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Detection of  Neu1 Sialidase Activity in Regulating TOLL-like Receptor Activation

Mammalian Toll-like receptors (TLRs) are a family of receptors that recognize pathogen-associated molecular patterns. Not only are TLRs crucial sensors of ...

Queen's University - Kingston, Ontario

&#x80DE;&#x5916;&#x533A;&#x7684; TOLL &#x6837;&#x53D7;&#x4F53; (&#x5355;&#x53CD;) &#x9AD8;&#x5EA6;&#x662F;&#x4E0E;&#x51E0;&#x4E2A; N &#x94FE;&#x63A5; gylcosylation &#x7AD9;&#x70B9;&#x4F4D;&#x4E8E;&#x5185;&#x51F9;&#x8868;&#x9762;&#x7CD6;&#x57FA;&#x5316;&#x3002;&#x672A;&#x77E5;&#x7684;&#x5355;&#x53CD;&#x53D7;&#x4F53;&#x6FC0;&#x6D3B;&#x8FD9;&#x4E9B;&#x7CD6; N-&#x805A;&#x7CD6;&#x7684;&#x786E;&#x5207;&#x4F5C;&#x7528;&#x3002;&#x6700;&#x8FD1;&#xFF0C;&#x6211;&#x4EEC;&#x5DF2;&#x8868;&#x660E;&#x553E;&#x6DB2;&#x9178;&#x9176; Neu1 &#x5E76;&#x4E0D;&#x662F; Neu2&#xFF0C;&#x4E00;&#x4E2A;&#x590D;&#x6742;&#x4E0E;&#x5355;&#x53CD;-2-3 &#x548C;-4 &#x5F62;&#x5F0F;&#x3001;-3&#x3001;-4 &#x7684;&#x53D7;&#x4F53;&#x4E0A;&#x7684;&#x5E7C;&#x7A1A;&#x548C;&#x6FC0;&#x6D3B;&#x7684;&#x5DE8;&#x566C;&#x7EC6;&#x80DE;&#x7684;&#x7EC6;&#x80DE;&#x8868;&#x9762;&#x819C;&#x7EC6;&#x80DE; (Glycoconj J DOI 10.1007/s10719-009-9239-8)&#x3002;Neu1 &#x6FC0;&#x6D3B;&#x88AB;&#x8BF1;&#x5BFC; TLR &#x914D;&#x4F53;&#x7ED1;&#x5B9A;&#x5230;&#x5176;&#x5404;&#x81EA;&#x7684;&#x53D7;&#x4F53;&#x3002;&#x5728;&#x8FD9;&#x91CC;&#xFF0C;&#x6211;&#x4EEC;&#x663E;&#x793A;&#x8BE5;&#x5185;&#x6BD2;&#x7D20;&#x8102;&#x591A;&#x7CD6; (LPS)-&#x81F4; MyD88/TLR4 &#x590D;&#x6742;&#x5730;&#x5C42;&#x548C;&#x968F;&#x540E; NFkappaB &#x6FC0;&#x6D3B;&#x662F;&#x4F9D;&#x8D56;&#x4E8E;&#x901A;&#x8FC7;&#x5173;&#x8054;&#x4E0E;&#x8102;&#x591A;&#x7CD6;&#x523A;&#x6FC0;&#x6D3B;&#x4E3B;&#x5DE8;&#x566C;&#x7EC6;&#x80DE;&#x3001; &#x5DE8;&#x566C;&#x7EC6;&#x80DE;&#x548C;&#x6811;&#x7A81;&#x72B6;&#x7EC6;&#x80DE;&#x7CFB;&#x4F46;&#x4E0D;&#x662F;&#x4E0E;&#x4E3B; Neu1 &#x7F3A;&#x5DE8;&#x566C;&#x7EC6;&#x80DE;&#x7684; Neu1 &#x6D3B;&#x52A8;&#x7684;&#x94FE;&#x63A5;&#x5230; &beta;-&#x82F7; TLR4 &#x7684; &alpha;-2&#xFF0C;3-&#x553E;&#x6DB2;&#x6B8B;&#x7559;&#x7684;&#x53BB;&#x9664;&#x3002;&#x5916;&#x6E90;&#x6027; &alpha;-2&#xFF0C;3 &#x553E;&#x6DB2;&#x7279;&#x5B9A;&#x795E;&#x7ECF;&#x6C28;&#x9178;&#x9176; (Streptoccocus &#x80BA;&#x708E;&#xFF09; &#x548C;&#x91CE;&#x751F;&#x578B;&#x7814;&#x7A76;&#x8DE8;-&#x553E;&#x6DB2;&#x9178;&#x9176; T.(TS) &#x4F46;&#x4E0D;&#x662F;&#x50AC;&#x5316;&#x5904;&#x4E8E;&#x975E;&#x6D3B;&#x52A8;&#x72B6;&#x6001;&#x7684;&#x7A81;&#x53D8;&#x4F53; TSAsp98 Glu &#x8C03;&#x89E3; TLR4 &#x4E8C;&#x805A;&#x53CD;&#x5E94;&#xFF0C;&#x4EE5;&#x4FBF; MyD88/TLR4 &#x590D;&#x6742;&#x5730;&#x5C42;&#x548C; NFkappaB &#x6FC0;&#x6D3B;&#x76F8;&#x4F3C;&#x4E0E;&#x8102;&#x591A;&#x7CD6;&#x770B;&#x5230;&#x8FD9;&#x4E9B;&#x7B54;&#x590D;&#x3002;&#x8FD9;&#x4E9B;&#x76F8;&#x540C;&#x7684;&#x5355;&#x53CD;&#x914D;&#x4F53;&#x8BF1;&#x5BFC;&#x7684; NFkappaB &#x54CD;&#x5E94;&#x5E76;&#x6CA1;&#x6709;&#x9075;&#x5B88;&#x5728;&#x5355;&#x53CD;&#x6709;&#x7F3A;&#x9677;&#x7684;&#x4EBA;&#x80DA;&#x80CE;&#x80BE; 293 &#x7EC6;&#x80DE;&#xFF0C;&#x4F46;&#x90FD;&#x5728;&#x4EBA;&#x80DA;&#x80CE;&#x80BE; 293 &#x7EC6;&#x80DE;&#x7A33;&#x5B9A;&#x8F6C;&#x67D3; TLR4/MD2&#xFF0C;&#x91CD;&#x65B0;&#x5EFA;&#x7ACB;&#xFF0C;&#x5747;&#x6709;&#x663E;&#x8457;&#x6291;&#x5236;&#x4F5C;&#x7528;&#x7684; &alpha;-2&#xFF0C;3-&#x553E;&#x6DB2;&#x5177;&#x4F53;&#x69D0;&#x5C71; &#xFF08;&#x4EF2;&#x88C1;&#x6CD5; &#x300B;-2) &#x51DD;&#x96C6;&#x7D20;&#x3001; &alpha;-2&#xFF0C;3-&#x553E;&#x6DB2;&#x5177;&#x4F53;&#x534A;&#x4E73;&#x7CD6;&#x51DD;&#x96C6;&#x7D20;-1 &#x548C;&#x795E;&#x7ECF;&#x6C28;&#x9178;&#x9176;&#x6291;&#x5236;&#x5242;&#x8FBE;&#x83F2;&#x4F46;&#x4E0D;&#x662F;&#x7531; &alpha;-2&#xFF0C;6-&#x553E;&#x6DB2;&#x5177;&#x4F53;&#x63A5;&#x9AA8;&#x9ED1;&#x8D28;&#x51DD;&#x96C6;&#x7D20; &#xFF08;SNA&#xFF09;&#x3002;&#x4E24;&#x8005;&#x5408;&#x8BA1;&#xFF0C;&#x8C03;&#x67E5;&#x7ED3;&#x679C;&#x8868;&#x660E; Neu1 desialylation &#x7684;&#x5355;&#x53CD;&#x53D7;&#x4F53;&#x7684; &alpha;-2&#xFF0C;3-&#x553E;&#x6DB2;&#x6B8B;&#x7559;&#x4F7F;&#x4E2D;&#x79FB;&#x9664;&#x5355;&#x53CD;&#x6FC0;&#x6D3B;&#x548C;&#x7EC6;&#x80DE;&#x4FE1;&#x53F7;&#x53D7;&#x4F53;&#x534F;&#x4F1A;&#x7A7A;&#x95F4;&#x4F4D;&#x963B;&#x52A8;&#x5F39;&#x3002;

Neu1 desialylation &#x553E;&#x6DB2;&#x94FE;&#x63A5;&#x963F;&#x5C14;&#x6CD5; 2&#xFF0C;3 &beta;-&#x534A;&#x4E73;&#x7CD6;&#x6B8B;&#x7559;&#x7684; TOLL &#x6837;&#x53D7;&#x4F53; 4 &#x5BF9;&#x53D7;&#x4F53;&#x6FC0;&#x6D3B;&#x548C;&#x7EC6;&#x80DE;&#x4FE1;&#x53F7;&#x81F3;&#x5173;&#x91CD;&#x8981;&#x3002;

The ectodomain of TOLL-like receptors (TLR) is highly glycosylated with several N-linked gylcosylation sites located in the inner concave surface. The precise role of these sugar N-glycans in TLR receptor activation is unknown. Recently, we have shown that Neu1 sialidase and not Neu2, -3 and -4 forms a complex with TLR-2, -3 and -4 receptors on the cell-surface membrane of naÃ¯ve and activated macrophage cells (Glycoconj J DOI 10.1007/s10719-009-9239-8). Activation of Neu1 is induced by TLR ligands binding to their respective receptors. Here, we show that endotoxin lipopolysaccharide (LPS)-induced MyD88/TLR4 complex formation and subsequent NFkappaB activation is dependent on the removal of alpha-2,3-sialyl residue linked to beta-galactoside of TLR4 by the Neu1 activity associated with LPS-stimulated live primary macrophage cells, macrophage and dendritic cell lines but not with primary Neu1-deficient macrophage cells. Exogenous alpha-2,3 sialyl specific neuraminidase (Streptoccocus pneumoniae) and wild-type T. cruzi trans-sialidase (TS) but not the catalytically inactive mutant TSAsp98-Glu mediate TLR4 dimerization to facilitate MyD88/TLR4 complex formation and NFkappaB activation similar to those responses seen with LPS. These same TLR ligand-induced NFkappaB responses are not observed in TLR deficient HEK293 cells, but are re-established in HEK293 cells stably transfected with TLR4/MD2, and are significantly inhibited by alpha-2,3-sialyl specific Maackia amurensis (MAL-2) lectin, alpha-2,3-sialyl specific galectin-1 and neuraminidase inhibitor Tamiflu but not by alpha-2,6-sialyl specific Sambucus nigra lectin (SNA). Taken together, the findings suggest that Neu1 desialylation of alpha-2,3-sialyl residues of TLR receptors enables in removing a steric hinderance to receptor association for TLR activation and cellular signaling.

Neu1 desialylation of sialyl alpha-2,3-linked beta-galactosyl residues of TOLL-like receptor 4 is essential for receptor activation and cellular signaling.

L&#x26;#39;ectodomaine de r&#xE9;cepteurs de type Toll (TLR) est fortement glycosyl&#xE9;e avec plusieurs sites de liaison N gylcosylation situ&#xE9;s dans la surface int&#xE9;rieure concave. Le r&#xF4;le pr&#xE9;cis de ces sucre N-glycanes dans l&#x26;#39;activation des r&#xE9;cepteurs TLR est inconnue. R&#xE9;cemment, nous avons montr&#xE9; que Neu1 sialidase et non Neu2, formes -3 et -4 un complexe avec TLR-2, -3 et -4 r&#xE9;cepteurs sur la membrane de surface cellulaire des cellules macrophages na&#xEF;fs et activ&#xE9; (Glycoconj J DOI 10.1007/s10719 -009-9239-8). L&#x26;#39;activation de Neu1 est induite par les ligands de TLR contraignantes &#xE0; leurs r&#xE9;cepteurs respectifs. Ici, nous montrons que le lipopolysaccharide endotoxine (LPS) induit la formation de complexes MyD88/TLR4 et l&#x26;#39;activation NFkappaB ult&#xE9;rieure d&#xE9;pend de l&#x26;#39;&#xE9;limination de l&#x26;#39;alpha-2 ,3-sialyl r&#xE9;sidus li&#xE9;s aux b&#xEA;ta-galactoside de TLR4 par l&#x26;#39;activit&#xE9; associ&#xE9;e &#xE0; Neu1 LPS- stimul&#xE9; les cellules vivantes macrophages primaires, des macrophages et des lign&#xE9;es de cellules dendritiques, mais pas avec des cellules primaires de macrophages Neu1-d&#xE9;ficientes. Exog&#xE8;ne alpha-2, 3 sialyl sp&#xE9;cifique neuraminidase (Streptococcus pneumoniae) et de type sauvage par T. cruzi trans-sialidase (TS), mais pas le mutant catalytiquement inactif TSAsp98-Glu m&#xE9;diate TLR4 dim&#xE9;risation pour faciliter la formation du complexe MyD88/TLR4 et l&#x26;#39;activation similaire &#xE0; NFkappaB ces r&#xE9;ponses vu avec le LPS. Ces m&#xEA;mes TLR ligand-r&#xE9;ponses induites par NFkappaB ne sont pas observ&#xE9;s dans les cellules HEK293 TLR d&#xE9;ficientes, mais sont r&#xE9;tablis dans les cellules HEK293 transfect&#xE9;es de fa&#xE7;on stable avec TLR4/MD2, et sont significativement inhib&#xE9;e par alpha-2 ,3-sialyl Maackia amurensis sp&#xE9;cifique (MAL- 2) la lectine, de l&#x26;#39;alpha-2 ,3-sialyl inhibiteur sp&#xE9;cifique galectine-1 et de la neuraminidase Tamiflu mais pas par l&#x26;#39;alpha-2 ,6-sialyl lectine sp&#xE9;cifique Sambucus nigra (SNA). Pris dans leur ensemble, les r&#xE9;sultats sugg&#xE8;rent que Neu1 d&#xE9;sialylation d&#x26;#39;alpha-2 ,3-sialyl r&#xE9;sidus de r&#xE9;cepteurs TLR permet &#xE0; la suppression d&#x26;#39;un encombrement st&#xE9;rique &#xE0; l&#x26;#39;association du r&#xE9;cepteur pour l&#x26;#39;activation de TLR et de la signalisation cellulaire.

Neu1 d&#xE9;sialylation de Sialyl Alpha-2 ,3-linked b&#xEA;ta-galactosyl r&#xE9;sidus de Toll-like receptor 4 est essentielle pour l&#x26;#39;activation des r&#xE9;cepteurs et signalisation cellulaires

Die APPs&alpha; von TOLL-Like Rezeptoren (TLR) ist sehr stark glykosyliert mit mehreren N verkn&uuml;pfte Gylcosylation-Standorte in die konkave Innenfl&auml;che. Die genaue Rolle der diese Zucker N-Glykane in TLR-Aktivierung ist unbekannt. Vor kurzem haben wir gezeigt, dass Neu1 Sialidase und nicht Neu2,-3 und-4 bildet einen Komplex mit TLR-2,-3 und-4 Rezeptoren auf der Zelloberfl&auml;che Membran der naive und aktivierte Makrophagen cells (Glycoconj J DOI 10.1007/s10719-009-9239-8). Aktivierung des Neu1 wird von TLR-Liganden binden an ihre entsprechenden Rezeptoren induziert. Hier zeigen wir, dass Endotoxin Lipopolysaccharid (LPS)-induzierte MyD88/TLR4-Komplexbildung und nachfolgende NFkappaB Aktivierung ist die Beseitigung von Alpha-2,3-Sialyl-R&uuml;ckstand mit dem Beta-galactopyranosid von TLR4 durch die Neu1 Aktivit&auml;t im Zusammenhang mit LPS stimuliert Leben prim&auml;ren Makrophagen-Zellen, Makrophagen und dendritischen Zelllinien aber nicht mit prim&auml;ren Neu1-defizienten Makrophagen Zellen abh&auml;ngig. Exogene Alpha-2,3 Sialyl spezifische Neuraminidase (Streptoccocus Pneumoniae) und Wildtyp T. Cruzi Trans-Sialidase (TS), aber nicht die katalytisch inaktive mutant TSAsp98-Glu vermitteln TLR4 Dimerisierung MyD88/TLR4-Komplexbildung und NFkappaB Aktivierung &auml;hnlich wie diese Antworten gesehen mit LPS zu erleichtern. Diese gleichen TLR Liganden induziert NFkappaB Antworten nicht in TLR mangelhaft HEK293 Zellen zu beobachten sind, aber in HEK293 Zellen stabil die mit TLR4/MD2 transfected wiederhergestellt werden und sind deutlich gehemmt, von Alpha-2,3-Sialyl spezifische Maackia Amurensis (MAL-2) Lektin, Alpha-2,3-Sialyl spezifische Galectin-1 und Neuraminidasehemmer Tamiflu aber nicht von Alpha-2,6-Sialyl spezifische Sambucus Nigra Lektin (SNA). Zusammengenommen zufolge die Feststellungen Neu1 Desialylation Alpha-2,3-Sialyl R&uuml;ckst&auml;nde von TLR-Rezeptoren erm&ouml;glicht eine sterische Hinderniss Rezeptor Vereinigung f&uuml;r TLR-Aktivierung und zellularen Signalisierens zu entfernen.

Neu1 Desialylation Sialyl Alpha-2,3-chromosomale Beta-Galaktosyltransferase R&uuml;ckst&auml;nde von TOLL-Like Receptor 4 unbedingt Rezeptor-Aktivierung und zellulare signalisieren.

Il ectodomain di recettori TOLL-like (TLR) &egrave; altamente glicosilata con diversi siti di N-linked gylcosylation situato nella superficie interna concava. Il ruolo preciso di questi zucchero N-glicani nell&#39;attivazione del recettore TLR &egrave; sconosciuto. Recentemente, abbiamo dimostrato che sialidasi Neu1 e non Neu2, forma il complesso con TLR-2-3 e -4, -3 e -4 recettori sulla superficie cellulare membrana di ingenui e macrofagi attivati cellule (Glycoconj J DOI 10.1007/s10719-009-9239-8). Attivazione del Neu1 &egrave; indotta da ligandi TLR vincolante ai loro rispettivi recettori. Qui, vi mostriamo quella lipopolisaccaride (LPS) di endotossina-indotta MyD88/TLR4 formazione complessa e NFkappaB successiva attivazione dipende la rimozione di residui alfa-2,3-sialil legata alla beta-Galattoside di TLR4 dall&#39;attivit&agrave; Neu1 associati con LPS-stimolata dal vivo primaria macrofago cellule, macrofagi e linee di cellule dendritiche, ma non con le cellule primarie del macrofago Neu1-carenti. Esogeno alfa-2,3 sialil specifico neuraminidasi (Streptoccocus pneumoniae) e wild-type T. cruzi trans-sialidasi (TS) ma non il mutante cataliticamente inattivo TSAsp98-Glu mediare TLR4 dimerizzazione per facilitare la formazione dei complessi MyD88/TLR4 e attivazione di NFkappaB simili a quelle risposte vista con LPS. Queste stesse TLR NFkappaB risposte non sono state osservate cellule HEK293 carente TLR, ma sono ristabilite in cellule HEK293 stabile transfected con TLR4/MD2 indotta dal ligando e sono significativamente inibito da alfa-2,3-sialil specifico Maackia amurensis (MAL-2) lectina, alfa-2,3-sialil specifico galectin-1 e neuraminidasi inibitore Tamiflu ma non da alfa-2,6-sialil specifico Sambucus nigra lectin (SNA). Presi insieme, i risultati suggeriscono che Neu1 desialylation di alfa-2,3-sialil residui di recettori TLR consente a rimuovere un impedimento sterico all&#39;associazione del recettore per l&#39;attivazione di TLR e segnalazione cellulare.

