&#x7684;&#x65F6;&#x95F4;&#x8FDB;&#x7A0B;&#x662F;&#x8FD1;&#x4F3C;&#x7EBF;&#x6027;&#xFF0C;&#x652F;&#x6301;&#x4E3B;&#x8981;&#x7535;&#x6CF3;&#x80FD;&#x65AF;&#x7279;-&#x666E;&#x6717;&#x514B;&#x65B9;&#x7A0B;&#x7684;&#x89E3;&#x3002;&#x65F6;&#x95F4;&#x8BFE;&#x7A0B;&#x540E;&#x540C;&#x610F;&#x80FD;&#x65AF;&#x7279;-&#x666E;&#x6717;&#x514B;&#x65B9;&#x7A0B;&#x7684;&#x6269;&#x6563;&#x578B;&#x89E3;&#x5982;&#x679C;&#x819C;&#x5F00;&#x62C6;&#x5047;&#x5B9A;&#x5305;&#x542B;&#x4E09;&#x4E2A;&#x4E0D;&#x540C;&#x7684;&#x90E8;&#x5206;&#xFF0C;&#x65F6;&#x95F4;&#x5355;&#x4F4D;&#x4E3A;&#x5FAE;&#x79D2;&#xFF0C;&#x6570;&#x4E07;&#x7684;&#x8303;&#x56F4;&#x4E2D;&#x7684;&#x5E38;&#x6570;&#x5FAE;&#x79D2;&#xFF0C;&#x6570;&#x767E;&#x540D;&#x548C;&#x6570;&#x5341;&#x79D2;&#xFF0C;&#x5206;&#x522B;&#x7684;&#x8109;&#x640F;&#x3002;

&#x52A8;&#x529B;&#x5B66;&#x7814;&#x7A76;&#x7684; electropermeabilized &#x7EC6;&#x80DE;&#x53D8;&#x6210;&#x5C0F;&#x5206;&#x5B50;&#x56E2;&#x7684;&#x8DE8;&#x819C;&#x8FD0;&#x8F93;&#x3002;

The transport of propidium iodide into electropermeabilized Chinese hamster ovary cells was monitored with a photomultiplier tube during and after the electric pulse. The influence of pulse amplitude and duration on the transport kinetics was investigated with time resolutions from 200 ns to 4 ms in intervals from 400 micros to 8 s. The transport became detectable as early as 60 micros after the start of the pulse, continued for tens of seconds after the pulse, and was faster and larger for higher pulse amplitudes and/or longer pulse durations. With fixed pulse parameters, transport into confluent monolayers of cells was slower than transport into suspended cells. Different time courses of fluorescence increase were observed during and at various times after the pulse, reflecting different transport mechanisms and ongoing membrane resealing. The data were compared to theoretical predictions of the Nernst-Planck equation. After a delay of 60 micros, the time course of fluorescence during the pulse was approximately linear, supporting a mainly electrophoretic solution of the Nernst-Planck equation. The time course after the pulse agreed with diffusional solution of the Nernst-Planck equation if the membrane resealing was assumed to consist of three distinct components, with time constants in the range of tens of microseconds, hundreds of microseconds, and tens of seconds, respectively.

Kinetics of transmembrane transport of small molecules into electropermeabilized cells.

Le transport de l&#x26;#39;iodure de propidium dans les cellules ovariennes de hamster chinois electropermeabilized a &#xE9;t&#xE9; surveill&#xE9;e par un tube photomultiplicateur pendant et apr&#xE8;s l&#x26;#39;impulsion &#xE9;lectrique. L&#x26;#39;influence de l&#x26;#39;amplitude et la dur&#xE9;e d&#x26;#39;impulsion sur la cin&#xE9;tique de transport a &#xE9;t&#xE9; &#xE9;tudi&#xE9;e avec des r&#xE9;solutions temporelles de 200 ns &#xE0; 4 ms &#xE0; des intervalles de 400 micros &#xE0; 8 s. Le transport est devenu d&#xE9;tectable d&#xE8;s 60 micros apr&#xE8;s le d&#xE9;but de l&#x26;#39;impulsion, continu&#xE9; pendant quelques dizaines de secondes apr&#xE8;s l&#x26;#39;impulsion, et &#xE9;tait plus rapide et plus importante pour les amplitudes d&#x26;#39;impulsion sup&#xE9;rieure et / ou plus la dur&#xE9;e des impulsions. Avec les param&#xE8;tres d&#x26;#39;impulsions fixes, le transport dans des monocouches confluentes de cellules a &#xE9;t&#xE9; plus lente que le transport dans les cellules en suspension. Des cours &#xE0; temps diff&#xE9;rents de l&#x26;#39;augmentation de fluorescence ont &#xE9;t&#xE9; observ&#xE9;es au cours et &#xE0; diff&#xE9;rents moments apr&#xE8;s l&#x26;#39;impulsion, ce qui refl&#xE8;te diff&#xE9;rents m&#xE9;canismes de transport et de fermeture membrane continue. Les donn&#xE9;es ont &#xE9;t&#xE9; compar&#xE9;es aux pr&#xE9;dictions th&#xE9;oriques de l&#x26;#39;&#xE9;quation de Nernst-Planck. Apr&#xE8;s un d&#xE9;lai de 60 micros, le cours du temps de la fluorescence lors de l&#x26;#39;impulsion a &#xE9;t&#xE9; &#xE0; peu pr&#xE8;s lin&#xE9;aire, en soutenant une solution essentiellement &#xE9;lectrophor&#xE9;tique de l&#x26;#39;&#xE9;quation de Nernst-Planck. Le cours du temps apr&#xE8;s l&#x26;#39;impulsion d&#x26;#39;accord avec une solution de diffusion de la formule de Nernst-Planck si le rescellement membrane a &#xE9;t&#xE9; suppos&#xE9; se composent de trois &#xE9;l&#xE9;ments distincts, avec des constantes de temps dans la gamme de quelques dizaines de microsecondes, des centaines de microsecondes, et des dizaines de secondes, respectivement .

Cin&#xE9;tique de transport transmembranaire de petites mol&#xE9;cules dans les cellules Electropermeabilized

Der Transport von Propidium Jodid in Electropermeabilized chinesischer Hamster Eierstock Zellen wurde mit einem Photomultiplier w&auml;hrend und nach der elektrischen Impuls &uuml;berwacht. Der Einfluss der Impuls-Amplitude und Dauer auf die Transport-Kinetik wurde untersucht, mit Zeit-Aufl&ouml;sungen von 200 ns bis 4 ms in Abst&auml;nden von 400 Mikrofone auf 8 s. Der Transport wurde nachweisbar, wie fr&uuml;h als 60 Mikrofone nach dem Start des Pulses, f&uuml;r zehn Sekunden nach dem Puls setzte, und war schneller und gr&ouml;&szlig;er f&uuml;r h&ouml;here Puls-Amplituden und/oder l&auml;ngeren Pulsdauern. Mit festen Puls Parametern war der Transport in konfluierende Monolayers Zellen langsamer als Verkehrsmittel in gesperrten Zellen. Andere Zeit Kurse Fluoreszenz-Erh&ouml;hung wurden w&auml;hrend und am verschiedentlich nach Puls, verschiedene Transportmechanismen und laufende Membran Neuversiegeln beobachtet. Die Daten wurden mit theoretischen Vorhersagen der Nernst-Planck-Gleichung verglichen. Nach einer Verz&ouml;gerung von 60 Mikrofone war der zeitlichen Verlauf der Fluoreszenz w&auml;hrend der Puls etwa linear, haupts&auml;chlich elektrophoretische L&ouml;sung der Nernst-Planck-Gleichung zu unterst&uuml;tzen. Der zeitlichen Verlauf nach Puls stimmte Diffusionsprozess L&ouml;sung der Nernst-Planck-Gleichung, wenn die Membran Neuversiegeln angenommen wurde, aus drei unterschiedlichen Komponenten mit Zeitkonstanten im Bereich von zig Mikrosekunden, Hunderte von Mikrosekunden und zehn Sekunden, bzw. bestehen.

Kinetik der Transmembran-Transport von kleinen Molek&uuml;len in Electropermeabilized Zellen.

Il trasporto di ioduro di propidium in cellule di ovaio di criceto cinese electropermeabilized &egrave; stato monitorato con un fotomoltiplicatore durante e dopo l&#39;impulso elettrico. L&#39;influenza di ampiezza di impulso e la durata sulla cinetica di trasporto &egrave; stata studiata con risoluzioni di tempo da 200 ns a 4 ms in intervalli da 400 micros per 8 s. Il trasporto &egrave; diventato rilevabile come presto come 60 micros dopo l&#39;inizio dell&#39;impulso, continuato per decine di secondi dopo l&#39;impulso ed era pi&ugrave; veloce e pi&ugrave; grande per ampiezze di impulso superiore e/o le durate di impulso pi&ugrave; lungo. Con parametri fissi pulse, trasporto in Monostrati confluenti di cellule &egrave; stato pi&ugrave; lento di trasporto nelle cellule sospese. Varie volte corsi differenti di tempo di aumento di fluorescenza sono stati osservati durante e dopo l&#39;impulso, riflettendo i meccanismi di trasporto differenti e membrana in corso una chiusura. I dati sono stati confrontati con le previsioni teoriche dell&#39;equazione di Nernst-Planck. Dopo un ritardo di 60 Micro, il corso di tempo della fluorescenza durante l&#39;impulso era approssimativamente lineare, favorendo la soluzione dell&#39;equazione di Nernst-Planck principalmente elettroforetica. Il corso di tempo dopo l&#39;impulso concordato con diffusione soluzione dell&#39;equazione di Nernst-Planck se la membrana di chiusura &egrave; stato presupposto consiste di tre componenti distinte, con costanti di tempo nella gamma di decine di microsecondi, centinaia di microsecondi e decine di secondi, rispettivamente.

Cinetica di trasporto transmembrana di piccole molecole nelle cellule electropermeabilized.

electropermeabilized&#x30C1;&#x30E3;&#x30A4;&#x30CB;&#x30FC;&#x30BA;&#x30CF;&#x30E0;&#x30B9;&#x30BF;&#x30FC;&#x5375;&#x5DE3;&#x7D30;&#x80DE;&#x3078;&#x306E;&#x30E8;&#x30A6;&#x5316;&#x30D7;&#x30ED;&#x30D4;&#x30B8;&#x30A6;&#x30E0;&#x306E;&#x8F38;&#x9001;&#x306F;&#x3001;&#x96FB;&#x6C17;&#x30D1;&#x30EB;&#x30B9;&#x306E;&#x9593;&#x3068;&#x5F8C;&#x306E;&#x5149;&#x96FB;&#x5B50;&#x5897;&#x500D;&#x7BA1;&#x3067;&#x30E2;&#x30CB;&#x30BF;&#x30FC;&#x3057;&#x305F;&#x3002;&#x8F38;&#x9001;&#x52D5;&#x614B;&#x306E;&#x30D1;&#x30EB;&#x30B9;&#x632F;&#x5E45;&#x3068;&#x6301;&#x7D9A;&#x6642;&#x9593;&#x306E;&#x5F71;&#x97FF;&#x306F;&#x3001;400&#x30DE;&#x30A4;&#x30AF;&#x30ED;&#x304B;&#x3089;8&#x79D2;&#x307E;&#x3067;&#x306E;&#x9593;&#x9694;&#x3067;200 ns&#x304B;&#x3089;4&#x30DF;&#x30EA;&#x79D2;&#x306E;&#x6642;&#x9593;&#x5206;&#x89E3;&#x80FD;&#x3067;&#x8ABF;&#x3079;&#x305F;&#x3002;&#x30C8;&#x30E9;&#x30F3;&#x30B9;&#x30DD;&#x30FC;&#x30C8;&#x306F;&#x3001;&#x30D1;&#x30EB;&#x30B9;&#x306E;&#x958B;&#x59CB;&#x5F8C;60&#x30DE;&#x30A4;&#x30AF;&#x30ED;&#x65E9;&#x3051;&#x308C;&#x3070;&#x691C;&#x51FA;&#x53EF;&#x80FD;&#x3068;&#x306A;&#x3063;&#x305F;&#x30D1;&#x30EB;&#x30B9;&#x306E;&#x5F8C;&#x306B;&#x6570;&#x5341;&#x79D2;&#x306E;&#x305F;&#x3081;&#x306B;&#x7D99;&#x7D9A;&#x3057;&#x3001;&#x3088;&#x308A;&#x901F;&#x304F;&#x3001;&#x3088;&#x308A;&#x9AD8;&#x3044;&#x30D1;&#x30EB;&#x30B9;&#x306E;&#x632F;&#x5E45;&#x304A;&#x3088;&#x3073;/&#x307E;&#x305F;&#x306F;&#x3088;&#x308A;&#x9577;&#x3044;&#x30D1;&#x30EB;&#x30B9;&#x306E;&#x6301;&#x7D9A;&#x6642;&#x9593;&#x306E;&#x305F;&#x3081;&#x306B;&#x5927;&#x304D;&#x304B;&#x3063;&#x305F;&#x3002;&#x56FA;&#x5B9A;&#x30D1;&#x30EB;&#x30B9;&#x306E;&#x30D1;&#x30E9;&#x30E1;&#x30FC;&#x30BF;&#x3092;&#x4F7F;&#x7528;&#x3057;&#x3066;&#x3001;&#x7D30;&#x80DE;&#x306E;&#x30B3;&#x30F3;&#x30D5;&#x30EB;&#x30A8;&#x30F3;&#x30C8;&#x306A;&#x5358;&#x5C64;&#x3078;&#x306E;&#x8F38;&#x9001;&#x306F;&#x3001;&#x7D30;&#x80DE;&#x61F8;&#x6FC1;&#x6DB2;&#x3078;&#x306E;&#x8F38;&#x9001;&#x3088;&#x308A;&#x3082;&#x9045;&#x304F;&#x306A;&#x308A;&#x307E;&#x3057;&#x305F;&#x3002;&#x86CD;&#x5149;&#x5897;&#x52A0;&#x306E;&#x5225;&#x306E;&#x30BF;&#x30A4;&#x30E0;&#x30B3;&#x30FC;&#x30B9;&#x306F;&#x3001;&#x7570;&#x306A;&#x308B;&#x30C8;&#x30E9;&#x30F3;&#x30B9;&#x30DD;&#x30FC;&#x30C8;&#x6A5F;&#x69CB;&#x3084;&#x7D99;&#x7D9A;&#x7684;&#x306A;&#x819C;&#x306E;&#x518D;&#x5C01;&#x9396;&#x3092;&#x53CD;&#x6620;&#x3057;&#x3066;&#x3001;&#x30D1;&#x30EB;&#x30B9;&#x306E;&#x5F8C;&#x3001;&#x69D8;&#x3005;&#x306A;&#x6642;&#x9593;&#x5E2F;&#x3068;&#x3067;&#x89B3;&#x5BDF;&#x3057;&#x305F;&#x3002;&#x30C7;&#x30FC;&#x30BF;&#x306F;&#x30CD;&#x30EB;&#x30F3;&#x30B9;&#x30C8; - &#x30D7;&#x30E9;&#x30F3;&#x30AF;&#x65B9;&#x7A0B;&#x5F0F;&#x306E;&#x7406;&#x8AD6;&#x7684;&#x4E88;&#x6E2C;&#x3068;&#x6BD4;&#x8F03;&#x3057;&#x305F;&#x3002; 60&#x30DE;&#x30A4;&#x30AF;&#x30ED;&#x306E;&#x9045;&#x5EF6;&#x306E;&#x5F8C;&#x3001;&#x30D1;&#x30EB;&#x30B9;&#x306E;&#x9593;&#x306E;&#x86CD;&#x5149;&#x306E;&#x7D4C;&#x6642;&#x5909;&#x5316;&#x306F;&#x30CD;&#x30EB;&#x30F3;&#x30B9;&#x30C8; - &#x30D7;&#x30E9;&#x30F3;&#x30AF;&#x65B9;&#x7A0B;&#x5F0F;&#x306E;&#x4E3B;&#x306B;&#x96FB;&#x6C17;&#x6CF3;&#x52D5;&#x30BD;&#x30EA;&#x30E5;&#x30FC;&#x30B7;&#x30E7;&#x30F3;&#x3092;&#x30B5;&#x30DD;&#x30FC;&#x30C8;&#x3057;&#x3001;&#x307B;&#x307C;&#x76F4;&#x7DDA;&#x3067;&#x3042;&#x3063;&#x305F;&#x3002;&#x819C;&#x306E;&#x518D;&#x5C01;&#x9396;&#x306F;&#x3001;3&#x3064;&#x306E;&#x7570;&#x306A;&#x308B;&#x30B3;&#x30F3;&#x30DD;&#x30FC;&#x30CD;&#x30F3;&#x30C8;&#x304B;&#x3089;&#x6210;&#x308B;&#x3068;&#x4EEE;&#x5B9A;&#x3055;&#x308C;&#x305F;&#x5834;&#x5408;&#x3001;&#x30D1;&#x30EB;&#x30B9;&#x5F8C;&#x306E;&#x6642;&#x9593;&#x7D4C;&#x904E;&#x306F;&#x3001;&#x305D;&#x308C;&#x305E;&#x308C;&#x6570;&#x5341;&#x30DE;&#x30A4;&#x30AF;&#x30ED;&#x79D2;&#x3001;&#x30DE;&#x30A4;&#x30AF;&#x30ED;&#x79D2;&#x306E;&#x4F55;&#x767E;&#x3068;&#x6570;&#x5341;&#x79D2;&#x306E;&#x7BC4;&#x56F2;&#x5185;&#x306E;&#x6642;&#x5B9A;&#x6570;&#x3067;&#x3001;&#x30CD;&#x30EB;&#x30F3;&#x30B9;&#x30C8; - &#x30D7;&#x30E9;&#x30F3;&#x30AF;&#x65B9;&#x7A0B;&#x5F0F;&#x306E;&#x62E1;&#x6563;&#x30BD;&#x30EA;&#x30E5;&#x30FC;&#x30B7;&#x30E7;&#x30F3;&#x3067;&#x5408;&#x610F;&#x3002;

Electropermeabilized&#x7D30;&#x80DE;&#x3078;&#x306E;&#x4F4E;&#x5206;&#x5B50;&#x306E;&#x819C;&#x8CAB;&#x901A;&#x8F38;&#x9001;&#x306E;&#x52D5;&#x529B;&#x5B66;

&#xC911; &#xACE0; &#xC804;&#xAE30; &#xD384;&#xC2A4; &#xD6C4; &#xB3C4;&#xCFC4; &#xD29C;&#xBE0C; propidium &#xC694;&#xC624;&#xB4DC; &#xD654; electropermeabilized &#xC911;&#xAD6D; &#xD584;&#xC2A4;&#xD130; &#xB09C;&#xC18C; &#xC138;&#xD3EC;&#xB85C; &#xC804;&#xC1A1; &#xBAA8;&#xB2C8;&#xD130;&#xB9C1; &#xD588;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xC804;&#xC1A1; &#xC18D;&#xB3C4;&#xC5D0; &#xD384;&#xC2A4; &#xC9C4;&#xD3ED; &#xBC0F; &#xAE30;&#xAC04;&#xC758; &#xC601;&#xD5A5; &#xC870;&#xC0AC;&#xC5D0; &#xC2DC;&#xAC04; &#xD574;&#xC0C1;&#xB3C4; 200&#xC5D0;&#xC11C; 400 &#xB9C8;&#xC774;&#xD06C;&#xB85C; 8&#xC5D0;&#xC11C; &#xAC04;&#xACA9; 4 &#xC11D;&#xC0AC; ns s. &#xC804;&#xC1A1; &#xB192;&#xC740; &#xD384;&#xC2A4; &#xC9C4;&#xD3ED; &#xBC0F; &#xAE34; &#xD384;&#xC2A4; &#xAE30;&#xAC04;&#xC774; &#xB354; &#xD070; &#xC77C;&#xCC0D; 60 &#xB9C8;&#xC774;&#xD06C;&#xB85C; &#xD384;&#xC2A4;, &#xC2DC;&#xC791; &#xD6C4; &#xC218;&#xC2ED; &#xCD08;&#xB97C; &#xD384;&#xC2A4; &#xD6C4;&#xC5D0; &#xACC4;&#xC18D; &#xD558; &#xACE0;&#xB294; &#xBE68;&#xB9AC; &#xAC10;&#xC9C0; &#xB418;&#xC5C8;&#xB2E4;. &#xACE0;&#xC815;&#xB41C; &#xD384;&#xC2A4; &#xB9E4;&#xAC1C; &#xBCC0;&#xC218; &#xC140; confluent monolayers&#xB85C; &#xC804;&#xC1A1; &#xC77C;&#xC2DC; &#xC911;&#xB2E8; &#xB41C; &#xC140;&#xC73C;&#xB85C; &#xC804;&#xC1A1; &#xBCF4;&#xB2E4; &#xB290;&#xB9B0; &#xD588;&#xB2E4;. &#xD615;&#xAD11; &#xC99D;&#xAC00;&#xC758; &#xB2E4;&#xB978; &#xC2DC;&#xAC04; &#xCF54;&#xC2A4; &#xD588;&#xB2E4; &#xAD00;&#xCC30; &#xC911;&#xC5D0;&#xC11C; &#xB2E4;&#xC591; &#xD55C; &#xC2DC;&#xAC04; &#xBC18;&#xC601; &#xD558;&#xB294; &#xC11C;&#xB85C; &#xB2E4;&#xB978; &#xC804;&#xC1A1; &#xBA54;&#xCEE4;&#xB2C8;&#xC998;&#xACFC; &#xC9C0;&#xC18D;&#xC801;&#xC778; &#xB9C9; resealing &#xD384;&#xC2A4; &#xD6C4;. &#xB124;&#xB978;&#xC2A4;&#xD2B8;-&#xD50C;&#xB791;&#xD06C; &#xBC29;&#xC815;&#xC2DD;&#xC758; &#xC774;&#xB860;&#xC801; &#xC608;&#xCE21; &#xB370;&#xC774;&#xD130; &#xBE44;&#xAD50; &#xB418;&#xC5C8;&#xB2E4;. 60 &#xB9C8;&#xC774;&#xD06C;&#xB85C; &#xC9C0;&#xC5F0; &#xD6C4; &#xD384;&#xC2A4; &#xC911; &#xD615;&#xAD11;&#xC758; &#xC2DC;&#xAC04; &#xACFC;&#xC815; &#xC57D; &#xC120;&#xD615; &#xB124;&#xB978;&#xC2A4;&#xD2B8;-&#xD50C;&#xB791;&#xD06C; &#xBC29;&#xC815;&#xC2DD;&#xC758; &#xC8FC;&#xB85C; &#xC804;&#xAE30; &#xC774;&#xB3D9; &#xC194;&#xB8E8;&#xC158;&#xC744; &#xC9C0;&#xC6D0; &#xD588;&#xB2E4;. &#xD384;&#xC2A4; &#xD6C4; &#xC2DC;&#xAC04; &#xCF54;&#xC2A4; &#xACBD;&#xC6B0; &#xB9C8;&#xC774;&#xD06C;&#xB85C;&#xCD08;&#xC758; 10&#xC758; &#xBC94;&#xC704;&#xC5D0;&#xC11C; &#xC2DC;&#xAC04; &#xC0C1;&#xC218;&#xC640; &#xC138; &#xAC00;&#xC9C0; &#xAD6C;&#xC131; &#xC694;&#xC18C;&#xC758; &#xC218;&#xBC31; &#xB9C8;&#xC774;&#xD06C;&#xB85C;&#xCD08;, &#xADF8;&#xB9AC;&#xACE0; &#xC218;&#xC2ED; &#xCD08;, &#xAC01;&#xAC01; &#xAD6C;&#xC131;&#xC73C;&#xB85C; &#xAC04;&#xC8FC; &#xB418;&#xC5C8;&#xB2E4; &#xB9C9; resealing &#xB124;&#xB978;&#xC2A4;&#xD2B8;-&#xD50C;&#xB791;&#xD06C; &#xBC29;&#xC815;&#xC2DD;&#xC758; diffusional &#xC194;&#xB8E8;&#xC158;&#xC5D0; &#xB3D9;&#xC758;.

Electropermeabilized &#xC140;&#xC5D0; &#xC791;&#xC740; &#xBD84;&#xC790;&#xC758; &#xB9C9; &#xD6A1;&#xB2E8; &#xAD50;&#xD1B5;&#xC758; &#xC18D;&#xB3C4; &#xB860;.

El transporte de yoduro de propidio en electropermeabilized c&#xE9;lulas de ovario de h&#xE1;mster chino se control&#xF3; con un tubo fotomultiplicador durante y despu&#xE9;s del impulso el&#xE9;ctrico. La influencia de la amplitud del pulso y la duraci&#xF3;n de la cin&#xE9;tica de transporte se investig&#xF3; con las resoluciones de tiempo de 200 ns a 4 ms en intervalos de 400 micros a 8 s. El transporte se convirti&#xF3; en detectables tan pronto como 60 micros despu&#xE9;s del comienzo del pulso, continu&#xF3; durante decenas de segundos despu&#xE9;s del pulso, y era m&#xE1;s r&#xE1;pido y m&#xE1;s grande para las amplitudes de pulso superior y / o m&#xE1;s duraciones de impulsos. Con par&#xE1;metros del pulso fijos, el transporte en monocapas confluentes de c&#xE9;lulas fue m&#xE1;s lento que el transporte en c&#xE9;lulas suspendidas. Diferentes cursos de tiempo de aumento de la fluorescencia se observaron durante y en las varias horas despu&#xE9;s del pulso, lo que refleja los diferentes mecanismos de transporte y resellado de membrana en curso. Los datos se compararon con las predicciones te&#xF3;ricas de la ecuaci&#xF3;n de Nernst-Planck. Despu&#xE9;s de una demora de 60 micros, el curso temporal de la fluorescencia durante el pulso era aproximadamente lineal, apoyando una soluci&#xF3;n principalmente electrofor&#xE9;tica de la ecuaci&#xF3;n de Nernst-Planck. El curso temporal despu&#xE9;s del pulso de acuerdo con soluci&#xF3;n difusional de la ecuaci&#xF3;n de Nernst-Planck si el resellado membrana se supone que constan de tres componentes distintos, con constantes de tiempo en el rango de decenas de microsegundos, cientos de microsegundos, y decenas de segundos, respectivamente .