Neu1 desialylation di sialil beta legata all&#39;alfa-2,3-galattosil residui del recettore TOLL-like 4 &egrave; essenziale per l&#39;attivazione del recettore e di segnalazione cellulare.

Toll&#x69D8;&#x53D7;&#x5BB9;&#x4F53;&#xFF08;TLR&#xFF09;&#x306E;&#x7D30;&#x80DE;&#x5916;&#x30C9;&#x30E1;&#x30A4;&#x30F3;&#x306F;&#x975E;&#x5E38;&#x306B;&#x5185;&#x5074;&#x306E;&#x51F9;&#x9762;&#x306B;&#x3042;&#x308B;&#x3044;&#x304F;&#x3064;&#x304B;&#x306E;N-&#x7D50;&#x5408;gylcosylation&#x30B5;&#x30A4;&#x30C8;&#x200B;&#x200B;&#x3068;&#x30B0;&#x30EA;&#x30B3;&#x30B7;&#x30EB;&#x5316;&#x3055;&#x308C;&#x3066;&#x3044;&#x308B;&#x3002; TLR&#x53D7;&#x5BB9;&#x4F53;&#x306E;&#x6D3B;&#x6027;&#x5316;&#x306B;&#x304A;&#x3051;&#x308B;&#x3053;&#x308C;&#x3089;&#x306E;&#x7CD6;&#x306E;N-&#x7D50;&#x5408;&#x578B;&#x7CD6;&#x9396;&#x306E;&#x6B63;&#x78BA;&#x306A;&#x5F79;&#x5272;&#x306F;&#x4E0D;&#x660E;&#x3067;&#x3042;&#x308B;&#x3002;&#x6700;&#x8FD1;&#x3001;&#x6211;&#x3005;&#x306F;&#x30CA;&#x30A4;&#x30FC;&#x30D6;&#x304A;&#x3088;&#x3073;&#x6D3B;&#x6027;&#x5316;&#x30DE;&#x30AF;&#x30ED;&#x30D5;&#x30A1;&#x30FC;&#x30B8;&#x7D30;&#x80DE;&#xFF08;Glycoconj J DOI 10.1007/s10719&#x306E;&#x7D30;&#x80DE;&#x819C;&#x8868;&#x9762;&#x4E0A;&#x306E;Neu1&#x30B7;&#x30A2;&#x30EA;&#x30C0;&#x30FC;&#x30BC;&#x306F;&#x3042;&#x308A;&#x307E;&#x305B;&#x3093;Neu2&#x3001;-3&#x304A;&#x3088;&#x3073;-4&#x30D5;&#x30A9;&#x30FC;&#x30E0;TLR-2&#x3001;-3&#x304A;&#x3088;&#x3073;-4&#x53D7;&#x5BB9;&#x4F53;&#x3068;&#x8907;&#x5408;&#x4F53;&#x3092;&#x793A;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x308B;-009-9239-8&#xFF09;&#x3002; Neu1&#x306E;&#x6D3B;&#x6027;&#x5316;&#x306F;&#x3001;&#x305D;&#x308C;&#x305E;&#x308C;&#x306E;&#x53D7;&#x5BB9;&#x4F53;&#x306B;&#x7D50;&#x5408;&#x3059;&#x308B;TLR&#x30EA;&#x30AC;&#x30F3;&#x30C9;&#x306B;&#x3088;&#x3063;&#x3066;&#x8A98;&#x5C0E;&#x3055;&#x308C;&#x308B;&#x3002;&#x3053;&#x3053;&#x3067;&#x306F;&#x3001;&#x30A8;&#x30F3;&#x30C9;&#x30C8;&#x30AD;&#x30B7;&#x30F3;&#x30EA;&#x30DD;&#x30DD;&#x30EA;&#x30B5;&#x30C3;&#x30AB;&#x30E9;&#x30A4;&#x30C9;&#xFF08;LPS&#xFF09;&#x8A98;&#x767A;MyD88/TLR4&#x8907;&#x200B;&#x200B;&#x5408;&#x4F53;&#x5F62;&#x6210;&#x3068;&#x305D;&#x306E;&#x5F8C;&#x306E;&#x5E30;&#x7740;&#x306E;&#x6D3B;&#x6027;&#x5316;&#x306F;LPS-&#x306B;&#x95A2;&#x9023;&#x4ED8;&#x3051;&#x3089;&#x308C;&#x3066;&#x3044;&#x308B;Neu1&#x6D3B;&#x6027;&#x306B;&#x3088;&#x308A;TLR4&#x306E;&#x3B2;-&#x30AC;&#x30E9;&#x30AF;&#x30C8;&#x30B7;&#x30C9;&#x306B;&#x30EA;&#x30F3;&#x30AF;&#x3055;&#x308C;&#x3066;&#x3044;&#x308B;&#x3B1;-2 ,3-&#x30B7;&#x30A2;&#x30EA;&#x30EB;&#x6B8B;&#x57FA;&#x306E;&#x9664;&#x53BB;&#x306B;&#x4F9D;&#x5B58;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x3092;&#x793A;&#x3059;&#x3067;&#x306F;&#x306A;&#x304F;&#x3001;&#x4E3B;Neu1&#x6B20;&#x640D;&#x30DE;&#x30AF;&#x30ED;&#x30D5;&#x30A1;&#x30FC;&#x30B8;&#x7D30;&#x80DE;&#x3092;&#x7528;&#x3044;&#x305F;&#x30E9;&#x30A4;&#x30D6;&#x4E3B;&#x30DE;&#x30AF;&#x30ED;&#x30D5;&#x30A1;&#x30FC;&#x30B8;&#x7D30;&#x80DE;&#x3001;&#x30DE;&#x30AF;&#x30ED;&#x30D5;&#x30A1;&#x30FC;&#x30B8;&#x3001;&#x6A39;&#x72B6;&#x7D30;&#x80DE;&#x682A;&#x3092;&#x523A;&#x6FC0;&#x3057;&#x305F;&#x3002;&#x5916;&#x56E0;&#x6027;&#x306E;&#x3B1;-2&#x3001;3&#x30B7;&#x30A2;&#x30EB;&#x9178;&#x7279;&#x7570;&#x7684;&#xFF08;Streptoccocus&#x80BA;&#x708E;&#xFF09;&#x30CE;&#x30A4;&#x30E9;&#x30DF;&#x30CB;&#x30C0;&#x30FC;&#x30BC;&#x3068;&#x91CE;&#x751F;&#x578B;&#x306E;T. cruzi&#x30C8;&#x30E9;&#x30F3;&#x30B9;&#x30B7;&#x30A2;&#x30EA;&#x30C0;&#x30FC;&#x30BC;&#xFF08;TS&#xFF09;&#x306F;&#x3042;&#x308A;&#x307E;&#x305B;&#x3093;&#x306B;&#x4F3C;&#x3066;MyD88/TLR4&#x8907;&#x200B;&#x200B;&#x5408;&#x4F53;&#x5F62;&#x6210;&#x3068;&#x5E30;&#x7740;&#x306E;&#x6D3B;&#x6027;&#x5316;&#x3092;&#x4FC3;&#x9032;&#x3059;&#x308B;&#x89E6;&#x5A92;&#x7684;&#x306B;&#x4E0D;&#x6D3B;&#x6027;&#x306A;&#x5909;&#x7570;&#x4F53;TSAsp98-Glu&#x306E;&#x4EF2;&#x4ECB;TLR4&#x4E8C;&#x91CF;&#x5316;&#x3053;&#x308C;&#x3089;&#x306E;&#x5FDC;&#x7B54;&#x306F;&#x3001;LPS&#x3068;&#x898B;&#x3089;&#x308C;&#x308B;&#x3002;&#x3053;&#x308C;&#x3089;&#x306E;&#x540C;&#x4E00;&#x306E;TLR&#x30EA;&#x30AC;&#x30F3;&#x30C9;&#x8A98;&#x5C0E;&#x5E30;&#x7740;&#x5FDC;&#x7B54;&#x304C;TLR&#x6B20;&#x640D;HEK293&#x7D30;&#x80DE;&#x3067;&#x89B3;&#x5BDF;&#x3055;&#x308C;&#x3066;&#x3044;&#x307E;&#x305B;&#x3093;&#x304C;&#x3001;&#x5B89;&#x5B9A;TLR4/MD2&#x3067;&#x30C8;&#x30E9;&#x30F3;&#x30B9;&#x30D5;&#x30A7;&#x30AF;&#x30C8;&#x3057;&#x305F;HEK293&#x7D30;&#x80DE;&#x3067;&#x518D;&#x78BA;&#x7ACB;&#x3055;&#x308C;&#x3001;&#x5927;&#x5E45;&#x306B;&#x3B1;-2 ,3-&#x30B7;&#x30A2;&#x30EA;&#x30EB;&#x7279;&#x5B9A;Maackia&#x306E;amurensis&#xFF08;MAL-&#x306B;&#x3088;&#x308A;&#x963B;&#x5BB3;&#x3055;&#x308C;&#x308B;2&#xFF09;&#x30EC;&#x30AF;&#x30C1;&#x30F3;&#x3001;&#x3B1;-2 ,6-&#x30B7;&#x30A2;&#x30EA;&#x30EB;&#x7279;&#x5B9A;&#x30CB;&#x30EF;&#x30C8;&#x30B3;&#x9ED2;&#x30EC;&#x30AF;&#x30C1;&#x30F3;&#xFF08;SNA&#xFF09;&#x306B;&#x3088;&#x3063;&#x3066;&#x30BF;&#x30DF;&#x30D5;&#x30EB;&#x3067;&#x306F;&#x306A;&#x304F;&#x3B1;-2 ,3-&#x30B7;&#x30A2;&#x30EA;&#x30EB;&#x7279;&#x5B9A;&#x306E;&#x30AC;&#x30EC;&#x30AF;&#x30C1;&#x30F3;-1&#x3068;&#x30CE;&#x30A4;&#x30E9;&#x30DF;&#x30CB;&#x30C0;&#x30FC;&#x30BC;&#x963B;&#x5BB3;&#x5264;&#x3002;&#x4E00;&#x7DD2;&#x306B;&#x3001;&#x8ABF;&#x67FB;&#x7D50;&#x679C;&#x306F;&#x3001;TLR&#x53D7;&#x5BB9;&#x4F53;&#x306E;&#x3B1;-2 ,3-&#x30B7;&#x30A2;&#x30EA;&#x30EB;&#x6B8B;&#x57FA;&#x306E;Neu1&#x8131;&#x30B7;&#x30A2;&#x30EA;&#x30EB;&#x5316;&#x306F;&#x3001;TLR&#x306E;&#x6D3B;&#x6027;&#x5316;&#x3084;&#x7D30;&#x80DE;&#x5185;&#x30B7;&#x30B0;&#x30CA;&#x30EB;&#x4F1D;&#x9054;&#x306E;&#x53D7;&#x5BB9;&#x4F53;&#x5354;&#x4F1A;&#x306B;&#x7ACB;&#x4F53;&#x969C;&#x5BB3;&#x3092;&#x9664;&#x53BB;&#x3059;&#x308B;&#x306E;&#x306B;&#x53EF;&#x80FD;&#x3067;&#x3042;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x3092;&#x793A;&#x5506;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x308B;&#x3002;

Toll&#x69D8;&#x53D7;&#x5BB9;&#x4F53;4&#x306E;&#x30B7;&#x30A2;&#x30EA;&#x30EB;&#x30A2;&#x30EB;&#x30D5;&#x30A1;-2,3  - &#x7D50;&#x5408;&#x3B2;-&#x30AC;&#x30E9;&#x30AF;&#x30C8;&#x30B7;&#x30EB;&#x6B8B;&#x57FA;&#x306E;Neu1&#x8131;&#x30B7;&#x30A2;&#x30EA;&#x30EB;&#x5316;&#x306F;&#x53D7;&#x5BB9;&#x4F53;&#x306E;&#x6D3B;&#x6027;&#x5316;&#x3068;&#x7D30;&#x80DE;&#x5185;&#x30B7;&#x30B0;&#x30CA;&#x30EB;&#x4F1D;&#x9054;&#x306B;&#x5FC5;&#x9808;&#x3067;&#x3042;&#x308B;

&#xC218;&#xC6A9; &#xCCB4; &#xD1B5;&#xD589;&#xC138; &#xAC19;&#xC774; (TLR)&#xC758; ectodomain&#xB294; &#xB192;&#xC740; &#xB2F9;&#xD654; &#xC548;&#xCABD; &#xC624;&#xBAA9;&#xD55C; &#xD45C;&#xBA74;&#xC5D0; &#xC788;&#xB294; &#xC5EC;&#xB7EC; gylcosylation N &#xC5F0;&#xACB0; &#xC0AC;&#xC774;&#xD2B8;&#xC640;. TLR &#xC218;&#xC6A9; &#xCCB4; &#xD65C;&#xC131;&#xD654;&#xC5D0; &#xC774;&#xB7EC;&#xD55C; &#xC124;&#xD0D5; N glycans&#xC758; &#xC815;&#xD655;&#xD55C; &#xC5ED;&#xD560;&#xC744; &#xC54C; &#xC218; &#xC788;&#xB2E4;. &#xCD5C;&#xADFC;&#xC5D0;, &#xC6B0;&#xB9AC; Neu1 sialidase &#xBC0F; &#xD558;&#xC9C0; Neu2, TLR-2 &#xB2E8;&#xC9C0; a-3&#xC640;-4 &#xD615;&#xD0DC;, &#xC21C;&#xC9C4;&#xD55C; &#xACE0; &#xD65C;&#xC131;&#xD654; &#xB41C; &#xB300; &#xC2DD; &#xC138;&#xD3EC;&#xC758; &#xC138;&#xD3EC; &#xD45C;&#xBA74; &#xB9C9;-3&#xACFC;-4 &#xC218;&#xC6A9; &#xCCB4; &#xC138;&#xD3EC; (Glycoconj J DOI 10.1007/s10719-009-9239-8) &#xAC83;&#xC73C;&#xB85C; &#xB098;&#xD0C0;&#xB0AC;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4;. Neu1&#xC758; &#xD65C;&#xC131;&#xD654;&#xB294; &#xAC01;&#xAC01; &#xADF8;&#xB4E4;&#xC758; &#xC218;&#xC6A9; &#xCCB4;&#xC5D0; &#xBC14;&#xC778;&#xB529; TLR ligands&#xC5D0; &#xC758;&#xD574; &#xC720;&#xBC1C; &#xB429;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xC790;, &#xC6B0;&#xB9AC;&#xAC00; &#xBCF4;&#xC5EC; &#xADF8; &#xC120;&#xCC98;&#xB9AC; lipopolysaccharide (LPS)-&#xC720;&#xB3C4; MyD88/TLR4 &#xBCF5;&#xC7A1; &#xD55C; &#xD615;&#xC131; &#xBC0F; &#xD6C4;&#xC18D; NFkappaB &#xD65C;&#xC131;&#xD654; &#xB77C;&#xC774;&#xBE0C; &#xAE30;&#xBCF8; macrophage LPS &#xC790;&#xADF9; &#xC138;&#xD3EC;, &#xB300; &#xC2DD; &#xC138;&#xD3EC;&#xC640; &#xC218;&#xC9C0;&#xC0C1; &#xC138;&#xD3EC; &#xB77C;&#xC778; &#xC544;&#xB2C8;&#xC9C0;&#xB9CC; &#xAE30;&#xBCF8; Neu1 &#xBD88;&#xCDA9;&#xBD84; &#xD55C; macrophage &#xC140; &#xC5F0;&#xACB0; &#xB41C; Neu1 &#xD65C;&#xB3D9;&#xC5D0; &#xC758;&#xD574; tlr4&#xC758; &#xBCA0;&#xD0C0;-galactoside&#xC5D0; &#xC5F0;&#xACB0; &#xD558;&#xB294; &#xC54C;&#xD30C;-2, 3-sialyl &#xC794;&#xB958;&#xBB3C;&#xC758; &#xC81C;&#xAC70;&#xC5D0; &#xB530;&#xB77C; &#xB2EC;&#xB77C; &#xC9D1;&#xB2C8;&#xB2E4;. Exogenous &#xC54C;&#xD30C;-2, 3 sialyl &#xD2B9;&#xC815; &#xC751;&#xC9D1; (Streptoccocus &#xADE0;)&#xC640; &#xC57C;&#xC0DD;-&#xD0C0;&#xC785; T. cruzi &#xD2B8;&#xB79C;&#xC2A4;-sialidase (TS) &#xD558;&#xC9C0;&#xB9CC; catalytically &#xBE44;&#xD65C;&#xC131; &#xB3CC;&#xC5F0;&#xBCC0;&#xC774; TSAsp98 Glu TLR4 dimerization MyD88/TLR4 &#xBCF5;&#xC7A1; &#xD55C; &#xD615;&#xC131;&#xACFC; &#xADF8; &#xC751;&#xB2F5; LPS&#xC640; &#xD568;&#xAED8; &#xBCFC; &#xC218;&#xC640; &#xBE44;&#xC2B7;&#xD55C; NFkappaB &#xD65C;&#xC131;&#xD654;&#xB97C; &#xCD09;&#xC9C4; &#xD558;&#xAE30; &#xC704;&#xD558;&#xC5EC; &#xC911;&#xC7AC;. &#xC774;&#xB7EC;&#xD55C; &#xB3D9;&#xC77C;&#xD55C; TLR &#xB9AC;&#xAC04;&#xB4DC; &#xC720;&#xB3C4; NFkappaB &#xC751;&#xB2F5; TLR &#xACB0;&#xD54D; HEK293 &#xC138;&#xD3EC;&#xC5D0;&#xC11C; &#xAD00;&#xCC30; &#xD558;&#xC9C0; &#xD558;&#xC9C0;&#xB9CC; &#xC548;&#xC815;&#xC801; TLR4/m d 2&#xC640; &#xD398; HEK293 &#xC138;&#xD3EC;&#xC5D0;&#xC11C; &#xB2E4;&#xC2DC; &#xACE0; &#xC54C;&#xD30C;-2, 6-sialyl &#xD2B9;&#xC815; Sambucus nigra lectin (SNA) &#xC544;&#xB2C8;&#xB77C; &#xC54C;&#xD30C;-2, 3-sialyl &#xD2B9;&#xC815; Maackia &#xB098;&#xBB34; (MAL-2) lectin, &#xC54C;&#xD30C;-2, 3-sialyl &#xD2B9;&#xC815; galectin-1 &#xBC0F; &#xC751;&#xC9D1; &#xC5B5;&#xC81C;&#xC81C; &#xD0C0; &#xBBF8; &#xD50C; &#xB8E8;&#xC5D0; &#xC758;&#xD574; &#xD06C;&#xAC8C; &#xC800;&#xD574; &#xB429;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xD568;&#xAED8; &#xCC0D;&#xC740; &#xACB0;&#xACFC; TLR &#xC218;&#xC6A9; &#xCCB4;&#xC758; &#xC54C;&#xD30C;-2, 3-sialyl &#xC794;&#xB958;&#xBB3C;&#xC758; Neu1 desialylation &#xC218;&#xC6A9; &#xCCB4; &#xD611;&#xD68C; TLR &#xD65C;&#xC131;&#xD654; &#xBC0F; &#xC140;&#xB8F0;&#xB7EC; &#xC2E0;&#xD638;&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xC785;&#xCCB4;&#xC801; hinderance &#xC81C;&#xAC70;&#xC5D0; &#xC0AC;&#xC6A9; &#xD558;&#xBA74; &#xAC83;&#xC774; &#xC88B;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4;.