Cin&#xE9;tica de transporte a trav&#xE9;s de peque&#xF1;as mol&#xE9;culas en las c&#xE9;lulas Electropermeabilized

&#x6211;&#x4EEC;&#x76EE;&#x524D;&#x7684;&#x63A2;&#x6D4B;&#x7535;&#x7A7F;&#x5B54;&#x7684;&#x7EC6;&#x80DE;&#x819C;&#x7684;&#x7403;&#x5F62;&#x548C;&#x4E0D;&#x89C4;&#x5219;&#x5F62;&#x72B6;&#x7684; CHO &#x7EC6;&#x80DE; (&#x6211;&#x4EEC;&#x8868;&#x793A;&#x6B64;&#x7535;&#x538B;&#x7531; ITVc) &#x4E2D;&#x6240;&#x4EA7;&#x751F;&#x7684;&#x6700;&#x5C0F;&#x7EC6;&#x80DE;&#x8DE8;&#x819C;&#x7535;&#x4F4D;&#x53D8;&#x5316;&#x7684;&#x7814;&#x7A76;&#x3002;&#x901A;&#x8FC7;&#x76D1;&#x89C6;&#x7684;&#x7ECF;&#xFF0C;&#x5927;&#x91CF;&#x6D8C;&#x5165;&#xFF0C;&#x68C0;&#x6D4B;&#x5230;&#x7684;&#x7535;&#x7A7F;&#x5B54;&#x548C;&#x8DE8;&#x819C;&#x7535;&#x538B;&#x8BA1;&#x7B97;&#x6BCF;&#x4E2A;&#x5355;&#x5143;&#x683C;&#xFF0C;&#x5176;&#x622A;&#x9762;&#x56FE;&#x50CF;&#x4ECE;&#x6784;&#x9020;&#x4E09;&#x7EF4;&#x6709;&#x9650;&#x5143;&#x6A21;&#x578B;&#x3002;&#x6211;&#x4EEC;&#x53D1;&#x73B0; ITVc &#x662F;&#x9AD8;&#x5EA6;&#x53EF;&#x53D8;&#x7684;&#x5C24;&#x5176;&#x662F;&#x5728;&#x4E0D;&#x89C4;&#x5219;&#x5F62;&#x72B6;&#x7684;&#x5355;&#x5143;&#x683C;&#xFF0C;&#x5B83;&#x5728;&#x4ECE; 512-1028 mV &#x4E0D;&#x7B49;&#x3002;&#x6211;&#x4EEC;&#x5C55;&#x793A;&#x6B64;&#x8303;&#x56F4;&#x662F;&#x592A;&#x5927;&#x4E86;&#xFF0C;&#x662F;&#x7531;&#x4E8E;&#x6570;&#x503C;&#x9519;&#x8BEF;&#x7684;&#x9879;&#x76EE;&#x548C;&#x5B9E;&#x9A8C;&#x7684;&#x4E0D;&#x51C6;&#x786E;&#x4E4B;&#x5904;&#xFF0C;&#x6697;&#x793A;&#xFF0C;&#x5BF9;&#x4E8E;&#x540C;&#x4E00;&#x7C7B;&#x578B;&#x7684;&#x5355;&#x5143;&#x683C;&#x548C;&#x66B4;&#x9732;&#x4E8E;&#x76F8;&#x540C;&#x6570;&#x91CF;&#x7684;&#x8109;&#x51B2;&#x4E0E;&#x76F8;&#x540C;&#x7684;&#x5DE5;&#x671F;&#xFF0C;ITVc &#x7684;&#x503C;&#x5DEE;&#x5F02;&#x53EF;&#x4EE5;&#x5F88;&#x5927;&#x4ECE;&#x4E00;&#x4E2A;&#x7EC6;&#x80DE;&#x5230;&#x53E6;&#x4E00;&#x4E2A;&#x3002;&#x6211;&#x4EEC;&#x8FD8;&#x6CE8;&#x610F;&#x5230;&#x5728;&#x8BB8;&#x591A;&#x60C5;&#x51B5;&#x4E0B;&#xFF0C;&#x8F83;&#x9AD8;&#x7684; ITVc&#xFF0C;&#x6BD4;&#x4E00;&#x4E2A;&#x8F83;&#x5C0F;&#x7684;&#x7279;&#x70B9;&#x662F;&#x8F83;&#x5927;&#x7684;&#x5355;&#x5143;&#x683C;&#x3002;&#x8FD9;&#x662F;&#x5728;&#x5B9A;&#x6027;&#x534F;&#x8BAE;&#x4E0E;&#x8F83;&#x9AD8;&#x7684;&#x819C;&#x66F2;&#x7387;&#x4FBF;&#x5229;&#x7535;&#x7A7F;&#x5B54;&#xFF0C;&#x4F46;&#x6570;&#x91CF;&#x7684;&#x8003;&#x8651;&#x5EFA;&#x8BAE;&#x89C2;&#x5BDF;&#x5230;&#x7684; ITVc &#x7684;&#x53D8;&#x5316;&#x4E0D;&#x80FD;&#x5B8C;&#x5168;&#x5F52;&#x4E8E;&#x819C;&#x66F2;&#x7387;&#x7684;&#x5DEE;&#x5F02;&#x7684;&#x62A5;&#x544A;&#x3002;

&#x5BFC;&#x81F4;&#x63A2;&#x6D4B;&#x7EC6;&#x80DE;&#x819C;&#x7535;&#x7A7F;&#x5B54;&#x7684;&#x6700;&#x5C0F;&#x7EC6;&#x80DE;&#x8DE8;&#x819C;&#x7535;&#x4F4D;&#x7684;&#x53D8;&#x5316;&#x3002;

We present a study of the variability of the minimal transmembrane voltage resulting in detectable electroporation of the plasma membrane of spherical and irregularly shaped CHO cells (we denote this voltage by ITVc). Electroporation was detected by monitoring the influx of Ca(2+), and the transmembrane voltage was computed on a 3D finite-elements model of each cell constructed from its cross-section images. We found that ITVc was highly variable, particularly in irregularly shaped cells, where it ranged from 512-1028 mV. We show that this range is much too large to be an artifact due to numerical errors and experimental inaccuracies, implying that for cells of the same type and exposed to the same number of pulses with the same duration, the value of ITVc can differ considerably from one cell to another. We also observed that larger cells are in many cases characterized by a higher ITVc than a smaller one. This is in qualitative agreement with the reports that higher membrane curvature facilitates electroporation, but quantitative considerations suggest that the observed variability of ITVc cannot be attributed entirely to the differences in membrane curvature.

Variability of the minimal transmembrane voltage resulting in detectable membrane electroporation.

Nous pr&#xE9;sentons une &#xE9;tude de la variabilit&#xE9; de la tension transmembranaire minimal r&#xE9;sultant de l&#x26;#39;&#xE9;lectroporation d&#xE9;tectable de la membrane plasmique de la rotule et de forme irr&#xE9;guli&#xE8;re des cellules CHO (on note cette tension par ITVC). &#xC9;lectroporation a &#xE9;t&#xE9; d&#xE9;tect&#xE9; en surveillant l&#x26;#39;influx de Ca (2 +), et la tension transmembranaire a &#xE9;t&#xE9; calcul&#xE9;e sur une 3D finis des &#xE9;l&#xE9;ments de mod&#xE8;le de chaque cellule construit de sa section d&#x26;#39;images. Nous avons constat&#xE9; que ITVC &#xE9;tait tr&#xE8;s variable, en particulier dans les cellules de forme irr&#xE9;guli&#xE8;re, o&#xF9; il allait de 512-1028 mV. On montre que cet intervalle est trop grand pour &#xEA;tre un artefact d&#xFB; &#xE0; des erreurs num&#xE9;riques et les impr&#xE9;cisions exp&#xE9;rimentales, ce qui implique que pour les cellules du m&#xEA;me type et expos&#xE9;e &#xE0; un m&#xEA;me nombre d&#x26;#39;impulsions avec la m&#xEA;me dur&#xE9;e, la valeur de ITVC variant sensiblement d&#x26;#39; une cellule &#xE0; une autre. Nous avons &#xE9;galement observ&#xE9; que les grandes cellules sont dans de nombreux cas caract&#xE9;ris&#xE9; par une plus grande ITVC qu&#x26;#39;un petit. Ceci est en accord qualitatif avec les rapports que la courbure sup&#xE9;rieur &#xE0; membrane facilite l&#x26;#39;&#xE9;lectroporation, mais des consid&#xE9;rations quantitatives sugg&#xE8;rent que la variabilit&#xE9; observ&#xE9;e de ITVC ne peut pas &#xEA;tre enti&#xE8;rement attribu&#xE9; aux diff&#xE9;rences de courbure membranaire.

La variabilit&#xE9; de la tension transmembranaire minimal r&#xE9;sultant de &#xE9;lectroporation membrane d&#xE9;tectable

Wir pr&auml;sentieren eine Studie &uuml;ber die Variabilit&auml;t der minimal transmembrane Spannung was zu nachweisbaren Electroporation der Plasmamembran von sph&auml;rischen und unregelm&auml;&szlig;ig geformten CHO-Zellen (Wir bezeichnen diese Spannung durch ITVc). Elektroporation wurde durch die &Uuml;berwachung des Zustroms von Ca(2+) gefunden, und die transmembrane-Spannung wurde auf einem 3D Finite-Elemente-Modell jeder Zelle konstruiert aus seinen Querschnitt-Bilder berechnet. Wir fanden, dass ITVc sehr variabel, besonders in den unregelm&auml;&szlig;ig geformten Zellen, in denen es von 512-1028 mV reichte. Wir zeigen, dass dieser Bereich viel zu gro&szlig; ist, um ein Artefakt durch numerische Fehler sein und experimentelle Ungenauigkeiten, impliziert, dass Zellen des gleichen Typs und der gleichen Anzahl der Impulse mit der gleichen Dauer, den Wert der ITVc ausgesetzt von einer Zelle zur anderen unterschiedlich k&ouml;nnen. Wir beobachten auch, dass gr&ouml;&szlig;ere Zellen in vielen F&auml;llen durch eine h&ouml;here ITVc als ein kleineres charakterisiert sind. Dies ist in qualitative Vereinbarung mit den Berichten, dass h&ouml;here Membran Kr&uuml;mmung Elektroporation erleichtert, sondern quantitative &Uuml;berlegungen schlagen vor, da&szlig; die beobachtete Variabilit&auml;t der ITVc ganz auf die Unterschiede in der Kr&uuml;mmung der Membran zur&uuml;ckgef&uuml;hrt werden kann.

Variabilit&auml;t der minimal transmembrane Spannung was zu nachweisbaren Membran Elektroporation.

Vi presentiamo uno studio della variabilit&agrave; della tensione del transmembrane minimal con conseguente rilevabile elettroporazione della membrana del plasma delle cellule CHO sferiche e dalla forma irregolare (denotiamo questa tensione da ITVc). Elettroporazione &egrave; stato rilevato dal monitoraggio l&#39;afflusso di Ca(2+), e la tensione del transmembrane &egrave; stata calcolata su un modello di elementi finiti 3D di ogni cella costruita dalle sue immagini in sezione trasversale. Abbiamo trovato che ITVc era altamente variabile, specialmente nelle cellule dalla forma irregolare, dove essa variava da 512-1028 mV. Dimostriamo che questa gamma &egrave; troppo grande per essere un artefatto a causa di errori numerici e sperimentali inesattezze, che implica che per le cellule dello stesso tipo ed esposti allo stesso numero di impulsi con la stessa durata, il valore di ITVc possono differiscono considerevolmente da una cella a altra. Abbiamo anche osservato che le cellule pi&ugrave; grandi sono in molti casi caratterizzati da una maggiore ITVc rispetto a uno pi&ugrave; piccolo. Questo &egrave; in accordo qualitativa con le relazioni che maggiore curvatura della membrana facilita l&#39;elettroporazione, ma considerazioni quantitative suggeriscono che la variabilit&agrave; osservata di ITVc non pu&ograve; essere attribuita interamente alle differenze nella curvatura della membrana.

Variabilit&agrave; della tensione del transmembrane minimal con conseguente rilevabile membrana elettroporazione.

&#x6211;&#x3005;&#x306F;&#x3001;&#x7403;&#x9762;&#x3068;&#x4E0D;&#x898F;&#x5247;&#x306A;&#x5F62;&#x3092;&#x3057;&#x305F;CHO&#x7D30;&#x80DE;&#xFF08;&#x6211;&#x3005;&#x306F;ITVc&#x3059;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x306B;&#x3088;&#x308A;&#x3001;&#x3053;&#x306E;&#x96FB;&#x5727;&#x3092;&#x793A;&#x3059;&#xFF09;&#x306E;&#x539F;&#x5F62;&#x8CEA;&#x819C;&#x306E;&#x691C;&#x51FA;&#x53EF;&#x80FD;&#x306A;&#x30A8;&#x30EC;&#x30AF;&#x30C8;&#x30ED;&#x30DD;&#x30EC;&#x30FC;&#x30B7;&#x30E7;&#x30F3;&#x306E;&#x7D50;&#x679C;&#x3001;&#x6700;&#x5C0F;&#x9650;&#x306E;&#x8CAB;&#x901A;&#x96FB;&#x5727;&#x306E;&#x5909;&#x52D5;&#x306E;&#x7814;&#x7A76;&#x3092;&#x7D39;&#x4ECB;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x30A8;&#x30EC;&#x30AF;&#x30C8;&#x30ED;&#x30DD;&#x30EC;&#x30FC;&#x30B7;&#x30E7;&#x30F3;&#x306F;&#x3001;Ca&#xFF08;2 +&#xFF09;&#x306E;&#x6D41;&#x5165;&#x3092;&#x76E3;&#x8996;&#x3059;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x306B;&#x3088;&#x3063;&#x3066;&#x691C;&#x51FA;&#x3055;&#x308C;&#x3001;&#x8CAB;&#x901A;&#x96FB;&#x5727;&#x306F;&#x3001;&#x305D;&#x306E;&#x65AD;&#x9762;&#x753B;&#x50CF;&#x304B;&#x3089;&#x69CB;&#x7BC9;&#x3055;&#x308C;&#x3001;&#x5404;&#x30BB;&#x30EB;&#x306E;3&#x6B21;&#x5143;&#x6709;&#x9650;&#x8981;&#x7D20;&#x30E2;&#x30C7;&#x30EB;&#x3067;&#x8A08;&#x7B97;&#x3055;&#x308C;&#x307E;&#x3057;&#x305F;&#x3002;&#x6211;&#x3005;&#x306F;&#x3001;&#x7279;&#x306B;&#x305D;&#x308C;&#x304C;512&#x304B;&#x3089;1028 mV&#x306E;&#x7BC4;&#x56F2;&#x3067;&#x3042;&#x3063;&#x305F;&#x4E0D;&#x898F;&#x5247;&#x306A;&#x5F62;&#x306E;&#x7D30;&#x80DE;&#x3067;&#x3001;ITVc&#x306F;&#x975E;&#x5E38;&#x306B;&#x591A;&#x69D8;&#x3067;&#x3042;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x304C;&#x308F;&#x304B;&#x3063;&#x305F;&#x3002;&#x6211;&#x3005;&#x306F;&#x3001;&#x3053;&#x306E;&#x7BC4;&#x56F2;&#x304C;&#x307B;&#x307C;&#x540C;&#x3058;&#x578B;&#x3068;&#x540C;&#x3058;&#x671F;&#x9593;&#x3092;&#x6301;&#x3064;&#x30D1;&#x30EB;&#x30B9;&#x306E;&#x6570;&#x304C;&#x540C;&#x3058;&#x306B;&#x3055;&#x3089;&#x3055;&#x308C;&#x305F;&#x7D30;&#x80DE;&#x306F;&#x3001;ITVc&#x306E;&#x5024;&#x304C;&#x304B;&#x306A;&#x308A;&#x7570;&#x306A;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x3092;&#x610F;&#x5473;&#x3057;&#x3001;&#x6570;&#x5024;&#x8AA4;&#x5DEE;&#x3068;&#x5B9F;&#x9A13;&#x8AA4;&#x308A;&#x306B;&#x8D77;&#x56E0;&#x3059;&#x308B;&#x30A2;&#x30FC;&#x30C6;&#x30A3;&#x30D5;&#x30A1;&#x30AF;&#x30C8;&#x3067;&#x3042;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x304C;&#x5927;&#x304D;&#x3059;&#x304E;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x3092;&#x793A;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x308B;&#x5225;&#x306E;&#x30BB;&#x30EB;&#x3002;&#x307E;&#x305F;&#x3001;&#x5927;&#x898F;&#x6A21;&#x306A;&#x7D30;&#x80DE;&#x304C;&#x591A;&#x304F;&#x306E;&#x5834;&#x5408;&#x3001;1&#x3088;&#x308A;&#x5C0F;&#x3055;&#x3044;&#x3088;&#x308A;&#x5927;&#x304D;&#x3044;ITVc&#x306B;&#x3088;&#x3063;&#x3066;&#x7279;&#x5FB4;&#x4ED8;&#x3051;&#x3089;&#x308C;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x3092;&#x89B3;&#x5BDF;&#x3057;&#x305F;&#x3002;&#x3053;&#x308C;&#x306F;&#x3001;&#x3088;&#x308A;&#x9AD8;&#x3044;&#x819C;&#x306E;&#x66F2;&#x7387;&#x304C;&#x30A8;&#x30EC;&#x30AF;&#x30C8;&#x30ED;&#x30DD;&#x30EC;&#x30FC;&#x30B7;&#x30E7;&#x30F3;&#x3092;&#x5BB9;&#x6613;&#x306B;&#x3059;&#x308B;&#x3068;&#x3044;&#x3046;&#x5831;&#x544A;&#x3068;&#x5B9A;&#x6027;&#x7684;&#x306B;&#x4E00;&#x81F4;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x308B;&#x304C;&#x3001;&#x5B9A;&#x91CF;&#x7684;&#x306A;&#x8003;&#x616E;&#x4E8B;&#x9805;&#x306F;ITVc&#x306E;&#x89B3;&#x5BDF;&#x3055;&#x308C;&#x305F;&#x3070;&#x3089;&#x3064;&#x304D;&#x306F;&#x819C;&#x306E;&#x66F2;&#x7387;&#x306E;&#x9055;&#x3044;&#x306B;&#x5B8C;&#x5168;&#x306B;&#x8D77;&#x56E0;&#x3059;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x304C;&#x3067;&#x304D;&#x306A;&#x3044;&#x3053;&#x3068;&#x3092;&#x793A;&#x5506;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x308B;&#x3002;

&#x691C;&#x51FA;&#x53EF;&#x80FD;&#x306A;&#x819C;&#x306E;&#x30A8;&#x30EC;&#x30AF;&#x30C8;&#x30ED;&#x30DD;&#x30EC;&#x30FC;&#x30B7;&#x30E7;&#x30F3;&#x3067;&#x306F;&#x7D50;&#x679C;&#x306E;&#x6700;&#x5C0F;&#x8CAB;&#x901A;&#x96FB;&#x5727;&#x306E;&#x3070;&#x3089;&#x3064;&#x304D;

&#xC6B0;&#xB9AC;&#xB294; &#xCD5C;&#xC18C;&#xD55C;&#xC758; &#xB9C9; &#xD6A1;&#xB2E8; &#xC804;&#xC555; &#xAC10;&#xC9C0; electroporation (&#xC6B0;&#xB9AC; Itvc&#xC5D0; &#xC758;&#xD574;&#xC774; &#xC804;&#xC555;&#xC744; &#xB098;&#xD0C0;&#xB0B4;&#xB294;) &#xAD6C;&#xD615; &#xD558; &#xACE0; &#xBD88;&#xADDC;&#xCE59; &#xD55C; &#xBAA8;&#xC591;&#xC758; &#xC870; &#xC138;&#xD3EC;&#xC758; &#xC6D0;&#xD615;&#xC9C8; &#xB9C9;&#xC758; &#xACB0;&#xACFC;&#xC758; &#xB2E4;&#xC591;&#xC131; &#xC5F0;&#xAD6C; &#xC81C;&#xC2DC;. Electroporation Ca(2+), &#xC720;&#xC785; &#xBAA8;&#xB2C8;&#xD130;&#xB9C1;&#xC5D0; &#xC758;&#xD574; &#xBC1C;&#xACAC; &#xB418;&#xC5C8;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4;&#xC640; &#xB9C9; &#xD6A1;&#xB2E8; &#xC804;&#xC555;&#xC758; &#xB2E8;&#xBA74; &#xC774;&#xBBF8;&#xC9C0;&#xC5D0;&#xC11C; &#xAD6C;&#xC131; &#xD558;&#xB294; &#xAC01; &#xC140;&#xC758; 3 &#xCC28;&#xC6D0; &#xC720;&#xD55C; &#xC694;&#xC18C; &#xBAA8;&#xB378;&#xC5D0; &#xACC4;&#xC0B0; &#xD588;&#xB2E4;. &#xD2B9;&#xD788; &#xBD88;&#xADDC;&#xCE59; &#xD55C; &#xBAA8;&#xC591;&#xC758; &#xC138;&#xD3EC;, &#xC5B4;&#xB514; &#xADF8;&#xAC83;&#xC740; 512-1028 Mv&#xC5D0;&#xC11C; 240&#xC5D0; Itvc&#xB294; &#xB192;&#xC740; &#xBCC0;&#xC218;&#xB97C; &#xCC3E;&#xC558;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xC6B0;&#xB9AC;&#xB294;&#xC774; &#xBC94;&#xC704;&#xB294; &#xD6E8;&#xC52C; &#xB108;&#xBB34; &#xCEE4;&#xC11C; &#xC22B;&#xC790; &#xC624;&#xB958; &#xC778;&#xD574; &#xC720;&#xBB3C; &#xAC83; &#xC2E4;&#xD5D8; &#xBD80;&#xC815;&#xD655;, &#xAC19;&#xC740; &#xC885;&#xB958;&#xC758; &#xC138;&#xD3EC;&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xC554;&#xC2DC;&#xB97C; &#xD558; &#xACE0; &#xAC19;&#xC740; &#xC218;&#xAC00; &#xAC19;&#xC740; &#xAE30;&#xAC04; Itvc&#xC758; &#xAC12;&#xACFC; &#xD384;&#xC2A4;&#xC5D0; &#xB178;&#xCD9C; &#xC218; &#xC788;&#xB294; &#xB2E4;&#xB978; &#xD55C; &#xC140;&#xC5D0;&#xC11C; &#xC0C1;&#xB2F9;&#xD788; &#xB2E4;&#xB97C; &#xD45C;&#xC2DC; &#xD569;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xC6B0;&#xB9AC;&#xB294; &#xB610;&#xD55C; &#xB354; &#xD070; &#xC140; &#xB9CE;&#xC740; &#xACBD;&#xC6B0;&#xC5D0; &#xB354; &#xC791;&#xC740; &#xAC83; &#xBCF4;&#xB2E4; &#xB354; &#xB192;&#xC740; Itvc&#xC5D0; &#xC758;&#xD574; &#xD2B9;&#xC9D5;&#xC740; &#xAD00;&#xCC30; &#xD588;&#xB2E4;. &#xC774;&#xAC83;&#xC740; &#xB354; &#xB192;&#xC740; &#xB9C9; &#xACE1;&#xB960; &#xC6A9;&#xC774; electroporation, &#xD558;&#xC9C0;&#xB9CC; &#xC591;&#xC801; &#xACE0;&#xB824; &#xC0AC;&#xD56D; &#xC81C;&#xC548; Itvc&#xC758; &#xAD00;&#xCC30; &#xB41C; &#xBCC0;&#xD654; &#xC644;&#xC804;&#xD788; &#xB9C9; &#xACE1;&#xB960;&#xC758; &#xCC28;&#xC774;&#xC5D0; &#xAE30; &#xC778;&#xD560; &#xC218; &#xC5C6;&#xB294; &#xBCF4;&#xACE0;&#xC11C;&#xC640; &#xC9C8;&#xC801; &#xACC4;&#xC57D;&#xC5D0;.

&#xCD5C;&#xC18C;&#xD55C;&#xC758; &#xB9C9; &#xD6A1;&#xB2E8; &#xC804;&#xC555; &#xAC10;&#xC9C0; &#xB9C9; electroporation &#xACB0;&#xACFC;&#xC758; &#xB2E4;&#xC591;&#xC131;.

Se presenta un estudio de la variabilidad de la tensi&#xF3;n m&#xED;nima de transmembrana que resulta en la electroporaci&#xF3;n detectable de la membrana plasm&#xE1;tica de las c&#xE9;lulas CHO esf&#xE9;ricas y de forma irregular (denotamos este voltaje por ITVc). La electroporaci&#xF3;n se detect&#xF3; mediante el control de la afluencia de Ca (2 +), y el voltaje de transmembrana se calcul&#xF3; en un 3D-elementos finitos modelo de cada celda construida a partir de sus im&#xE1;genes de secci&#xF3;n transversal. Hemos encontrado que ITVc fue muy variable, particularmente en las c&#xE9;lulas de forma irregular, donde se iban desde 512-1028 mV. Se demuestra que este intervalo es demasiado grande para ser un artefacto debido a errores num&#xE9;ricos e imprecisiones experimentales, lo que implica que para las c&#xE9;lulas del mismo tipo y expuesto al mismo n&#xFA;mero de impulsos con la misma duraci&#xF3;n, el valor de ITVc pueden diferir considerablemente desde una c&#xE9;lula a otra. Tambi&#xE9;n se observ&#xF3; que las grandes c&#xE9;lulas son en muchos casos se caracteriza por una ITVc mayor que uno m&#xE1;s peque&#xF1;o. Esto est&#xE1; de acuerdo cualitativo con los informes de que una mayor curvatura de la membrana facilita la electroporaci&#xF3;n, pero las consideraciones cuantitativas sugieren que la variabilidad observada de ITVc no puede atribuirse exclusivamente a las diferencias en la curvatura de la membrana.

La variabilidad de la tensi&#xF3;n transmembrana m&#xED;nimo resultante de electroporaci&#xF3;n de membrana detectable

&#x4E3A;&#x6709;&#x6548;&#x63A7;&#x5236;&#x7684;&#x7EC4;&#x7EC7; electropermeabilization &#x7684;&#x7535;&#x5316;&#x5B66;&#x548C; electrogenotherapy&#xFF0C;&#x8981;&#x6C42;&#x5B83;&#x662F;&#x975E;&#x5E38;&#x91CD;&#x8981;&#x7684;&#x4FE1;&#x606F;&#x63D0;&#x4F9B;&#x7684;&#x4E00;&#x7EC4;&#x5B9A;&#x4E49;&#x7684;&#x7535;&#x6781;&#x7684;&#x7535;&#x573A;&#x5206;&#x5E03;&#x3002;&#x8BA1;&#x7B97;&#x673A;&#x6A21;&#x62DF;&#x4F7F;&#x7528;&#x7684;&#x6709;&#x9650;&#x5143;&#x6A21;&#x578B;&#x65B9;&#x6CD5;&#x9884;&#x6D4B;&#x7684;&#x76F8;&#x5173;&#x8054;&#x7684;&#x5B57;&#x6BB5;&#x5206;&#x5E03;&#x548C;&#x7535;&#x6D41;&#x3002;&#x5E7B;&#x50CF;&#x660E;&#x786E;&#x7535;&#x5BFC;&#x4E0E;&#x51DD;&#x80F6;&#x5236;&#x6210;&#x4E86;&#x7528;&#x6765;&#x8861;&#x91CF;&#x5F53;&#x524D;&#x65B0;&#x7535;&#x6781;&#x7684;&#x51E0;&#x4F55;&#x5F62;&#x72B6; &#xFF08;&#x5BFC;&#x7EBF;&#xFF09; &#x7684;&#x53CD;&#x5E94;&#xFF0C;&#x4E00;&#x4E2A;&#x597D;&#x7684;&#x534F;&#x8BAE;&#x4E4B;&#x95F4;&#x7684;&#x8861;&#x91CF;&#x548C;&#x9884;&#x6D4B;&#x5230;&#x7684;&#x7535;&#x6D41;&#x6709;&#x4EBA;&#x652F;&#x6301;&#x573A;&#x5206;&#x5E03;&#x9884;&#x6D4B;&#x7684;&#x6709;&#x6548;&#x6027;&#x3002;&#x573A;&#x5206;&#x5E03;&#x6709;&#x4EBA;&#x8981;&#x975E;&#x5E38;&#x672C;&#x5730;&#x5316;&#x548C;&#x9AD8;&#x5EA6;&#x5747;&#x5300;&#x63A5;&#x89E6;&#x5BFC;&#x7EBF;&#x7535;&#x6781;&#x7684;&#x65B0;&#x6982;&#x5FF5;&#x3002;&#x4ED6;&#x4EEC;&#x5141;&#x8BB8;&#x96C6;&#x4E2D;&#x6CBF;&#x8868;&#x9762;&#x7684;&#x7EC4;&#x7EC7;&#x4EE5;&#x8BF1;&#x4F7F;&#x63A7;&#x91CA;&#x836F;&#x7269;&#x6216;&#x8D28;&#x7C92;&#x7684;&#x573A;&#x6548;&#x5E94;&#x3002;&#x975E;&#x4FB5;&#x88AD;&#x6027; &#xFF08;&#x8054;&#x7CFB;&#x4EBA;&#xFF09; &#x7535;&#x6781;&#x53EF;&#x4EE5;&#x8FC5;&#x901F;&#x79FB;&#x52A8;&#xFF0C;&#x8EAB;&#x4F53;&#x4E0A;&#x548C;&#x4E0D;&#x8981;&#x523A;&#x7A7F;&#x76AE;&#x80A4;&#x548C;&#x7EC4;&#x7EC7;&#x3002;&#x5B83;&#x4EEC;&#x53EF;&#x7528;&#x4E8E;&#x5927;&#x578B;&#x7684;&#x8868;&#x9762;&#x6548;&#x679C;&#xFF0C;&#x4E3A;&#x6CBB;&#x7597;&#x76AE;&#x80A4;&#x53CA;&#x76AE;&#x4E0B;&#x80BF;&#x7624;&#x3002;&#x4F7F;&#x7528;&#x836F;&#x7269;&#x6216; DNA &#x76AE;&#x5185;&#x6CE8;&#x5C04;&#x540E;&#x7684;&#x63A5;&#x89E6;&#x7535;&#x6781;&#x8FDB;&#x884C;&#x4E86;&#x9A8C;&#x8BC1;&#x7684;&#x5927;&#x8868;&#x9762;&#x76AE;&#x80A4;&#x80BF;&#x7624;&#x7684;&#x4E34;&#x5E8A;&#x6CBB;&#x7597;&#x548C;&#x4F53;&#x5185;&#x6210;&#x50CF;&#x7684;&#x901A;&#x900F;&#x6027;&#x589E;&#x9AD8;&#x6216;&#x57FA;&#x56E0;&#x7684;&#x8868;&#x8FBE;&#x3002;

&#x975E;&#x4FB5;&#x88AD;&#x6027;&#x63A5;&#x89E6;&#x7535;&#x6781;&#x7684;&#x4F53;&#x5185;&#x5C40;&#x90E8;&#x76AE;&#x80A4; electropulsation &#x548C;&#x5173;&#x8054;&#x7684;&#x836F;&#x7269;&#x548C;&#x6838;&#x9178;&#x4F20;&#x9012;&#x3002;

For an effective tissue controlled electropermeabilization as requested for electrochemotherapy and electrogenotherapy, it is very important to have informations about the electric field distribution provided by a defined set of electrodes. Computer simulations using the finite element models approach predicted the associated field distributions and currents. Phantoms made of gels with well-defined electrical conductance were used to measure the current responses of a new electrode geometry (wires), A good agreement between the measured and predicted currents was observed supporting the validity of the prediction for the field distribution. Field distribution was observed to be very localized and highly homogeneous with the new concept of contact wire electrodes. They allowed to focus the field effect along the surface of the tissue to induce a controlled release of drugs or plasmids. Non invasive (contact) electrodes can be moved rapidly on the body and avoid puncturing the skin and the tissue. They can be used for large surface effects, to treat the skin and subcutaneous tumors. The use of contact electrodes after drug or DNA intradermal injection were validated by clinical treatment of large surface skin tumors and by in vivo imaging of permeabilization or of gene expression.

Non invasive contact electrodes for in vivo localized cutaneous electropulsation and associated drug and nucleic acid delivery.

Pour une &#xE9;lectroperm&#xE9;abilisation efficace des tissus contr&#xF4;l&#xE9;e &#xE0; la demande pour &#xE9;lectrochimioth&#xE9;rapie et electrogenotherapy, qu&#x26;#39;il est tr&#xE8;s important d&#x26;#39;avoir des informations sur la distribution du champ &#xE9;lectrique fournie par un ensemble d&#xE9;fini d&#x26;#39;&#xE9;lectrodes. Des simulations sur ordinateur en utilisant les mod&#xE8;les &#xE9;l&#xE9;ments finis approche pr&#xE9;dit les distributions de champs associ&#xE9;s et des courants. Phantoms faites de gels avec bien d&#xE9;fini la conductance &#xE9;lectrique ont &#xE9;t&#xE9; utilis&#xE9;s pour mesurer les r&#xE9;ponses actuelles d&#x26;#39;une g&#xE9;om&#xE9;trie nouvelle &#xE9;lectrode (fils), un bon accord entre les courants mesur&#xE9;s et pr&#xE9;dits a &#xE9;t&#xE9; observ&#xE9; soutenant la validit&#xE9; de la pr&#xE9;diction de la distribution du champ. Distribution du champ a &#xE9;t&#xE9; observ&#xE9;e &#xE0; &#xEA;tre tr&#xE8;s localis&#xE9;e et tr&#xE8;s homog&#xE8;ne avec le nouveau concept de fils-&#xE9;lectrodes de contact. Ils peuvent se concentrer l&#x26;#39;effet de champ le long de la surface du tissu pour induire une lib&#xE9;ration contr&#xF4;l&#xE9;e de m&#xE9;dicaments ou des plasmides. Non invasive (contact) des &#xE9;lectrodes peut &#xEA;tre d&#xE9;plac&#xE9; rapidement sur le corps et &#xE9;viter perforation de la peau et le tissu. Ils peuvent &#xEA;tre utilis&#xE9;s pour les effets &#xE0; grande surface, pour traiter la peau et des tumeurs sous-cutan&#xE9;es. L&#x26;#39;utilisation d&#x26;#39;&#xE9;lectrodes de contact apr&#xE8;s la drogue ou l&#x26;#39;injection d&#x26;#39;ADN intradermique ont &#xE9;t&#xE9; valid&#xE9;s par le traitement clinique de grandes tumeurs de la peau de surface et par l&#x26;#39;imagerie in vivo de la perm&#xE9;abilisation ou de l&#x26;#39;expression g&#xE9;nique.

&#xC9;lectrodes non invasives pour contact in vivo Electropulsation cutan&#xE9;e localis&#xE9;e et drogues associ&#xE9;s et d&#xE9;livrance d&#x26;#39;acides nucl&#xE9;iques

F&uuml;r eine effektive Gewebe gesteuert-Electropermeabilization f&uuml;r Electrochemotherapy und Electrogenotherapy, ist es sehr wichtig, Informationen &uuml;ber die Verteilung des elektrischen Feldes bereitgestellt durch eine definierte Gruppe von Elektroden haben. Computer-Simulationen, die mit den finite-Elemente-Modelle-Ansatz prognostiziert die zugeordnete Feld Distributionen und Str&ouml;mungen. Phantome des Gels mit klar definierten Elektrischer Leitwert gemacht verwendet wurden, um die aktuellen Antworten einer neuen Elektrode Geometrie (Dr&auml;hte) zu messen, wurde ein gutes Abkommen zwischen den gemessenen und den vorhergesagten Str&ouml;mungen beobachtet, die G&uuml;ltigkeit der Vorhersage f&uuml;r den Bereich Vertrieb unterst&uuml;tzen. Verteilung wurde beobachtet, um zu sehr mit dem neuen Konzept des Fahrdrahtes Elektroden sehr homogen sein. Sie erlaubt den Feldeffekt entlang der Oberfl&auml;che des Gewebes eine kontrollierte Freisetzung von Drogen oder Plasmide veranlassen zu konzentrieren. Nicht invasive (Kontakte) Elektroden auf den K&ouml;rper schnell verschoben werden k&ouml;nnen und vermeiden, Punktion der Haut und des Gewebes. Sie k&ouml;nnen f&uuml;r gro&szlig;e Oberfl&auml;cheneffekte, verwendet werden, um der Haut und des subkutanen Tumoren zu behandeln. Die Verwendung der Kontaktdaten Elektroden nach Drogen oder DNA intradermale Injektion wurden &uuml;berpr&uuml;ft, indem klinische Behandlung von gro&szlig;en Oberfl&auml;che Hauttumoren und in-vivo Bildgebung von Permeabilization oder der Genexpression.

Nicht invasive Kontakt Elektroden f&uuml;r in-vivo lokalisierte kutane Electropulsation und zugeh&ouml;rigen Drogen- und Nukleins&auml;ure-Lieferung.

Per un electropermeabilization efficace tessuto controllato come richiesto per electrochemotherapy ed electrogenotherapy, &egrave; molto importante avere informazioni circa la distribuzione del campo elettrico fornito da un insieme definito di elettrodi. Simulazioni al computer utilizzando l&#39;approccio di modelli agli elementi finiti predisse il campo associato distribuzioni e correnti. Fantasmi di gel con conduttanza elettrica ben definita sono stati utilizzati per misurare le risposte attuali di una nuova geometria di elettrodo (fili), &egrave; stato osservato un buon accordo tra le correnti misurate e predetto sostenendo la validit&agrave; della previsione per la distribuzione di campo. Distribuzione di campo &egrave; stato osservato per essere molto localizzata e altamente omogenea con il nuovo concetto di elettrodi del legare del contatto. Hanno permesso di concentrare l&#39;effetto campo lungo la superficie del tessuto per indurre un rilascio controllato di farmaci o di plasmidi. Elettrodi (contatti) non invasivi possono essere spostati rapidamente sul corpo ed evitare di perforare la pelle e il tessuto. Pu&ograve; essere utilizzati per grandi effetti di superficie, per trattare la pelle e i tumori sottocutanei. L&#39;uso di elettrodi di contatti dopo iniezione intradermica di DNA o di droga sono stati convalidati da trattamento clinico dei tumori di grande superficie della pelle e di imaging in vivo di permeabilization o dell&#39;espressione genica.

Non invasivi contatti elettrodi per electropulsation cutanea localizzata in vivo e la consegna di droga e acido nucleico associato.

&#x96FB;&#x6C17;&#x5316;&#x5B66;&#x3068;electrogenotherapy&#x305F;&#x3081;&#x306B;&#x8981;&#x6C42;&#x3055;&#x308C;&#x305F;&#x3088;&#x3046;&#x306B;&#x52B9;&#x679C;&#x7684;&#x306A;&#x7D44;&#x7E54;&#x5236;&#x5FA1;electropermeabilization&#x305F;&#x3081;&#x306B;&#x306F;&#x3001;&#x96FB;&#x6975;&#x306E;&#x5B9A;&#x7FA9;&#x3055;&#x308C;&#x305F;&#x30BB;&#x30C3;&#x30C8;&#x306B;&#x3088;&#x3063;&#x3066;&#x63D0;&#x4F9B;&#x3055;&#x308C;&#x305F;&#x96FB;&#x754C;&#x5206;&#x5E03;&#x306B;&#x3064;&#x3044;&#x3066;&#x306E;&#x60C5;&#x5831;&#x3092;&#x6301;&#x3063;&#x3066;&#x3044;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x306F;&#x975E;&#x5E38;&#x306B;&#x91CD;&#x8981;&#x3067;&#x3059;&#x3002;&#x6709;&#x9650;&#x8981;&#x7D20;&#x30E2;&#x30C7;&#x30EB;&#x306E;&#x30A2;&#x30D7;&#x30ED;&#x30FC;&#x30C1;&#x3092;&#x4F7F;&#x7528;&#x3057;&#x3066;&#x30B3;&#x30F3;&#x30D4;&#x30E5;&#x30FC;&#x30BF;&#x30B7;&#x30DF;&#x30E5;&#x30EC;&#x30FC;&#x30B7;&#x30E7;&#x30F3;&#x3067;&#x306F;&#x3001;&#x95A2;&#x9023;&#x4ED8;&#x3051;&#x3089;&#x308C;&#x305F;&#x30D5;&#x30A3;&#x30FC;&#x30EB;&#x30C9;&#x5206;&#x5E03;&#x3068;&#x96FB;&#x6D41;&#x3092;&#x4E88;&#x6E2C;&#x3057;&#x305F;&#x3002;&#x660E;&#x78BA;&#x306B;&#x5B9A;&#x7FA9;&#x3055;&#x308C;&#x305F;&#x96FB;&#x6C17;&#x4F1D;&#x5C0E;&#x5EA6;&#x3092;&#x6709;&#x3059;&#x308B;&#x30B2;&#x30EB;&#x88FD;&#x306E;&#x30D5;&#x30A1;&#x30F3;&#x30C8;&#x30E0;&#x306F;&#x3001;&#x65B0;&#x3057;&#x3044;&#x96FB;&#x6975;&#x5F62;&#x72B6;&#xFF08;&#x30EF;&#x30A4;&#x30E4;&#xFF09;&#x3001;&#x96FB;&#x754C;&#x5206;&#x5E03;&#x306E;&#x4E88;&#x6E2C;&#x306E;&#x59A5;&#x5F53;&#x6027;&#x3092;&#x652F;&#x6301;&#x3059;&#x308B;&#x89B3;&#x5BDF;&#x3055;&#x308C;&#x305F;&#x6E2C;&#x5B9A;&#x5024;&#x3068;&#x4E88;&#x6E2C;&#x96FB;&#x6D41;&#x306E;&#x9593;&#x306E;&#x826F;&#x597D;&#x306A;&#x5951;&#x7D04;&#x306E;&#x96FB;&#x6D41;&#x5FDC;&#x7B54;&#x3092;&#x6E2C;&#x5B9A;&#x3059;&#x308B;&#x305F;&#x3081;&#x306B;&#x4F7F;&#x7528;&#x3055;&#x308C;&#x307E;&#x3057;&#x305F;&#x3002;&#x96FB;&#x754C;&#x5206;&#x5E03;&#x306F;&#x3001;&#x30C8;&#x30ED;&#x30EA;&#x7DDA;&#x96FB;&#x6975;&#x306E;&#x65B0;&#x3057;&#x3044;&#x30B3;&#x30F3;&#x30BB;&#x30D7;&#x30C8;&#x3068;&#x975E;&#x5E38;&#x306B;&#x30ED;&#x30FC;&#x30AB;&#x30E9;&#x30A4;&#x30BA;&#x3055;&#x308C;&#x305F;&#x3001;&#x975E;&#x5E38;&#x306B;&#x5747;&#x8CEA;&#x3067;&#x3042;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x304C;&#x89B3;&#x5BDF;&#x3055;&#x308C;&#x305F;&#x3002;&#x5F7C;&#x3089;&#x306F;&#x3001;&#x85AC;&#x3084;&#x30D7;&#x30E9;&#x30B9;&#x30DF;&#x30C9;&#x306E;&#x5236;&#x5FA1;&#x653E;&#x51FA;&#x3092;&#x8A98;&#x5C0E;&#x3059;&#x308B;&#x305F;&#x3081;&#x306B;&#x7D44;&#x7E54;&#x306E;&#x8868;&#x9762;&#x306B;&#x6CBF;&#x3063;&#x3066;&#x96FB;&#x754C;&#x52B9;&#x679C;&#x3092;&#x96C6;&#x4E2D;&#x3059;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x304C;&#x3067;&#x304D;&#x307E;&#x3057;&#x305F;&#x3002;&#x975E;&#x4FB5;&#x8972;&#x6027;&#xFF08;&#x63A5;&#x89E6;&#xFF09;&#x306E;&#x96FB;&#x6975;&#x304C;&#x672C;&#x4F53;&#x306B;&#x6025;&#x901F;&#x306B;&#x79FB;&#x52D5;&#x3057;&#x3001;&#x76AE;&#x819A;&#x3084;&#x7D44;&#x7E54;&#x3092;&#x7A7F;&#x523A;&#x3092;&#x56DE;&#x907F;&#x3059;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x304C;&#x3067;&#x304D;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x5F7C;&#x3089;&#x306F;&#x3001;&#x76AE;&#x819A;&#x3084;&#x76AE;&#x4E0B;&#x816B;&#x760D;&#x3092;&#x6CBB;&#x7642;&#x3059;&#x308B;&#x305F;&#x3081;&#x306B;&#x3001;&#x5927;&#x898F;&#x6A21;&#x306A;&#x8868;&#x9762;&#x52B9;&#x679C;&#x3092;&#x4F7F;&#x7528;&#x3059;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x304C;&#x3067;&#x304D;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x85AC;&#x7269;&#x307E;&#x305F;&#x306F;DNA&#x76AE;&#x5185;&#x6CE8;&#x5C04;&#x5F8C;&#x306E;&#x63A5;&#x89E6;&#x96FB;&#x6975;&#x3092;&#x4F7F;&#x7528;&#x3059;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x306F;&#x5927;&#x304D;&#x306A;&#x8868;&#x9762;&#x306E;&#x76AE;&#x819A;&#x816B;&#x760D;&#x306E;&#x81E8;&#x5E8A;&#x6CBB;&#x7642;&#x3067;&#x3068;&#x900F;&#x904E;&#x6027;&#x306E;&#x3001;&#x307E;&#x305F;&#x306F;&#x907A;&#x4F1D;&#x5B50;&#x767A;&#x73FE;&#x306E;in vivo&#x30A4;&#x30E1;&#x30FC;&#x30B8;&#x30F3;&#x30B0;&#x306B;&#x3088;&#x3063;&#x3066;&#x691C;&#x8A3C;&#x3055;&#x308C;&#x3066;&#x3044;&#x307E;&#x3059;&#x3002;

&#x751F;&#x4F53;&#x5185;&#x3067;&#x30ED;&#x30FC;&#x30AB;&#x30E9;&#x30A4;&#x30BA;&#x3055;&#x308C;&#x305F;&#x76AE;&#x819A;Electropulsation&#x3068;&#x95A2;&#x9023;&#x3059;&#x308B;&#x85AC;&#x7269;&#x304A;&#x3088;&#x3073;&#x6838;&#x9178;&#x9001;&#x9054;&#x306E;&#x305F;&#x3081;&#x306E;&#x975E;&#x4FB5;&#x8972;&#x30B3;&#x30F3;&#x30BF;&#x30AF;&#x30C8;&#x96FB;&#x6975;

&#xD6A8;&#xACFC;&#xC801;&#xC778; &#xC870;&#xC9C1; &#xC81C;&#xC5B4; electropermeabilization&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; electrochemotherapy &#xBC0F; electrogenotherapy, &#xC694;&#xCCAD;&#xC5D0; &#xB530;&#xB77C; &#xADF8;&#xAC83;&#xC740; &#xC804;&#xADF9;&#xC758; &#xC815;&#xC758; &#xB41C; &#xC9D1;&#xD569;&#xC5D0;&#xC11C; &#xC81C;&#xACF5; &#xD558;&#xB294; &#xC804;&#xAE30; &#xBD84;&#xC57C; &#xC720;&#xD1B5;&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xC815;&#xBCF4;&#xB97C; &#xB9E4;&#xC6B0; &#xC911;&#xC694; &#xD569;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xC720;&#xD55C; &#xC694;&#xC18C; &#xBAA8;&#xB378; &#xC811;&#xADFC;&#xBC95;&#xC744; &#xC0AC;&#xC6A9; &#xD558; &#xC5EC; &#xCEF4;&#xD4E8;&#xD130; &#xC2DC;&#xBBAC;&#xB808;&#xC774;&#xC158; &#xAD00;&#xB828;&#xB41C; &#xD544;&#xB4DC; &#xBD84;&#xD3EC; &#xBC0F; &#xC804;&#xB958; &#xC608;&#xCE21; &#xD588;&#xB2E4;. &#xC720;&#xB839; &#xAC1C;&#xCCB4; &#xC798; &#xC815;&#xC758; &#xB41C; &#xC804;&#xAE30; &#xC804;&#xB3C4;&#xB3C4;&#xC640; &#xC824;&#xC758; &#xB9CC;&#xB4E0; &#xC0C8;&#xB85C;&#xC6B4; &#xC804;&#xADF9; &#xD615;&#xC0C1; (&#xC804;&#xC120;)&#xC758; &#xD604;&#xC7AC; &#xC751;&#xB2F5;&#xC744; &#xCE21;&#xC815; &#xD558;&#xB294; &#xB370; &#xC0AC;&#xC6A9;&#xD55C;, &#xCE21;&#xC815; &#xBC0F; &#xC608;&#xCE21; &#xC804;&#xB958; &#xC0AC;&#xC774; &#xC88B;&#xC740; &#xACC4;&#xC57D; &#xD544;&#xB4DC; &#xBD84;&#xD3EC;&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xC608;&#xCE21;&#xC758; &#xD0C0;&#xB2F9;&#xC131;&#xC744; &#xC9C0; &#xC6D0;&#xD558;&#xB294; &#xAD00;&#xCC30; &#xB418;&#xC5C8;&#xB2E4;. &#xD544;&#xB4DC; &#xBD84;&#xD3EC;&#xB294; &#xB9E4;&#xC6B0; &#xC9C0;&#xC5ED;&#xD654; &#xBC0F; &#xC5F0;&#xB77D;&#xCC98; &#xC640;&#xC774;&#xC5B4; &#xC804;&#xADF9;&#xC758; &#xC0C8;&#xB85C;&#xC6B4; &#xAC1C;&#xB150;&#xC744; &#xB9E4;&#xC6B0; &#xADE0;&#xC9C8; &#xAC83; &#xAD00;&#xCC30; &#xB418;&#xC5C8;&#xB2E4;. &#xADF8;&#xB4E4;&#xC740; &#xC57D;&#xBB3C; &#xB610;&#xB294; &#xD50C;&#xB77C;&#xC2A4; &#xBBF8;&#xB4DC;&#xC758; &#xC81C;&#xC5B4; &#xCD9C;&#xC2DC;&#xB97C; &#xC720;&#xB3C4; &#xD558;&#xAE30; &#xC704;&#xD574; &#xC9C1;&#xBB3C;&#xC758; &#xD45C;&#xBA74; &#xB530;&#xB77C; &#xD544;&#xB4DC; &#xD6A8;&#xACFC; &#xCD08;&#xC810;&#xC744; &#xD5C8;&#xC6A9;. &#xBE44; &#xCE68;&#xB7B5; &#xC801; (&#xC5F0;&#xB77D;&#xCC98;) &#xC804;&#xADF9;&#xC744; &#xC2E0;&#xCCB4;&#xC5D0; &#xBE60;&#xB974;&#xAC8C; &#xC774;&#xB3D9;&#xD560; &#xC218; &#xC788;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4; &#xD558; &#xACE0; &#xD53C;&#xBD80;&#xC640; &#xC870;&#xC9C1; puncturing &#xD53C;&#xD558;&#xC2ED;&#xC2DC;&#xC624;. &#xADF8;&#xB4E4;&#xC740; &#xD53C;&#xBD80;&#xC640; &#xD53C;&#xD558; &#xC885;&#xC591;&#xC744; &#xCE58;&#xB8CC; &#xD558; &#xB300;&#xD615; &#xD45C;&#xBA74; &#xD6A8;&#xACFC; &#xC704;&#xD574; &#xC0AC;&#xC6A9;&#xD560; &#xC218; &#xC788;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xC57D;&#xBB3C; &#xC774;&#xB098; DNA &#xD53C;&#xBD80; &#xC8FC;&#xC785; &#xD6C4; &#xC811;&#xCD09; &#xC804;&#xADF9; &#xC0AC;&#xC6A9; &#xD588;&#xB2E4; &#xD070; &#xD45C;&#xBA74; &#xD53C;&#xBD80; &#xC885;&#xC591;&#xC758; &#xC784;&#xC0C1; &#xCE58;&#xB8CC;&#xC640; permeabilization&#xC758; &#xB610;&#xB294; &#xC720;&#xC804;&#xC790; &#xBC1C;&#xD604;&#xC758; &#xC0DD;&#xCCB4; &#xC870;&#xAC74; &#xD654;&#xC0C1; &#xC9C4; &#xCC30;&#xC5D0; &#xC758;&#xD574; &#xC720;&#xD6A8;&#xC131;&#xC774; &#xAC80;&#xC0AC; &#xB429;&#xB2C8;&#xB2E4;.