&#xC218;&#xC6A9; &#xCCB4; &#xD1B5;&#xD589;&#xC138; &#xAC19;&#xC774; 4&#xC758; sialyl &#xC54C;&#xD30C; 2, 3 &#xC5F0;&#xACB0; &#xBCA0;&#xD0C0; galactosyl &#xC794;&#xB958;&#xBB3C;&#xC758; Neu1 desialylation &#xC218;&#xC6A9; &#xCCB4; &#xD65C;&#xC131;&#xD654; &#xBC0F; &#xC140;&#xB8F0;&#xB7EC; &#xC2E0;&#xD638;&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xD544;&#xC218;&#xC801; &#xC774;&#xB2E4;.

El ectodominio de receptores de tipo Toll (TLR) es altamente glicosilada con varios sitios de N-gylcosylation de destino ubicados en la superficie interna c&#xF3;ncava. El papel exacto de estos de az&#xFA;car en la N-glicanos en la activaci&#xF3;n de los receptores TLR es desconocida. Recientemente, hemos demostrado que Neu1 sialidasa y no Neu2, formas -3 y -4 un complejo con TLR-2, -3 y -4 receptores en la membrana de la superficie celular de c&#xE9;lulas de macr&#xF3;fagos no tratados previamente y activado (Glycoconj J DOI 10.1007/s10719 -009-9239-8). La activaci&#xF3;n de Neu1 es inducida por ligandos TLR de uni&#xF3;n a sus respectivos receptores. Aqu&#xED;, se muestra que lipopolisac&#xE1;rido endotoxina (LPS)-inducida MyD88/TLR4 formaci&#xF3;n de complejos y la activaci&#xF3;n NFkappaB posterior depende de la eliminaci&#xF3;n de alfa-2 ,3-sialil residuo ligado a la beta-galact&#xF3;sido de TLR4 por la actividad Neu1 asociado con LPS- estimulado en vivo los macr&#xF3;fagos primarios, los macr&#xF3;fagos y las l&#xED;neas de c&#xE9;lulas dendr&#xED;ticas, pero no con c&#xE9;lulas primarias de los macr&#xF3;fagos deficientes en Neu1. Ex&#xF3;geno alfa-2, 3 sialil espec&#xED;fica neuraminidasa (Streptoccocus pneumoniae) y de tipo salvaje T. cruzi trans-sialidasa (TS), pero no la catal&#xED;ticamente inactiva mutante TSAsp98-Glu mediata TLR4 dimerizaci&#xF3;n para facilitar la formaci&#xF3;n de complejos y MyD88/TLR4 activaci&#xF3;n NFkappaB similar a dichas respuestas visto con LPS. Estas mismas TLR inducida por ligandos respuestas NFkappaB no se observan en las c&#xE9;lulas HEK293 TLR deficientes, pero se restableci&#xF3; en las c&#xE9;lulas HEK293 transfectadas establemente con TLR4/MD2, y se inhibi&#xF3; por la alfa-2 ,3-sialil espec&#xED;fica amurensis Maackia (MAL- 2) lectina, alfa-2 ,3-sialil inhibidor espec&#xED;fico galectina-1 y neuraminidasa Tamiflu pero no por la alfa-2 ,6-sialil espec&#xED;fico lectina Sambucus nigra (SCN). En conjunto, los hallazgos sugieren que Neu1 desialilaci&#xF3;n de la alfa-2 ,3-sialil los residuos de los receptores TLR permite que en la eliminaci&#xF3;n de un impedimento est&#xE9;rico a la asociaci&#xF3;n de receptores para la activaci&#xF3;n de TLR y la se&#xF1;alizaci&#xF3;n celular.

Neu1 desialilaci&#xF3;n de sialil Alfa-2 ,3-beta-vinculados a los residuos de galactosilo Toll-like receptor 4 es esencial para la activaci&#xF3;n del receptor y la se&#xF1;alizaci&#xF3;n celular

&#x5B9E;&#x9A8C;&#x6027;&#x81EA;&#x8EAB;&#x514D;&#x75AB;&#x6027;&#x8111;&#x810A;&#x9AD3;&#x708E; (EAE) &#x662F;&#x556E;&#x9F7F;&#x52A8;&#x7269;&#x6A21;&#x578B;&#x7684;&#x514D;&#x75AB;&#x4F50;&#x5242;&#x7684;&#x9AD3;&#x9798; Ag &#x5728;&#x52A8;&#x7269;&#x4E2D;&#x6267;&#x884C;&#x7684;&#x591A;&#x53D1;&#x6027;&#x786C;&#x5316;&#x75C7;&#x3002;SJL/J &#x81EA;&#x8EAB;&#x514D;&#x75AB;&#x6027;&#x6613;&#x53D1;&#x5E94;&#x53D8;&#x7684;&#x9F20;&#x6807;&#x5DF2;&#x7528;&#x4E8E;&#x6A21;&#x578B;&#x590D;&#x53D1;&#x7F13;&#x89E3;&#x578B;&#x591A;&#x53D1;&#x6027;&#x786C;&#x5316;&#x75C7;&#x3002;&#x7136;&#x800C;&#xFF0C;&#x5CF0;&#x503C;&#x5206;&#x6570;&#x3001; &#x5B9A;&#x65F6;&#x53D1;&#x4F5C;&#x548C;&#x53D1;&#x751F;&#x7387;&#x7684;&#x53D8;&#x5316;&#x5F88;&#x5927;&#x95F4;&#x5B9E;&#x9A8C;&#x5BA4;&#xFF0C;&#x8868;&#x73B0;&#x51FA;&#x663E;&#x8457;&#x7684;&#x4E0D;&#x4E00;&#x81F4;&#x8FD9;&#x4E00;&#x75BE;&#x75C5;&#x7684; postacute &#xFF08;&#x590D;&#x53D1;&#xFF09; &#x9636;&#x6BB5;&#x89C2;&#x5BDF;&#x5230;&#x3002;&#x6211;&#x4EEC;&#x7684;&#x7279;&#x70B9;&#x8868;&#x73B0;&#x51FA;&#x6DF1;&#x523B;&#x7684;&#x4E0D;&#x540C;&#xFF0C;EAE &#x75BE;&#x75C5;&#x53C2;&#x6570;&#x7684; SJL/J &#x5C0F;&#x9F20;&#x7684;&#x4E24;&#x4E2A; substrains&#x3002;&#x7B2C; SJL/J substrain EAE &#x8BF1;&#x5BFC;&#x5BFC;&#x81F4;&#x5728;&#x8BB8;&#x591A;&#x60C5;&#x51B5;&#x4E0B;&#x7531;&#x6FC0;&#x8FDB; B &#x7EC6;&#x80DE;&#x53CD;&#x5E94;&#x7684;&#x7ED9;&#x94F6;&#x548C;&#x5185;&#x6E90;&#x6027; CNS Ags &#x7684;&#x6162;&#x6027; EAE&#x3002;&#x76F8;&#x6BD4;&#x4E4B;&#x4E0B;&#xFF0C;&#x5176;&#x4ED6; SJL/J substrain &#x5C55;&#x51FA;&#x590D;&#x53D1;&#x7F13;&#x89E3;&#x578B;&#x7684; EAE &#x4F34;&#x63D0;&#x5347;&#x4E00;&#x4E9B;&#x7EC6;&#x80DE;&#x56E0;&#x5B50;&#x751F;&#x4EA7; CD4(+) T &#x7EC6;&#x80DE;&#x5728;&#x4E2D;&#x67A2;&#x795E;&#x7ECF;&#x7CFB;&#x7EDF;&#x4E2D;&#x7684;&#x7A97;&#x4F53;&#x3002;&#x6211;&#x4EEC;&#x5229;&#x7528;&#x8FD9;&#x4E9B; interstrain &#x7684;&#x5DEE;&#x5F02;&#xFF0C;&#x5BF9;&#x4E24;&#x4E2A;&#x5B8C;&#x5168;&#x4E0D;&#x540C;&#x7684; SJL/J substrains &#x6267;&#x884C;&#x5168;&#x57FA;&#x56E0;&#x7EC4;&#x62F7;&#x8D1D;&#x6570;&#x5206;&#x6790;&#x548C;&#x53D1;&#x73B0;&#x8BB8;&#x591A;&#x57FA;&#x56E0;&#x7528;&#x91CF;&#x5DEE;&#x5F02;&#x3002;&#x5C24;&#x5176;&#x662F;&#xFF0C;&#x4E00;&#x4E2A;&#x708E;&#x75C7;&#x76F8;&#x5173;&#x57FA;&#x56E0;&#xFF0C;Naip1&#xFF0C;&#x662F;&#x51FA;&#x5E2D;&#x5C55;&#x793A;&#x590D;&#x53D1;&#x7F13;&#x89E3;&#x578B; EAE &#x7684; SJL/J substrain &#x5728;&#x8F83;&#x9AD8;&#x7684;&#x62F7;&#x8D1D;&#x6570;&#x3002;&#x8FD9;&#x4E9B;&#x7ED3;&#x679C;&#x8868;&#x660E; substrain &#x7684;&#x5DEE;&#x5F02;&#xFF0C;&#x4E5F;&#x8BB8;&#x5728;&#x57FA;&#x56E0;&#x7EC4;&#x62F7;&#x8D1D;&#x6570;&#x7684;&#x7EA7;&#x522B;&#xFF0C;&#x53EF;&#x4EE5;&#x53D8;&#x5F02;&#x7684;&#x5E10;&#x6237;&#x5728; EAE &#x7684; postacute &#x9636;&#x6BB5;&#xFF0C;&#x53EF;&#x80FD;&#x590D;&#x53D1;&#x6027;&#x75BE;&#x75C5;&#x4E0E;&#x6162;&#x6027;&#x7684;&#x9A71;&#x52A8;&#x5668;&#x3002;

Substrain &#x5DEE;&#x5F02;&#x63ED;&#x793A;&#x65B0;&#x578B;&#x75BE;&#x75C5;&#x4FEE;&#x6539;&#x57FA;&#x56E0;&#x5019;&#x9009;&#x4EBA;&#x6539;&#x53D8;&#x556E;&#x9F7F;&#x52A8;&#x7269;&#x6A21;&#x578B;&#x7684;&#x591A;&#x53D1;&#x6027;&#x786C;&#x5316;&#x7684;&#x4E34;&#x5E8A;&#x8BFE;&#x7A0B;&#x3002;

Experimental autoimmune encephalomyelitis (EAE) is a rodent model of multiple sclerosis that is executed in animals by immunization with myelin Ag in adjuvant. The SJL/J autoimmune-prone strain of mouse has been used to model relapsing-remitting multiple sclerosis. However, significant variations in peak scores, timing of onset, and incidence are observed among laboratories, with the postacute (relapse) phase of the disease exhibiting significant inconsistency. We characterized two substrains of SJL/J mice that exhibit profoundly different EAE disease parameters. Induction of EAE in the first SJL/J substrain resulted in many cases of chronic EAE that was dominated by an aggressive B cell response to the immunizing Ag and to endogenous CNS Ags. In contrast, the other SJL/J substrain exhibited a relapsing-remitting form of EAE concomitant with an elevated number of cytokine-producing CD4(+) T cells in the CNS. Exploiting these interstrain differences, we performed a genome-wide copy number analysis on the two disparate SJL/J substrains and discovered numerous gene-dosage differences. In particular, one inflammation-associated gene, Naip1, was present at a higher copy number in the SJL/J substrain that exhibited relapsing-remitting EAE. These results demonstrate that substrain differences, perhaps at the level of genomic copy number, can account for variability in the postacute phase of EAE and may drive chronic versus relapsing disease.

Substrain differences reveal novel disease-modifying gene candidates that alter the clinical course of a rodent model of multiple sclerosis.

Enc&eacute;phalomy&eacute;lite auto-immune exp&eacute;rimentale (EAE) est un mod&egrave;le de rongeur de la scl&eacute;rose en plaques qui est ex&eacute;cut&eacute; dans animaux par immunisation avec la my&eacute;line Ag en adjuvant. La souche auto-immunes sujettes aux souris SJL/J a &eacute;t&eacute; utilis&eacute;e pour mod&eacute;liser la scl&eacute;rose en plaques r&eacute;mittente. Toutefois, des variations importantes dans les scores de la cr&ecirc;te, le moment d&#39;apparition et de la fr&eacute;quence sont observ&eacute;es entre les laboratoires, avec la phase postacute (rechute) de la maladie pr&eacute;sentant une incoh&eacute;rence significative. Nous avons caract&eacute;ris&eacute; deux sous-souches des souris SJL/J qui pr&eacute;sentent des param&egrave;tres de maladie EAE profond&eacute;ment diff&eacute;rents. Induction de l&#39;EAE dans le premier sous-souche SJL/J a entra&icirc;n&eacute; dans de nombreux cas de l&#39;EAE chronique qui a &eacute;t&eacute; domin&eacute;e par une r&eacute;ponse agressive des lymphocytes B l&#39;immunisant Ag et endog&egrave;nes CNS Ags. En revanche, l&#39;autre sous-souche SJL/J pr&eacute;sentait une forme cyclique de l&#39;EAE concomitante avec un nombre &eacute;lev&eacute; de productrices de cytokines des cellules T CD4 + dans le syst&egrave;me nerveux central. Exploiter ces diff&eacute;rences entre, on a effectu&eacute; une analyse nombre de copie du g&eacute;nome-large sur les deux sous-souches disparates de SJL/J et d&eacute;couvert de nombreuses diff&eacute;rences de dosage des g&egrave;nes. En particulier, un g&egrave;ne li&eacute; &agrave; l&#39;inflammation, Naip1, assista &agrave; un nombre plus &eacute;lev&eacute; de la copie dans le sous-souche SJL/J qui pr&eacute;sentaient l&#39;EAE cyclique. Ces r&eacute;sultats d&eacute;montrent que substrain les diff&eacute;rences, peut-&ecirc;tre au niveau du nombre de copies g&eacute;nomiques, peut le compte de la variabilit&eacute; dans la phase postacute de l&#39;EAE et peut lecteur chronique par rapport &agrave; une forme r&eacute;mittente de la maladie.

Diff&eacute;rences sous-souche r&eacute;v&egrave;lent de nouveaux candidats g&egrave;nes modificateurs qui modifient l&#39;&eacute;volution clinique d&#39;un mod&egrave;le de rongeur de la scl&eacute;rose en plaques.

Experimentellen autoimmunen Enzephalomyelitis (EAE) ist ein Nagetier Modell der multiplen Sklerose, die bei Tieren durch Immunisierung mit Myelin Ag in Adjuvant ausgef&uuml;hrt wird. Die SJL/J Autoimmun-gef&auml;hrdeten Sorte Maus wurde verwendet, schubf&ouml;rmig-remittierender multipler Sklerose zu modellieren. Allerdings sind erhebliche Schwankungen der Spitze Partituren, Timing der Onset und Inzidenz Labors, mit der postacute (Rezidiv) Phase der Krankheit pr&auml;sentiert bedeutende Inkonsistenz beobachtet. Wir zeichnen sich zwei Substrains SJL/J-M&auml;use, die grundlegend EAE-Krankheit-Parameter aufweisen. Induktion von EAE in der ersten SJL/J Substrain f&uuml;hrte in vielen F&auml;llen von chronischen EAE, die durch eine aggressive B-Zell-Antwort der immunisierenden Ag und endogene CNS-Ags dominiert wurde. Dagegen stellte der anderen SJL/J Substrain eine schubf&ouml;rmig-remittierender Form der begleitenden mit einer erh&ouml;hten Anzahl von Zytokin-produzierenden CD4(+) T-Zellen im ZNS EAE. Nutzen diese interstrain Unterschiede, wir eine Anzahl genomweiten Kopie-Analyse auf die zwei unterschiedlichen SJL/J Substrains durchgef&uuml;hrt und entdeckte zahlreiche Unterschiede der Gen-Dosierung. Insbesondere war eine Entz&uuml;ndung-assoziierte gen, Naip1, bei Kopie Zahl in der SJL/J-Substrain, die schubf&ouml;rmig-remittierender EAE ausgestellt. Diese Ergebnisse zeigen, dass substrain Unterschiede, k&ouml;nnen vielleicht auf der Ebene der genomischen Exemplarzahl, Konto f&uuml;r Variabilit&auml;t in der postacute Phase der EAE und kann mit dem chronischen gegen rezidivierende Krankheit.

Substrain Unterschiede zeigen neuartige krankheitsmodifizierende gen Kandidaten, die den Verlauf eines Nagetier-Modells der multiplen Sklerose zu &auml;ndern.

Encefalomielite autoimmune sperimentale (EAE) &egrave; un roditore modello di sclerosi multipla che viene eseguito in animali di immunizzazione con mielina Ag in adiuvante. Il ceppo autoimmune incline SJL/J del mouse &egrave; stato utilizzato per modellare la sclerosi multipla recidivante-remittente. Tuttavia, variazioni significative nei punteggi di picco, tempi di insorgenza e l&#39;incidenza sono osservati tra i laboratori, con la fase postacute (ricaduta) della malattia esibendo significativa incoerenza. Abbiamo caratterizzato due substrains di topi SJL/J che presentano parametri di malattia EAE profondamente diversi. Induzione di EAE nel primo sottoceppo SJL/J ha provocato in molti casi di EAE cronica che &egrave; stata dominata da una risposta aggressiva delle cellule di B per l&#39;Ag immunologico ed endogeno CNS Ags. Al contrario, gli altri sottoceppo SJL/J esposto una forma recidivante-remittente di EAE concomitante con un elevato numero di produzione di cytokine CD4(+) T cellule nel sistema nervoso centrale. Sfruttando queste differenze interstrain, abbiamo effettuato un&#39;analisi numero genome-wide copia le due substrains SJL/J disparati e scoperto numerose differenze di gene-dosaggio. In particolare, un gene associato a infiammazione, Naip1, era presente ad un elevato numero di copia nel sottoceppo SJL/J che esposto recidivante-remittente EAE. Questi risultati dimostrano che substrain le differenze, forse a livello di numero di copie genomiche, possibile conto di variabilit&agrave; nella fase postacute della EAE e pu&ograve; auto cronica versus malattia recidivante.

Differenze sottoceppo rivelano romanzo modificanti la malattia genica candidati che alterano il decorso clinico di un roditore modello di sclerosi multipla.