Vivo&#xC5D0;&#xC11C; &#xC9C0;&#xC5ED;&#xD654; &#xB41C; &#xD53C;&#xBD80; electropulsation &#xBC0F; &#xAD00;&#xB828;&#xB41C; &#xC57D;&#xBB3C; &#xBC0F; &#xD575; &#xC0B0; &#xBC30;&#xB2EC; &#xBE44; &#xCE68;&#xB7B5; &#xC801; &#xC811;&#xCD09; &#xC804;&#xADF9;.

Para un tejido electropermeabilization controlada eficaz como solicitado para electroquimioterapia y electrogenotherapy, es muy importante disponer de informaciones sobre la distribuci&#xF3;n del campo el&#xE9;ctrico proporcionado por un conjunto definido de electrodos. Las simulaciones por ordenador que utilizan los modelos de elementos finitos acercamiento pronosticado las distribuciones de campo asociados y las corrientes. Fantasmas hechos de geles con bien definida la conductancia el&#xE9;ctrica se utilizaron para medir las respuestas actuales de una geometr&#xED;a nuevo electrodo (cables), un buen acuerdo entre las corrientes medidas y predijo que se observ&#xF3; el apoyo a la validez de la predicci&#xF3;n de la distribuci&#xF3;n del campo. Distribuci&#xF3;n de campo se ha observado ser muy localizada y homog&#xE9;nea altamente con el nuevo concepto de electrodos de alambre de contacto. Se permiti&#xF3; a centrar el efecto de campo a lo largo de la superficie del tejido para inducir una liberaci&#xF3;n controlada de f&#xE1;rmacos o pl&#xE1;smidos. No invasivas (contacto) electrodos pueden ser movidos r&#xE1;pidamente en el cuerpo y evitar la perforaci&#xF3;n de la piel y el tejido. Se pueden utilizar para los efectos de superficie grande, para tratar la piel y tumores subcut&#xE1;neos. El uso de electrodos de contacto despu&#xE9;s de la droga o la inyecci&#xF3;n intrad&#xE9;rmica de ADN fueron validadas por el tratamiento cl&#xED;nico de grandes tumores superficiales de la piel y por la formaci&#xF3;n de im&#xE1;genes in vivo de permeabilizaci&#xF3;n o de la expresi&#xF3;n g&#xE9;nica.

No invasivas para electrodos de contacto en Vivo Electropulsation cut&#xE1;nea localizada y medicamentos asociados y entrega de &#xE1;cido nucleico

&#x6211;&#x4EEC;&#x63CF;&#x8FF0;&#x73B0;&#x5B9E;&#x4E0D;&#x89C4;&#x5219;&#x751F;&#x7269;&#x4E2D;&#x7684;&#x5355;&#x5143;&#x683C;&#x5141;&#x8BB8;&#x4F9D;&#x8D56;&#x4E8E;&#x65F6;&#x95F4;&#x7684;&#x53D8;&#x5316;&#x7684;&#x8BF1;&#x5BFC;&#x7EC6;&#x80DE;&#x8DE8;&#x819C;&#x7535;&#x4F4D; (&#x4E09;&#x89D2;&#x6D32; Psi) &#x8BA1;&#x7B97;&#x5916;&#x7684;&#x7535;&#x573A;&#x6709;&#x9650;&#x5143;&#x6A21;&#x578B;&#x548C;&#x6A21;&#x62DF;&#x7684;&#x7EC6;&#x80DE;&#x819C;&#x7535;&#x7A7F;&#x5B54;&#x3002;&#x6A21;&#x578B;&#x7B2C;&#x4E00;&#x6B21;&#x6D4B;&#x8BD5;&#x901A;&#x8FC7;&#x6BD4;&#x8F83;&#x5176;&#x7ED3;&#x679C;&#x4F9D;&#x8D56;&#x4E8E;&#x65F6;&#x95F4;&#x7684;&#x89E3;&#x6790;&#x89E3;&#x4E3A;&#x4E09;&#x89D2;&#x6D32; Psi &#x5BF9; nonporated &#x7684;&#x7403;&#x5F62;&#x7EC6;&#x80DE;&#xFF0C;&#x5E76;&#x83B7;&#x5F97;&#x4E00;&#x4E2A;&#x597D;&#x7684;&#x534F;&#x8BAE;&#x4E86;&#x3002;&#x8981;&#x6A21;&#x62DF;&#x7535;&#x7A7F;&#x5B54;&#xFF0C;&#x6A21;&#x578B;&#x662F;&#x901A;&#x8FC7;&#x5F15;&#x5165;&#x53D8;&#x91CF;&#x819C;&#x7535;&#x5BFC;&#x7387;&#x6269;&#x5C55;&#x3002;&#x5728;&#x63A5;&#x89E6;&#x5230;&#x8DB3;&#x591F;&#x9AD8;&#x7684;&#x4E09;&#x89D2;&#x6D32; Psi &#x7684;&#x533A;&#x57DF;&#xFF0C;&#x819C;&#x7535;&#x5BFC;&#x7387;&#x8FC5;&#x901F;&#x589E;&#x52A0;&#x968F;&#x7740;&#x65F6;&#x95F4;&#x7684;&#x63A8;&#x79FB;&#xFF0C;&#x5BFC;&#x81F4;&#x4FEE;&#x6539;&#x7684;&#x7A7A;&#x95F4;&#x5206;&#x5E03;&#x7684;&#x4E09;&#x89D2;&#x6D32;&#x9632;&#x6269;&#x6563;&#x5B89;&#x5168;&#x5021;&#x8BAE;&#x3002;&#x6211;&#x4EEC;&#x663E;&#x793A;&#x7A33;&#x6001;&#x6A21;&#x578B;&#x90FD;&#x4E0D;&#x8DB3;&#x4EE5;&#x51C6;&#x786E;&#x63CF;&#x8FF0;&#x7684;&#x4E09;&#x89D2;&#x6D32;&#x9632;&#x6269;&#x6563;&#x5B89;&#x5168;&#x5021;&#x8BAE;&#xFF0C;&#x4EE5;&#x53CA;&#x6D4B;&#x5B9A;&#x7684;&#x819C;&#xFF0C;&#x8F6C;&#x5730;&#x533A;&#x548C;&#x65F6;&#x95F4;&#x4F9D;&#x8D56;&#x6A21;&#x578B;&#x5E94;&#x6539;&#x4E3A;&#x4F7F;&#x7528;&#x3002;&#x6211;&#x4EEC;&#x7684;&#x5EFA;&#x6A21;&#x65B9;&#x6CD5;&#x8FD8;&#x5141;&#x8BB8;&#x76F4;&#x63A5;&#x6BD4;&#x8F83;&#x7684;&#x8BA1;&#x7B97;&#x548C;&#x5B9E;&#x9A8C;&#x3002;&#x4F5C;&#x4E3A;&#x4E00;&#x4E2A;&#x4F8B;&#x5B50;&#xFF0C;&#x6211;&#x4EEC;&#x663E;&#x793A;&#x7535;&#x7A7F;&#x5B54;&#x7684;&#x8BA1;&#x7B97;&#x7684;&#x533A;&#x57DF;&#x5BF9;&#x5E94;&#x7684;&#x5206;&#x5B50;&#x8FD0;&#x8F93;&#x5B9E;&#x9A8C;&#x89C2;&#x5BDF;&#x4ECE;&#x4E2D;&#x6784;&#x9020;&#x6A21;&#x578B;&#x662F;&#x76F8;&#x540C;&#x7684;&#x5355;&#x5143;&#x683C;&#x533A;&#x57DF;&#x3002;&#x4E09;&#x89D2;&#x6D32;&#x9632;&#x6269;&#x6563;&#x5B89;&#x5168;&#x5021;&#x8BAE;&#x7684;&#x65F6;&#x95F4;&#x4F9D;&#x8D56;&#x4E8E;&#x6A21;&#x578B;&#x548C;&#x6A21;&#x578B;&#x7684;&#x7535;&#x7A7F;&#x5B54;&#x53EF;&#x4EE5;&#x8FDB;&#x4E00;&#x6B65;&#x5229;&#x7528;&#x7814;&#x7A76;&#x66F4;&#x590D;&#x6742;&#x7684;&#x5355;&#x5143;&#x683C;&#x7CFB;&#x7EDF;&#xFF0C;&#x5305;&#x62EC;&#x90A3;&#x4E9B;&#x5BF9;&#x7EC6;&#x80DE;&#x95F4;&#x7684;&#x76F8;&#x4E92;&#x4F5C;&#x7528;&#x7684;&#x884C;&#x4E3A;&#x3002;

&#x4F9D;&#x8D56;&#x4E8E;&#x65F6;&#x95F4;&#x7684;&#x6570;&#x503C;&#x6A21;&#x578B;&#x7684;&#x8BF1;&#x5BFC;&#x7EC6;&#x80DE;&#x8DE8;&#x819C;&#x7535;&#x4F4D;&#x548C;&#x7535;&#x7A7F;&#x5B54;&#x7684;&#x4E0D;&#x89C4;&#x5219;&#x5F62;&#x72B6;&#x7684;&#x5355;&#x5143;&#x683C;&#x3002;

We describe a finite-element model of a realistic irregularly shaped biological cell in an external electric field that allows the calculation of time-dependent changes of the induced transmembrane voltage (Delta Psi) and simulation of cell membrane electroporation. The model was first tested by comparing its results to the time-dependent analytical solution for Delta Psi on a nonporated spherical cell, and a good agreement was obtained. To simulate electroporation, the model was extended by introducing a variable membrane conductivity. In the regions exposed to a sufficiently high Delta Psi, the membrane conductivity rapidly increased with time, leading to a modified spatial distribution of Delta Psi. We show that steady-state models are insufficient for accurate description of Delta Psi, as well as determination of electroporated regions of the membrane, and time-dependent models should be used instead. Our modeling approach also allows direct comparison of calculations and experiments. As an example, we show that calculated regions of electroporation correspond to the regions of molecular transport observed experimentally on the same cell from which the model was constructed. Both the time-dependent model of Delta Psi and the model of electroporation can be exploited further to study the behavior of more complicated cell systems, including those with cell-to-cell interactions.

A time-dependent numerical model of transmembrane voltage inducement and electroporation of irregularly shaped cells.

Nous d&#xE9;crivons un mod&#xE8;le par &#xE9;l&#xE9;ments finis d&#x26;#39;une cellule biologique r&#xE9;aliste de forme irr&#xE9;guli&#xE8;re dans un champ &#xE9;lectrique externe qui permet le calcul du temps-d&#xE9;pendants des changements de la tension transmembranaire induite (Psi Delta) et la simulation de l&#x26;#39;&#xE9;lectroporation membrane cellulaire. Le mod&#xE8;le a d&#x26;#39;abord &#xE9;t&#xE9; test&#xE9;e en comparant ses r&#xE9;sultats &#xE0; la solution en fonction du temps d&#x26;#39;analyse pour Psi Delta sur une cellule nonporated sph&#xE9;rique, et un bon accord a &#xE9;t&#xE9; obtenu. Pour simuler l&#x26;#39;&#xE9;lectroporation, le mod&#xE8;le a &#xE9;t&#xE9; &#xE9;tendu par l&#x26;#39;introduction d&#x26;#39;une conductivit&#xE9; membrane variable. Dans les r&#xE9;gions expos&#xE9;es &#xE0; un Psi suffisamment &#xE9;lev&#xE9;e Delta, la conductivit&#xE9; membranaire augmente rapidement avec le temps, conduisant &#xE0; une r&#xE9;partition spatiale de la modification de Psi Delta. Nous montrons que les mod&#xE8;les l&#x26;#39;&#xE9;tat d&#x26;#39;&#xE9;quilibre sont insuffisantes pour description pr&#xE9;cise de Psi Delta, ainsi que la d&#xE9;termination des r&#xE9;gions &#xE9;lectropor&#xE9;es de la membrane, et d&#xE9;pendant du temps des mod&#xE8;les devrait &#xEA;tre utilis&#xE9; &#xE0; la place. Notre approche de mod&#xE9;lisation permet &#xE9;galement une comparaison directe des calculs et des exp&#xE9;riences. A titre d&#x26;#39;exemple, nous montrons que les r&#xE9;gions calcul&#xE9;s de &#xE9;lectroporation correspondent aux r&#xE9;gions de transport mol&#xE9;culaire observ&#xE9; exp&#xE9;rimentalement sur la m&#xEA;me cellule &#xE0; partir duquel le mod&#xE8;le est construit. Tant le mod&#xE8;le d&#xE9;pendant du temps de Psi Delta et le mod&#xE8;le de l&#x26;#39;&#xE9;lectroporation peut &#xEA;tre davantage exploit&#xE9; pour &#xE9;tudier le comportement de syst&#xE8;mes plus complexes cellulaires, y compris ceux avec la cellule &#xE0; cellule des interactions.

Un mod&#xE8;le d&#xE9;pendant du temps num&#xE9;rique de l&#x26;#39;incitation de tension transmembranaire et &#xE9;lectroporation des cellules de forme irr&#xE9;guli&#xE8;re

Wir beschreiben ein Finite-Elemente-Modell einer realistischen unregelm&auml;&szlig;ig geformten biologische Zelle in einem externen elektrischen Feld, das die Berechnung der zeitabh&auml;ngigen &Auml;nderungen der induzierten Spannung Transmembran (Delta Psi) erlaubt und Simulation der Zellmembran Elektroporation. Das Modell wurde zun&auml;chst durch den Vergleich seiner Ergebnisse zur zeitabh&auml;ngigen analytische L&ouml;sung f&uuml;r Delta Psi auf einen sph&auml;rischen Nonporated-Zelle getestet, und ein gutes Abkommen erworben wurde. Um Elektroporation zu simulieren, wurde das Modell erweitert, durch die Einf&uuml;hrung einer Variable Membrane Leitf&auml;higkeit. In den Regionen, die einen ausreichend hohen Delta-Psi ausgesetzt erh&ouml;ht die Leitf&auml;higkeit der Membran schnell mit der Zeit f&uuml;hrt zu einer ver&auml;nderten r&auml;umlichen Verteilung der Delta Psi. Wir zeigen, dass die station&auml;ren Modelle sind nicht ausreichend f&uuml;r die genaue Beschreibung der Delta Psi, sowie Bestimmung der Electroporated Regionen der Membran und zeitabh&auml;ngige Modelle sollte stattdessen verwendet werden. Unsere Modellierung-Ansatz erm&ouml;glicht auch direkten Vergleich von Berechnungen und Experimente. Als Beispiel zeigen wir, dass die berechneten Bereiche der Elektroporation entsprechen den Regionen Molekulare Transportmittel auf der gleichen Zelle, aus der das Modell konstruiert wurde, experimentell beobachtet. Sowohl die zeitabh&auml;ngige Delta PSI und dem Modell der Elektroporation k&ouml;nnen weiter ausgenutzt werden, um das Verhalten von komplizierter Zellsysteme, einschlie&szlig;lich derer mit Zell-Zell-Interaktionen zu studieren.

Eine zeitabh&auml;ngige numerische Modell des transmembrane Spannung Anreiz und Electroporation von unregelm&auml;&szlig;ig geformten Zellen.

Descriviamo un modello di elementi finiti di un realistico cellula biologica dalla forma irregolare in un campo elettrico esterno che permette il calcolo del tempo-dipendente cambiamenti della tensione indotta transmembrana (Delta Psi) e la simulazione di elettroporazione di membrana cellulare. Il modello &egrave; stato testato prima confrontando i risultati per la soluzione di analisi tempo-dipendente per Delta Psi su una cellula sferica di nonporated, ed &egrave; stato ottenuto un buon accordo. Per simulare l&#39;elettroporazione, il modello &egrave; stato esteso con l&#39;introduzione di una conducibilit&agrave; di membrana variabile. Nelle regioni esposte a un sufficientemente elevato Delta Psi, la conducibilit&agrave; di membrana aumenta rapidamente con il tempo, portando ad una distribuzione spaziale modificata di Delta Psi. Vi mostriamo i modelli steady-state sono insufficienti per la descrizione accurata del Delta Psi, nonch&eacute; la determinazione delle regioni electroporated della membrana, che modelli di tempo-dipendente dovrebbero essere utilizzati invece. Il nostro approccio di modellazione consente inoltre il confronto diretto dei calcoli ed esperimenti. Ad esempio, mostriamo che regioni calcolati di elettroporazione corrispondono alle regioni di trasporto molecolare osservato sperimentalmente sulla stessa cellula da cui &egrave; stato costruito il modello. Sia il modello dipendente dal tempo di Delta Psi e l&#39;elettroporazione pu&ograve; essere sfruttati ulteriormente per studiare il comportamento dei pi&ugrave; complicati sistemi cellulari, compresi quelli con le interazioni cellula-cellula.

Un modello numerico dipendente dal tempo di incentivo di tensione del transmembrane ed elettroporazione delle cellule dalla forma irregolare.

&#x6211;&#x3005;&#x306F;&#x6642;&#x9593;&#x306B;&#x4F9D;&#x5B58;&#x3059;&#x308B;&#x8A98;&#x5C0E;&#x8CAB;&#x901A;&#x96FB;&#x5727;&#x306E;&#x5909;&#x5316;&#xFF08;&#x30C7;&#x30EB;&#x30BF;PSI&#xFF09;&#x3068;&#x7D30;&#x80DE;&#x819C;&#x306E;&#x30A8;&#x30EC;&#x30AF;&#x30C8;&#x30ED;&#x30DD;&#x30EC;&#x30FC;&#x30B7;&#x30E7;&#x30F3;&#x306E;&#x30B7;&#x30DF;&#x30E5;&#x30EC;&#x30FC;&#x30B7;&#x30E7;&#x30F3;&#x8A08;&#x7B97;&#x3092;&#x53EF;&#x80FD;&#x306B;&#x3059;&#x308B;&#x5916;&#x90E8;&#x96FB;&#x754C;&#x306E;&#x73FE;&#x5B9F;&#x7684;&#x306A;&#x4E0D;&#x898F;&#x5247;&#x306A;&#x5F62;&#x72B6;&#x306E;&#x751F;&#x4F53;&#x7D30;&#x80DE;&#x306E;&#x6709;&#x9650;&#x8981;&#x7D20;&#x30E2;&#x30C7;&#x30EB;&#x3092;&#x8A18;&#x8FF0;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x30E2;&#x30C7;&#x30EB;&#x306F;&#x3001;&#x6700;&#x521D;&#x306E;nonporated&#x7403;&#x72B6;&#x7D30;&#x80DE;&#x4E0A;&#x306E;&#x30C7;&#x30EB;&#x30BF;Psi&#x306E;&#x305F;&#x3081;&#x306E;&#x6642;&#x9593;&#x4F9D;&#x5B58;&#x6027;&#x306E;&#x89E3;&#x6790;&#x89E3;&#x306B;&#x305D;&#x306E;&#x7D50;&#x679C;&#x3092;&#x6BD4;&#x8F03;&#x3059;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x306B;&#x3088;&#x3063;&#x3066;&#x8A66;&#x9A13;&#x3057;&#x3001;&#x826F;&#x597D;&#x306A;&#x4E00;&#x81F4;&#x304C;&#x5F97;&#x3089;&#x308C;&#x305F;&#x3002;&#x30A8;&#x30EC;&#x30AF;&#x30C8;&#x30ED;&#x30DD;&#x30EC;&#x30FC;&#x30B7;&#x30E7;&#x30F3;&#x3092;&#x30B7;&#x30DF;&#x30E5;&#x30EC;&#x30FC;&#x30C8;&#x3059;&#x308B;&#x305F;&#x3081;&#x306B;&#x3001;&#x30E2;&#x30C7;&#x30EB;&#x304C;&#x53EF;&#x5909;&#x819C;&#x306E;&#x5C0E;&#x96FB;&#x6027;&#x3092;&#x5C0E;&#x5165;&#x3059;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x306B;&#x3088;&#x3063;&#x3066;&#x62E1;&#x5F35;&#x3055;&#x308C;&#x307E;&#x3057;&#x305F;&#x3002;&#x5341;&#x5206;&#x306B;&#x9AD8;&#x3044;&#x30C7;&#x30EB;&#x30BF;psi&#x306B;&#x3055;&#x3089;&#x3055;&#x308C;&#x308B;&#x5730;&#x57DF;&#x3067;&#x306F;&#x3001;&#x819C;&#x306E;&#x5C0E;&#x96FB;&#x7387;&#x304C;&#x6025;&#x901F;&#x306B;&#x30C7;&#x30EB;&#x30BF;&#x30B5;&#x30A4;&#x306E;&#x5909;&#x66F4;&#x3055;&#x308C;&#x305F;&#x7A7A;&#x9593;&#x7684;&#x306A;&#x5206;&#x5E03;&#x306B;&#x3064;&#x306A;&#x304C;&#x308B;&#x3001;&#x6642;&#x9593;&#x3068;&#x3068;&#x3082;&#x306B;&#x5897;&#x52A0;&#x3057;&#x305F;&#x3002;&#x6211;&#x3005;&#x306F;&#x3001;&#x5B9A;&#x5E38;&#x72B6;&#x614B;&#x30E2;&#x30C7;&#x30EB;&#x306F;&#x3001;&#x6B63;&#x78BA;&#x306A;&#x30C7;&#x30EB;&#x30BF;PSI&#x306E;&#x8AAC;&#x660E;&#x3068;&#x540C;&#x69D8;&#x306B;&#x3001;&#x819C;&#x306E;&#x30A8;&#x30EC;&#x30AF;&#x30C8;&#x30ED;&#x30DD;&#x30EC;&#x30FC;&#x30B7;&#x30E7;&#x30F3;&#x9818;&#x57DF;&#x306E;&#x6C7A;&#x5B9A;&#x306B;&#x306F;&#x4E0D;&#x5341;&#x5206;&#x3067;&#x3042;&#x308A;&#x3001;&#x6642;&#x9593;&#x4F9D;&#x5B58;&#x30E2;&#x30C7;&#x30EB;&#x304C;&#x4EE3;&#x308F;&#x308A;&#x306B;&#x4F7F;&#x7528;&#x3059;&#x308B;&#x5FC5;&#x8981;&#x304C;&#x3042;&#x308A;&#x307E;&#x3059;&#x8868;&#x793A;&#x3055;&#x308C;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x6211;&#x3005;&#x306E;&#x30E2;&#x30C7;&#x30EA;&#x30F3;&#x30B0;&#x30A2;&#x30D7;&#x30ED;&#x30FC;&#x30C1;&#x306F;&#x3001;&#x8A08;&#x7B97;&#x3068;&#x5B9F;&#x9A13;&#x306E;&#x76F4;&#x63A5;&#x6BD4;&#x8F03;&#x3059;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x304C;&#x3067;&#x304D;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x4F8B;&#x3068;&#x3057;&#x3066;&#x3001;&#x6211;&#x3005;&#x306F;&#x3001;&#x30A8;&#x30EC;&#x30AF;&#x30C8;&#x30ED;&#x30DD;&#x30EC;&#x30FC;&#x30B7;&#x30E7;&#x30F3;&#x306E;&#x8A08;&#x7B97;&#x9818;&#x57DF;&#x306F;&#x3001;&#x30E2;&#x30C7;&#x30EB;&#x304C;&#x69CB;&#x7BC9;&#x3055;&#x308C;&#x305F;&#x306E;&#x3068;&#x540C;&#x3058;&#x30BB;&#x30EB;&#x4E0A;&#x306B;&#x5B9F;&#x9A13;&#x7684;&#x306B;&#x89B3;&#x5BDF;&#x5206;&#x5B50;&#x8F38;&#x9001;&#x306E;&#x9818;&#x57DF;&#x306B;&#x5BFE;&#x5FDC;&#x3059;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x3092;&#x793A;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x308B;&#x3002;&#x30C7;&#x30EB;&#x30BF;PSI&#x306E;&#x6642;&#x9593;&#x4F9D;&#x5B58;&#x30E2;&#x30C7;&#x30EB;&#x3068;&#x30A8;&#x30EC;&#x30AF;&#x30C8;&#x30ED;&#x30DD;&#x30EC;&#x30FC;&#x30B7;&#x30E7;&#x30F3;&#x306E;&#x30E2;&#x30C7;&#x30EB;&#x306E;&#x4E21;&#x65B9;&#x304C;&#x7D30;&#x80DE;&#x9593;&#x76F8;&#x4E92;&#x4F5C;&#x7528;&#x3092;&#x6709;&#x3059;&#x308B;&#x3082;&#x306E;&#x3092;&#x542B;&#x3080;&#x3001;&#x3088;&#x308A;&#x8907;&#x96D1;&#x306A;&#x7D30;&#x80DE;&#x30B7;&#x30B9;&#x30C6;&#x30E0;&#x306E;&#x52D5;&#x4F5C;&#x3092;&#x7814;&#x7A76;&#x3059;&#x308B;&#x305F;&#x3081;&#x306B;&#x3001;&#x3055;&#x3089;&#x306B;&#x60AA;&#x7528;&#x3055;&#x308C;&#x308B;&#x53EF;&#x80FD;&#x6027;&#x304C;&#x3042;&#x308A;&#x307E;&#x3059;&#x3002;

&#x4E0D;&#x898F;&#x5247;&#x306A;&#x5F62;&#x306E;&#x7D30;&#x80DE;&#x306E;&#x819C;&#x8CAB;&#x901A;&#x96FB;&#x5727;&#x8A98;&#x5C0E;&#x3068;&#x30A8;&#x30EC;&#x30AF;&#x30C8;&#x30ED;&#x306E;&#x6642;&#x9593;&#x4F9D;&#x5B58;&#x6570;&#x5024;&#x30E2;&#x30C7;&#x30EB;

&#xC6B0;&#xB9AC; &#xC720;&#xB3C4; &#xB9C9; &#xD6A1;&#xB2E8; &#xC804;&#xC555; (&#xB378;&#xD0C0; Psi)&#xC758; &#xC2DC;&#xAC04;&#xC5D0; &#xB530;&#xB978; &#xBCC0;&#xD654;&#xC758; &#xACC4;&#xC0B0;&#xC744; &#xC218; &#xC788;&#xB3C4;&#xB85D; &#xC678;&#xBD80; &#xC804;&#xAE30;&#xC7A5;&#xC5D0; &#xD604;&#xC2E4;&#xC801;&#xC778; &#xBD88;&#xADDC;&#xCE59; &#xD55C; &#xBAA8;&#xC591;&#xC758; &#xC0DD;&#xBB3C; &#xC138;&#xD3EC;&#xC758; &#xC720;&#xD55C; &#xC694;&#xC18C; &#xBAA8;&#xB378;&#xC744; &#xC124;&#xBA85; &#xD558; &#xACE0; &#xC138;&#xD3EC; &#xB9C9; electroporation &#xC2DC;&#xBBAC;&#xB808;&#xC774;&#xC158;. &#xBAA8;&#xB378; nonporated &#xAD6C;&#xD615; &#xC140;&#xC5D0; &#xB378;&#xD0C0; Psi&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xC2DC;&#xAC04;&#xC5D0; &#xB530;&#xB77C; &#xBD84;&#xC11D; &#xC194;&#xB8E8;&#xC158;&#xC5D0; &#xADF8; &#xACB0;&#xACFC; &#xBE44;&#xAD50; &#xD558; &#xC5EC; &#xBA3C;&#xC800; &#xD14C;&#xC2A4;&#xD2B8; &#xD558; &#xACE0; &#xC88B;&#xC740; &#xD569;&#xC758; &#xC5BB;&#xC740;. Electroporation &#xC2DC;&#xBBAC;&#xB808;&#xC774;&#xC158; &#xBAA8;&#xB378; &#xBCC0;&#xC218; &#xB9C9; &#xC804;&#xB3C4;&#xB3C4; &#xB3C4;&#xC785; &#xD558; &#xC5EC; &#xD655;&#xC7A5; &#xB418;&#xC5C8;&#xB2E4;. &#xCDA9;&#xBD84;&#xD788; &#xB192;&#xC740; &#xB378;&#xD0C0; Psi&#xC5D0; &#xB178;&#xCD9C; &#xB41C; &#xC9C0;&#xC5ED;&#xC5D0;&#xC11C; &#xB9C9; &#xC804;&#xB3C4;&#xB3C4; &#xAE09;&#xC18D; &#xD558; &#xAC8C; &#xC99D;&#xAC00; &#xC2DC;&#xAC04;, &#xB378;&#xD0C0; Psi&#xC758; &#xC218;&#xC815; &#xACF5;&#xAC04; &#xBD84;&#xD3EC; &#xC120;&#xB3C4;. &#xC6B0;&#xB9AC;&#xB294; &#xC815;&#xC0C1; &#xC0C1;&#xD0DC; &#xBAA8;&#xB378;&#xC740; &#xB378;&#xD0C0; Psi&#xC758; &#xC815;&#xD655;&#xD55C; &#xC124;&#xBA85;&#xC73C;&#xB85C;, &#xB9C9;&#xC758; electroporated &#xC601;&#xC5ED;&#xC758; &#xACB0;&#xC815;&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xCDA9;&#xBD84; &#xD55C; &#xC2DC;&#xAC04;&#xC5D0; &#xB530;&#xB77C; &#xBAA8;&#xB378;&#xC744; &#xB300;&#xC2E0; &#xC0AC;&#xC6A9; &#xD574;&#xC57C; &#xD45C;&#xC2DC; &#xD569;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xC6B0;&#xB9AC;&#xC758; &#xBAA8;&#xB378;&#xB9C1; &#xC811;&#xADFC; &#xBC29;&#xBC95;&#xC5D0;&#xB294; &#xACC4;&#xC0B0;&#xACFC; &#xC2E4;&#xD5D8;&#xC744; &#xC9C1;&#xC811; &#xBE44;&#xAD50;&#xD560; &#xC218; &#xC788;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xC608;&#xB97C; &#xB4E4;&#xC5B4;, &#xC6B0;&#xB9AC;&#xB294; &#xACC4;&#xC0B0;&#xB41C; &#xC601;&#xC5ED; electroporation&#xC758; &#xBD84;&#xC790; &#xC804;&#xC1A1; &#xBAA8;&#xB378; &#xC0DD;&#xC131; &#xB41C; &#xB3D9;&#xC77C;&#xD55C; &#xC140;&#xC5D0; &#xC2E4;&#xD5D8;&#xC801;&#xC73C;&#xB85C; &#xAD00;&#xCC30;&#xC758; &#xC601;&#xC5ED;&#xC5D0; &#xD574;&#xB2F9; &#xBCF4;&#xC5EC;&#xC90D;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xB378;&#xD0C0; Psi&#xC758; &#xC2DC;&#xAC04; &#xC885;&#xC18D; &#xBAA8;&#xB378;&#xACFC; electroporation &#xBAA8;&#xB378; &#xBAA8;&#xB450; &#xADF8; &#xC140; &#xC0C1;&#xD638; &#xC791;&#xC6A9;&#xC744; &#xD3EC;&#xD568; &#xD55C; &#xBCF4;&#xB2E4; &#xBCF5;&#xC7A1; &#xD55C; &#xC804;&#xC9C0; &#xC2DC;&#xC2A4;&#xD15C;&#xC758; &#xB3D9;&#xC791;&#xC744; &#xC5F0;&#xAD6C;&#xB97C; &#xB354; &#xC774;&#xC6A9;&#xD560; &#xC218; &#xC788;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4;.

&#xB9C9; &#xD6A1;&#xB2E8; &#xC804;&#xC555; &#xC720;&#xB3C4; &#xD558; &#xACE0; &#xBD88;&#xADDC;&#xCE59; &#xD55C; &#xBAA8;&#xC591;&#xC758; &#xC140; electroporation&#xC758; &#xC2DC;&#xAC04;&#xC5D0; &#xB530;&#xB978; &#xC218;&#xCE58; &#xBAA8;&#xB378;.

Se describe un modelo de elementos finitos de una c&#xE9;lula biol&#xF3;gica real de forma irregular en un campo el&#xE9;ctrico externo que permite el c&#xE1;lculo de los cambios dependientes del tiempo de la tensi&#xF3;n inducida por la transmembrana (Psi Delta) y la simulaci&#xF3;n de la electroporaci&#xF3;n de la membrana celular. El modelo fue probado por primera vez mediante la comparaci&#xF3;n de sus resultados a la soluci&#xF3;n de an&#xE1;lisis en funci&#xF3;n del tiempo de Psi Delta en una c&#xE9;lula esf&#xE9;rica nonporated, y un buen acuerdo se obtuvo. Para simular la electroporaci&#xF3;n, el modelo se extendi&#xF3; mediante la introducci&#xF3;n de una membrana de conductividad variable. En las regiones expuestas a un Psi Delta suficientemente alta, la conductividad membrana aumentado r&#xE1;pidamente con el tiempo, dando lugar a una distribuci&#xF3;n espacial modificada de Psi Delta. Se demuestra que los modelos de estado estacionario son insuficientes para la descripci&#xF3;n exacta de Psi Delta, as&#xED; como la determinaci&#xF3;n de las regiones electroporadas de la membrana, y dependientes del tiempo modelos se debe utilizar en su lugar. Nuestro enfoque de modelado tambi&#xE9;n permite la comparaci&#xF3;n directa de los c&#xE1;lculos y experimentos. Como un ejemplo, se muestra que las regiones calculados de electroporaci&#xF3;n corresponden a las regiones de transporte molecular observado experimentalmente en la misma celda de la que se construy&#xF3; el modelo. Tanto el modelo dependiente del tiempo de Psi Delta y el modelo de electroporaci&#xF3;n puede explotarse a&#xFA;n m&#xE1;s para estudiar el comportamiento de sistemas m&#xE1;s complicados de c&#xE9;lulas, incluyendo aquellas con las interacciones de c&#xE9;lula a c&#xE9;lula.

Un modelo num&#xE9;rico en funci&#xF3;n del tiempo de inducci&#xF3;n transmembrana de tensi&#xF3;n y de electroporaci&#xF3;n de c&#xE9;lulas con formas irregulares

&#x5728;&#x8BF1;&#x5BFC;&#x7684;&#x8DE8;&#x819C; (&#x8BF1;&#x5BFC;&#x7EC6;&#x80DE;&#x8DE8;&#x819C;&#x7535;&#x4F4D;&#xFF0C;DeltaPsi (m)&#xFF09; &#x548C;&#x8DB3;&#x591F;&#x5F3A;&#x5927;&#x4E2D;&#x7684;&#x5B57;&#x6BB5;&#xFF0C;&#x819C;&#x901A;&#x900F;&#x6027; &#xFF08;&#x7A7F;&#x5B54;&#xFF09; &#x6682;&#x65F6;&#x589E;&#x52A0;&#x7535;&#x538B;&#x7535;&#x573A;&#x7ED3;&#x679C;&#x5355;&#x5143;&#x683C;&#x7684;&#x63A5;&#x89E6;&#x3002;&#x6211;&#x4EEC;&#x68C0;&#x8BA8; DeltaPsi (m) &#x7684;&#x6D4B;&#x5B9A;&#x5206;&#x6790;&#x3001; &#x6570;&#x503C;&#x6A21;&#x62DF;&#x548C;&#x5B9E;&#x9A8C;&#x65B9;&#x6CD5;&#x548C;&#x76D1;&#x6D4B;&#x65B9;&#x6CD5;&#x7684;&#x8DE8;&#x819C;&#x8FD0;&#x8F93;&#x3002;&#x7136;&#x540E;&#xFF0C;&#x6211;&#x4EEC;&#x7ED3;&#x5408;&#x8FD9;&#x4E9B;&#x65B9;&#x6CD5;&#x6765;&#x8C03;&#x67E5; DeltaPsi (m) &#x548C;&#x901A;&#x8FC7;&#x6B63;&#x89C4;&#x548C;&#x975E;&#x6B63;&#x89C4;&#x7684;&#x5F62;&#x72B6;&#x4E2D;&#x5BC6;&#x60AC;&#x6D6E;&#x4EE5;&#x53CA;&#x5355;&#x5C42;&#x96C6;&#x7FA4;&#x4E2D;&#x7684;&#x5355;&#x5143;&#x683C;, &#x7684;&#x5355;&#x5143;&#x683C;&#x79BB;&#x7EC6;&#x80DE;&#x8F6C;&#x819C;&#x5206;&#x5B50;&#x8FD0;&#x8F93;&#x4E4B;&#x95F4;&#x7684;&#x76F8;&#x4E92;&#x5173;&#x7CFB;&#x3002;&#x6211;&#x4EEC;&#x5BF9;&#x4E2A;&#x522B;&#x7EC6;&#x80DE;&#x7684;&#x89C4;&#x5219;&#x548C;&#x4E0D;&#x89C4;&#x5219;&#x5F62;&#x72B6;&#x7684;&#x5B9E;&#x9A8C;&#x8BC1;&#x5B9E;&#x7406;&#x8BBA;&#x9884;&#x6D4B;&#x9762;&#x4E34;&#x7535;&#x6781;&#x819C;&#x5730;&#x533A;&#x627E;&#x51FA;&#x6700;&#x9AD8;&#x7684; DeltaPsi (m) &#x7EDD;&#x5BF9;&#x503C;&#x548C;&#x7535;&#x7A7F;&#x5B54;&#x4ECB;&#x5BFC;&#x7684;&#x8FD0;&#x8F93;&#x5C40;&#x9650;&#x4E8E;&#x8FD9;&#x4E9B;&#x76F8;&#x540C;&#x7684;&#x533A;&#x57DF;&#x3002;&#x5BF9;&#x4E8E;&#x7FA4;&#x96C6;&#x4E2D;&#x7684;&#x5355;&#x5143;&#x683C;&#xFF0C;&#x8FD0;&#x8F93;&#x533A;&#x57DF;&#x7684;&#x4F4D;&#x7F6E;&#x610F;&#x5473;&#x7740;&#xFF0C;&#x5728;&#x5916;&#x5730;&#x5B9E;&#x529B;&#x8DB3;&#x591F;&#x7684;&#x7535;&#x7A7F;&#x5B54;&#xFF0C;&#x7EC6;&#x80DE;&#x884C;&#x4E3A;&#x4F5C;&#x4E3A;&#x7535;&#x7EDD;&#x7F18; &#xFF08;&#x5373;&#xFF0C;&#x4F5C;&#x4E3A;&#x4E2A;&#x4EBA;&#xFF09; &#x7684;&#x5355;&#x5143;&#x683C;&#x3002;&#x4E0E;&#x4E4B;&#x76F8;&#x53CD;&#xFF0C;&#x5927;&#x5927;&#x8F83;&#x5F31;&#xFF0C;nonelectroporating &#x5B57;&#x6BB5;&#xFF0C;&#x7535;&#x4F4D;&#x7684;&#x6D4B;&#x91CF;&#x7ED3;&#x679C;&#x663E;&#x793A;&#x8FD9;&#x4E9B;&#x76F8;&#x540C;&#x7684;&#x7FA4;&#x96C6;&#x4E2D;&#x7684;&#x5355;&#x5143;&#x683C;&#x8868;&#x73B0;&#x4E3A;&#x7535;&#x76F8;&#x4E92;&#x5173;&#x8054;&#x7684;&#x5355;&#x5143;&#x683C; &#xFF08;&#x5373;&#xFF0C;&#x4F5C;&#x4E3A;&#x4E00;&#x4E2A;&#x5927;&#x7684;&#x5355;&#x5143;&#x683C;&#xFF09;&#x3002;&#x8FD9;&#x4E9B;&#x7ED3;&#x679C;&#x8868;&#x660E;&#x8DB3;&#x591F;&#x9AD8;&#x7684;&#x7535;&#x573A;&#x5F71;&#x54CD;&#x7EC6;&#x80DE;&#x95F4;&#x7684;&#x901A;&#x8DEF;&#xFF0C;&#x4ECE;&#x800C;&#x6539;&#x53D8;&#x5176;&#x6B63;&#x5E38;&#x7684;&#x751F;&#x7406;&#x72B6;&#x6001;&#x7684;&#x5355;&#x5143;&#x683C;&#x7684;&#x7535;&#x884C;&#x4E3A;&#x3002;

&#x8BF1;&#x5BFC;&#x7EC6;&#x80DE;&#x8DE8;&#x819C;&#x7535;&#x4F4D;&#x53CA;&#x4E0E;&#x7535;&#x7A7F;&#x5B54;&#x4ECB;&#x5BFC;&#x5206;&#x5B50;&#x8FD0;&#x8F93;&#x7684;&#x5173;&#x7CFB;&#x3002;

Exposure of a cell to an electric field results in inducement of a voltage across its membrane (induced transmembrane voltage, DeltaPsi (m)) and, for sufficiently strong fields, in a transient increase of membrane permeability (electroporation). We review the analytical, numerical and experimental methods for determination of DeltaPsi (m) and a method for monitoring of transmembrane transport. We then combine these methods to investigate the correlation between DeltaPsi (m) and molecular transport through an electroporated membrane for isolated cells of regular and irregular shapes, for cells in dense suspensions as well as for cells in monolayer clusters. Our experiments on isolated cells of both regular and irregular shapes confirm the theoretical prediction that the highest absolute values of DeltaPsi (m) are found in the membrane regions facing the electrodes and that electroporation-mediated transport is confined to these same regions. For cells in clusters, the location of transport regions implies that, at the field strengths sufficient for electroporation, the cells behave as electrically insulated (i.e., as individual) cells. In contrast, with substantially weaker, nonelectroporating fields, potentiometric measurements show that the cells in these same clusters behave as electrically interconnected cells (i.e., as one large cell). These results suggest that sufficiently high electric fields affect the intercellular pathways and thus alter the electric behavior of the cells with respect to their normal physiological state.

Induced transmembrane voltage and its correlation with electroporation-mediated molecular transport.

L&#x26;#39;exposition d&#x26;#39;une cellule &#xE0; un champ &#xE9;lectrique dans les r&#xE9;sultats d&#x26;#39;incitation d&#x26;#39;une tension aux bornes de la membrane (tension transmembranaire induite, DeltaPsi (m)) et, pour des champs suffisamment forts, une augmentation transitoire de la perm&#xE9;abilit&#xE9; de la membrane (&#xE9;lectroporation). Nous passons en revue les m&#xE9;thodes analytiques, num&#xE9;riques et exp&#xE9;rimentales pour la d&#xE9;termination de DeltaPsi (m) et une m&#xE9;thode pour la surveillance du transport transmembranaire. Nous avons ensuite combiner ces m&#xE9;thodes pour &#xE9;tudier la corr&#xE9;lation entre DeltaPsi (m) et le transport mol&#xE9;culaire &#xE0; travers une membrane &#xE9;lectropor&#xE9; pour les cellules isol&#xE9;es de formes r&#xE9;guli&#xE8;res et irr&#xE9;guli&#xE8;res, pour les cellules de suspensions denses ainsi que pour les cellules en grappes monocouches. Nos exp&#xE9;riences sur des cellules isol&#xE9;es de formes &#xE0; la fois r&#xE9;guli&#xE8;res et irr&#xE9;guli&#xE8;res confirment la pr&#xE9;diction th&#xE9;orique que les plus hautes valeurs absolues de DeltaPsi (m) se trouvent dans les r&#xE9;gions de membranes en regard des &#xE9;lectrodes et que le transport d&#x26;#39;&#xE9;lectroporation &#xE0; m&#xE9;diation se limite &#xE0; ces m&#xEA;mes r&#xE9;gions. Pour les cellules en grappes, l&#x26;#39;emplacement des r&#xE9;gions de transport implique que, lors des intensit&#xE9;s de champ suffisante pour l&#x26;#39;&#xE9;lectroporation, les cellules se comportent comme des isol&#xE9;s pour l&#x26;#39;&#xE9;lectricit&#xE9; (c.-&#xE0;-, en tant qu&#x26;#39;individu) des cellules. En revanche, avec sensiblement plus faibles, les champs nonelectroporating, des mesures potentiom&#xE9;triques montrent que les cellules de ces m&#xEA;mes grappes se comportent comme des cellules interconnect&#xE9;es &#xE9;lectriquement (c&#x26;#39;est &#xE0; dire comme une cellule grande). Ces r&#xE9;sultats sugg&#xE8;rent que suffisamment de champs &#xE9;lectriques &#xE9;lev&#xE9;s affectent les voies intercellulaires et donc de modifier le comportement &#xE9;lectrique des cellules par rapport &#xE0; leur &#xE9;tat physiologique normal.

Tension transmembranaire induite et sa corr&#xE9;lation avec d&#x26;#39;&#xE9;lectroporation &#xE0; m&#xE9;diation Transport Mol&#xE9;culaire

Gef&auml;hrdung durch ein elektrisches Feld einer Zelle f&uuml;hrt Verleitung einer Spannung in seiner Membran verteilt (induzierten transmembrane Spannung, DeltaPsi (m)) und f&uuml;r ausreichend starke Felder, ein vor&uuml;bergehender Anstieg der Membrane Permeabilit&auml;t (Elektroporation). Wir &uuml;berpr&uuml;fen die analytischen, numerischen und experimentellen Methoden zur Bestimmung des DeltaPsi (m) und eine Methode zur &Uuml;berwachung von Transmembran-Transport. Dann verbinden wir diese Methoden um die Korrelation zwischen DeltaPsi (m) und Molekulare Transport durch eine Electroporated Membran f&uuml;r isolierte Zellen von regelm&auml;&szlig;igen und unregelm&auml;&szlig;igen Formen, f&uuml;r Zellen in dichten Suspensionen sowie f&uuml;r Zellen in Clustern Monolage zu untersuchen. Unsere Experimente an isolierten Zellen sowohl regelm&auml;&szlig;ige und unregelm&auml;&szlig;ige Formen best&auml;tigen die theoretische Vorhersage, dass die h&ouml;chsten absoluten Werte der DeltaPsi (m) in die Membran Regionen, in denen die Elektroden befinden und Elektroporation-vermittelten Transport auf diesen gleichen Regionen beschr&auml;nkt ist. F&uuml;r Zellen in Clustern impliziert die Position des Transport-Regionen, dass bei der Feldst&auml;rken ausreichend f&uuml;r Elektroporation, die Zellen als elektrisch isolierte (d. h. als einzelne) Zellen Verhalten. Im Gegensatz dazu mit wesentlich schw&auml;cher, Nonelectroporating Felder zufolge Potentiometrische Messungen Zellen in diese gleichen Cluster als elektrisch miteinander verbundene Zellen (das hei&szlig;t als eine gro&szlig;e Zelle) Verhalten. Diese Ergebnisse legen nahe, dass ausreichend hohe elektrische Felder die interzellul&auml;ren Pfaden beeinflussen und ver&auml;ndern damit das elektrische Verhalten der Zellen in Bezug auf ihre normalen physiologischen Zustand.

Induzierte transmembrane Spannung und seine Korrelation mit molekularen Transport Elektroporation-vermittelte.

L&#39;esposizione di una cella di un campo elettrico provoca incentivo di una tensione attraverso la membrana (tensione del transmembrane indotta, DeltaPsi (m)) e, per i campi sufficientemente forte, in un temporaneo aumento della permeabilit&agrave; della membrana (elettroporazione). Passiamo in rassegna i metodi analitici, numerici e sperimentali per la determinazione del DeltaPsi (m) e un metodo per il monitoraggio del trasporto transmembrana. Abbiamo quindi combinare questi metodi per indagare la correlazione tra DeltaPsi (m) e il trasporto molecolare attraverso una membrana electroporated per cellule isolate di forme regolari e irregolari, per le celle in sospensioni dense come pure per quanto riguarda le cellule in ammassi monostrato. Nostri esperimenti su cellule isolate di forme regolari e irregolari di confermare la previsione teorica che i valori assoluti pi&ugrave; alti di DeltaPsi (m) si trovano nelle regioni membrana rivolto verso gli elettrodi e che trasporto mediato elettroporazione &egrave; limitato a queste regioni stesse. Per le celle in cluster, la posizione delle regioni di trasporto implica che, a forza di campo sufficiente per elettroporazione, le cellule si comportano come cellule elettricamente isolate (cio&egrave;, come singoli). In contrasto, con sostanzialmente pi&ugrave; debole, nonelectroporating campi, potenziometriche misurazioni mostrano che le cellule in questi cluster stessi comportano come elettricamente le celle interconnesse (cio&egrave;, come una cella di grandi dimensioni). Questi risultati suggeriscono che sufficientemente alti campi elettrici possono influenzare le vie intercellulari e cos&igrave; alterare il comportamento elettrico delle cellule rispetto al loro normale stato fisiologico.

Tensione del transmembrane indotta e sua correlazione con trasporto molecolare elettroporazione-mediata.