&#x5B9F;&#x9A13;&#x7684;&#x81EA;&#x5DF1;&#x514D;&#x75AB;&#x6027;&#x8133;&#x810A;&#x9AC4;&#x708E; (EAE) &#x52D5;&#x7269;&#x306E;&#x514D;&#x75AB;&#x30A2;&#x30B8;&#x30E5;&#x30D0;&#x30F3;&#x30C8;&#x306E;&#x30DF;&#x30A8;&#x30EA;&#x30F3; Ag &#x306B;&#x3088;&#x308B;&#x5B9F;&#x884C;&#x3055;&#x308C;&#x308B;&#x591A;&#x767A;&#x6027;&#x786C;&#x5316;&#x75C7;&#x306E;&#x9F67;&#x6B6F;&#x52D5;&#x7269;&#x30E2;&#x30C7;&#x30EB;&#x3067;&#x3059;&#x3002;SJL/J &#x306E;&#x81EA;&#x5DF1;&#x514D;&#x75AB;&#x3092;&#x8D77;&#x3053;&#x3057;&#x3084;&#x3059;&#x3044;&#x3072;&#x305A;&#x307F;&#x30DE;&#x30A6;&#x30B9;&#x306E;&#x518D;&#x767A;&#x5BDB;&#x89E3;&#x591A;&#x767A;&#x6027;&#x786C;&#x5316;&#x75C7;&#x3092;&#x30E2;&#x30C7;&#x30EB;&#x306B;&#x4F7F;&#x7528;&#x3055;&#x308C;&#x3066;&#x3044;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x305F;&#x3060;&#x3057;&#x3001;postacute (&#x518D;&#x767A;) &#x76F8;&#x306E;&#x91CD;&#x8981;&#x306A;&#x77DB;&#x76FE;&#x3092;&#x51FA;&#x5C55;&#x75BE;&#x60A3;&#x3092;&#x6301;&#x3064;&#x7814;&#x7A76;&#x6240;&#x306E;&#x9593;&#x3067;&#x30D4;&#x30FC;&#x30AF;&#x5F97;&#x70B9;&#x3001;&#x767A;&#x75C7;&#x3068;&#x767A;&#x75C7;&#x306E;&#x30BF;&#x30A4;&#x30DF;&#x30F3;&#x30B0;&#x306E;&#x5927;&#x5E45;&#x306A;&#x5909;&#x52D5;&#x304C;&#x89B3;&#x6E2C;&#x3055;&#x308C;&#x3066;&#x3044;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x6211;&#x3005; &#x306F;&#x6DF1;&#x304F;&#x7570;&#x306A;&#x308B; EAE &#x75C5;&#x30D1;&#x30E9;&#x30E1;&#x30FC;&#x30BF;&#x30FC;&#x3092;&#x5C55;&#x793A; SJL/J &#x30DE;&#x30A6;&#x30B9;&#x306E; 2 &#x3064;&#x306E;&#x5404;&#x7279;&#x5FB4;&#x3002;EAE &#x8A98;&#x5C0E;&#x6700;&#x521D; SJL/J &#x4E9C;&#x306B;&#x306F;&#x591A;&#x304F;&#x306E;&#x5834;&#x5408;&#x3001;&#x7A4D;&#x6975;&#x7684;&#x306A; B &#x7D30;&#x80DE;&#x306E;&#x5FDC;&#x7B54;&#x3001;&#x514D;&#x75AB; ag &#x3068;&#x5185;&#x56E0;&#x6027; CNS Ags &#x306B;&#x3088;&#x3063;&#x3066;&#x652F;&#x914D;&#x3055;&#x308C;&#x305F;&#x6162;&#x6027;&#x306E; EAE &#x306E;&#x7D50;&#x679C;&#x3002;&#x5BFE;&#x7167;&#x7684;&#x306B;&#x3001;&#x4ED6;&#x306E; SJL/J &#x4E9C;&#x518D;&#x767A;&#x5BDB;&#x89E3;&#x306E;&#x30D5;&#x30A9;&#x30FC;&#x30E0; EAE &#x4F75;&#x7528;&#x306B;&#x304A;&#x3051;&#x308B;&#x4E2D;&#x67A2;&#x795E;&#x7D4C;&#x7CFB;&#x306E; CD4(+) T &#x7D30;&#x80DE;&#x306E;&#x30B5;&#x30A4;&#x30C8;&#x30AB;&#x30A4;&#x30F3;&#x7523;&#x751F;&#x306E;&#x6570;&#x304C;&#x7BA1;&#x7406;&#x8005;&#x7279;&#x6A29;&#x3067;&#x306E;&#x5C55;&#x793A;&#x3002;&#x3053;&#x308C;&#x3089;&#x306E; interstrain &#x306E;&#x9055;&#x3044;&#x3092;&#x60AA;&#x7528;&#x3001;&#x6211;&#x3005; 2 &#x3064;&#x306E;&#x7570;&#x306A;&#x308B; SJL/J &#x3055;&#x3089;&#x306B;&#x30B2;&#x30CE;&#x30E0; &#x30B3;&#x30D4;&#x30FC;&#x6570;&#x89E3;&#x6790;&#x3092;&#x5B9F;&#x884C;&#x3057;&#x3001;&#x591A;&#x6570;&#x306E;&#x907A;&#x4F1D;&#x5B50;&#x91CF;&#x306E;&#x9055;&#x3044;&#x3092;&#x767A;&#x898B;&#x3057;&#x307E;&#x3057;&#x305F;&#x3002;&#x7279;&#x306B;&#x3001;1 &#x3064;&#x306E;&#x708E;&#x75C7;&#x95A2;&#x9023;&#x907A;&#x4F1D;&#x5B50;&#x3001;Naip1&#x3001;&#x518D;&#x767A;&#x5BDB;&#x89E3; EAE &#x5C55;&#x793A; SJL/J &#x4E9C;&#x3067;&#x9AD8;&#x3044;&#x30B3;&#x30D4;&#x30FC;&#x6570;&#x3067;&#x5B58;&#x5728;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x305F;&#x3002;&#x3053;&#x308C;&#x3089;&#x306E;&#x7D50;&#x679C;&#x306F;&#x3001;&#x9055;&#x3044;&#x3092; substrain&#x3001;&#x304A;&#x305D;&#x3089;&#x304F; EAE &#x306E; postacute &#x306E;&#x6BB5;&#x968E;&#x3067;&#x30A2;&#x30AB;&#x30A6;&#x30F3;&#x30C8;&#x5909;&#x52D5;&#x306E;&#x30B2;&#x30CE;&#x30E0; &#x30B3;&#x30D4;&#x30FC;&#x6570;&#x306E;&#x30EC;&#x30D9;&#x30EB;&#x3067;&#x306F;&#x3001;&#x3059;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x304C;&#x3067;&#x304D;&#x307E;&#x3059;&#x3001;&#x6162;&#x6027;&#x518D;&#x767A;&#x6027;&#x75BE;&#x60A3;&#x5BFE;&#x30C9;&#x30E9;&#x30A4;&#x30D6;&#x53EF;&#x80FD;&#x6027;&#x304C;&#x3042;&#x308A;&#x307E;&#x3059;&#x3092;&#x793A;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x307E;&#x3059;&#x3002;

&#x4E9C;&#x9055;&#x3044;&#x9F67;&#x6B6F;&#x52D5;&#x7269;&#x30E2;&#x30C7;&#x30EB;&#x591A;&#x767A;&#x6027;&#x786C;&#x5316;&#x75C7;&#x306E;&#x81E8;&#x5E8A;&#x7D4C;&#x904E;&#x3092;&#x5909;&#x66F4;&#x3059;&#x308B;&#x65B0;&#x898F;&#x75BE;&#x60A3;&#x4FEE;&#x98FE;&#x5019;&#x88DC;&#x907A;&#x4F1D;&#x5B50;&#x3092;&#x660E;&#x3089;&#x304B;&#x306B;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;

&#xC2E4;&#xD5D8; &#xC790;&#xAC00; &#xBA74;&#xC5ED; encephalomyelitis (EAE) &#xBCF4;&#xC870; &#xC81C;&#xC5D0; &#xC788;&#xB294; myelin Ag&#xC640; &#xC608;&#xBC29; &#xC811;&#xC885;&#xC5D0; &#xC758;&#xD574; &#xB3D9;&#xBB3C;&#xC5D0;&#xC11C; &#xC2E4;&#xD589; &#xB418;&#xB294; &#xB2E4;&#xC911; &#xACBD;&#xD654; &#xC99D;&#xC758; &#xC124;&#xCE58;&#xB958; &#xBAA8;&#xB378;&#xC785;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xB3CC;&#xC544;&#xAC00;&#xB294; &#xC0AC; &#xB2E4; &#xBC1C;&#xC131; &#xACBD;&#xD654; &#xC99D; &#xBAA8;&#xB378; &#xB9C8;&#xC6B0;&#xC2A4;&#xC758; SJL/J &#xBA74;&#xC5ED; &#xACBD;&#xD5A5;&#xC774; &#xBCC0;&#xD615; &#xC0AC;&#xC6A9; &#xB418;&#xC5C8;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xADF8;&#xB7EC;&#xB098; &#xD53C;&#xD06C; &#xC810;&#xC218;, &#xBC1C;&#xBCD1; &#xD558; &#xACE0; &#xBC1C;&#xBCD1; &#xB960;&#xC758; &#xD0C0;&#xC774;&#xBC0D;&#xC5D0; &#xC0C1;&#xB2F9;&#xD55C; &#xBCC0;&#xD654;&#xAC00; &#xC0C1;&#xB2F9;&#xD55C; &#xBD88;&#xC77C;&#xCE58;&#xB97C; &#xC804;&#xC2DC; &#xD558;&#xB294; &#xC9C8;&#xBCD1;&#xC758; postacute (&#xC7AC;&#xBC1C;) &#xB2E8;&#xACC4;&#xC640; &#xC2E4;&#xD5D8;&#xC2E4; &#xC911;&#xC5D0;&#xC11C; &#xAD00;&#xCC30; &#xB41C;&#xB2E4;. &#xC6B0;&#xB9AC;&#xAC00; &#xC9C4;&#xC2EC;&#xC73C; &#xB2E4;&#xB978; EAE &#xC9C8;&#xBCD1; &#xB9E4;&#xAC1C; &#xBCC0;&#xC218; &#xC804;&#xC2DC; SJL/J &#xC950;&#xC758; 2 &#xAC1C;&#xC758; substrains&#xC774; &#xD2B9;&#xC9D5;&#xC785;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xCCAB; &#xBC88;&#xC9F8; SJL/J substrain&#xC5D0;&#xC11C; EAE&#xC758; &#xC720;&#xB3C4; immunizing Ag&#xC640; &#xC0DD; CNS Ags &#xC801;&#xADF9;&#xC801;&#xC778; B &#xC138;&#xD3EC; &#xBC18;&#xC751;&#xC5D0; &#xC758;&#xD574; &#xC9C0;&#xBC30; &#xB418;&#xC5C8;&#xB2E4; &#xB9CC;&#xC131; EAE&#xC758; &#xB9CE;&#xC740; &#xACBD;&#xC6B0; &#xADC0;&#xCC29;&#xB418; &#xC5C8; &#xB2E4;. &#xBC18;&#xBA74;, &#xB2E4;&#xB978; SJL/J substrain &#xB3CC;&#xC544;&#xAC00;&#xB294; &#xC0AC; EAE CNS&#xC5D0; CD4(+) T &#xC138;&#xD3EC; cytokine &#xC0DD;&#xC0B0;&#xC758; &#xB192;&#xC740; &#xC22B;&#xC790;&#xC640; &#xD568;&#xAED8; &#xC218; &#xBC18;&#xD558;&#xB294; &#xD615;&#xD0DC;&#xC758; &#xC804;&#xC2DC;. Interstrain &#xC774;&#xB7EC;&#xD55C; &#xCC28;&#xC774; &#xC774;&#xC6A9;, &#xC6B0;&#xB9AC; &#xB450; &#xAC1C;&#xC758; &#xC11C;&#xB85C; &#xB2E4;&#xB978; SJL/J substrains&#xC5D0; &#xAC8C;&#xB188; &#xC804;&#xCCB4; &#xBCF5;&#xC0AC;&#xBCF8; &#xBC88;&#xD638; &#xBD84;&#xC11D;&#xC744; &#xC218;&#xD589; &#xD558; &#xACE0; &#xC218;&#xB9CE;&#xC740; &#xC720;&#xC804;&#xC790; &#xBCF5;&#xC6A9;&#xB7C9; &#xCC28;&#xC774; &#xBC1C;&#xACAC;. &#xD2B9;&#xD788;, &#xD558;&#xB098;&#xC758; &#xC5FC;&#xC99D; &#xAD00;&#xB828; &#xC720;&#xC804;&#xC790;, Naip1, EAE &#xB3CC;&#xC544;&#xAC00;&#xB294;-&#xC0AC; &#xC804;&#xC2DC; SJL/J substrain&#xC5D0; &#xB192;&#xC740; &#xBCF5;&#xC0AC;&#xBCF8; &#xC218;&#xC5D0; &#xC81C;&#xC2DC; &#xD588;&#xB2E4;. &#xC774;&#xB7EC;&#xD55C; &#xACB0;&#xACFC; &#xCC28;&#xC774; substrain, &#xC544;&#xB9C8;&#xB3C4; &#xB9E4;&#xC218; &#xAC8C;&#xB188; &#xC218;&#xC900;&#xC5D0;&#xC11C; EAE&#xC758; postacute &#xB2E8;&#xACC4;&#xC5D0;&#xC11C; &#xBCC0;&#xD654;&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xACC4;&#xC815; &#xC218; &#xBC0F; &#xB9CC;&#xC131; &#xC7AC;&#xBC1C; &#xC9C8;&#xD658; &#xB300; &#xB4DC;&#xB77C;&#xC774;&#xBE0C; &#xC218; &#xC788;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4; &#xBCF4;&#xC5EC; &#xC90D;&#xB2C8;&#xB2E4;.

Substrain &#xCC28;&#xC774; &#xC18C;&#xC124; &#xC9C8;&#xBCD1; &#xC218;&#xC815; &#xC720;&#xC804;&#xC790; &#xD6C4;&#xBCF4; &#xB2E4; &#xBC1C;&#xC131; &#xACBD;&#xD654; &#xC99D;&#xC758; &#xC124;&#xCE58;&#xB958; &#xBAA8;&#xB378;&#xC758; &#xC784;&#xC0C1; &#xACFC;&#xC815;&#xC744; &#xBCC0;&#xACBD; &#xD558;&#xB294; &#xACF5;&#xAC1C;.

Encefalomielitis autoinmune experimental (EAE) es un modelo de roedor de la esclerosis m&uacute;ltiple que se ejecuta en animales mediante la vacunaci&oacute;n con mielina Ag en adyuvante. La cepa autoinmune propensas a SJL/J de rat&oacute;n se ha utilizado para modelar la esclerosis m&uacute;ltiple recurrente-remitente. Sin embargo, se observan variaciones significativas en las puntuaciones de pico, tiempo de inicio y la incidencia entre los laboratorios, con la fase de postacute (reca&iacute;da) de la enfermedad que exhibe inconsistencia significativa. Caracterizamos dos substrains de ratones SJL/J que exhiben par&aacute;metros profundamente diferentes de la enfermedad de la EAE. Inducci&oacute;n de EAE en el primer substrain SJL/J result&oacute; en muchos casos de EAE cr&oacute;nica que fue dominada por una respuesta agresiva de c&eacute;lulas B AG inmunizante y end&oacute;geno de CNS de Ags. En cambio, los otro substrain SJL/J exhibi&oacute; una forma recurrente-remitente de EAE concomitante con un elevado n&uacute;mero de c&eacute;lulas T CD4 productoras de citoquinas en el SNC. Explotar estas diferencias interstrain, realizamos un an&aacute;lisis del n&uacute;mero de copia del genoma en las dos substrains SJL/J dispares y descubri&oacute; numerosas diferencias de dosis g&eacute;nica. En particular, un gen de inflamaci&oacute;n asociada, Naip1, estuvo presente en un mayor n&uacute;mero de copia en el substrain SJL/J que exhibi&oacute; recurrente-remitente EAE. Estos resultados demuestran que substrain las diferencias, tal vez a nivel de n&uacute;mero de copias gen&oacute;micas, puede cuenta de variabilidad en la fase postacute de EAE y puede coche cr&oacute;nica versus reca&iacute;da de la enfermedad.

Substrain diferencias revelan a nuevos candidatos genes modificadores de la enfermedad que alteran el curso cl&iacute;nico de un modelo de roedor de la esclerosis m&uacute;ltiple.

Thymoquinone (TQ) &#x6297;&#x708E;&#x6D3B;&#x52A8;&#x5DF2;&#x7ECF;&#x88AB;&#x8BC1;&#x660E;&#x5728;&#x4F53;&#x5916;&#x548C;&#x4F53;&#x5185;&#x7814;&#x7A76;&#x3002;&#x7136;&#x800C;&#xFF0C;TQ &#x7684;&#x786E;&#x5207;&#x673A;&#x5236;&#xFF0C;&#x5728;&#x8FD9;&#x4E9B;&#x6D3B;&#x52A8;&#x4E2D;&#x6297;&#x708E;&#x4F5C;&#x7528;&#x4E0D;&#x662F;&#x5F88;&#x4E86;&#x89E3;&#x7684;&#x3002;&#x4F7F;&#x7528;&#x4E00;&#x79CD;&#x65B0;&#x5F00;&#x53D1;&#x7684;&#x68C0;&#x6D4B;&#x65B9;&#x6CD5;&#x6765;&#x68C0;&#x6D4B;&#x6D3B;&#x5DE8;&#x566C;&#x7EC6;&#x80DE;&#x4E2D;&#x7684;&#x553E;&#x6DB2;&#x9178;&#x9176;&#x6D3B;&#x6027; (Glycoconj J doi: 10.1007/s10719-009-9239-8&#xFF09;&#xFF0C;&#x5728;&#x8FD9;&#x91CC;&#x6211;&#x4EEC;&#x5C55;&#x793A; TQ &#x6D3B; BMC 2 &#x5DE8;&#x566C;&#x7EC6;&#x80DE;&#x4E2D;&#x6709;&#x6CA1;&#x6709;&#x5BF9;&#x5185;&#x6BD2;&#x7D20;&#x8102;&#x591A;&#x7CD6; (LPS) &#x7684;&#x6291;&#x5236;&#x4F5C;&#x7528;&#x5F15;&#x8D77;&#x553E;&#x6DB2;&#x9178;&#x9176;&#x6D3B;&#x6027;&#x3002;&#x76F8;&#x6BD4;&#x4E4B;&#x4E0B;&#xFF0C;&#x7236;&#x9ED1;&#x7C7D;&#x6CB9; (BSO) &#x548C;&#x53E6;&#x4E00;&#x6210;&#x5206;&#x7684;&#x4F1E;&#x82B1;&#x6BB5; BSO (p CY) &#x5B8C;&#x5168;&#x963B;&#x6B62; LPS &#x8BF1;&#x5BFC;&#x553E;&#x6DB2;&#x9178;&#x9176;&#x6D3B;&#x6027;&#x3002;&#x8FD9;&#x4E9B;&#x5316;&#x5408;&#x7269;&#x90FD;&#x4E0D;&#x4F1A;&#x5F71;&#x54CD;&#x7EC6;&#x80DE;&#x6D3B;&#x6027;&#x3002;&#x53E6;&#x4E00;&#x65B9;&#x9762;&#xFF0C;TQ &#x4EE5;&#x5242;&#x91CF;&#x4F9D;&#x8D56;&#x65B9;&#x5F0F;&#x4EE5;&#x53CA;&#x5728;&#x73B0;&#x573A;&#x76F4;&#x6D41;-2.4 &#x6811;&#x7A81;&#x72B6;&#x7EC6;&#x80DE;&#x8BF1;&#x5BFC;&#x6D3B; BMC 2 &#x5DE8;&#x566C;&#x7EC6;&#x80DE;&#x4E2D;&#x6709;&#x529B;&#x7684;&#x553E;&#x6DB2;&#x9178;&#x9176;&#x6D3B;&#x6027;&#xFF0C;&#x952E;&#x5165; sialidosis &#x6210;&#x7EA4;&#x7EF4;&#x7EC6;&#x80DE;&#x66FC;&#x6D66;&#x6C49;&#x514B;-TLR4/MD2&#x3001; &#x4EBA;&#x80DA;&#x80CE;&#x80BE; 293&#x3001; SP1 &#x4E73;&#x817A;&#x817A;&#x764C;&#x7EC6;&#x80DE;&#x3001; &#x4EBA;&#x7C7B; WT &#x548C; 1140F01 &#x548C; WG0544&#x3002;&#x8FBE;&#x83F2; &#xFF08;&#x78F7;&#x9178;&#x5965;&#x53F8;&#x4ED6;&#x97E6;) &#x6291;&#x5236;&#x6D3B; BMC 2 &#x7EC6;&#x80DE;&#x4E0E; IC(50) &#x76F8;&#x6BD4;&#xFF0C;IC(50) &#x7684;&#x795E;&#x7ECF;&#x6C28;&#x9178;&#x9176;&#x6291;&#x5236;&#x5242; (2-deoxy-2,3-dehydro-N-acetylneuraminic acid) DANA 19.1 microM 0.0194 microM &#x7684; TQ &#x81F4;&#x553E;&#x6DB2;&#x9178;&#x9176;&#x6D3B;&#x6027;&#x3002;&#x6297;-Neu1-2 &#x548C;-3 &#x6297;&#x4F53;&#x5728;&#x8BF1;&#x5BFC; TQ &#x553E;&#x6DB2;&#x9178;&#x9176;&#x6D3B;&#x6027;&#x65E0;&#x6291;&#x5236;&#x6D3B; BMC-2 &#x548C;&#x4EBA;&#x7C7B; thp-1 &#x5DE8;&#x566C;&#x7EC6;&#x80DE;&#x4F46;&#x6297; Neu4 &#x6297;&#x4F53;&#x5B8C;&#x5168;&#x5757;&#x8FD9;&#x9879;&#x6D3B;&#x52A8;&#x3002;&#x6709;&#x6765;&#x81EA; WT &#x548C; hypomorphic &#x7EC4;&#x7EC7;&#x86CB;&#x767D;&#x9176; A &#x5C0F;&#x9F20;&#x8F85;&#x52A9; Neu1 &#x865A; (NeuI &#x79D1;&#x5A01;&#x7279;&#x7B2C;&#x7EB3;&#x5C14;)&#xFF0C;&#x800C;&#x4E0D;&#x662F;&#x4ECE; Neu4 &#xFF08;Neu4 KO) &#x57FA;&#x56E0;&#x6572;&#x9664;&#x5C0F;&#x9F20;&#x7684; TQ &#x6CBB;&#x7597;&#x6D3B;&#x4E3B;&#x9AA8;&#x9AD3; (BM) &#x5DE8;&#x566C;&#x7EC6;&#x80DE;&#x4E0E;&#x5173;&#x8054;&#x6709;&#x529B;&#x553E;&#x6DB2;&#x9178;&#x9176;&#x6D3B;&#x6027;&#x3002;&#x767E;&#x65E5;&#x54B3;&#x6BD2;&#x7D20; &#xFF08;PTX&#xFF09;&#xFF0C;&#x4E00;&#x79CD;&#x7279;&#x5B9A;&#x7684;&#x6291;&#x5236;&#x5242; Galphai &#x86CB;&#x767D;&#x7684; G &#x86CB;&#x767D;&#x5076;&#x8054;&#x53D7;&#x4F53; &#xFF08;&#x6C14;&#x76F8;&#xFF09; &#x5E7F;&#x6CDB;&#x6291;&#x5236;&#x5242;&#x57FA;&#x8D28;&#x91D1;&#x5C5E;&#x86CB;&#x767D;&#x9176; &#xFF08;MMP&#xFF09; galardin &#x548C;&#x54CC;&#x55EA;&#x5E94;&#x7528;&#x4E8E;&#x6D3B; BMC 2&#x3001; THP-1 &#x548C;&#x4E3B; BM &#x5DE8;&#x566C;&#x7EC6;&#x80DE;&#x5B8C;&#x5168;&#x963B;&#x6B62; TQ &#x81F4;&#x553E;&#x6DB2;&#x9178;&#x9176;&#x6D3B;&#x6027;&#x3002;&#x4E0E; GM1 &#x795E;&#x7ECF;&#x8282;&#x82F7;&#x8102;&#x5177;&#x4F53;&#x970D;&#x4E71;&#x6BD2;&#x7D20;&#x4E9A;&#x57FA; B (CTXB) &#x4EE5;&#x53CA;&#x73AF;&#x78F7;&#x9170;&#x80FA;&#x3001; &#x916A;&#x6C28;&#x9178;&#x6FC0;&#x9176;&#x6291;&#x5236;&#x5242; K252a &#x548C;&#x8303;&#x56F4;&#x5E7F;&#x6CDB;&#x7684;&#x5404;&#x79CD;&#x6C14;&#x76F8;&#x7F13;&#x8680;&#x5242;&#x82CF;&#x62C9;&#x660E;&#x4E0D;&#x9075;&#x5B88;&#x8FD9;&#x4E9B;&#x76F8;&#x540C;&#x7684;&#x6291;&#x5236;&#x4F5C;&#x7528;&#x3002;&#x57FA;&#x8D28;&#x91D1;&#x5C5E;&#x86CB;&#x767D;&#x9176;-9&#x3001; &#x53CD;-&#x57FA;&#x8D28;&#x91D1;&#x5C5E;&#x86CB;&#x767D;&#x9176;-9 &#x7684;&#x6297;&#x4F53;&#x548C;&#x6297; Neu4 &#x6297;&#x4F53;&#x7684;&#x7279;&#x5F02;&#x6027;&#x6291;&#x5236;&#x5242;&#xFF0C;&#x4F46;&#x6CA1;&#x6709;&#x7279;&#x5F02;&#x6027;&#x7684;&#x57FA;&#x8D28;&#x91D1;&#x5C5E;&#x86CB;&#x767D;&#x9176;-3 &#x7684;&#x6291;&#x5236;&#x5242;&#x5B8C;&#x5168;&#x963B;&#x6B62;&#x6D3B; thp-1 &#x7EC6;&#x80DE;&#xFF0C;&#x7EC6;&#x80DE;&#x8868;&#x9762;&#x8868;&#x8FBE; Neu4 &#x548C;&#x57FA;&#x8D28;&#x91D1;&#x5C5E;&#x86CB;&#x767D;&#x9176;-9 &#x7684; TQ &#x81F4;&#x553E;&#x6DB2;&#x9178;&#x9176;&#x6D3B;&#x6027;&#x3002;Neu4 &#x553E;&#x6DB2;&#x9178;&#x9176;&#x6D3B;&#x6027;&#x7684;&#x7EC6;&#x80DE;&#x88C2;&#x89E3; TQ &#x6CBB;&#x7597;&#x6D3B; THP 1 &#x4ECE;&#x7EC6;&#x80DE; desialylates &#x5929;&#x7136;&#x795E;&#x7ECF;&#x8282;&#x82F7;&#x8102;&#x548C;&#x9ECF;&#x86CB;&#x767D;&#x57FA;&#x5E95;&#x3002;&#x9006;&#x8F6C;&#x5F55;-&#x805A;&#x5408;&#x9176;&#x94FE;&#x53CD;&#x5E94;&#x548C;&#x5370;&#x8FF9;&#x5206;&#x6790;&#x63ED;&#x793A;&#x5728;&#x4EBA;&#x7C7B;&#x5355;&#x6838;&#x7EC6;&#x80DE; thp-1 &#x7EC6;&#x80DE;&#xFF0C;Neu4 &#x548C; Neu3 &#x57FA;&#x56E0;&#x8868;&#x8FBE;&#x548C;&#x86CB;&#x767D;&#x8D28;&#x503C;&#x4E4B;&#x95F4;&#x6CA1;&#x6709;&#x5173;&#x8054;&#x6697;&#x793A;&#x7B2C;&#x4E00;&#x6B21;&#x72EC;&#x7ACB;&#x7684; TQ &#x6FC0;&#x6D3B;&#x8FD9;&#x4E9B;&#x4E24;&#x4E2A;&#x54FA;&#x4E73;&#x52A8;&#x7269; sialidases &#x4E0D;&#x540C;&#x8F6C;&#x5F55;&#x673A;&#x5236;&#x3002;&#x6211;&#x4EEC;&#x7684;&#x7814;&#x7A76;&#x7ED3;&#x679C;&#x5EFA;&#x7ACB;&#x524D;&#x6240;&#x672A;&#x6709;&#x7684; Neu4 thymoquinone&#xFF0C;&#x5176;&#x4E2D;&#x6765;&#x81EA;&#x4FDD;&#x5065;&#x54C1;&#x9ED1;&#x5B5C;&#x7136;&#x6CB9;&#x901A;&#x8FC7;&#x7EC6;&#x80DE;&#x8868;&#x9762;&#x7684;&#x553E;&#x6DB2;&#x9178;&#x9176;&#x6FC0;&#x6D3B;&#x3002;&#x957F;&#x65F6;&#x7A0B;&#x589E;&#x5F3A;&#x6C14;&#x76F8;&#x5316;&#x5B66;&#x8FD8;&#x539F;&#x4FE1;&#x53F7;&#x7531; TQ &#x901A;&#x8FC7;&#x819C;&#x9488;&#x5BF9; Galphai &#x4E9A;&#x57FA;&#x86CB;&#x767D;&#x548C;&#x57FA;&#x8D28;&#x91D1;&#x5C5E;&#x86CB;&#x767D;&#x9176; 9 &#x6FC0;&#x6D3B;&#x53EF;&#x80FD;&#x53C2;&#x4E0E;&#x7EC6;&#x80DE;&#x8868;&#x9762; Neu4 &#x553E;&#x6DB2;&#x9178;&#x9176;&#x7684;&#x6FC0;&#x6D3B;&#x8FC7;&#x7A0B;&#x3002;

&#x4ECE;&#x4FDD;&#x5065;&#x54C1;&#x9ED1;&#x5B5C;&#x7136;&#x6CB9; Thymoquinone &#x6FC0;&#x6D3B; Neu4 &#x553E;&#x6DB2;&#x9178;&#x9176;&#x6D3B;&#x7684;&#x5DE8;&#x566C;&#x7EC6;&#x80DE;&#x3001; &#x6811;&#x7A81;&#x72B6;&#xFF0C;&#x548C;&#x6B63;&#x5E38;&#x548C;&#x7B2C;&#x4E00;&#x7C7B;&#x901A;&#x8FC7;&#x6C14;&#x76F8;&#x5316;&#x5B66;&#x8FD8;&#x539F; Galphai &#x86CB;&#x767D;&#x548C;&#x57FA;&#x8D28;&#x91D1;&#x5C5E;&#x86CB;&#x767D;&#x9176;-9 sialidosis &#x4EBA;&#x6210;&#x7EA4;&#x7EF4;&#x7EC6;&#x80DE;&#x3002;

Anti-inflammatory activities of thymoquinone (TQ) have been demonstrated in in vitro and in vivo studies. However, the precise mechanism(s) of TQ in these anti-inflammatory activities is not well understood. Using a newly developed assay to detect sialidase activity in live macrophage cells (Glycoconj J doi: 10.1007/s10719-009-9239-8 ), here we show that TQ has no inhibitory effect on endotoxin lipopolysaccharide (LPS) induced sialidase activity in live BMC-2 macrophage cells. In contrast, the parent black seed oil (BSO) and another constituent of BSO para-cymene (p-CY) completely block LPS induced sialidase activity. All of these compounds had no effect on cell viability. On the other hand, TQ induces a vigorous sialidase activity in live BMC-2 macrophage cells in a dose dependent manner as well in live DC-2.4 dendritic cells, HEK-TLR4/MD2, HEK293, SP1 mammary adenocarcinoma cells, human WT and 1140F01 and WG0544 type I sialidosis fibroblast cells. Tamiflu (oseltamivir phosphate) inhibits TQ-induced sialidase activity in live BMC-2 cells with an IC(50) of 0.0194 microM compared to an IC(50) of 19.1 microM for neuraminidase inhibitor DANA (2-deoxy-2,3-dehydro-N-acetylneuraminic acid). Anti-Neu1, -2 and -3 antibodies have no inhibition of TQ-induced sialidase activity in live BMC-2 and human THP-1 macrophage cells but anti-Neu4 antibodies completely block this activity. There is a vigorous sialidase activity associated with TQ treated live primary bone marrow (BM) macrophage cells derived from WT and hypomorphic cathepsin A mice with a secondary Neu1 deficiency (NeuI KD), but not from Neu4 knockout (Neu4 KO) mice. Pertussis toxin (PTX), a specific inhibitor of Galphai proteins of G-protein coupled receptor (GPCR) and the broad range inhibitors of matrix metalloproteinase (MMP) galardin and piperazine applied to live BMC-2, THP-1 and primary BM macrophage cells completely block TQ-induced sialidase activity. These same inhibitory effects are not observed with the GM1 ganglioside specific cholera toxin subunit B (CTXB) as well as with CTX, tyrosine kinase inhibitor K252a, and the broad range GPCR inhibitor suramin. The specific inhibitor of MMP-9, anti-MMP-9 antibody and anti-Neu4 antibody, but not the specific inhibitor of MMP-3 completely block TQ-induced sialidase activity in live THP-1 cells, which express Neu4 and MMP-9 on the cell surface. Neu4 sialidase activity in cell lysates from TQ-treated live THP-1 cells desialylates natural gangliosides and mucin substrates. RT-PCR and western blot analyses reveal no correlation between mRNA and protein values for Neu3 and Neu4 in human monocytic THP-1 cells, suggesting for the first time a varied post-transcriptional mechanism for these two mammalian sialidases independent of TQ activation. Our findings establish an unprecedented activation of Neu4 sialidase on the cell surface by thymoquinone, which is derived from the nutraceutical black cumin oil. The potentiation of GPCR-signaling by TQ via membrane targeting of Galphai subunit proteins and matrix metalloproteinase-9 activation may be involved in the activation process of Neu4 sialidase on the cell surface.

Thymoquinone from nutraceutical black cumin oil activates Neu4 sialidase in live macrophage, dendritic, and normal and type I sialidosis human fibroblast cells via GPCR Galphai proteins and matrix metalloproteinase-9.

Activit&#xE9;s anti-inflammatoires de thymoquinone (TQ) ont &#xE9;t&#xE9; d&#xE9;montr&#xE9;s in vitro et in vivo. Cependant, le m&#xE9;canisme pr&#xE9;cis (s) de TQ dans ces activit&#xE9;s anti-inflammatoires n&#x26;#39;est pas bien comprise. L&#x26;#39;utilisation d&#x26;#39;un test r&#xE9;cemment mis au point pour d&#xE9;tecter l&#x26;#39;activit&#xE9; sialidase dans les cellules macrophages vivants (Glycoconj J doi: 10.1007/s10719-009-9239-8), ici nous montrons que TQ n&#x26;#39;a pas d&#x26;#39;effet inhibiteur sur la lipopolysaccharide endotoxine (LPS) d&#x26;#39;activit&#xE9; induite par la sialidase en direct BMC -2 cellules macrophages. En revanche, l&#x26;#39;huile de graine noire parent (BSO) et un autre constituant de BSO para-cym&#xE8;ne (p-CY) de bloquer compl&#xE8;tement l&#x26;#39;activit&#xE9; LPS sialidase induite. Tous ces compos&#xE9;s n&#x26;#39;a eu aucun effet sur la viabilit&#xE9; cellulaire. D&#x26;#39;autre part, TQ induit une activit&#xE9; sialidase vigoureuse dans les cellules vivantes macrophages BMC-2 d&#x26;#39;une mani&#xE8;re dose-d&#xE9;pendante aussi bien en direct DC-2.4 des cellules dendritiques, HEK-TLR4/MD2, HEK293, les cellules SP1 ad&#xE9;nocarcinome mammaire humain WT et 1140F01 et les cellules de type I WG0544 fibroblastes sialidose. Tamiflu (phosphate d&#x26;#39;oseltamivir) inhibe l&#x26;#39;activit&#xE9; sialidase TQ induite dans vivantes BMC-2 des cellules avec un circuit int&#xE9;gr&#xE9; (50) de 0,0194 microM par rapport &#xE0; un circuit int&#xE9;gr&#xE9; (50) de 19,1 pour microM inhibiteur de la neuraminidase DANA (2-d&#xE9;soxy-2 ,3-d&#xE9;shydro -N-ac&#xE9;tylneuraminique). Anti-Neu1, -2 et -3 anticorps n&#x26;#39;ont pas l&#x26;#39;inhibition de l&#x26;#39;activit&#xE9; sialidase TQ-induite en direct BMC-2 et les cellules humaines macrophages THP-1, mais l&#x26;#39;anti-Neu4 anticorps bloquer compl&#xE8;tement cette activit&#xE9;. Il s&#x26;#39;agit d&#x26;#39;une activit&#xE9; vigoureuse sialidase associ&#xE9;e &#xE0; TQ trait&#xE9;s en direct la moelle osseuse primaire (BM), les cellules macrophages d&#xE9;riv&#xE9;s de la cathepsine WT et hypomorphic A des souris ayant une d&#xE9;ficience secondaire Neu1 (NeuI KD), mais pas de Neu4 knock-out (KO Neu4) chez la souris. La toxine de pertussis (PTX), un inhibiteur sp&#xE9;cifique de prot&#xE9;ines Galphai de G-r&#xE9;cepteurs coupl&#xE9;s aux prot&#xE9;ines (RCPG) et les inhibiteurs large gamme de m&#xE9;talloprot&#xE9;inases matricielles (MMP) et la pip&#xE9;razine galardin appliqu&#xE9;e &#xE0; vivre BMC-2, THP-1 et des cellules primaires de macrophages BM bloquer compl&#xE8;tement l&#x26;#39;activit&#xE9; sialidase TQ-induite. Ces m&#xEA;mes effets inhibiteurs ne sont pas observ&#xE9;es avec le ganglioside GM1 sp&#xE9;cifique B du chol&#xE9;ra sous-unit&#xE9; toxine (ctxB) ainsi qu&#x26;#39;avec CTX, tyrosine kinase K252a, et l&#x26;#39;inhibiteur de large gamme GPCR suramine. L&#x26;#39;inhibiteur sp&#xE9;cifique de la MMP-9, l&#x26;#39;anti-MMP-9 anticorps et l&#x26;#39;anticorps anti-Neu4, mais pas l&#x26;#39;inhibiteur sp&#xE9;cifique de la MMP-3 compl&#xE8;tement l&#x26;#39;activit&#xE9; de bloc sialidase TQ induite dans vivantes cellules THP-1, qui expriment Neu4 et MMP-9 sur la surface cellulaire. Neu4 activit&#xE9; sialidase dans les lysats cellulaires de TQ-trait&#xE9;s en direct cellules THP-1 desialylates gangliosides naturels et des substrats de mucine. RT-PCR et analyses western blot n&#x26;#39;ont pas r&#xE9;v&#xE9;l&#xE9; de corr&#xE9;lation entre l&#x26;#39;ARNm et de prot&#xE9;ines pour les valeurs Neu3 et Neu4 dans l&#x26;#39;homme monocytaires THP-1 des cellules, sugg&#xE9;rant pour la premi&#xE8;re fois une gamme vari&#xE9;e post-transcriptionnelle m&#xE9;canisme de ces deux mammif&#xE8;res sialidases ind&#xE9;pendants de l&#x26;#39;activation TQ. Nos r&#xE9;sultats &#xE9;tablir une activation pr&#xE9;c&#xE9;dent de la sialidase Neu4 sur la surface de la cellule par thymoquinone, qui est d&#xE9;riv&#xE9; de l&#x26;#39;huile de nigelle nutraceutique noir. La potentialisation de GPCR de signalisation par TQ via la membrane des prot&#xE9;ines sous-unit&#xE9;s Galphai et la m&#xE9;talloprot&#xE9;inase matricielle-9 d&#x26;#39;activation peuvent &#xEA;tre impliqu&#xE9;s dans le processus d&#x26;#39;activation de Neu4 sialidase sur la surface de la cellule.