&#x305D;&#x306E;&#x819C;&#xFF08;&#x8A98;&#x5C0E;&#x8CAB;&#x901A;&#x96FB;&#x5727;&#x3001;DeltaPsi&#xFF08;M&#xFF09;&#xFF09;&#x306E;&#x4E21;&#x7AEF;&#x306E;&#x96FB;&#x5727;&#x306E;&#x8A98;&#x5C0E;&#x306E;&#x96FB;&#x754C;&#x7D50;&#x679C;&#x3078;&#x306E;&#x7D30;&#x80DE;&#x306E;&#x66DD;&#x9732;&#x3068;&#x3001;&#x5341;&#x5206;&#x306B;&#x5F37;&#x529B;&#x306A;&#x30D5;&#x30A3;&#x30FC;&#x30EB;&#x30C9;&#x306B;&#x3001;&#x819C;&#x900F;&#x904E;&#x6027;&#xFF08;&#x30A8;&#x30EC;&#x30AF;&#x30C8;&#x30ED;&#x30DD;&#x30EC;&#x30FC;&#x30B7;&#x30E7;&#x30F3;&#xFF09;&#x306E;&#x4E00;&#x904E;&#x6027;&#x306B;&#x5897;&#x52A0;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x6211;&#x3005;&#x306F;DeltaPsi&#xFF08;m&#xFF09;&#x306E;&#x6E2C;&#x5B9A;&#x304A;&#x3088;&#x3073;&#x819C;&#x8CAB;&#x901A;&#x8F38;&#x9001;&#x306E;&#x76E3;&#x8996;&#x306E;&#x305F;&#x3081;&#x306E;&#x65B9;&#x6CD5;&#x306F;&#x3001;&#x5206;&#x6790;&#x6570;&#x5024;&#x8A08;&#x7B97;&#x304A;&#x3088;&#x3073;&#x5B9F;&#x9A13;&#x65B9;&#x6CD5;&#x3092;&#x78BA;&#x8A8D;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x305D;&#x306E;&#x5F8C;&#x3001;&#x5B9A;&#x671F;&#x7684;&#x304B;&#x3064;&#x4E0D;&#x898F;&#x5247;&#x306A;&#x5F62;&#x72B6;&#x306E;&#x5358;&#x96E2;&#x3055;&#x308C;&#x305F;&#x7D30;&#x80DE;&#x306E;&#x305F;&#x3081;&#x306E;&#x30A8;&#x30EC;&#x30AF;&#x30C8;&#x30ED;&#x30DD;&#x30EC;&#x30FC;&#x30B7;&#x30E7;&#x30F3;&#x819C;&#x3092;&#x4ECB;&#x3057;&#x3066;&#x3001;&#x7DFB;&#x5BC6;&#x306A;&#x61F8;&#x6FC1;&#x6DB2;&#x4E2D;&#x306E;&#x7D30;&#x80DE;&#x306E;&#x305F;&#x3081;&#x3060;&#x3051;&#x3067;&#x306A;&#x304F;&#x3001;&#x5358;&#x5206;&#x5B50;&#x5C64;&#x30AF;&#x30E9;&#x30B9;&#x30BF;&#x5185;&#x306E;&#x30BB;&#x30EB;&#x306E;DeltaPsi&#xFF08;m&#xFF09;&#x3068;&#x5206;&#x5B50;&#x8F38;&#x9001;&#x3068;&#x306E;&#x76F8;&#x95A2;&#x95A2;&#x4FC2;&#x3092;&#x8ABF;&#x3079;&#x308B;&#x305F;&#x3081;&#x306B;&#x3001;&#x3053;&#x308C;&#x3089;&#x306E;&#x30E1;&#x30BD;&#x30C3;&#x30C9;&#x3092;&#x7D44;&#x307F;&#x5408;&#x308F;&#x305B;&#x3066;&#x3044;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x5B9A;&#x671F;&#x7684;&#x304B;&#x3064;&#x4E0D;&#x898F;&#x5247;&#x306A;&#x5F62;&#x72B6;&#x306E;&#x4E21;&#x65B9;&#x306E;&#x5358;&#x96E2;&#x7D30;&#x80DE;&#x3092;&#x7528;&#x3044;&#x305F;&#x5B9F;&#x9A13;&#x3067;&#x306F;DeltaPsi&#xFF08;m&#xFF09;&#x306E;&#x6700;&#x9AD8;&#x306E;&#x7D76;&#x5BFE;&#x5024;&#x306F;&#x3001;&#x5BFE;&#x5411;&#x96FB;&#x6975;&#x819C;&#x9818;&#x57DF;&#x3067;&#x767A;&#x898B;&#x3055;&#x308C;&#x3001;&#x305D;&#x306E;&#x30A8;&#x30EC;&#x30AF;&#x30C8;&#x30ED;&#x30DD;&#x30EC;&#x30FC;&#x30B7;&#x30E7;&#x30F3;&#x3092;&#x4ECB;&#x3057;&#x305F;&#x8F38;&#x9001;&#x304C;&#x3053;&#x308C;&#x3089;&#x306E;&#x540C;&#x3058;&#x5730;&#x57DF;&#x306B;&#x9650;&#x5B9A;&#x3055;&#x308C;&#x3066;&#x3044;&#x308B;&#x3002;&#x7406;&#x8AD6;&#x7684;&#x306A;&#x4E88;&#x6E2C;&#x3092;&#x78BA;&#x8A8D;&#x3059;&#x308B;&#x30AF;&#x30E9;&#x30B9;&#x30BF;&#x5185;&#x306E;&#x30BB;&#x30EB;&#x306E;&#x5834;&#x5408;&#x3001;&#x8F38;&#x9001;&#x9818;&#x57DF;&#x306E;&#x4F4D;&#x7F6E;&#x306F;&#x3001;&#x30A8;&#x30EC;&#x30AF;&#x30C8;&#x30ED;&#x30DD;&#x30EC;&#x30FC;&#x30B7;&#x30E7;&#x30F3;&#x306E;&#x305F;&#x3081;&#x306E;&#x5341;&#x5206;&#x306A;&#x96FB;&#x754C;&#x5F37;&#x5EA6;&#x3067;&#x306F;&#x3001;&#x7D30;&#x80DE;&#x306F;&#x7D30;&#x80DE;&#xFF08;&#x3059;&#x306A;&#x308F;&#x3061;&#x3001;&#x500B;&#x4EBA;&#x3068;&#x3057;&#x3066;&#xFF09;&#x306E;&#x3088;&#x3046;&#x306A;&#x96FB;&#x6C17;&#x7684;&#x306B;&#x7D76;&#x7E01;&#x3055;&#x308C;&#x305F;&#x52D5;&#x4F5C;&#x306F;&#x3001;&#x3053;&#x3068;&#x3092;&#x610F;&#x5473;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x5BFE;&#x7167;&#x7684;&#x306B;&#x3001;&#x5927;&#x5E45;&#x306B;&#x5F31;&#x304F;&#x3001;nonelectroporating&#x30D5;&#x30A3;&#x30FC;&#x30EB;&#x30C9;&#x3067;&#x3001;&#x96FB;&#x4F4D;&#x5DEE;&#x6E2C;&#x5B9A;&#x306F;&#x3001;&#x3053;&#x308C;&#x3089;&#x306E;&#x540C;&#x3058;&#x30AF;&#x30E9;&#x30B9;&#x30BF;&#x5185;&#x306E;&#x7D30;&#x80DE;&#x306F;&#x96FB;&#x6C17;&#x7684;&#x306B;&#x76F8;&#x4E92;&#x63A5;&#x7D9A;&#x3055;&#x308C;&#x305F;&#x7D30;&#x80DE;&#xFF08;&#x3059;&#x306A;&#x308F;&#x3061;&#x3001;&#x4E00;&#x3064;&#x306E;&#x5927;&#x304D;&#x306A;&#x30BB;&#x30EB;&#xFF09;&#x3068;&#x3057;&#x3066;&#x632F;&#x308B;&#x821E;&#x3046;&#x3053;&#x3068;&#x3092;&#x793A;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x308B;&#x3002;&#x3053;&#x308C;&#x3089;&#x306E;&#x7D50;&#x679C;&#x306F;&#x5341;&#x5206;&#x306B;&#x9AD8;&#x3044;&#x96FB;&#x754C;&#x304C;&#x7D30;&#x80DE;&#x9593;&#x306E;&#x7D4C;&#x8DEF;&#x306B;&#x5F71;&#x97FF;&#x3092;&#x4E0E;&#x3048;&#x308B;&#x306E;&#x3067;&#x3001;&#x305D;&#x308C;&#x3089;&#x306E;&#x6B63;&#x5E38;&#x306A;&#x751F;&#x7406;&#x72B6;&#x614B;&#x3092;&#x57FA;&#x6E96;&#x306B;&#x3057;&#x3066;&#x7D30;&#x80DE;&#x306E;&#x96FB;&#x6C17;&#x7684;&#x632F;&#x308B;&#x821E;&#x3044;&#x3092;&#x5909;&#x66F4;&#x3059;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x3092;&#x304A;&#x52E7;&#x3081;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;

&#x8A98;&#x5C0E;&#x3055;&#x308C;&#x308B;&#x819C;&#x8CAB;&#x901A;&#x96FB;&#x5727;&#x3068;&#x30A8;&#x30EC;&#x30AF;&#x30C8;&#x30ED;&#x4ECB;&#x5728;&#x5206;&#x5B50;&#x8F38;&#x9001;&#x3068;&#x306E;&#x76F8;&#x95A2;

&#xADF8; &#xB9C9; (&#xC720;&#xB3C4; &#xB9C9; &#xD6A1;&#xB2E8; &#xC804;&#xC555;, DeltaPsi (m))&#xC5D0; &#xAC78;&#xCCD0; &#xACE0; &#xB9C9; &#xD22C;&#xACFC;&#xC728; (electroporation)&#xC758; &#xC77C;&#xC2DC;&#xC801; &#xC99D;&#xAC00;&#xC5D0; &#xCDA9;&#xBD84;&#xD788; &#xAC15;&#xB825;&#xD55C; &#xD544;&#xB4DC;&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xC804;&#xC555;&#xC758; &#xC720;&#xB3C4;&#xC5D0; &#xC804;&#xAE30; &#xD544;&#xB4DC; &#xACB0;&#xACFC;&#xB97C; &#xC140;&#xC758; &#xB178;&#xCD9C;. DeltaPsi (m)&#xC758; &#xACB0;&#xC815;&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xBD84;&#xC11D;, &#xC218;&#xCE58; &#xBC0F; &#xC2E4;&#xD5D8; &#xBC29;&#xBC95; &#xBC0F; &#xB9C9; &#xD6A1;&#xB2E8; &#xAD50;&#xD1B5; &#xBAA8;&#xB2C8;&#xD130;&#xB9C1; &#xD558;&#xB294; &#xBC29;&#xBC95;&#xC744; &#xAC80;&#xD1A0; &#xD569;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xC6B0;&#xB9AC;&#xB294; &#xB2E4;&#xC74C; DeltaPsi (m)&#xC640; &#xC140; &#xB2E8;&#xCE35; &#xD074;&#xB7EC;&#xC2A4;&#xD130; &#xC140; &#xBFD0;&#xB9CC; &#xC544;&#xB2C8;&#xB77C; &#xACE0;&#xBC00;&#xB3C4; &#xC815;&#xC9C0;&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xC815;&#xAE30;&#xC801;&#xC774; &#xACE0; &#xBD88;&#xADDC;&#xCE59; &#xD55C; &#xBAA8;&#xC591;&#xC758; &#xACE0;&#xB9BD; &#xB41C; &#xC140;&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; electroporated &#xBA64;&#xBE0C;&#xB808;&#xC778;&#xC744; &#xD1B5;&#xD574; &#xBD84;&#xC790; &#xC804;&#xC1A1; &#xC0AC;&#xC774;&#xC758; &#xC0C1;&#xAD00; &#xAD00;&#xACC4;&#xB97C; &#xC870;&#xC0AC; &#xD558;&#xAE30; &#xC704;&#xD574;&#xC774; &#xBC29;&#xBC95;&#xC744; &#xACB0;&#xD569;. &#xC815;&#xAE30; &#xBC0F; &#xBD88;&#xADDC;&#xCE59; &#xD55C; &#xB3C4;&#xD615;&#xC758; &#xACA9;&#xB9AC; &#xB41C; &#xC140;&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xC6B0;&#xB9AC;&#xC758; &#xC2E4;&#xD5D8; DeltaPsi (m)&#xC758; &#xC808;&#xB300; &#xCD5C;&#xB300;&#xAC12; &#xC9C1;&#xBA74; &#xC804;&#xADF9; &#xB9C9; &#xC9C0;&#xC5ED;&#xC5D0;&#xC11C; &#xBC1C;&#xACAC; &#xB418; &#xACE0; &#xC804;&#xC1A1; electroporation &#xC911;&#xC7AC;&#xC774; &#xAC19;&#xC740; &#xC9C0;&#xC5ED;&#xC5D0; &#xAD6D;&#xD55C; &#xB418;&#xB294; &#xC774;&#xB860;&#xC801; &#xC608;&#xCE21;&#xC744; &#xD655;&#xC778; &#xD569;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xD074;&#xB7EC;&#xC2A4;&#xD130;&#xC5D0; &#xC788;&#xB294; &#xC140;&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xC804;&#xC1A1; &#xC601;&#xC5ED;&#xC758; &#xC704;&#xCE58; electroporation&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xCDA9;&#xBD84; &#xD55C; &#xD544;&#xB4DC; &#xAC15;&#xC810;&#xC5D0; (&#xC989;,&#xC73C;&#xB85C; &#xAC1C;&#xBCC4;) &#xC804;&#xAE30;&#xC801;&#xC73C;&#xB85C; &#xC808;&#xC5F0; &#xB41C; &#xC140; &#xC140; &#xB3D9;&#xC791;, &#xC758;&#xBBF8; &#xD569;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xBC18;&#xBA74;, &#xC2E4;&#xC9C8;&#xC801;&#xC73C;&#xB85C; &#xC57D;&#xD55C; nonelectroporating &#xD544;&#xB4DC;&#xC640; potentiometric &#xCE21;&#xC815;&#xC740; &#xC140;&#xC774; &#xB3D9;&#xC77C;&#xD55C; &#xD074;&#xB7EC;&#xC2A4;&#xD130;&#xC5D0; &#xB3D9;&#xC791; &#xC804;&#xAE30;&#xC801;&#xC73C;&#xB85C; &#xC0C1;&#xD638; &#xC5F0;&#xACB0; &#xB41C; &#xC140; (&#xC608;&#xB97C; &#xB4E4;&#xC5B4;, &#xD070; &#xC140;)&#xC73C;&#xB85C; &#xD45C;&#xC2DC;. &#xC774;&#xB7EC;&#xD55C; &#xACB0;&#xACFC; &#xCDA9;&#xBD84;&#xD788; &#xB192;&#xC740; &#xC804;&#xAE30; &#xBD84;&#xC57C; &#xC138;&#xD3EC; &#xACBD;&#xB85C; &#xC601;&#xD5A5;&#xC744; &#xD558; &#xACE0; &#xB530;&#xB77C;&#xC11C; &#xADF8;&#xB4E4;&#xC758; &#xC815;&#xC0C1;&#xC801;&#xC778; &#xC0DD;&#xB9AC; &#xC801; &#xC0C1;&#xD0DC;&#xC5D0; &#xAD00;&#xD558;&#xC5EC; &#xC140;&#xC758; &#xC804;&#xAE30; &#xB3D9;&#xC791;&#xC744; &#xBCC0;&#xACBD; &#xD558;&#xC2DC;&#xAE30; &#xBC14;&#xB78D;&#xB2C8;&#xB2E4;.

&#xB9C9; &#xD6A1;&#xB2E8; &#xC804;&#xC555; &#xBC0F; &#xBD84;&#xC790; &#xC804;&#xC1A1; electroporation &#xC911;&#xC7AC;&#xC640; &#xC0C1;&#xAD00; &#xAD00;&#xACC4;&#xB97C; &#xC720;&#xBC1C; &#xD569;&#xB2C8;&#xB2E4;.

La exposici&#xF3;n de una c&#xE9;lula a un campo el&#xE9;ctrico resultados en la inducci&#xF3;n de un voltaje a trav&#xE9;s de su membrana (voltaje inducido transmembrana, DeltaPsi (m)) y, por campos suficientemente fuertes, en un aumento transitorio de la permeabilidad de la membrana (electroporaci&#xF3;n). Se revisan los m&#xE9;todos anal&#xED;ticos, num&#xE9;ricos y experimentales para la determinaci&#xF3;n de DeltaPsi (m) y un m&#xE9;todo para el control del transporte transmembrana. A continuaci&#xF3;n, combinar estos m&#xE9;todos para investigar la correlaci&#xF3;n entre DeltaPsi (m) y el transporte molecular a trav&#xE9;s de una membrana electroporado para c&#xE9;lulas aisladas de formas regulares e irregulares, para las celdas de suspensiones densas, as&#xED; como para las c&#xE9;lulas en racimos monocapa. Nuestros experimentos sobre c&#xE9;lulas aisladas de las formas regulares e irregulares confirmar la predicci&#xF3;n te&#xF3;rica de que los m&#xE1;s altos valores absolutos de DeltaPsi (m) se encuentran en las regiones de membrana que se enfrentan los electrodos y que el transporte mediado por electroporaci&#xF3;n se limita a estas mismas regiones. Para las c&#xE9;lulas en racimos, la ubicaci&#xF3;n de las regiones de transporte implica que, en las intensidades de campo suficientes para la electroporaci&#xF3;n, las c&#xE9;lulas se comportan como aislados el&#xE9;ctricamente (es decir, como individuo) c&#xE9;lulas. En contraste, con sustancialmente m&#xE1;s d&#xE9;biles, campos nonelectroporating, las mediciones de potenciom&#xE9;tricos muestran que las c&#xE9;lulas en estos mismos grupos se comportan como c&#xE9;lulas interconectadas el&#xE9;ctricamente (es decir, como una c&#xE9;lula grande). Estos resultados sugieren que los campos el&#xE9;ctricos suficientemente altas influyen en las v&#xED;as intercelulares y as&#xED; alterar el comportamiento el&#xE9;ctrico de las c&#xE9;lulas con respecto a su estado fisiol&#xF3;gico normal.

Voltaje transmembrana inducida y su correlaci&#xF3;n con transporte mediada por electroporaci&#xF3;n Molecular

&#x57FA;&#x4E8E;&#x7535;&#x7A7F;&#x5B54;&#x7684;&#x5E94;&#x7528;&#x7A0B;&#x5E8F;&#x9700;&#x8981;&#x4F7F;&#x7528;&#x7279;&#x5B9A;&#x8109;&#x51B2;&#x53C2;&#x6570;&#x53D6;&#x5F97;&#x6210;&#x529F;&#x7684;&#x7ED3;&#x679C;&#x3002;&#x5F53;&#x8109;&#x51B2;&#x53C2;&#x6570;&#x7684;&#x63A8;&#x8350;&#x7684;&#x503C;&#x4E0D;&#x80FD;&#x8BBE;&#x7F6E;&#x65F6;&#xFF0C;&#x53EF;&#x4EE5;&#x901A;&#x8FC7;&#x4F7F;&#x7528;&#x7B49;&#x6548;&#x7684;&#x8109;&#x51B2;&#x53C2;&#x6570;&#x83B7;&#x53D6;&#x7C7B;&#x4F3C;&#x7684;&#x7ED3;&#x679C;&#x3002;&#x6211;&#x4EEC;&#x5DF2;&#x786E;&#x5B9A;&#x632F;&#x5E45;&#x4E0E;&#x5728;&#x76F8;&#x540C;&#x5206;&#x6570;&#x7684;&#x7535;&#x6FC0;&#x8F6C;&#x5316;&#x7EC6;&#x80DE;&#x4E2D;&#x6240;&#x4EA7;&#x751F;&#x7684;&#x8109;&#x51B2;&#x4FE1;&#x53F7;&#x6301;&#x7EED;&#x65F6;&#x95F4;/&#x6570;&#x91CF;&#x4E4B;&#x95F4;&#x7684;&#x5173;&#x7CFB;&#x3002;&#x8109;&#x51B2;&#x6301;&#x7EED;&#x65F6;&#x95F4;&#x7684;&#x53D8;&#x5316;&#x662F;&#x4ECE; 150 &#x5230; 100 ms &#x548C;&#x7684;&#x8109;&#x51B2;&#x6570;&#x4ECE; 1 &#x5230; 128 ns&#x3002;Fura 2 &#x4E0A;&#x5348;&#x88AB;&#x7528;&#x6765;&#x786E;&#x5B9A;&#x7EC6;&#x80DE;&#x5411;&#x7ECF;&#x7535;&#x7A7F;&#x5B54;&#x3002;&#x957F;&#x8109;&#x51B2;&#x6216;&#x66F4;&#x9AD8;&#x7684;&#x8109;&#x51B2;&#x6570;&#xFF0C;&#x7535;&#x6FC0;&#x8F6C;&#x5316;&#x7EC6;&#x80DE;&#x7684;&#x76F8;&#x540C;&#x5206;&#x6570;&#x9700;&#x8981;&#x8F83;&#x4F4E;&#x7684;&#x632F;&#x5E45;&#x3002;&#x4ECE;&#x7535;&#x7A7F;&#x5B54;&#x6A21;&#x578B;&#x6D3E;&#x751F;&#x7684;&#x8868;&#x8FBE;&#x5F0F;&#x53EF;&#x4EE5;&#x5728;&#x6574;&#x4E2A;&#x95F4;&#x9694;&#x5185;&#x7684;&#x8109;&#x51B2;&#x6301;&#x7EED;&#x65F6;&#x95F4;&#x63CF;&#x8FF0;&#x7684;&#x6D4B;&#x91CF;&#x7684;&#x6570;&#x636E;&#x3002;&#x5728;&#x8F83;&#x7A84;&#x7684;&#x8303;&#x56F4; (0.1-100 ms)&#xFF0C;&#x4E0D;&#x592A;&#x590D;&#x6742;&#xFF0C;&#x5BF9;&#x6570;&#x6216;&#x7535;&#x6E90;&#x529F;&#x80FD;&#x53EF;&#x4F9B;&#x4F7F;&#x7528;&#x3002;&#x5E42;&#x51FD;&#x6570;&#x4E0E;&#x6307;&#x6570;&#x51FD;&#x6570;&#xFF0C;&#x6700;&#x597D;&#x53EF;&#x4EE5;&#x63CF;&#x8FF0;&#x632F;&#x5E45;&#x548C;&#x8109;&#x51B2;&#x4FE1;&#x53F7;&#x6570;&#x91CF;&#x4E4B;&#x95F4;&#x7684;&#x5173;&#x7CFB;&#x3002;&#x6211;&#x4EEC;&#x8868;&#x660E;&#x76F8;&#x5BF9;&#x7B80;&#x5355;&#x7684;&#x4E24;&#x4E2A;&#x53C2;&#x6570;&#x7535;&#x6E90;&#x6216;&#x5BF9;&#x6570;&#x51FD;&#x6570;&#x662F;&#x6709;&#x7528;&#x5BFB;&#x6C42;&#x7535;&#x7A7F;&#x5B54;&#x7684;&#x7B49;&#x6548;&#x8109;&#x51B2;&#x53C2;&#x6570;&#x7684;&#x65F6;&#x5019;&#x3002;&#x8FD9;&#x79CD;&#x8109;&#x51B2;&#x53C2;&#x6570;&#x4E4B;&#x95F4;&#x7684;&#x6570;&#x5B66;&#x5173;&#x7CFB;&#x53EF;&#x4EE5;&#x662F;&#x91CD;&#x8981;&#x7684;&#x89C4;&#x5212;&#x57FA;&#x4E8E;&#x7535;&#x7A7F;&#x5B54;&#x7684;&#x6CBB;&#x7597;&#xFF0C;&#x5982;&#x7535;&#x5316;&#x5B66;&#x6CBB;&#x7597;&#x548C; nonthermal &#x4E0D;&#x53EF;&#x9006;&#x8F6C;&#x7684;&#x7535;&#x7A7F;&#x5B54;&#x3002;

&#x7535;&#x7A7F;&#x5B54;&#x7684;&#x7B49;&#x6548;&#x8109;&#x51B2;&#x53C2;&#x6570;&#x3002;

Electroporation-based applications require the use of specific pulse parameters for a successful outcome. When recommended values of pulse parameters cannot be set, similar outcomes can be obtained by using equivalent pulse parameters. We determined the relations between the amplitude and duration/number of pulses resulting in the same fraction of electroporated cells. Pulse duration was varied from 150 ns to 100 ms, and the number of pulses from 1 to 128. Fura 2-AM was used to determine electroporation of cells to Ca(2+). With longer pulses or higher number of pulses, lower amplitudes are needed for the same fraction of electroporated cells. The expression derived from the model of electroporation could describe the measured data on the whole interval of pulse durations. In a narrower range (0.1-100 ms), less complex, logarithmic or power functions could be used instead. The relation between amplitude and number of pulses could best be described with a power function or an exponential function. We show that relatively simple two-parameter power or logarithmic functions are useful when equivalent pulse parameters for electroporation are sought. Such mathematical relations between pulse parameters can be important in planning of electroporation-based treatments, such as electrochemotherapy and nonthermal irreversible electroporation.

Equivalent pulse parameters for electroporation.

L&#x26;#39;&#xE9;lectroporation des applications bas&#xE9;es sur exigent l&#x26;#39;utilisation de param&#xE8;tres d&#x26;#39;impulsion sp&#xE9;cifiques pour assurer le succ&#xE8;s. Lorsque les valeurs recommand&#xE9;es de param&#xE8;tres d&#x26;#39;impulsion ne peut pas &#xEA;tre r&#xE9;gl&#xE9;, des r&#xE9;sultats similaires peuvent &#xEA;tre obtenus en utilisant des param&#xE8;tres d&#x26;#39;impulsion &#xE9;quivalentes. Nous avons d&#xE9;termin&#xE9; les relations entre l&#x26;#39;amplitude et la dur&#xE9;e / nombre d&#x26;#39;impulsions r&#xE9;sultant dans la m&#xEA;me fraction de cellules &#xE9;lectropor&#xE9;es. La dur&#xE9;e des impulsions varie de 150 ns &#xE0; 100 ms, et le nombre d&#x26;#39;impulsions de 1 &#xE0; 128. Fura 2-AM a &#xE9;t&#xE9; utilis&#xE9;e pour d&#xE9;terminer l&#x26;#39;&#xE9;lectroporation des cellules &#xE0; Ca (2 +). Avec des impulsions plus longues ou plus le nombre d&#x26;#39;impulsions, des amplitudes plus faibles sont n&#xE9;cessaires pour la m&#xEA;me fraction de cellules &#xE9;lectropor&#xE9;es. L&#x26;#39;expression d&#xE9;riv&#xE9;e du mod&#xE8;le de l&#x26;#39;&#xE9;lectroporation pourrait d&#xE9;crire les donn&#xE9;es mesur&#xE9;es sur tout l&#x26;#39;intervalle de dur&#xE9;es d&#x26;#39;impulsion. Dans une gamme plus &#xE9;troite (0,1-100 ms), les fonctions moins complexes, logarithmiques ou de la puissance pourrait &#xEA;tre utilis&#xE9;e &#xE0; la place. La relation entre l&#x26;#39;amplitude et le nombre d&#x26;#39;impulsions pourrait &#xEA;tre d&#xE9;crit avec une fonction de puissance ou une fonction exponentielle. Nous montrons que relativement simple &#xE0; deux param&#xE8;tres de puissance ou des fonctions logarithmiques sont utiles lorsque les param&#xE8;tres d&#x26;#39;impulsions &#xE9;quivalents pour l&#x26;#39;&#xE9;lectroporation sont recherch&#xE9;s. Ces relations math&#xE9;matiques entre les param&#xE8;tres d&#x26;#39;impulsion peut &#xEA;tre important dans la planification des traitements bas&#xE9;s sur l&#x26;#39;&#xE9;lectroporation, comme &#xE9;lectrochimioth&#xE9;rapie et non thermiques &#xE9;lectroporation irr&#xE9;versible.

Param&#xE8;tres des impulsions &#xE9;quivalents pour l&#x26;#39;&#xE9;lectroporation

Elektroporation-basierten Anwendungen erfordern den Einsatz von spezifischen Impuls-Parameter f&uuml;r ein erfolgreiches Ergebnis. Beim empfohlenen Werte der Puls-Parameter k&ouml;nnen nicht festgelegt werden, k&ouml;nnen &auml;hnliche Ergebnisse abgerufen werden, mithilfe von Parametern &Auml;quivalent Puls. Wir entschlossen die Beziehungen zwischen der Amplitude und Dauer/Anzahl der Impulse, die zu den gleichen Bruch der Electroporated Zellen. Impulsdauer war schwankte zwischen 150 ns bis 100 ms und die Anzahl der Impulse von 1 bis 128. FURA-2AM wurde zur Elektroporation von Zellen zu Ca(2+) zu bestimmen. F&uuml;r den gleichen Bruch der Electroporated Zellen werden mit l&auml;ngeren Impulse oder h&ouml;here Anzahl von Impulsen niedrigere Amplituden ben&ouml;tigt. Der Ausdruck abgeleitet aus dem Modell der Elektroporation k&ouml;nnte die gemessenen Daten &uuml;ber das gesamte Zeitintervall Pulsdauern beschreiben. In einem engeren Bereich (0.1-100 ms), weniger komplexe, logarithmische oder Power-Funktionen k&ouml;nnten stattdessen verwendet werden. Das Verh&auml;ltnis zwischen Amplitude und Anzahl der Impulse k&ouml;nnten am besten mit einem Power-Funktion oder eine Exponentialfunktion beschrieben werden. Wir zeigen, dass relativ einfache zwei-Parameter-Power oder logarithmische Funktionen n&uuml;tzlich sind, wenn entsprechende Puls-Parameter f&uuml;r die Elektroporation gesucht werden. Solche mathematischen Beziehungen zwischen Puls-Parameter k&ouml;nnen bei der Planung der Elektroporation-basierte Behandlungen, wie Electrochemotherapy und nichtthermische irreversible Electroporation wichtig sein.

Gleichwertige Puls-Parameter f&uuml;r die Elektroporation.

Elettroporazione-ha basato le applicazioni richiedono l&#39;uso di parametri specifici impulsi per un esito positivo. Quando non &egrave; possibile impostare valori consigliati dei parametri di impulso, risultati simili sono ottenibili utilizzando i parametri equivalenti di impulso. Abbiamo determinato i rapporti tra l&#39;ampiezza e la durata/numero di impulsi derivanti nella stessa frazione di cellule electroporated. Durata dell&#39;impulso &egrave; stata variata da 150 ns a 100 ms e il numero di impulsi da 1 a 128. Fura 2-AM &egrave; stato utilizzato per determinare elettroporazione delle celle a Ca(2+). Con gli impulsi pi&ugrave; lungo o pi&ugrave; alto numero di impulsi, ampiezze inferiori sono necessari per la stessa frazione di cellule electroporated. L&#39;espressione derivata dal modello di elettroporazione potrebbe descrivere i dati misurati sull&#39;intero intervallo di durate di impulso. In una gamma pi&ugrave; ristretta (0,1-100 ms), meno complessa, funzioni logaritmiche o potenza potrebbero essere usate invece. Il rapporto tra ampiezza e numero di impulsi potrebbe essere meglio descritta con una funzione di potere o di una funzione esponenziale. Mostriamo che relativamente semplice potenza di due parametri o funzioni logaritmiche sono utili quando sono richiesti parametri equivalenti impulso per elettroporazione. Tali relazioni matematiche tra i parametri del polso possono essere importante nella pianificazione di trattamenti a base di elettroporazione, quali electrochemotherapy e nonthermal elettroporazione irreversibile.

Parametri equivalenti impulso per elettroporazione.

&#x30A8;&#x30EC;&#x30AF;&#x30C8;&#x30ED;&#x30DD;&#x30EC;&#x30FC;&#x30B7;&#x30E7;&#x30F3;&#x30D9;&#x30FC;&#x30B9;&#x306E;&#x30A2;&#x30D7;&#x30EA;&#x30B1;&#x30FC;&#x30B7;&#x30E7;&#x30F3;&#x3067;&#x306F;&#x3001;&#x6210;&#x529F;&#x3057;&#x305F;&#x7D50;&#x679C;&#x3001;&#x7279;&#x5B9A;&#x306E;&#x30D1;&#x30EB;&#x30B9;&#xB7;&#x30D1;&#x30E9;&#x30E1;&#x30FC;&#x30BF;&#x3092;&#x4F7F;&#x7528;&#x3059;&#x308B;&#x5FC5;&#x8981;&#x304C;&#x3042;&#x308A;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x30D1;&#x30EB;&#x30B9;&#xB7;&#x30D1;&#x30E9;&#x30E1;&#x30FC;&#x30BF;&#x306E;&#x63A8;&#x5968;&#x5024;&#x3092;&#x8A2D;&#x5B9A;&#x3059;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x304C;&#x3067;&#x304D;&#x306A;&#x3044;&#x5834;&#x5408;&#x306F;&#x3001;&#x540C;&#x69D8;&#x306E;&#x7D50;&#x679C;&#x306F;&#x3001;&#x7B49;&#x4FA1;&#x30D1;&#x30EB;&#x30B9;&#xB7;&#x30D1;&#x30E9;&#x30E1;&#x30FC;&#x30BF;&#x3092;&#x4F7F;&#x7528;&#x3057;&#x3066;&#x53D6;&#x5F97;&#x3067;&#x304D;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x6211;&#x3005;&#x306F;&#x3001;&#x632F;&#x5E45;&#x3068;&#x6301;&#x7D9A;&#x6642;&#x9593;/&#x30A8;&#x30EC;&#x30AF;&#x30C8;&#x30ED;&#x30DD;&#x30EC;&#x30FC;&#x30B7;&#x30E7;&#x30F3;&#x3057;&#x305F;&#x7D30;&#x80DE;&#x3068;&#x540C;&#x3058;&#x753B;&#x5206;&#x306B;&#x5F97;&#x3089;&#x308C;&#x305F;&#x30D1;&#x30EB;&#x30B9;&#x6570;&#x306E;&#x95A2;&#x4FC2;&#x3092;&#x6C7A;&#x5B9A;&#x3057;&#x305F;&#x3002;&#x30D1;&#x30EB;&#x30B9;&#x6301;&#x7D9A;&#x6642;&#x9593;&#x306F;150 ns&#x304B;&#x3089;100&#x30DF;&#x30EA;&#x79D2;&#x3001;1&#x301C;128&#x30D1;&#x30EB;&#x30B9;&#x306E;&#x6570;&#x304B;&#x3089;&#x5909;&#x5316;&#x3055;&#x305B;&#x305F;&#x3002;&#x30D5;&#x30E9;2-AM&#x306F;&#x3001;Ca&#xFF08;2 +&#xFF09;&#x3078;&#x306E;&#x7D30;&#x80DE;&#x306E;&#x30A8;&#x30EC;&#x30AF;&#x30C8;&#x30ED;&#x30DD;&#x30EC;&#x30FC;&#x30B7;&#x30E7;&#x30F3;&#x3092;&#x6C7A;&#x5B9A;&#x3059;&#x308B;&#x305F;&#x3081;&#x306B;&#x4F7F;&#x7528;&#x3055;&#x308C;&#x3066;&#x3044;&#x307E;&#x3057;&#x305F;&#x3002;&#x9577;&#x3044;&#x30D1;&#x30EB;&#x30B9;&#x307E;&#x305F;&#x306F;&#x30D1;&#x30EB;&#x30B9;&#x6570;&#x306E;&#x5897;&#x52A0;&#x3067;&#x3001;&#x4F4E;&#x632F;&#x5E45;&#x306F;&#x30A8;&#x30EC;&#x30AF;&#x30C8;&#x30ED;&#x30DD;&#x30EC;&#x30FC;&#x30B7;&#x30E7;&#x30F3;&#x3057;&#x305F;&#x7D30;&#x80DE;&#x3068;&#x540C;&#x3058;&#x5272;&#x5408;&#x306B;&#x5FC5;&#x8981;&#x3068;&#x3055;&#x308C;&#x308B;&#x3002;&#x30A8;&#x30EC;&#x30AF;&#x30C8;&#x30ED;&#x30DD;&#x30EC;&#x30FC;&#x30B7;&#x30E7;&#x30F3;&#x306E;&#x30E2;&#x30C7;&#x30EB;&#x304B;&#x3089;&#x6D3E;&#x751F;&#x3057;&#x305F;&#x5F0F;&#x3067;&#x306F;&#x3001;&#x30D1;&#x30EB;&#x30B9;&#x6301;&#x7D9A;&#x6642;&#x9593;&#x5168;&#x4F53;&#x306E;&#x9593;&#x9694;&#x3067;&#x6E2C;&#x5B9A;&#x3057;&#x305F;&#x30C7;&#x30FC;&#x30BF;&#x3092;&#x8A18;&#x8FF0;&#x3059;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x304C;&#x3067;&#x304D;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x72ED;&#x3044;&#x7BC4;&#x56F2;&#xFF08;0.1&#x304B;&#x3089;100&#x30DF;&#x30EA;&#x79D2;&#xFF09;&#x3067;&#x3001;&#x305D;&#x308C;&#x307B;&#x3069;&#x8907;&#x96D1;&#x3067;&#x3001;&#x5BFE;&#x6570;&#x307E;&#x305F;&#x306F;&#x96FB;&#x6E90;&#x306E;&#x6A5F;&#x80FD;&#x3092;&#x4EE3;&#x308F;&#x308A;&#x306B;&#x4F7F;&#x7528;&#x3059;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x304C;&#x3067;&#x304D;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x632F;&#x5E45;&#x3068;&#x30D1;&#x30EB;&#x30B9;&#x6570;&#x306E;&#x95A2;&#x4FC2;&#x306F;&#x6700;&#x9AD8;&#x306E;&#x30D1;&#x30EF;&#x200B;&#x200B;&#x30FC;&#x95A2;&#x6570;&#x3084;&#x6307;&#x6570;&#x95A2;&#x6570;&#x3092;&#x7528;&#x3044;&#x3066;&#x8AAC;&#x660E;&#x3059;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x304C;&#x3067;&#x304D;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x6211;&#x3005;&#x306F;&#x3001;&#x30A8;&#x30EC;&#x30AF;&#x30C8;&#x30ED;&#x30DD;&#x30EC;&#x30FC;&#x30B7;&#x30E7;&#x30F3;&#x306E;&#x7B49;&#x4FA1;&#x30D1;&#x30EB;&#x30B9;&#xB7;&#x30D1;&#x30E9;&#x30E1;&#x30FC;&#x30BF;&#x304C;&#x6C42;&#x3081;&#x3089;&#x308C;&#x3066;&#x3044;&#x308B;&#x3068;&#x304D;&#x306B;&#x3001;&#x6BD4;&#x8F03;&#x7684;&#x5358;&#x7D14;&#x306A;2&#x3064;&#x306E;&#x30D1;&#x30E9;&#x30E1;&#x30FC;&#x30BF;&#x3092;&#x30D1;&#x30EF;&#x30FC;&#x307E;&#x305F;&#x306F;&#x5BFE;&#x6570;&#x95A2;&#x6570;&#x304C;&#x6709;&#x7528;&#x3067;&#x3042;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x3092;&#x793A;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x30D1;&#x30EB;&#x30B9;&#xB7;&#x30D1;&#x30E9;&#x30E1;&#x30FC;&#x30BF;&#x306E;&#x9593;&#x306B;&#x305D;&#x306E;&#x3088;&#x3046;&#x306A;&#x6570;&#x5B66;&#x7684;&#x95A2;&#x4FC2;&#x306F;&#x3001;&#x3053;&#x306E;&#x3088;&#x3046;&#x306A;&#x96FB;&#x6C17;&#x5316;&#x5B66;&#x3068;&#x975E;&#x71B1;&#x7684;&#x4E0D;&#x53EF;&#x9006;&#x7684;&#x30A8;&#x30EC;&#x30AF;&#x30C8;&#x30ED;&#x30DD;&#x30EC;&#x30FC;&#x30B7;&#x30E7;&#x30F3;&#x306E;&#x3088;&#x3046;&#x306A;&#x30A8;&#x30EC;&#x30AF;&#x30C8;&#x30ED;&#xB7;&#x30D9;&#x30FC;&#x30B9;&#x306E;&#x6CBB;&#x7642;&#x3001;&#x306E;&#x8A08;&#x753B;&#x3067;&#x91CD;&#x8981;&#x306B;&#x306A;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x304C;&#x3042;&#x308A;&#x307E;&#x3059;&#x3002;

&#x30A8;&#x30EC;&#x30AF;&#x30C8;&#x30ED;&#x30DD;&#x30EC;&#x30FC;&#x30B7;&#x30E7;&#x30F3;&#x306E;&#x305F;&#x3081;&#x306E;&#x7B49;&#x4FA1;&#x30D1;&#x30EB;&#x30B9;&#xB7;&#x30D1;&#x30E9;&#x30E1;&#x30FC;&#x30BF;

Electroporation &#xAE30;&#xBC18; &#xC751;&#xC6A9; &#xD504;&#xB85C;&#xADF8;&#xB7A8;&#xC740; &#xC131;&#xACF5;&#xC801;&#xC778; &#xACB0;&#xACFC; &#xB300; &#xD55C; &#xD2B9;&#xC815; &#xD384;&#xC2A4; &#xB9E4;&#xAC1C; &#xBCC0;&#xC218; &#xC0AC;&#xC6A9;&#xC744; &#xD574;&#xC57C;&#xD569;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xD384;&#xC2A4; &#xB9E4;&#xAC1C; &#xBCC0;&#xC218; &#xAD8C;&#xC7A5;&#xB41C; &#xAC12;&#xC744; &#xC124;&#xC815;&#xD560; &#xC218; &#xC5C6;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4; &#xACBD;&#xC6B0; &#xD574;&#xB2F9; &#xD384;&#xC2A4; &#xB9E4;&#xAC1C; &#xBCC0;&#xC218;&#xB97C; &#xC0AC;&#xC6A9; &#xD558; &#xC5EC; &#xBE44;&#xC2B7;&#xD55C; &#xACB0;&#xACFC; &#xC5BB;&#xC744; &#xC218; &#xC788;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xC6B0;&#xB9AC;&#xB294; &#xC9C4;&#xD3ED; &#xBC0F; electroporated &#xC140;&#xC758; &#xB3D9;&#xC77C;&#xD55C; &#xBE44;&#xC728;&#xC5D0; &#xB530;&#xB978; &#xD384;&#xC2A4;&#xC758; &#xC9C0;&#xC18D; &#xC2DC;&#xAC04;/&#xC218; &#xC0AC;&#xC774;&#xC758; &#xAD00;&#xACC4;&#xB97C; &#xACB0;&#xC815;. &#xD384;&#xC2A4; &#xC9C0;&#xC18D; &#xC2DC;&#xAC04; 150&#xC5D0;&#xC11C; &#xB2E4;&#xC591; &#xD588;&#xB2E4; 1 128 ~ 100 ms&#xC640; &#xD384;&#xC2A4;&#xC758; &#xC218; ns. Fura 2AM electroporation Ca(2+) &#xC140;&#xC744; &#xD655;&#xC778; &#xD558;&#xB824;&#xBA74; &#xC0AC;&#xC6A9; &#xB418;&#xC5C8;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xAE34; &#xD384;&#xC2A4; &#xB610;&#xB294; &#xD384;&#xC2A4;&#xC758; &#xB354; &#xB192;&#xC740; &#xC218;, &#xB354; &#xB0AE;&#xC740; &#xC9C4;&#xD3ED; electroporated &#xC140;&#xC758; &#xB3D9;&#xC77C;&#xD55C; &#xBD80;&#xBD84;&#xC744; &#xC704;&#xD574; &#xD544;&#xC694; &#xD569;&#xB2C8;&#xB2E4;. Electroporation &#xBAA8;&#xB378;&#xC5D0;&#xC11C; &#xD30C;&#xC0DD; &#xB41C; &#xC2DD; &#xD384;&#xC2A4; &#xAE30;&#xAC04; &#xC804;&#xCCB4; &#xAC04;&#xACA9;&#xC5D0; &#xCE21;&#xC815; &#xB41C; &#xB370;&#xC774;&#xD130;&#xB97C; &#xD45C;&#xD604;&#xD560; &#xC218; &#xC788;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xB354; &#xC881;&#xC740; &#xBC94;&#xC704; (0.1-100 ms), &#xB35C; &#xBCF5;&#xC7A1;, &#xB85C;&#xADF8; &#xB610;&#xB294; &#xC804;&#xC6D0; &#xAE30;&#xB2A5;&#xC744; &#xB300;&#xC2E0; &#xC0AC;&#xC6A9; &#xB420; &#xC218; &#xC788;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xC9C4;&#xD3ED; &#xBC0F; &#xD384;&#xC2A4; &#xC218; &#xC0AC;&#xC774;&#xC758; &#xAD00;&#xACC4; &#xC804;&#xC6D0; &#xD568;&#xC218; &#xB610;&#xB294; &#xC9C0; &#xC218; &#xD568;&#xC218;&#xB97C; &#xAC00;&#xC7A5; &#xC798; &#xC124;&#xBA85; &#xB420; &#xC218; &#xC788;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xC6B0;&#xB9AC; electroporation&#xC758; &#xD384;&#xC2A4;&#xC5D0; &#xD574;&#xB2F9; &#xB9E4;&#xAC1C; &#xBCC0;&#xC218;&#xB294; &#xCD94;&#xC801;&#xC744; &#xD560; &#xB54C; &#xC0C1;&#xB300;&#xC801;&#xC73C;&#xB85C; &#xAC04;&#xB2E8;&#xD55C; &#xB450; &#xB9E4;&#xAC1C; &#xBCC0;&#xC218; &#xB2A5;&#xB825; &#xB610;&#xB294; &#xB85C;&#xADF8; &#xD568;&#xC218; &#xC720;&#xC6A9;&#xC740; &#xBCF4;&#xC5EC;&#xC90D;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xD384;&#xC2A4; &#xB9E4;&#xAC1C; &#xBCC0;&#xC218; &#xAC04;&#xC5D0; &#xC218;&#xD559; &#xAD00;&#xACC4;&#xC2DD; &#xC774;&#xB7EC;&#xD55C; electrochemotherapy &#xBC0F; nonthermal &#xB3CC;&#xC774;&#xD0AC; &#xC218; &#xC5C6;&#xB294; electroporation &#xAC19;&#xC740; electroporation &#xAE30;&#xBC18; &#xCE58;&#xB8CC;&#xC758; &#xACC4;&#xD68D;&#xC5D0; &#xC911;&#xC694; &#xD55C; &#xB420; &#xC218; &#xC788;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4;.

&#xD574;&#xB2F9; &#xD384;&#xC2A4; electroporation&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xB9E4;&#xAC1C; &#xBCC0;&#xC218;&#xC785;&#xB2C8;&#xB2E4;.

Basados &#x200B;&#x200B;en la electroporaci&#xF3;n, las aplicaciones requieren el uso de par&#xE1;metros de pulso espec&#xED;ficas para un resultado exitoso. Cuando los valores recomendados de los par&#xE1;metros del pulso no se puede establecer, resultados similares se pueden obtener mediante el uso de par&#xE1;metros equivalentes de impulsos. Se determinaron las relaciones entre la amplitud y duraci&#xF3;n / n&#xFA;mero de impulsos resultantes en la misma fracci&#xF3;n de c&#xE9;lulas electroporadas. La duraci&#xF3;n del impulso se vari&#xF3; de 150 ns a 100 ms, y el n&#xFA;mero de pulsos de 1 a 128. Fura 2-AM se utiliz&#xF3; para determinar la electroporaci&#xF3;n de c&#xE9;lulas a Ca (2 +). Con pulsos m&#xE1;s largos o con mayor n&#xFA;mero de pulsos, la disminuci&#xF3;n de las amplitudes son necesarios para la misma fracci&#xF3;n de c&#xE9;lulas electroporadas. La expresi&#xF3;n deriva del modelo de la electroporaci&#xF3;n podr&#xED;a describir los datos medidos en todo el intervalo de las duraciones de pulso. En un rango m&#xE1;s estrecho (0,1 a 100 ms), las funciones menos complejas, logar&#xED;tmicas o el poder se podr&#xED;a utilizar en su lugar. La relaci&#xF3;n entre la amplitud y el n&#xFA;mero de impulsos que podr&#xED;a describirse mejor con una funci&#xF3;n de potencia o una funci&#xF3;n exponencial. Se demuestra que relativamente sencillo de dos par&#xE1;metros de potencia o funciones logar&#xED;tmicas son &#xFA;tiles cuando los par&#xE1;metros equivalentes de impulsos para la electroporaci&#xF3;n se buscan. Estas relaciones matem&#xE1;ticas entre los par&#xE1;metros del pulso puede ser importante en la planificaci&#xF3;n de los tratamientos basados &#x200B;&#x200B;en la electroporaci&#xF3;n, tales como electroquimioterapia y la electroporaci&#xF3;n irreversible, no t&#xE9;rmico.