Thymoquinone partir d&#x26;#39;huile de cumin noir Nutraceutique Active Neu4 sialidase dans des macrophages vivants, dendritiques, et normales et cellules de type I sialidose fibroblastes humains Via GPCR prot&#xE9;ines Galphai et Matrix Metalloproteinase-9

Entz&uuml;ndungshemmende Aktivit&auml;ten der Thymoquinone (TQ) ist in in-vitro und in vivo Studien bewiesen. Die genauen Mechanismen der TQ in diese entz&uuml;ndungshemmenden Aktivit&auml;ten ist jedoch nicht gut verstanden. Mit einer neu entwickelten Assay um Sialidase Aktivit&auml;t in live Makrophagen Zellen zu erreichen (Glycoconj J Doi: 10.1007/s10719-009-9239-8), hier zeigen wir, dass TQ keine hemmende Wirkung auf Endotoxin Lipopolysaccharid (LPS) induzierte Sialidase Aktivit&auml;t in lebenden Zellen der BMC-2-Makrophagen hat. Im Gegensatz dazu blockieren die &uuml;bergeordneten schwarz Kern&ouml;l (BSO) und ein weiterer Bestandteil des BSO Para-Cymol (p-CY) vollst&auml;ndig LPS-induzierte Sialidase Aktivit&auml;t. Alle diese Verbindungen hatten keine Auswirkung auf die Zellviabilit&auml;t. Auf der anderen Seite, TQ induziert eine kr&auml;ftige Sialidase-Aktivit&auml;t in lebenden Zellen der BMC-2-Makrophagen in gewissem Dosis abh&auml;ngige als auch in lebenden DC-2.4 dendritischen Zellen, HEK-TLR4/MD2, HEK293, SP1 Mamma Adenokarzinom Zellen, menschliche WT und 1140F01 und WG0544 Typ I Sialidose L929. Tamiflu (Oseltamivir-Phosphat) hemmt Sialidase TQ-induzierte Aktivit&auml;t in lebenden Zellen, den BMC-2 mit einem IC (50) der 0.0194 MicroM im Vergleich zu einem IC (50) von 19,1 MicroM f&uuml;r Neuraminidasehemmer DANA (2-deoxy-2,3-dehydro-N-acetylneuraminic S&auml;ure). Anti-Neu1,-2 und-3 Antik&ouml;rper haben keine Hemmung der TQ-induzierte Sialidase Aktivit&auml;t in lebenden BMC-2 und menschlichen THP-1 Makrophagen Zellen aber Anti-Neu4 Antik&ouml;rper vollst&auml;ndig blockieren diese Aktivit&auml;t. Es gibt eine kr&auml;ftige Sialidase Aktivit&auml;t im Zusammenhang mit TQ behandelt Leben prim&auml;re (BM) Makrophagen Knochenmarkzellen abgeleitet von WT und hypomorphen Kathepsin A-M&auml;use mit einem sekund&auml;ren Neu1-Mangel (NeuI KD), aber nicht von Neu4 (Neu4 KO) k.o.-M&auml;use. Pertussis-Toxin (PTX), ein spezifischer Hemmer von Galphai Proteinen von G-Protein-gekoppelte Rezeptor (GPCR) und die breite Palette-Inhibitoren von Matrix-Metalloproteasen (MMP)-Galardin und Piperazin auf Leben BMC-2 angewendet, THP-1 und prim&auml;re BM Makrophagen Zellen vollst&auml;ndig blockieren Sialidase TQ-induzierte Aktivit&auml;t. Diese gleichen hemmenden Effekte sind nicht mit der GM1 Ganglioside spezifischen Cholera Toxin Untereinheit B (CTXB) sowie mit CTX, Tyrosinkinase-Hemmer der K252a und die breite Palette GPCR Inhibitor Suramin beobachtet. Die spezifischen Inhibitor von MMP-9, Anti-MMP-9-Antik&ouml;rper und Anti-Neu4 Antik&ouml;rper, aber nicht die spezifischen Inhibitor der MMP-3 komplett blockieren Sialidase TQ-induzierte Aktivit&auml;t in lebenden Zellen der THP-1, welche Neu4 und MMP-9 auf der Zelloberfl&auml;che. Neu4 Sialidase Aktivit&auml;t in Zelllysate von TQ-behandelten Leben THP-1 Zellen Desialylates nat&uuml;rliche Ganglioside und Mucin-Substrate. RT-PCR und western-Blot-Analysen zeigen keine Korrelation zwischen mRNA und Protein-Werte f&uuml;r Neu3 und Neu4 in humanen monozyt&auml;ren THP-1-Zellen, schl&auml;gt zum ersten Mal einen abwechslungsreichen Posttranskriptionale Mechanismus f&uuml;r diese zwei S&auml;ugetier-Sialidases unabh&auml;ngig von TQ-Aktivierung. Unsere Sachaufkl&auml;rung eine beispiellose Aktivierung des Neu4 Sialidase auf der Zelloberfl&auml;che von Thymoquinone, die von den Nutraceutical Schwarzk&uuml;mmel&ouml;l abgeleitet ist. Die Potenzierung von GPCR-Signalisierung von TQ &uuml;ber die Membran auf der Galphai-Untereinheit Proteine und Matrix Metalloprotease-9-Aktivierung kann bei der Aktivierung von Neu4 Sialidase auf der Zelloberfl&auml;che hinzugezogen werden.

Thymoquinone von Nutraceutical Schwarzk&uuml;mmel&ouml;l Neu4 Sialidase im Leben Makrophagen, dendritischen und normale aktiviert und Typ I Sialidose menschlichen L929 via GPCR Galphai Proteine und Matrix-Metalloproteasen-9.

Attivit&agrave; antinfiammatoria di thymoquinone (TQ) sono state dimostrate in studi in vitro e in vivo. Tuttavia, i meccanismi precisi comprendono di TQ in queste attivit&agrave; anti-infiammatorie non sono ben compreso. Utilizzando un dosaggio di recente sviluppato per rilevare attivit&agrave; sialidasi nel vivo dei macrofagi cellule (J Glycoconj doi: 10.1007/s10719-009-9239-8), qui vi mostriamo che TQ non ha alcuna attivit&agrave; sialidasi effetto inibitorio su lipopolisaccaride (LPS) di endotossina indotta in cellule vive di macrofago BMC-2. Al contrario, l&#39;olio di seme nero padre (BSO) e un altro costituente della BSO para-cimene (p-CY) bloccare completamente attivit&agrave; sialidasi indotta da LPS. Tutti questi composti ha avuto alcun effetto sulla vitalit&agrave; delle cellule. D&#39;altra parte, TQ induce un&#39;attivit&agrave; vigorosa sialidasi in cellule vive di macrofago BMC-2 in modo dose dipendente pure in diretta DC-2.4 le cellule dendritiche, HEK-TLR4/MD2, HEK293, cellule di adenocarcinoma mammario SP1, WT umano e 1140F01 e WG0544 di tipo sialidosi cellule di fibroblasti. Tamiflu (oseltamivir fosfato) inibisce l&#39;attivit&agrave; della sialidasi TQ-indotta in cellule vive di BMC-2 con un IC(50) di microM 0.0194 rispetto a un IC(50) di 19,1 microM per inibitore della neuraminidasi DANA (acido 2-deoxy-2,3-dehydro-N-acetylneuraminic). Anti-Neu1,-2 e -3 anticorpi non hanno inibizione dell&#39;attivit&agrave; sialidasi TQ-indotta in BMC-2 e umane THP-1 macrofagi cellule vive ma anticorpi anti-Neu4 completamente isolato questa attivit&agrave;. C&#39;&egrave; un&#39;attivit&agrave; vigorosa sialidasi associata TQ trattati dal vivo midollo osseo primario (BM) macrofago cellule derivate da topi catepsina A WT e hypomorphic con un deficit secondario di Neu1 (NeuI KD), ma non da topi knockout (KO Neu4) Neu4. Tossina pertosse (PTX), un inibitore specifico delle proteine Galphai della G-proteina coupled receptor (GPCR) e gli inibitori della vasta gamma di matrix metalloproteinase (MMP) galardin e piperazina applicato alla diretta BMC-2, THP-1 e le cellule primarie del macrofago BM completamente bloccano attivit&agrave; sialidasi TQ-indotta. Questi stessi effetti inibitori non vengono osservati con la subunit&agrave; del tossina di colera specifici dei gangliosidi GM1 B (CTXB), nonch&eacute; con CTX, inibitore di tirosin chinasi K252a e la vasta gamma GPCR inibitore suramina. L&#39;inibitore specifico dell&#39;anticorpo dell&#39;anticorpo e anti-Neu4 MMP-9, anti-MMP-9, ma non specifico inibitore della MMP-3 blocca completamente attivit&agrave; sialidasi TQ-indotta in cellule THP-1 vive, che esprimono Neu4 e MMP-9 sulla superficie della cellula. Neu4 sialidasi attivit&agrave; nei lisati cellulari da TQ-trattati dal vivo THP-1 cellule desialylates naturale gangliosidi e substrati di mucina. RT-PCR e western blot analisi non rivelano alcuna correlazione tra i valori di mRNA e proteine per Neu3 e Neu4 nelle cellule umane THP-1 monocitica, suggerendo per la prima volta un meccanismo di espresione vario per questi due sialidases dei mammiferi indipendente di attivazione TQ. I nostri risultati stabiliscono un&#39;attivazione senza precedenti della sialidasi Neu4 sulla superficie delle cellule di thymoquinone, che &egrave; derivato dall&#39;olio di cumino nero nutraceutico. Il potenziamento di GPCR-segnalazione da TQ tramite membrana targeting di attivazione Galphai subunit&agrave; proteine e matrix metalloproteinase-9 possa essere coinvolti nel processo di attivazione della sialidasi Neu4 sulla superficie delle cellule.

Thymoquinone dall&#39;olio di cumino nero nutraceutico attiva sialidasi Neu4 nel vivo dei macrofagi, dendritiche e normali e di tipo cellule di fibroblasti umani sialidosi via GPCR Galphai proteine e matrix metalloproteinase-9.

thymoquinone&#x306E;&#x6297;&#x708E;&#x75C7;&#x6D3B;&#x6027;&#x306F;&#x3001;&#xFF08;TQ&#xFF09;&#x3001;in vitro&#x304A;&#x3088;&#x3073;in vivo&#x8A66;&#x9A13;&#x3067;&#x5B9F;&#x8A3C;&#x3055;&#x308C;&#x3066;&#x3044;&#x308B;&#x3002;&#x3057;&#x304B;&#x3057;&#x3001;&#x3053;&#x308C;&#x3089;&#x306E;&#x6297;&#x708E;&#x75C7;&#x6D3B;&#x6027;&#x306E;TQ&#x306E;&#x6B63;&#x78BA;&#x306A;&#x30E1;&#x30AB;&#x30CB;&#x30BA;&#x30E0;&#xFF08;s&#xFF09;&#x306F;&#x5341;&#x5206;&#x306B;&#x7406;&#x89E3;&#x3055;&#x308C;&#x3066;&#x3044;&#x306A;&#x3044;&#x3002;&#x30E9;&#x30A4;&#x30D6;&#x30DE;&#x30AF;&#x30ED;&#x30D5;&#x30A1;&#x30FC;&#x30B8;&#x7D30;&#x80DE;&#xFF08;Glycoconj J DOI&#xFF1A;10.1007/s10719-009-9239-8&#xFF09;&#x306E;&#x30B7;&#x30A2;&#x30EA;&#x30C0;&#x30FC;&#x30BC;&#x6D3B;&#x6027;&#x3092;&#x691C;&#x51FA;&#x3059;&#x308B;&#x305F;&#x3081;&#x306B;&#x65B0;&#x3057;&#x304F;&#x958B;&#x767A;&#x3055;&#x308C;&#x305F;&#x30A2;&#x30C3;&#x30BB;&#x30A4;&#x3092;&#x4F7F;&#x7528;&#x3057;&#x3066;&#x3001;&#x3053;&#x3053;&#x3067;&#x306F;TQ&#x30E9;&#x30A4;&#x30D6;BMC&#x306E;&#x30A8;&#x30F3;&#x30C9;&#x30C8;&#x30AD;&#x30B7;&#x30F3;&#x30EA;&#x30DD;&#x30DD;&#x30EA;&#x30B5;&#x30C3;&#x30AB;&#x30E9;&#x30A4;&#x30C9;&#xFF08;LPS&#xFF09;&#x8A98;&#x5C0E;&#x30B7;&#x30A2;&#x30EA;&#x30C0;&#x30FC;&#x30BC;&#x6D3B;&#x6027;&#x306B;&#x5BFE;&#x3057;&#x3066;&#x6291;&#x5236;&#x52B9;&#x679C;&#x3092;&#x6301;&#x3063;&#x3066;&#x3044;&#x306A;&#x3044;&#x3053;&#x3068;&#x3092;&#x793A;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x308B;-2&#x30DE;&#x30AF;&#x30ED;&#x30D5;&#x30A1;&#x30FC;&#x30B8;&#x7D30;&#x80DE;&#x3002;&#x5BFE;&#x7167;&#x7684;&#x306B;&#x3001;&#x89AA;&#x30D6;&#x30E9;&#x30C3;&#x30AF;&#x30B7;&#x30FC;&#x30C9;&#x30AA;&#x30A4;&#x30EB;&#xFF08;BSO&#xFF09;&#x3068;BSO&#x30D1;&#x30E9; 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Galphai&#x30B5;&#x30D6;&#x30E6;&#x30CB;&#x30C3;&#x30C8;&#x30BF;&#x30F3;&#x30D1;&#x30AF;&#x8CEA;&#x3068;&#x30DE;&#x30C8;&#x30EA;&#x30C3;&#x30AF;&#x30B9;&#x30E1;&#x30BF;&#x30ED;&#x30D7;&#x30ED;&#x30C6;&#x30A4;&#x30CA;&#x30FC;&#x30BC;-9&#x306E;&#x6D3B;&#x6027;&#x5316;&#x3092;&#x6A19;&#x7684;&#x819C;&#x3092;&#x4ECB;&#x3057;&#x3066;TQ&#x306B;&#x3088;&#x3063;&#x3066;GPCR&#x30B7;&#x30B0;&#x30CA;&#x30EA;&#x30F3;&#x30B0;&#x306E;&#x5897;&#x5F37;&#x306F;&#x3001;&#x7D30;&#x80DE;&#x8868;&#x9762;&#x4E0A;&#x306E;Neu4&#x30B7;&#x30A2;&#x30EA;&#x30C0;&#x30FC;&#x30BC;&#x306E;&#x6D3B;&#x6027;&#x5316;&#x30D7;&#x30ED;&#x30BB;&#x30B9;&#x306B;&#x95A2;&#x4E0E;&#x3059;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x304C;&#x3067;&#x304D;&#x307E;&#x3059;&#x3002;

&#x6804;&#x990A;&#x88DC;&#x52A9;&#x98DF;&#x54C1;&#x30D6;&#x30E9;&#x30C3;&#x30AF;&#x30AF;&#x30DF;&#x30F3;&#x30AA;&#x30A4;&#x30EB;&#x304B;&#x3089;Thymoquinone&#x306F;Neu4&#x30E9;&#x30A4;&#x30D6;&#x30DE;&#x30AF;&#x30ED;&#x30D5;&#x30A1;&#x30FC;&#x30B8;&#x306B;&#x304A;&#x3051;&#x308B;&#x30B7;&#x30A2;&#x30EA;&#x30C0;&#x30FC;&#x30BC;&#x3001;&#x6A39;&#x72B6;&#x7A81;&#x8D77;&#x3001;&#x304A;&#x3088;&#x3073;GPCR Galphai&#x30BF;&#x30F3;&#x30D1;&#x30AF;&#x8CEA;&#x304A;&#x3088;&#x3073;&#x30DE;&#x30C8;&#x30EA;&#x30C3;&#x30AF;&#x30B9;&#x30E1;&#x30BF;&#x30ED;&#x30D7;&#x30ED;&#x30C6;&#x30A4;&#x30CA;&#x30FC;&#x30BC;9&#x3092;&#x4ECB;&#x3057;&#x3066;&#x30CE;&#x30FC;&#x30DE;&#x30EB;&#x3068;&#x30BF;&#x30A4;&#x30D7;I&#x30B7;&#x30A2;&#x30EA;&#x30C9;&#x30FC;&#x30B7;&#x30B9;&#x30D2;&#x30C8;&#x7DDA;&#x7DAD;&#x82BD;&#x7D30;&#x80DE;&#x3092;&#x6D3B;&#x6027;&#x5316;&#x3059;&#x308B;

Thymoquinone (TQ)&#xC758; &#xD56D; &#xC5FC;&#xC99D; &#xC81C; &#xD65C;&#xB3D9; &#xCCB4; &#xC678; in vivo &#xC5F0;&#xAD6C;&#xC5D0;&#xC11C; &#xC99D;&#xBA85; &#xD588;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xADF8;&#xB7EC;&#xB098;, &#xC7A5;&#xCE58;&#xB97C; &#xC815;&#xD655;&#xD55C; &#xB9C8;&#xB354;&#xBCF4;&#xB4DC;&#xC5D0; TQ&#xC758; &#xC774;&#xB7EC;&#xD55C; &#xD56D; &#xC5FC;&#xC99D; &#xC81C; &#xD65C;&#xB3D9;&#xC5D0;&#xC11C; &#xC798; &#xC774;&#xD574; &#xB418;&#xC9C0; &#xC54A;&#xB294;&#xB2E4;. &#xC0C8;&#xB85C; &#xAC1C;&#xBC1C;&#xB41C; &#xB41C; &#xBD84;&#xC11D; &#xACB0;&#xACFC; &#xC0AC;&#xC6A9; &#xD558; &#xC5EC; &#xB77C;&#xC774;&#xBE0C; macrophage &#xC140;&#xC5D0; sialidase &#xD65C;&#xB3D9;&#xC744; &#xAC10;&#xC9C0; &#xD558; (Glycoconj J doi: 10.1007/s10719-009-9239-8), &#xC5EC;&#xAE30; &#xC6B0;&#xB9AC;&#xAC00; TQ &#xB77C;&#xC774;&#xBE0C; BMC 2 macrophage &#xC140;&#xC5D0; &#xAC78;&#xCCD0; lipopolysaccharide (LPS)&#xC5D0; &#xC720;&#xBC1C; &#xC5B5;&#xC81C; &#xD6A8;&#xACFC; sialidase &#xD65C;&#xB3D9;&#xC774; &#xC788;&#xB2E4;&#xB294; &#xD45C;&#xC2DC;. &#xBC18;&#xBA74;, &#xBD80;&#xBAA8; &#xAC80;&#xC740; &#xC885;&#xC790; &#xC624;&#xC77C; (BSO) &#xBC0F; BSO &#xD30C;&#xB77C; cymene (p-CY)&#xC758; &#xB610; &#xB2E4;&#xB978; &#xAD6C;&#xC131; &#xC644;&#xC804;&#xD788; LPS &#xC720;&#xBC1C; sialidase &#xD65C;&#xB3D9;&#xC744; &#xCC28;&#xB2E8;&#xD569;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xC774;&#xB7EC;&#xD55C; &#xD654;&#xD569;&#xBB3C;&#xC758; &#xBAA8;&#xB4E0; &#xC138;&#xD3EC; &#xC0DD;&#xC874; &#xB2A5;&#xB825;&#xC5D0; &#xC544;&#xBB34;&#xB7F0; &#xC601;&#xD5A5;&#xC744; &#xBBF8;&#xCE58;&#xC9C0;&#xB97C; &#xD588;&#xB2E4;. &#xB2E4;&#xB978; &#xD55C;&#xD3B8;&#xC73C;&#xB85C;, TQ &#xB77C;&#xC774;&#xBE0C; DC 2.4 &#xC218;&#xC9C0;&#xC0C1; &#xC138;&#xD3EC;&#xC5D0;&#xB3C4; &#xBCF5;&#xC6A9;&#xB7C9; &#xC758;&#xC874; &#xBC29;&#xC2DD;&#xC5D0;&#xC11C; &#xB77C;&#xC774;&#xBE0C; BMC 2 macrophage &#xC140;&#xC5D0;&#xC11C; &#xD65C;&#xBC1C; &#xD55C; sialidase &#xD65C;&#xB3D9;&#xC744; &#xC720;&#xB3C4;, HEK-TLR4/MD2, HEK293, SP1 &#xC720; &#xBC29; &#xC120; &#xC554; &#xC138;&#xD3EC;, &#xC778;&#xAC04;&#xC758; WT &#xBC0F; 1140F01 &#xBC0F; WG0544 sialidosis fibroblast &#xC138;&#xD3EC; &#xD0C0;&#xC785;. &#xD0C0;&#xBBF8;&#xD50C;&#xB8E8; (oseltamivir &#xC778;&#xC0B0; &#xC5FC;) 19.1 microM &#xC751;&#xC9D1; &#xC5B5;&#xC81C;&#xC81C; &#xB2E4; &#xB098; (2-deoxy-2,3-dehydro-N-acetylneuraminic &#xC0B0;)&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C;&#xC758; IC(50)&#xC5D0; &#xBE44;&#xD574; 0.0194 Microm&#xC758; IC(50)&#xC640; &#xD568;&#xAED8; &#xB77C;&#xC774;&#xBE0C; BMC 2 &#xC140;&#xC5D0; TQ &#xC720;&#xB3C4; &#xB41C; sialidase &#xD65C;&#xB3D9;&#xC744; &#xC5B5;&#xC81C; &#xD55C;&#xB2E4;. &#xC548;&#xD2F0;-Neu1,-2 &#xBC0F;-3 &#xD56D; &#xCCB4; &#xC788;&#xB294; TQ &#xC720;&#xB3C4; &#xB41C; sialidase &#xD65C;&#xB3D9;&#xC758; &#xC544;&#xBB34; &#xC800;&#xD574; &#xB77C;&#xC774;&#xBE0C; BMC 2 &#xC778;&#xAC04;&#xACFC; THP 1 macrophage &#xB2E4;&#xB978; &#xC548;&#xD2F0;-Neu4 &#xD56D; &#xCCB4; &#xC644;&#xC804;&#xD788; &#xCC28;&#xB2E8; &#xD558;&#xC9C0;&#xB9CC; &#xC140;&#xC774;&#xC774; &#xD65C;&#xB3D9;. TQ &#xCE58;&#xB8CC; &#xB77C;&#xC774;&#xBE0C; &#xC8FC; &#xACE8; (BM) macrophage &#xC140; &#xD30C;&#xC0DD; &#xB41C; &#xBCF4;&#xC870; Neu1 &#xACB0;&#xD54D; (NeuI KD) &#xB41C; WT &#xBC0F; hypomorphic cathepsin A &#xB9C8;&#xC6B0;&#xC2A4; &#xC788;&#xC9C0;&#xB9CC; Neu4 &#xB179;&#xC544;&#xC6C3; (Neu4 KO) &#xB9C8;&#xC6B0;&#xC2A4;&#xC640; &#xAD00;&#xB828; &#xB41C; &#xD65C;&#xBC1C; &#xD55C; sialidase &#xD65C;&#xB3D9;&#xC774;&#xC785;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xBC31; &#xC77C; &#xD574; &#xB3C5; &#xC18C; (PTX), G-&#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8;&#xC758; Galphai &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8;&#xC758; &#xD2B9;&#xC815; &#xC5B5;&#xC81C;&#xC81C; &#xACB0;&#xD569; &#xC218;&#xC6A9; &#xCCB4; (GPCR)&#xC640; &#xB9E4;&#xD2B8;&#xB9AD;&#xC2A4; metalloproteinase (MMP) galardin &#xBC0F; &#xB77C;&#xC774;&#xBE0C; BMC 2&#xC5D0; &#xC801;&#xC6A9; &#xB41C; piperazine&#xC758; &#xAD11;&#xBC94;&#xC704; &#xD55C; &#xC5B5;&#xC81C;&#xC81C;, THP 1&#xACFC; &#xAE30;&#xBCF8; BM macrophage &#xC140; &#xC644;&#xC804;&#xD788; TQ &#xC720;&#xB3C4; &#xB41C; sialidase &#xD65C;&#xB3D9;&#xC744; &#xCC28;&#xB2E8;. CTX, &#xD2F0;&#xB85C;&#xC2E0; &#xD0A4; &#xB2C8; &#xC544; &#xC81C; &#xC5B5;&#xC81C;&#xC81C; K252a, &#xADF8;&#xB9AC;&#xACE0; &#xAD11;&#xBC94;&#xC704; &#xD55C; GPCR &#xC5B5;&#xC81C;&#xC81C; suramin &#xBFD0;&#xB9CC; &#xC544;&#xB2C8;&#xB77C; &#xC18C;&#xB97C; GM1 ganglioside &#xD2B9;&#xC815; &#xCF5C;&#xB808;&#xB77C; &#xB3C5; &#xC18C; &#xB2E8;&#xC704; B (CTXB)&#xC640; &#xAC19;&#xC740; &#xC774;&#xB7EC;&#xD55C; &#xC5B5;&#xC81C; &#xD6A8;&#xACFC; &#xAD00;&#xCC30; &#xD558;&#xC9C0;&#xB294;. MMP 9, &#xC548;&#xD2F0; MMP 9 &#xD56D; &#xCCB4; &#xBC0F; &#xC548;&#xD2F0;-Neu4 &#xD56D; &#xCCB4;&#xC758; &#xD2B9;&#xC815; &#xC5B5;&#xC81C;&#xC81C; &#xD558;&#xC9C0;&#xB9CC; MMP 3 &#xD558;&#xC9C0; &#xD2B9;&#xC815; &#xC5B5;&#xC81C;&#xC81C; &#xC644;&#xC804;&#xD788; &#xC138;&#xD3EC; &#xD45C;&#xBA74;&#xC5D0; Neu4 &#xBC0F; MMP 9 &#xC775;&#xC2A4;&#xD504;&#xB808;&#xC2A4; &#xB77C;&#xC774;&#xBE0C; THP 1 &#xC140;&#xC5D0; TQ &#xC720;&#xB3C4; &#xB41C; sialidase &#xD65C;&#xB3D9;&#xC744; &#xCC28;&#xB2E8; &#xD569;&#xB2C8;&#xB2E4;. TQ &#xCDE8;&#xAE09; &#xB77C;&#xC774;&#xBE0C; THP-1&#xC5D0;&#xC11C; &#xC140; lysates&#xC5D0;&#xC11C; Neu4 sialidase &#xD65C;&#xB3D9; &#xC138;&#xD3EC; desialylates &#xC790;&#xC5F0; gangliosides, mucin &#xAE30;&#xD310;. RT-PCR &#xBC0F; &#xC11C;&#xCABD; &#xC624; &#xC810; &#xBD84;&#xC11D; &#xACF5;&#xAC1C; &#xC778;&#xAC04;&#xC758; monocytic THP 1 &#xC140;&#xC5D0; neu4&#xACFC; neu3&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; Mrna&#xC640; &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8; &#xAC12; &#xC0AC;&#xC774;&#xC758; &#xC0C1;&#xAD00; &#xAD00;&#xACC4;&#xAC00; &#xC774;&#xB7EC;&#xD55C; &#xB450; &#xD3EC;&#xC720;&#xB958; sialidases TQ &#xD65C;&#xC131;&#xD654;&#xC758; &#xB3C5;&#xB9BD;&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xB2E4;&#xC591; &#xD55C; post-transcriptional &#xBA54;&#xCEE4;&#xB2C8;&#xC998;&#xC744; &#xCC98;&#xC74C;&#xC73C;&#xB85C; &#xC81C;&#xC548; &#xD569;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xC6B0;&#xB9AC;&#xC758; &#xC5F0;&#xAD6C; &#xACB0;&#xACFC; nutraceutical &#xBE14;&#xB799; &#xCEE4; &#xBBFC; &#xC624;&#xC77C;&#xC5D0;&#xC11C; &#xD30C;&#xC0DD; &#xB418;&#xB294; thymoquinone&#xC5D0; &#xC758;&#xD574; &#xC138;&#xD3EC; &#xD45C;&#xBA74;&#xC5D0; Neu4 sialidase&#xC758; &#xC804;&#xB840; &#xD65C;&#xC131;&#xD654;&#xB97C; &#xC124;&#xC815; &#xD569;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xBA64;&#xBE0C;&#xB808;&#xC778; Galphai &#xC18C; &#xB2E8;&#xC704; &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8; &#xBC0F; &#xB9E4;&#xD2B8;&#xB9AD;&#xC2A4; metalloproteinase 9 &#xD65C;&#xC131;&#xD654;&#xC758; &#xD0C0;&#xAC9F;&#xD305;&#xC744; &#xD1B5;&#xD574; TQ&#xC5D0; &#xC758;&#xD574; GPCR &#xC2E0;&#xD638; potentiation &#xC138;&#xD3EC; &#xD45C;&#xBA74;&#xC5D0; Neu4 sialidase&#xC758; &#xD65C;&#xC131;&#xD654; &#xACFC;&#xC815;&#xC5D0; &#xAD00;&#xB828; &#xB418;&#xC5B4;&#xC788;&#xC744; &#xC218; &#xC788;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4;.

Nutraceutical &#xBE14;&#xB799; &#xCEE4; &#xBBFC; &#xC624;&#xC77C;&#xC5D0;&#xC11C; Thymoquinone Neu4 sialidase &#xB77C;&#xC774;&#xBE0C; &#xB300; &#xC2DD; &#xC138;&#xD3EC;, &#xC218;&#xC9C0;&#xC0C1;, &#xBC0F; &#xC815;&#xC0C1;&#xC5D0;&#xC11C; &#xD65C;&#xC131;&#xD654; &#xD558; &#xACE0; &#xC720;&#xD615; I GPCR Galphai &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8; &#xBC0F; &#xB9E4;&#xD2B8;&#xB9AD;&#xC2A4; metalloproteinase-9&#xB97C; &#xD1B5;&#xD574; sialidosis &#xC778;&#xAC04;&#xC758; fibroblast &#xC138;&#xD3EC;.

Anti-inflamatorios actividades de timoquinona (TQ) ha sido demostrada in vitro e in vivo. Sin embargo, el mecanismo exacto (s) de TQ en estas actividades anti-inflamatorios no se entiende bien. El uso de un ensayo de reciente desarrollo para detectar la actividad sialidasa en las c&#xE9;lulas vivas, los macr&#xF3;fagos Glycoconj J doi: 10.1007/s10719-009-9239-8), aqu&#xED; se demuestra que CA no tiene ning&#xFA;n efecto inhibitorio sobre la lipopolisac&#xE1;rido endotoxina (LPS) inducida por la actividad sialidasa en vivo BMC -2 macr&#xF3;fagos. En contraste, el aceite de semilla de matriz negro (BSO) y otro componente de la BSO para cimeno (p-CY) bloquean completamente LPS actividad sialidasa inducido. Todos estos compuestos no tuvo ning&#xFA;n efecto sobre la viabilidad celular. Por otro lado, TQ induce una actividad sialidasa vigorosa en c&#xE9;lulas vivas macr&#xF3;fagos BMC-2 en una forma dependiente de dosis, as&#xED; como en vivo DC-2.4 c&#xE9;lulas dendr&#xED;ticas, HEK-TLR4/MD2, HEK293, c&#xE9;lulas de adenocarcinoma mamario SP1, humanos y WT 1140F01 y WG0544 c&#xE9;lulas de tipo I sialidosis fibroblastos. Tamiflu (oseltamivir fosfato) inhibe la actividad inducida por TQ sialidasa en vivo BMC-2 c&#xE9;lulas con un IC (50) de 0,0194 microM en comparaci&#xF3;n con un IC (50) de 19,1 microM para inhibidor de la neuraminidasa DANA (2-desoxi-2 ,3-deshidro -&#xE1;cido N-acetilneuram&#xED;nico). Anti-Neu1, -2 y -3 anticuerpos no tienen inhibici&#xF3;n de la actividad sialidasa TQ-inducida en vivo BMC-2 y humanos THP-1 macr&#xF3;fagos, sino contra la Neu4 anticuerpos bloquean completamente esta actividad. No es una actividad sialidasa vigorosa asociada a TQ en vivo de m&#xE9;dula &#xF3;sea tratada primaria (BM) los macr&#xF3;fagos derivados de la catepsina WT y hypomorphic A los ratones con una deficiencia secundaria Neu1 (NeuI KD), pero no de Neu4 nocaut (KO Neu4) ratones. La toxina pertussis (PTX), un inhibidor espec&#xED;fico de las prote&#xED;nas de los receptores de Galphai acoplados a prote&#xED;nas G (GPCR) y los inhibidores de la amplia gama de metaloproteinasas de matriz (MMP) y piperazina galardina aplicada a vivir BMC-2, THP-1 y macr&#xF3;fagos, c&#xE9;lulas primarias de BM bloquear completamente TQ-inducida por la actividad sialidasa. Estos efectos inhibitorios mismos no se observan con el gangli&#xF3;sido GM1 B espec&#xED;fico c&#xF3;lera subunidad toxina (ctxB), as&#xED; como con CTX, tirosina quinasa K252a, y la amplia gama GRCP inhibidor suramina. El inhibidor espec&#xED;fico de la MMP-9, anti-MMP-9 anticuerpos y anticuerpos anti-Neu4, pero no el inhibidor espec&#xED;fico de la MMP-3 completamente la actividad sialidasa bloque TQ inducida en vivo c&#xE9;lulas THP-1, que expresa Neu4 y MMP 9- en la superficie celular. Neu4 la actividad sialidasa en lisados &#x200B;&#x200B;celulares de TQ tratados en vivo c&#xE9;lulas THP-1 desialylates gangli&#xF3;sidos naturales y sustratos de mucina. RT-PCR y an&#xE1;lisis de Western blot revelar ninguna correlaci&#xF3;n entre los valores de ARNm y prote&#xED;na para Neu3 y Neu4 en humanos monoc&#xED;ticas THP-1 en las c&#xE9;lulas, lo que sugiere por primera vez una variada post-transcripcional mecanismo para estos dos sialidasas mam&#xED;feros independientes de activaci&#xF3;n CA. Nuestros resultados establecer una activaci&#xF3;n sin precedentes de Neu4 sialidasa en la superficie celular por timoquinona, que se deriva del aceite nutrac&#xE9;utico comino negro. La potenciaci&#xF3;n de GPCR se&#xF1;alizaci&#xF3;n por TQ a trav&#xE9;s de la membrana focalizaci&#xF3;n de prote&#xED;nas de las subunidades Galphai y matriz de activaci&#xF3;n metaloproteinasa-9 pueden estar implicados en el proceso de activaci&#xF3;n de Neu4 sialidasa en la superficie celular.

Timoquinona del aceite de Comino Negro Nutraceutical Activa Neu4 sialidasa en los macr&#xF3;fagos en vivo, dendr&#xED;ticas y normales y c&#xE9;lulas de tipo I sialidosis Humanos fibroblastos Via GPCR prote&#xED;nas Galphai y metaloproteinasas de la matriz-9

Thymoquinone (TQ) &#x6765;&#x81EA;&#x4FDD;&#x5065;&#x54C1;&#x9ED1;&#x5B5C;&#x7136;&#x6CB9;&#x636E;&#x62A5;&#x662F;&#x6D3B;&#x7EC6;&#x80DE; (Glycoconj J DOI 10.1007/s10719-010-9281-6) Neu4 &#x553E;&#x6DB2;&#x9178;&#x9176;&#x6D3B;&#x6027;&#x7684;&#x65B0;&#x578B;&#x6FC0;&#x52A8;&#x5242;&#x3002;&#x6FC0;&#x6D3B;&#x7684;&#x7EC6;&#x80DE;&#x8868;&#x9762;&#x7684; TQ Neu4 &#x553E;&#x6DB2;&#x9178;&#x9176;&#x88AB;&#x53D1;&#x73B0;&#x6D89;&#x53CA;&#x6C14;&#x76F8;&#x5316;&#x5B66;&#x8FD8;&#x539F;&#x4FE1;&#x53F7;&#x901A;&#x8FC7;&#x819C;&#x9488;&#x5BF9; G&alpha;i &#x4E9A;&#x57FA;&#x86CB;&#x767D;&#x548C;&#x57FA;&#x8D28;&#x91D1;&#x5C5E;&#x86CB;&#x767D;&#x9176; 9 &#x6FC0;&#x6D3B;&#x3002;&#x4E0E;&#x5176;&#x4ED6;&#x62A5;&#x544A;&#xFF0C;TQ &#x4E86;&#x4F53;&#x5916;&#x65E0;&#x6297;&#x708E;&#x4F5C;&#x7528;&#x3002;&#x5728;&#x8FD9;&#x91CC;&#xFF0C;&#x6211;&#x4EEC;&#x663E;&#x793A; MyD88/TLR4 &#x590D;&#x6742;&#x5730;&#x5C42;&#x548C;&#x968F;&#x540E; NF&kappa;B &#x6FC0;&#x6D3B;&#x8BF1;&#x5BFC;&#x5173;&#x8054; TQ &#x523A;&#x6FC0;&#x6D3B;&#x4E3B; (BM) &#x5DE8;&#x566C;&#x7EC6;&#x80DE;&#x4E0E;&#x9AA8;&#x9AD3;&#x7EC6;&#x80DE;&#x4ECE; WT &#x548C; Neu1 &#x7F3A;&#x9677;&#x5C0F;&#x9F20;&#x3001; &#x66FC;&#x6D66;&#x6C49;&#x514B;-TLR4/MD2 &#x7EC6;&#x80DE; BMC 2 &#x5DE8;&#x566C;&#x7EC6;&#x80DE;&#x7CFB;&#x4F46;&#x4E0D;&#x662F;&#x4E0E;&#x539F;&#x53D1;&#x6027;&#x5DE8;&#x566C;&#x7EC6;&#x80DE;&#x4ECE; Neu4 &#x57FA;&#x56E0;&#x6572;&#x9664;&#x5C0F;&#x9F20;&#x7684; Neu4 &#x6D3B;&#x52A8;&#x3002;&#x8FBE;&#x83F2; &#xFF08;&#x78F7;&#x9178;&#x5965;&#x53F8;&#x4ED6;&#x97E6;)&#x3001; &#x767E;&#x65E5;&#x54B3;&#x6BD2;&#x7D20; &#xFF08;PTX&#xFF09;&#xFF0C;&#x4E00;&#x79CD;&#x7279;&#x5B9A;&#x7684;&#x6291;&#x5236;&#x5242; G&alpha;i &#x86CB;&#x767D; G &#x86CB;&#x767D;&#x7684;&#x8026;&#x5408; &#xFF08;&#x6C14;&#x76F8;&#xFF09; &#x53D7;&#x4F53;&#x548C;&#x8303;&#x56F4;&#x5E7F;&#x6CDB;&#x7684;&#x5404;&#x79CD;&#x6291;&#x5236;&#x5242;&#x57FA;&#x8D28;&#x91D1;&#x5C5E;&#x86CB;&#x767D;&#x9176; &#xFF08;MMP&#xFF09; galardin &#x5E94;&#x7528;&#x4F4F;&#x4E3B; BM &#x5DE8;&#x566C;&#x7EC6;&#x80DE;&#x5B8C;&#x5168;&#x5757; TQ &#x8BF1;&#x5BFC; MyD88/TLR4 &#x590D;&#x6742;&#x5730;&#x5C42;&#x3002;&#x91C7;&#x7528;&#x514D;&#x75AB;&#x7EC6;&#x80DE;&#x5316;&#x5B66;&#x548C;&#x5370;&#x8FF9;&#x5206;&#x6790;&#xFF0C;&#x8FBE;&#x83F2;&#x3001; galardin &#x548C; PTX &#x6291;&#x5236; NF&kappa;B &#x6FC0;&#x6D3B;&#x4E0E; TQ &#x523A;&#x6FC0; BMC-2 &#x5355;&#x5143;&#x683C;&#x3001; &#x5355;&#x5143;&#x683C;&#x66FC;&#x6D66;&#x6C49;&#x514B;-TLR4/MD2 &#x548C; WT &#x5C0F;&#x9F20;&#x5DE8;&#x566C;&#x7EC6;&#x80DE; BM &#x4E3B;&#x8981;&#x5173;&#x8054;&#x7684; Neu4 &#x6D3B;&#x52A8;&#x6240;&#x81F4;&#x3002;&#x5730;&#x9AD8;&#x8F9B;&#x5206;&#x6790;&#x5BF9;&#x66FC;&#x6D66;&#x6C49;&#x514B;-TLR4/MD2 &#x6838;&#x7EC6;&#x80DE;&#x63D0;&#x53D6;&#x786E;&#x8BA4;&#x6838;&#x5B9A;&#x4F4D;&#x548C; DNA &#x7ED1;&#x5B9A;&#x7684; TQ &#x8BF1;&#x5BFC; NF&kappa;B &#x6FC0;&#x6D3B;&#x5185; 30 &#x5206;&#x949F; Co &#x6C89;&#x6DC0;&#x5B9E;&#x9A8C;&#x53CC;&#x76F8;&#x5730;&#x63ED;&#x793A;&#x4E86;&#x57FA;&#x8D28;&#x91D1;&#x5C5E;&#x86CB;&#x767D;&#x9176; 9 &#x53EF;&#x80FD;&#x662F;&#x91CD;&#x8981;&#x7684;&#x4E2D;&#x95F4;&#x73AF;&#x8282;&#xFF0C;&#x54C8;&#x514B;&#x9488;&#x5BF9; TLR4 &#x53D7;&#x4F53;&#x8BF1;&#x5BFC; TQ Neu4 &#x6D3B;&#x52A8;&#x4E2D;&#x7B2C;&#x4E00;&#x6B21;&#x3002;&#x4E2D;&#x592E;&#x5BF9;&#x8FD9;&#x4E00;&#x8FDB;&#x7A0B;&#xFF0C;&#x5E76;&#x662F; Neu4 &#x5F62;&#x5F0F;&#x4E0E;&#x57FA;&#x8D28;&#x91D1;&#x5C5E;&#x86CB;&#x767D;&#x9176;-9&#xFF0C;&#x5DF2;&#x7ECF;&#x662F;&#x4E00;&#x79CD;&#x590D;&#x6742;&#x7ED1;&#x5B9A;&#x5230; TLR4 &#x53D7;&#x4F53;&#x3002;CD14 THP1 &#x6D3B;&#x7EC6;&#x80DE;&#x8367;&#x5149;&#x5206;&#x5149;&#x5149;&#x5EA6;&#x8BA1;&#x5206;&#x6790;&#x6CBB;&#x7597; TQ &#x4F7F;&#x7528;&#x6D41;&#x6D41;&#x5F0F;&#x7EC6;&#x80DE;&#x4EEA;&#x5206;&#x6790;&#xFF0C;&#x663E;&#x793A; Neu4 &#x553E;&#x6DB2;&#x9178;&#x9176;&#x6D3B;&#x6027;&#x8D85;&#x8FC7; 5 &#x5206;&#x949F; CD14 THP1 &#x7EC6;&#x80DE;&#x6CBB;&#x7597; TQ &#x5FEB;&#x9012;&#x7A33;&#x5B9A;&#x86CB;&#x767D;&#x6C34;&#x5E73;&#x7684; Neu4&#x3001; TLR4 &#x548C; MMP9 &#x5BF9;&#x7EC6;&#x80DE;&#x8868;&#x9762;&#x9664;&#x4E86;&#x5728; 15 &#x5206;&#x949F;&#x4F7F;&#x7528;&#x7EC6;&#x80DE;&#x56E0;&#x5B50;&#x9635;&#x5217;&#x5256;&#x9762;&#x5206;&#x6790;&#x8840;&#x6E05; MMP9 &#x663E;&#x8457;&#x51CF;&#x5C11;&#x8D85;&#x8FC7; 30 &#x5206;&#x949F;&#xFF0C;Neu4 &#x57FA;&#x56E0;&#x6572;&#x9664;&#x5C0F;&#x9F20;&#x54CD;&#x5E94;&#x5DEE; TQ &#x751F;&#x4EA7;&#x4FC3;&#x708E;&#x6027;&#x7EC6;&#x80DE;&#x56E0;&#x5B50;&#x3001; &#x8D8B;&#x5316;&#x56E0;&#x5B50;&#x4E0E;&#x91CE;&#x751F;&#x578B;&#x76F8;&#x6BD4; 5 h &#x6CBB;&#x7597;&#x540E;&#x7684;&#x6216;hypomorphic &#x7EC4;&#x7EC7;&#x86CB;&#x767D;&#x9176; A &#x4E2D;&#x5B66; 90 %neu1 &#x7F3A;&#x9677;&#x5C0F;&#x9F20;&#x5C0F;&#x9F20;&#x3002;&#x6211;&#x4EEC;&#x7684;&#x7814;&#x7A76;&#x7ED3;&#x679C;&#x5EFA;&#x7ACB;&#x8BF1;&#x5BFC; TQ Neu4 &#x553E;&#x6DB2;&#x9178;&#x9176;&#x6D3B;&#x6027;&#x7A7A;&#x524D;&#x4FE1;&#x53F7;&#x4F20;&#x8F93;&#x6A21;&#x5F0F;&#x3002;&#x5B83;&#x6807;&#x5FD7;&#x7740;&#x57FA;&#x8D28;&#x91D1;&#x5C5E;&#x86CB;&#x767D;&#x9176;-9 &#x4E0E; TLR4 &#x53D7;&#x4F53;&#x80DE;&#x5916;&#x533A;&#x5728;&#x590D;&#x6742;&#x5F62;&#x5F0F;&#x91CD;&#x8981;&#x7684;&#x5206;&#x5B50;&#x4FE1;&#x53F7;&#x5E73;&#x53F0;&#x548C;&#x5145;&#x5F53;&#x4E2D;&#x751F;&#x6210;&#x529F;&#x80FD;&#x53D7;&#x4F53;&#x4E0E;&#x968F;&#x540E; NF&kappa;B &#x6FC0;&#x6D3B;&#x548C;&#x708E;&#x75C7;&#x7EC6;&#x80DE;&#x56E0;&#x5B50;&#x751F;&#x4EA7;&#x4F53;&#x5185;&#x8BF1;&#x5BFC; TQ Neu4 &#x553E;&#x6DB2;&#x9178;&#x9176;&#x7684;&#x4E2D;&#x4ECB;&#x73AF;&#x8282;&#x3002;