Par&#xE1;metros equivalentes de impulsos de electroporaci&#xF3;n

&#x57FA;&#x56E0; electrotransfer &#x662F;&#x4E00;&#x79CD;&#x65E2;&#x5B9A;&#x7684;&#x65B9;&#x6CD5;&#x5C06;&#x57FA;&#x56E0;&#x8F6C;&#x79FB;&#x5230;&#x7EC6;&#x80DE;&#xFF0C;&#x4F46;&#x662F;&#xFF0C;&#x8DE8;&#x819C;&#x7684; DNA &#x8F6C;&#x79FB;&#x7684;&#x673A;&#x5236;&#x4ECD;&#x4E0D;&#x5F97;&#x800C;&#x77E5;&#x3002;&#x4E00;&#x4E9B;&#x7814;&#x7A76;&#x8868;&#x660E; DNA &#x901A;&#x8FC7;&#x819C;&#x6BDB;&#x5B54;&#x518D;&#x8F6C;&#x79FB;&#xFF0C;&#x6709;&#x4E9B;&#x5219;&#x63D0;&#x8BAE;&#x901A;&#x8FC7;&#x7535;-&#x5185;&#x541E;&#x4F5C;&#x7528;&#xFF0C;DNA &#x8FDB;&#x5165;&#x7EC6;&#x80DE;&#xFF0C;&#x4F46;&#x6CA1;&#x6709;&#x76F4;&#x63A5;&#x89C2;&#x5BDF;&#x88AB;&#x6267;&#x884C;&#x3002;&#x5728;&#x672C;&#x767D;&#x76AE;&#x4E66;&#x4E2D;&#xFF0C;&#x6211;&#x4EEC;&#x8C03;&#x67E5;&#x4E86;&#x7B2C;&#x4E8C;&#x79CD;&#x5047;&#x8BBE;&#x3002;&#x5355;&#x5143;&#x683C;&#xFF0C;&#x6CBE;&#x6EE1;&#x819C;&#x67D3;&#x6599;&#x8C03;&#x9891; 1-43FX&#xFF0C;&#x8FD9;&#x662F;&#x7528;&#x4E8E;&#x5185;&#x541E;&#x4F5C;&#x7528;&#xFF0C;&#x89C2;&#x5BDF;&#x7136;&#x540E;&#x906D;&#x53D7;&#x7535;&#x8109;&#x51B2;&#x3002;&#x6211;&#x4EEC;&#x5206;&#x6790;&#x4E86;&#x5982;&#x679C;&#x541E;&#x901A;&#x8FC7;&#x5E94;&#x7528;&#x5F3A;&#x5EA6;&#x4F4E;&#x4E8E;&#x548C;&#x9AD8;&#x4E8E;&#x9608;&#x503C;&#x7684;&#x57FA;&#x56E0; electrotransfer &#x7684;&#x7535;&#x8109;&#x51B2;&#x523A;&#x6FC0;&#x3002;&#x5185;&#x541E;&#x4F5C;&#x7528;&#x4ECE; 20 &#x5206;&#x949F;&#x6216;&#x751A;&#x81F3;&#x9AD8;&#x8FBE; 2 h &#x540E;&#x8109;&#x51B2;&#x4F20;&#x9012;&#x6709;&#x4EBA;&#x6307;&#x51FA;&#xFF0C;&#x65E0;&#x8BBA;&#x7535;&#x573A;&#x5F3A;&#x5EA6;&#x6CA1;&#x6709;&#x589E;&#x52A0;&#x3002;&#x8FD9;&#x4E9B;&#x610F;&#x89C1;&#x4E0E; electrotransfer &#x6548;&#x7387;&#xFF0C;&#x4ECE;&#x800C;&#x63D0;&#x9AD8;&#x4E86;&#x4E0E;&#x573A;&#x5F3A;&#x5E76;&#x89C2;&#x5BDF;&#x5230;&#x53EA;&#x6709;&#x8D85;&#x8FC7;&#x9608;&#x503C;&#x6CA1;&#x6709;&#x5173;&#x8054;&#x3002;&#x6211;&#x4EEC;&#x7684;&#x7814;&#x7A76;&#x7ED3;&#x679C;&#x8868;&#x660E;&#x7535;&#x541E;&#x4E0D;&#x662F;&#x57FA;&#x56E0; electrotransfer &#x7684;&#x5173;&#x952E;&#x673A;&#x5236;&#x548C;&#x901A;&#x900F;&#x6027;&#x7684;&#x5047;&#x8BBE;&#x7684;&#x6613;&#x4F4D;&#x901A;&#x8FC7; DNA &#x8FDB;&#x5165;&#x6539;&#x53D8;&#x819C;&#x662F;&#x66F4;&#x6709;&#x9053;&#x7406;&#x3002;&#x63D0;&#x4EA4;&#x7684;&#x7ED3;&#x679C;&#x662F;&#x91CD;&#x8981;&#x7684;&#x57FA;&#x56E0; electrotransfer &#x7684;&#x673A;&#x5236;&#x66F4;&#x597D;&#x5730;&#x4E86;&#x89E3;&#x5176;&#x4E34;&#x5E8A;&#x5E94;&#x7528;&#x7A0B;&#x5E8F;&#x4F18;&#x5316;&#x3002;

&#x7535;&#x523A;&#x6FC0;&#x541E;&#x5728;&#x57FA;&#x56E0; electrotransfer &#x7684;&#x4F5C;&#x7528;&#x3002;

Gene electrotransfer is an established method for transfer of genes into cells, however, the mechanism of transfer of DNA across the cell membrane is still not known. Some studies suggest that DNA is translocated through membrane pores while others propose that DNA enters the cell via electro-endocytosis, but no direct observation was performed. In this paper we investigated the second hypothesis. Cells were stained with membrane dye FM 1-43FX, which is used for observation of endocytosis, and then exposed to electric pulses. We analyzed if endocytosis was stimulated by applying electric pulses with intensities below and above the threshold value for gene electrotransfer. No increase in endocytosis from 20 min or even up to 2h after the pulse delivery was observed, regardless of the electric field strength. These observations do not correlate with electrotransfer efficiency, which increases with field strength and is observed only above the threshold value. Our results suggest that electro-endocytosis is not a crucial mechanism for gene electrotransfer and that the hypothesis of DNA entry by translocation through permeabilized membrane is more plausible. The presented results are important for better understanding of the mechanisms of gene electrotransfer and for its optimization for clinical applications.

The role of electrically stimulated endocytosis in gene electrotransfer.

G&egrave;ne ELECTROTRANSFERT est une m&eacute;thode &eacute;tablie pour le transfert de g&egrave;nes dans les cellules, cependant, le m&eacute;canisme de transfert de l&#39;ADN &agrave; travers la membrane cellulaire ne sait toujours pas. Certaines &eacute;tudes sugg&egrave;rent que l&#39;ADN est transloqu&eacute; &agrave; travers les pores de la membrane, tandis que d&#39;autres proposent que l&#39;ADN p&eacute;n&egrave;tre dans la cellule par endocytose-electro, mais aucune observation directe a &eacute;t&eacute; r&eacute;alis&eacute;e. Dans cet article, nous avons &eacute;tudi&eacute; la deuxi&egrave;me hypoth&egrave;se. Les cellules ont &eacute;t&eacute; color&eacute;es avec membrane colorant FM 1-43FX, qui est utilis&eacute; pour l&#39;observation de l&#39;endocytose et puis expos&eacute;s &agrave; des impulsions &eacute;lectriques. Nous avons analys&eacute; si l&#39;endocytose est stimul&eacute;e par l&#39;application d&#39;impulsions &eacute;lectriques avec des intensit&eacute;s inf&eacute;rieures et sup&eacute;rieures &agrave; la valeur seuil pour le g&egrave;ne ELECTROTRANSFERT. Aucune augmentation de l&#39;endocytose de 20 min ou m&ecirc;me jusqu&#39;&agrave; 2 h apr&egrave;s que la livraison de l&#39;impulsion a &eacute;t&eacute; observ&eacute;e, quelle que soit l&#39;intensit&eacute; du champ &eacute;lectrique. Ces observations ne concordent pas avec efficacit&eacute; ELECTROTRANSFERT, qui augmente avec l&#39;intensit&eacute; du champ et on observe seulement au-dessus de la valeur de seuil. Nos r&eacute;sultats sugg&egrave;rent que l&#39;electro-endocytose n&#39;est pas un m&eacute;canisme crucial pour le g&egrave;ne ELECTROTRANSFERT et que l&#39;hypoth&egrave;se de l&#39;entr&eacute;e de l&#39;ADN par translocation &agrave; travers perm&eacute;abilis&eacute;es membrane est plus plausible. Les r&eacute;sultats pr&eacute;sent&eacute;s sont importantes pour une meilleure compr&eacute;hension des m&eacute;canismes du g&egrave;ne ELECTROTRANSFERT et pour son optimisation pour des applications cliniques.

Le r&ocirc;le de l&#39;endocytose stimul&eacute;e &eacute;lectriquement en g&egrave;ne Electrotransfert.

Gen Electrotransfer ist ein systematisches Verfahren f&uuml;r die &Uuml;bertragung von Genen in Zellen, ist jedoch der Mechanismus der &Uuml;bertragung von DNA &uuml;ber die Zellmembran noch nicht bekannt. Einige Studien schlagen vor, da&szlig; die DNA durch Membran Poren systemisch wirkt, w&auml;hrend andere vorschlagen, dass die DNA gelangt die Zelle &uuml;ber Elektro-Endozytose, aber keine direkte Beobachtung durchgef&uuml;hrt wurde. In diesem Papier untersuchen wir die zweite Hypothese. Zellen wurden mit Membran-Farbstoff-FM-1-43FX, gef&auml;rbt, die f&uuml;r die Beobachtung der Endozytose verwendet, und dann zu elektrischen Impulsen ausgesetzt. Wir analysierten wenn Endozytose angeregt wurde, durch die Anwendung elektrischer Impulse mit Intensit&auml;ten unterhalb und oberhalb der Schwellenwert f&uuml;r gen-Electrotransfer. Keine Zunahme der Endozytose von 20 min oder sogar bis zu 2 h nach die Puls-Lieferung, unabh&auml;ngig von der elektrischen Feldst&auml;rke zu beobachten war. Diese Beobachtungen haben keine mit Electrotransfer Effizienz, Entsprechungen, die mit Feldst&auml;rke erh&ouml;ht und nur oberhalb des Schwellenwertes eingehalten wird. Unsere Ergebnisse legen nahe, dass Elektro-Endozytose kein entscheidender Mechanismus zum gen Electrotransfer ist und dass die Hypothese der DNS-Eintrag durch Translokation durch Membran permeabilized plausibler. Die vorgestellten Ergebnisse sind wichtig f&uuml;r ein besseres Verst&auml;ndnis der Mechanismen der Gen Electrotransfer und f&uuml;r die Optimierung f&uuml;r klinische Anwendungen.

Die Rolle der elektrisch stimulierten Endozytose in gen Electrotransfer.

Gene electrotransfer &egrave; un metodo stabilito per il trasferimento di geni nelle cellule, tuttavia, il meccanismo di trasferimento di DNA attraverso la membrana cellulare &egrave; ancora non noto. Alcuni studi suggeriscono che il DNA &egrave; traslocato attraverso i pori di membrana, mentre altri propongono che DNA entra nella cellula tramite endocitosi electro, ma &egrave; stata eseguita alcuna osservazione diretta. In questo libro abbiamo studiato la seconda ipotesi. Le celle erano macchiate con membrana colorante FM 1-43FX, che &egrave; utilizzato per l&#39;osservazione di endocitosi e quindi esposti a impulsi elettrici. Abbiamo analizzato se endocitosi &egrave; stato stimolato mediante l&#39;applicazione di impulsi elettrici con intensit&agrave; di sotto e sopra il valore soglia per gene electrotransfer. Nessun aumento in endocitosi da 20 min o anche fino a 2 ore dopo la consegna di impulso &egrave; stata osservata, indipendentemente dall&#39;intensit&agrave; di campo elettrico. Queste osservazioni non correlare con l&#39;efficienza di electrotransfer, che aumenta con l&#39;intensit&agrave; di campo e si osserva solo sopra il valore di soglia. I nostri risultati suggeriscono che electro-endocitosi non sono un meccanismo cruciale per il gene electrotransfer e che l&#39;ipotesi di entrata di DNA da una traslocazione attraverso permeabilized membrana &egrave; pi&ugrave; plausibile. I risultati presentati sono importanti per una migliore comprensione dei meccanismi del gene electrotransfer e per la sua ottimizzazione per applicazioni cliniche.

Il ruolo dell&#39;endocitosi elettricamente stimolata nel gene electrotransfer.

&#x96FB;&#x5B50;&#x4F1D;&#x9054;&#x7CFB;&#x907A;&#x4F1D;&#x5B50;&#x306E;&#x907A;&#x4F1D;&#x5B50;&#x306E;&#x8EE2;&#x9001;&#x306E;&#x30BB;&#x30EB;&#x306B;&#x78BA;&#x7ACB;&#x3055;&#x308C;&#x305F;&#x624B;&#x6CD5;&#x3067;&#x3059;&#x3057;&#x304B;&#x3057;&#x3001;&#x7D30;&#x80DE;&#x819C;&#x3092;&#x631F;&#x3093;&#x3060; DNA &#x306E;&#x4F1D;&#x9054;&#x6A5F;&#x69CB;&#x307E;&#x3060;&#x77E5;&#x3089;&#x308C;&#x3066;&#x3044;&#x307E;&#x305B;&#x3093;&#x3002;&#x3044;&#x304F;&#x3064;&#x304B;&#x306E;&#x7814;&#x7A76;&#x306F;&#x3001;&#x4ED6;&#x306F; DNA &#x304C;&#x7D30;&#x80DE;&#x306B;&#x5165;&#x308B;&#x30A8;&#x30EC;&#x30AF;&#x30C8;&#x30ED; &#x30A8;&#x30F3;&#x30C9;&#x30B5;&#x30A4;&#x30C8;&#x30FC;&#x30B7;&#x30B9;&#x7D4C;&#x7531;&#x304C;&#x76F4;&#x63A5;&#x89B3;&#x5BDF;&#x304C;&#x884C;&#x308F;&#x308C;&#x306A;&#x304B;&#x3063;&#x305F;&#x3053;&#x3068;&#x3092;&#x63D0;&#x6848;&#x3059;&#x308B;&#x4E00;&#x65B9; DNA &#x819C;&#x7D30;&#x5B54;&#x3092;&#x4ECB;&#x3057;&#x3066;, &#x3067;&#x3042;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x3092;&#x304A;&#x52E7;&#x3081;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x672C;&#x7A3F;&#x3067;&#x306F; 2 &#x756A;&#x76EE;&#x306E;&#x4EEE;&#x8AAC;&#x3092;&#x691C;&#x8A0E;&#x3057;&#x307E;&#x3057;&#x305F;&#x3002;&#x7D30;&#x80DE;&#x819C;&#x8272;&#x7D20; FM 1 - &#x89B3;&#x5BDF;&#x30A8;&#x30F3;&#x30C9;&#x30B5;&#x30A4;&#x30C8;&#x30FC;&#x30B7;&#x30B9;&#x306E;&#x305F;&#x3081;&#x306B;&#x4F7F;&#x7528;&#x3055;&#x308C;&#x3001;&#x96FB;&#x6C17;&#x30D1;&#x30EB;&#x30B9;&#x3092;&#x516C;&#x958B;&#x3055;&#x308C;&#x3066;&#x3044;&#x308B; 43FX &#x3067;&#x67D3;&#x8272;&#x3057;&#x307E;&#x3057;&#x305F;&#x3002;&#x30A8;&#x30F3;&#x30C9;&#x30B5;&#x30A4;&#x30C8;&#x30FC;&#x30B7;&#x30B9;&#x306F;&#x3001;&#x5F37;&#x5EA6;&#x306E;&#x4E0B;&#x3068;&#x4E0A;&#x306E;&#x3057;&#x304D;&#x3044;&#x5024;&#x3092;&#x907A;&#x4F1D;&#x5B50;&#x96FB;&#x5B50;&#x4F1D;&#x9054;&#x7CFB;&#x3092;&#x96FB;&#x6C17;&#x30D1;&#x30EB;&#x30B9;&#x3092;&#x9069;&#x7528;&#x3059;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x306B;&#x3088;&#x3063;&#x3066;&#x523A;&#x6FC0;&#x3055;&#x308C;&#x305F;&#x5834;&#x5408;&#x6211;&#x3005; &#x3092;&#x5206;&#x6790;&#x3057;&#x307E;&#x3057;&#x305F;&#x3002;20 &#x5206;&#x304B;&#x3089;&#x3001;&#x307E;&#x305F;&#x306F;&#x96FB;&#x754C;&#x5F37;&#x5EA6;&#x306B;&#x95A2;&#x4FC2;&#x306A;&#x304F;&#x30D1;&#x30EB;&#x30B9;&#x914D;&#x4FE1;&#x304C;&#x89B3;&#x5BDF;&#x3055;&#x308C;&#x305F;&#x5F8C;&#x3082;&#x307E;&#x3067; 2 h &#x306E;&#x30A8;&#x30F3;&#x30C9;&#x30B5;&#x30A4;&#x30C8;&#x30FC;&#x30B7;&#x30B9;&#x306F;&#x5897;&#x52A0;&#x3057;&#x307E;&#x305B;&#x3093;&#x3002;&#x3053;&#x308C;&#x3089;&#x306E;&#x89B3;&#x5BDF;&#x306F;&#x3001;&#x96FB;&#x754C;&#x5F37;&#x5EA6;&#x3092;&#x9AD8;&#x3081;&#x3001;&#x4E0A;&#x8A18;&#x306E;&#x3057;&#x304D;&#x3044;&#x5024;&#x306E;&#x307F;&#x3092;&#x89B3;&#x5BDF;&#x96FB;&#x5B50;&#x4F1D;&#x9054;&#x7CFB;&#x306E;&#x52B9;&#x7387;&#x6027;&#x3068;&#x76F8;&#x95A2;&#x304C;&#x306A;&#x3044;&#x3067;&#x3059;&#x3002;&#x30A8;&#x30EC;&#x30AF;&#x30C8;&#x30ED; &#x30A8;&#x30F3;&#x30C9;&#x30B5;&#x30A4;&#x30C8;&#x30FC;&#x30B7;&#x30B9;&#x907A;&#x4F1D;&#x5B50;&#x96FB;&#x5B50;&#x4F1D;&#x9054;&#x7CFB;&#x306E;&#x305F;&#x3081;&#x306E;&#x91CD;&#x8981;&#x306A;&#x30E1;&#x30AB;&#x30CB;&#x30BA;&#x30E0;&#x3067;&#x306F;&#x306A;&#x3044;&#x3068;&#x306E; DNA &#x306E;&#x30A8;&#x30F3;&#x30C8;&#x30EA;&#x3092;&#x901A;&#x3058;&#x3066;&#x8EE2;&#x6D41;&#x306B;&#x3088;&#x3063;&#x3066;&#x4EEE;&#x8AAC;&#x819C;&#x3092; permeabilized &#x304C;&#x3088;&#x308A;&#x3082;&#x3063;&#x3068;&#x3082;&#x3089;&#x3057;&#x3044;&#x3067;&#x3059;&#x304C;&#x793A;&#x5506;&#x3055;&#x308C;&#x307E;&#x3057;&#x305F;&#x3002;&#x3053;&#x308C;&#x3089;&#x306E;&#x7D50;&#x679C;&#x3068;&#x305D;&#x306E;&#x81E8;&#x5E8A;&#x5FDC;&#x7528;&#x6700;&#x9069;&#x5316;&#x907A;&#x4F1D;&#x5B50;&#x96FB;&#x5B50;&#x4F1D;&#x9054;&#x7CFB;&#x306E;&#x30E1;&#x30AB;&#x30CB;&#x30BA;&#x30E0;&#x306E;&#x7406;&#x89E3;&#x306B;&#x3068;&#x3063;&#x3066;&#x91CD;&#x8981;&#x3067;&#x3059;&#x3002;

&#x96FB;&#x6C17;&#x7684;&#x523A;&#x6FC0;&#x306E;&#x30A8;&#x30F3;&#x30C9;&#x30B5;&#x30A4;&#x30C8;&#x30FC;&#x30B7;&#x30B9;&#x907A;&#x4F1D;&#x5B50;&#x96FB;&#x5B50;&#x4F1D;&#x9054;&#x7CFB;&#x3067;&#x306E;&#x5F79;&#x5272;&#x3002;

&#xADF8;&#xB7EC;&#xB098; &#xC720;&#xC804;&#xC790; electrotransfer &#xC138;&#xD3EC;&#xC5D0; &#xC720;&#xC804;&#xC790;&#xC758; &#xC591;&#xB3C4; &#xB300; &#xD55C; &#xC124;&#xB9BD;&#xB41C; &#xBC29;&#xBC95;, DNA&#xC758; &#xC138;&#xD3EC; &#xB9C9;&#xC5D0; &#xAC78;&#xCCD0; &#xC804;&#xC1A1; &#xBA54;&#xCEE4;&#xB2C8;&#xC998;&#xC740; &#xC5EC;&#xC804;&#xD788; &#xC54C; &#xC218; &#xC5C6;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xC77C;&#xBD80; &#xC5F0;&#xAD6C;&#xB294; &#xB2E4;&#xB978; DNA &#xC804;&#xAE30; endocytosis &#xD1B5;&#xD574; &#xC140; &#xC785;&#xB825; &#xD558;&#xC9C0;&#xB9CC; &#xC544;&#xBB34; &#xC9C1;&#xC811;&#xC801;&#xC778; &#xAD00;&#xCC30; &#xC218;&#xD589;&#xC744; &#xC81C;&#xC548; &#xD558;&#xB294; &#xB3D9;&#xC548; &#xB9C9; &#xC228; &#xAD6C;&#xBA4D;&#xC744; &#xD1B5;&#xD574; DNA translocated &#xAC83;&#xC774; &#xC88B;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xC774; &#xBB38;&#xC11C;&#xC5D0; &#xB450; &#xBC88;&#xC9F8; &#xAC00;&#xC124;&#xC744; &#xC870;&#xC0AC;. &#xC140; &#xBA64;&#xBE0C;&#xB808;&#xC778; &#xC5FC;&#xB8CC; FM 1-43FX, endocytosis, &#xAD00;&#xCC30;&#xC744; &#xC704;&#xD574; &#xC0AC;&#xC6A9; &#xB418; &#xACE0; &#xB2E4;&#xC74C; &#xC804;&#xAE30; &#xD384;&#xC2A4;&#xC5D0; &#xB178;&#xCD9C; &#xD558;&#xB294; &#xBB3C; &#xB4E4;&#xC77C; &#xB418;&#xC5C8;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xC6B0;&#xB9AC;&#xAC00; &#xBD84;&#xC11D; endocytosis &#xC544;&#xB798;&#xC640; &#xC720;&#xC804;&#xC790; electrotransfer&#xC758; &#xC784;&#xACC4;&#xAC12; &#xAC12; &#xC704;&#xC5D0; &#xB18D;&#xB3C4;&#xC640; &#xC804;&#xAE30; &#xD384;&#xC2A4;&#xB97C; &#xC801;&#xC6A9; &#xD558; &#xC5EC; &#xC790;&#xADF9; &#xD588;&#xB2E4;. Endocytosis 20 &#xBD84; &#xB610;&#xB294; &#xC804;&#xAE30;&#xC7A5; &#xAC15;&#xB3C4; &#xAD00;&#xACC4; &#xC5C6;&#xC774; &#xD384;&#xC2A4; &#xBC30;&#xB2EC; &#xAD00;&#xCC30; &#xB418;&#xC5C8;&#xB2E4; 2 h&#xB3C4;&#xB97C; &#xC99D;&#xAC00; &#xD558;&#xC9C0; &#xC54A;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xC774;&#xB7EC;&#xD55C; &#xAD00;&#xCE21; &#xAC15;&#xB3C4; &#xB530;&#xB77C; &#xC99D;&#xAC00; &#xD558; &#xACE0; &#xC784;&#xACC4;&#xAC12; &#xAC12; &#xC704;&#xC5D0;&#xC11C; &#xAD00;&#xCC30; &#xD558;&#xB294; electrotransfer &#xD6A8;&#xC728; &#xAD00;&#xB828; &#xB418;&#xC9C0; &#xC54A;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xC6B0;&#xB9AC;&#xC758; &#xACB0;&#xACFC; &#xC804;&#xAE30; endocytosis&#xB294; &#xC720;&#xC804;&#xC790; electrotransfer&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xC911;&#xC694; &#xD55C; &#xBA54;&#xCEE4;&#xB2C8;&#xC998;&#xC744; &#xD1B5;&#xD574; &#xC804; &#xC88C;&#xC5D0; &#xC758;&#xD574; DNA &#xD56D;&#xBAA9;&#xC758; &#xAC00;&#xC124; permeabilized &#xBA64;&#xBE0C;&#xB808;&#xC778;&#xC740; &#xB354; &#xADF8;&#xB7F4; &#xB4EF; &#xD558; &#xAC8C; &#xC88B;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xC81C;&#xC2DC; &#xACB0;&#xACFC; &#xC720;&#xC804;&#xC790; electrotransfer&#xC758; &#xBA54;&#xCEE4;&#xB2C8;&#xC998;&#xC758; &#xC774;&#xD574; &#xBC0F; &#xC784;&#xC0C1; &#xC751;&#xC6A9; &#xD504;&#xB85C;&#xADF8;&#xB7A8;&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xCD5C;&#xC801;&#xD654;&#xB294; &#xC911;&#xC694; &#xD558;&#xB2E4;.

&#xC720;&#xC804;&#xC790; electrotransfer &#xC804;&#xAE30; &#xC790;&#xADF9;&#xB41C; endocytosis&#xC758; &#xC5ED;&#xD560;.

Gen i es un m&eacute;todo establecido para la transferencia de genes en las c&eacute;lulas, sin embargo, el mecanismo de transferencia de ADN a trav&eacute;s de la membrana celular todav&iacute;a no se sabe. Algunos estudios sugieren que el ADN se desplaza a trav&eacute;s de los poros de la membrana mientras que otros proponen que ADN entra en la c&eacute;lula mediante electro-endocitosis, pero no fue realizada observaci&oacute;n directa. En este trabajo se investig&oacute; la segunda hip&oacute;tesis. Las c&eacute;lulas fueron te&ntilde;idas con tinte membrana FM 1-43FX, que se utiliza para la observaci&oacute;n de endocitosis y expuestos a impulsos el&eacute;ctricos. Analizamos si endocitosis fue estimulada mediante la aplicaci&oacute;n de impulsos el&eacute;ctricos con intensidades por debajo y por encima del valor de umbral para gen i. Aumento de la endocitosis de 20 min o hasta 2 h despu&eacute;s de la entrega de pulso se observ&oacute;, independientemente de la fuerza del campo el&eacute;ctrico. Estas observaciones no se correlacionan con eficacia i, que aumenta con la intensidad de campo y se observa solamente sobre el valor de umbral. Nuestros resultados sugieren que el electro-endocitosis no es un mecanismo crucial para gen i y que la hip&oacute;tesis de la entrada de ADN por translocaci&oacute;n a trav&eacute;s permeabilized membrana es m&aacute;s plausible. Los resultados presentados son importantes para una mejor comprensi&oacute;n de los mecanismos de gene i y para su optimizaci&oacute;n para aplicaciones cl&iacute;nicas.

Gorazd Pucihar

Department of Biomedical Engineering,
Faculty of Electrical Engineering,
Department of Biomedical Engineering, Faculty of Electrical Engineering

University of Ljubljana

Measuring the Induced Membrane Voltage with Di-8-ANEPPS

Gorazd Pucihar

Department of Biomedical Engineering,Faculty of Electrical Engineering,Department of Biomedical Engineering, Faculty of Electrical Engineering

University of Ljubljana

Measuring the Induced Membrane Voltage with Di-8-ANEPPS

Department of Biomedical Engineering,
Faculty of Electrical Engineering,
Department of Biomedical Engineering, Faculty of Electrical Engineering