Thymoquinone &#x8BF1;&#x5BFC;&#x7684;&#x553E;&#x6DB2;&#x9178;&#x9176; Neu4 &#x6FC0;&#x6D3B;&#x7684;&#x5DE8;&#x566C;&#x7EC6;&#x80DE;&#x548C;&#x708E;&#x75C7;&#x7EC6;&#x80DE;&#x56E0;&#x5B50;&#x5728;&#x4F53;&#x5185;&#x7684; NF&kappa;B&#x3002;

Thymoquinone (TQ) derived from the nutraceutical black cumin oil has been reported to be a novel agonist of Neu4 sialidase activity in live cells (Glycoconj J DOI 10.1007/s10719-010-9281-6). The activation of Neu4 sialidase on the cell surface by TQ was found to involve GPCR-signaling via membrane targeting of GÎ±i subunit proteins and matrix metalloproteinase-9 activation. Contrary to other reports, TQ had no anti-inflammatory effects in vitro. Here, we show that MyD88/TLR4 complex formation and subsequent NFÎºB activation are induced by the Neu4 activity associated with TQ-stimulated live primary bone marrow (BM) macrophage cells from WT and Neu1-deficient mice, HEK-TLR4/MD2 cells and BMC-2 macrophage cell line but not with primary macrophage cells from Neu4-knockout mice. Tamiflu (oseltamivir phosphate), pertussis toxin (PTX), a specific inhibitor of GÎ±i proteins of G-protein coupled receptor (GPCR) and the broad range inhibitor of matrix metalloproteinase (MMP) galardin applied to live primary BM macrophage cells completely block TQ-induced MyD88/TLR4 complex formation. Using immunocytochemistry and western blot analyses, Tamiflu, galardin and PTX inhibit NFÎºB activation induced by Neu4 activity associated with TQ-stimulated BMC-2 cells, HEK-TLR4/MD2 cells and primary BM macrophages from WT mice. EMSA analyses on HEK-TLR4/MD2 nuclear cell extracts confirm the nuclear localization and DNA binding of TQ-induced NFÎºB activation in a biphasic manner within 30Â min. Co-immunoprecipitation experiments reveal for the first time that MMP-9 may be an important intermediate link in the TQ-induced Neu4 activity circuitously targeting TLR4 receptors. Central to this process is that Neu4 forms a complex with MMP-9, which is already bound to TLR4 receptors. Fluorescence spectrophotometer analyses of live CD14-THP1 cells treated with TQ show Neu4 sialidase activity over 5Â min. Using flow cytometry analyses, CD14-THP1 cells treated with TQ express stable protein levels of Neu4, TLR4 and MMP9 on the cell surface over 30Â min except for a marked diminution of MMP9 at 15Â min. Using cytokine array profiling analyses of serum, Neu4-knockout mice respond poorly to TQ in producing pro-inflammatory cytokines and chemokines after 5-h treatment compared to the wild-type or hypomorphic cathepsin A mice with a secondary 90% Neu1 deficient mice. Our findings establish an unprecedented signaling paradigm for TQ-induced Neu4 sialidase activity. It signifies that MMP-9 forms an important molecular signaling platform in complex with TLR4 receptors at the ectodomain and acts as the intermediate link for TQ-induced Neu4 sialidase in generating a functional receptor with subsequent NFÎºB activation and pro-inflammatory cytokine production in vivo.

Thymoquinone-induced Neu4 sialidase activates NFÎºB in macrophage cells and pro-inflammatory cytokines in vivo.

Thymoquinone (TQ) d&#xE9;riv&#xE9; de l&#x26;#39;huile de cumin noir nutraceutique a &#xE9;t&#xE9; signal&#xE9; comme &#xE9;tant un agoniste roman de Neu4 activit&#xE9; sialidase dans les cellules vivantes (Glycoconj J DOI 10.1007/s10719-010-9281-6). L&#x26;#39;activation de la sialidase Neu4 sur la surface de la cellule par TQ a &#xE9;t&#xE9; trouv&#xE9;e &#xE0; associer RCPG-signalisation via la membrane des prot&#xE9;ines de sous-unit&#xE9;s G&#x3B1;i et la matrice m&#xE9;talloprot&#xE9;inase-9 activation. Contrairement &#xE0; d&#x26;#39;autres rapports, TQ n&#x26;#39;a eu aucun effet anti-inflammatoires in vitro. Ici, nous montrons que la formation du complexe MyD88/TLR4 et l&#x26;#39;activation subs&#xE9;quente NFkB sont induits par l&#x26;#39;activit&#xE9; Neu4 associ&#xE9;e &#xE0; TQ-stimul&#xE9; la moelle osseuse en direct primaire (BM) &#xE0; partir de cellules macrophages et WT Neu1 souris d&#xE9;ficientes, HEK-TLR4/MD2 cellules et BMC -2 lign&#xE9;e cellulaire de macrophages, mais pas avec les cellules macrophages primaires de Neu4-souris d&#xE9;ficientes en prot&#xE9;ine. Tamiflu (phosphate d&#x26;#39;oseltamivir), la toxine de pertussis (PTX), un inhibiteur sp&#xE9;cifique de prot&#xE9;ines G&#x3B1;i du r&#xE9;cepteur coupl&#xE9; aux prot&#xE9;ines G (GPCR) et l&#x26;#39;inhibiteur large &#xE9;ventail de m&#xE9;talloprot&#xE9;inases matricielles (MMP) galardin appliqu&#xE9;e &#xE0; vivre des cellules primaires de macrophages BM bloquer compl&#xE8;tement TQ- induite MyD88/TLR4 formation du complexe. Utilisation de l&#x26;#39;immunocytochimie et des analyses western blot, le Tamiflu, galardin et PTX inhiber l&#x26;#39;activation induite par NFKB Neu4 activit&#xE9; associ&#xE9;e &#xE0; TQ-stimul&#xE9; BMC-2 des cellules, des cellules et HEK-TLR4/MD2 primaires des macrophages BM de souris WT. Analyses EMSA sur HEK-TLR4/MD2 extraits cellulaires nucl&#xE9;aires confirmer la localisation nucl&#xE9;aire et liaison &#xE0; l&#x26;#39;ADN de TQ-activation induite par NFKB d&#x26;#39;une mani&#xE8;re biphasique dans les 30 minutes. Co-immunopr&#xE9;cipitation exp&#xE9;riences r&#xE9;v&#xE8;lent pour la premi&#xE8;re fois que la MMP-9 peut &#xEA;tre un lien important interm&#xE9;diaire dans la TQ-induite Neu4 activit&#xE9; d&#xE9;tours ciblage TLR4 r&#xE9;cepteurs. Au centre de ce processus est que Neu4 forme un complexe avec MMP-9, qui est d&#xE9;j&#xE0; li&#xE9; &#xE0; TLR4 r&#xE9;cepteurs. Analyses spectrophotom&#xE8;tre &#xE0; fluorescence de CD14-vivants THP1 cellules trait&#xE9;es avec TQ spectacle de l&#x26;#39;activit&#xE9; sialidase Neu4 plus de 5 min. En utilisant des analyses de cytom&#xE9;trie en flux, CD14-THP1 cellules trait&#xE9;es avec des niveaux de prot&#xE9;ines stables express TQ de Neu4, TLR4 et MMP9 sur la surface des cellules pendant 30 min, sauf pour une diminution marqu&#xE9;e de la MMP9 &#xE0; 15 min. L&#x26;#39;aide d&#x26;#39;analyses de cytokines tableau de profilage de s&#xE9;rum, Neu4-souris d&#xE9;ficientes en prot&#xE9;ine r&#xE9;agissent mal &#xE0; TQ dans la production de cytokines pro-inflammatoires et des chimiokines apr&#xE8;s 5 h de traitement par rapport &#xE0; la cathepsine de type sauvage ou hypomorphic A des souris avec un secondaire de 90% Neu1 souris d&#xE9;ficientes. Nos r&#xE9;sultats &#xE9;tablir un paradigme de signalisation sans pr&#xE9;c&#xE9;dent pour TQ-induite Neu4 activit&#xE9; sialidase. Cela signifie que les MMP-9 formes une importante plate-forme mol&#xE9;culaire de signalisation dans un complexe avec TLR4 r&#xE9;cepteurs &#xE0; l&#x26;#39;ectodomaine et agit comme interm&#xE9;diaire pour le lien TQ-induite Neu4 sialidase &#xE0; g&#xE9;n&#xE9;rer un r&#xE9;cepteur fonctionnel avec l&#x26;#39;activation de NFkB et la production subs&#xE9;quente cytokine pro-inflammatoire in vivo.

Thymoquinone induite Neu4 sialidase Active NFkB dans les cellules macrophages et cytokines pro-inflammatoires dans Vivo

Thymoquinone (TQ) abgeleitet vom Nutraceutical Schwarzk&uuml;mmel&ouml;l wurde berichtet, ein neuartiges Agonist Neu4 Sialidase Aktivit&auml;t in lebenden Zellen (Glycoconj J DOI 10.1007/s10719-010-9281-6) sein. Die Aktivierung des Neu4 Sialidase auf der Zelloberfl&auml;che von TQ wurde festgestellt, dass GPCR-Signalisierung &uuml;ber die Membran auf der G&alpha;i-Untereinheit Proteine und Matrix Metalloprotease-9-Aktivierung beinhalten. Im Gegensatz zu anderen Berichten hatte TQ keine entz&uuml;ndungshemmende Wirkung, die in-vitro. Hier zeigen wir, da&szlig; MyD88/TLR4-Komplexbildung und anschlie&szlig;ende NF&kappa;B-Aktivierung der Neu4 Aktivit&auml;t im Zusammenhang mit TQ-stimuliert Leben prim&auml;re (BM) Makrophagen Knochenmarkzellen von WT und Neu1-defizienten M&auml;usen, HEK-TLR4/MD2-Zellen und Makrophagen-Zelllinie BMC-2 aber nicht mit prim&auml;ren Makrophagen Zellen von Neu4-Knockout-M&auml;usen hervorruft. Tamiflu (Oseltamivir-Phosphat), Pertussis-Toxin (PTX), einen spezifischen Hemmer von G&alpha;i Proteinen von G-Protein-gekoppelte Rezeptoren (GPCR) und die breite Palette-Inhibitor der Matrix-Metalloproteasen (MMP)-Galardin angewendet, um prim&auml;re BM Makrophagen Zellen vollst&auml;ndig Block TQ-induzierte MyD88/TLR4-Komplexbildung zu leben. Mit Immunzytochemie und western-Blot Analysen, hemmen Tamiflu, Galardin und PTX NF&kappa;B-Aktivierung von Neu4 Aktivit&auml;t im Zusammenhang mit TQ-stimuliert BMC-2 Zellen, HEK-TLR4/MD2 Zellen und prim&auml;re BM Makrophagen aus WT M&auml;use induziert. EMSA Analysen auf HEK-TLR4/MD2 atomare Zelle, Extrakte best&auml;tigen, dass die nukleare Lokalisierung und DNA-Bindung der TQ-induzierte NF&kappa;B-Aktivierung in gewissem biphasische innerhalb 30 min. Co-Immunopr&auml;zipitation Experimente zum ersten Mal zu offenbaren, dass MMP-9 m&ouml;glicherweise ein wichtiges Zwischenglied in der TQ-induzierte Neu4-Aktivit&auml;t auf Umwegen TLR4-Rezeptoren. Zentrale zu diesem Prozess Neu4 bildet einen Komplex mit MMP-9, die bereits an TLR4-Rezeptor gebunden ist. Fluoreszenz-Spektralphotometer-Analysen von lebenden Zellen in Verwendung CD14-THP1 behandelt mit TQ zeigen Neu4 Sialidase Aktivit&auml;t mehr als 5 min. Using flie&szlig;en Cytometry Analysen, Verwendung CD14-THP1 Zellen behandelt mit TQ ausdr&uuml;ckliche stabilen Protein-Ebene Neu4, TLR4 und MMP9 auf der Zelle Oberfl&auml;che &amp;gt; 30 min bis auf eine markierte Verringerung der MMP9 bei 15 min. Using Cytokine Array Profilerstellung Analysen von Serum, Neu4-Knockout-M&auml;usen reagieren schlecht auf TQ Produktion Pro-inflammatorische Zytokine und Chemokine nach 5-h-Behandlung im Vergleich zu den Wildtyp oder hypomorphen Kathepsin A M&auml;use mit einer sekund&auml;ren 90 % Neu1 unzul&auml;nglichen M&auml;usen. Unsere Sachaufkl&auml;rung eine beispiellose Signalling Paradigma f&uuml;r TQ-induzierte Neu4 Sialidase Aktivit&auml;t. Es bedeutet, dass MMP-9 eine wichtige Molekulare Signalling-Plattform im Komplex mit TLR4-Rezeptoren an den APPs&alpha; bildet und als Zwischenglied f&uuml;r TQ-induzierte Neu4 Sialidase fungiert bei der Erzeugung eines funktionellen Rezeptors mit anschlie&szlig;ende NF&kappa;B-Aktivierung und Pro-inflammatorische Zytokin-Produktion in-vivo.

Thymoquinone induziert Neu4 Sialidase aktiviert NF&kappa;B in Makrophagen Zellen und Pro-inflammatorische Zytokine in-vivo.

Thymoquinone (TQ) derivati dall&#39;olio di cumino nero nutraceutico &egrave; stato segnalato per essere un romanzo agonista di attivit&agrave; sialidasi Neu4 in cellule vive (Glycoconj J DOI 10.1007/s10719-010-9281-6). L&#39;attivazione della sialidasi Neu4 sulla superficie delle cellule da TQ &egrave; stato trovato a coinvolgere GPCR-segnalazione tramite membrana targeting di attivazione G&alpha;i subunit&agrave; proteine e matrix metalloproteinase-9. Contrariamente alle altre relazioni, TQ ha avuto effetti anti-infiammatori in vitro. Qui, ci mostra che MyD88/TLR4 formazione complessa e successiva attivazione di NF&kappa;B sono indotte dall&#39;attivit&agrave; Neu4 associati con TQ-stimolata dal vivo primaria cellule del midollo osseo (BM) macrofago dai topi WT e deficit di Neu1, le cellule HEK-TLR4/MD2 e BMC-2 macrofago cella linea, ma non con cellule macrofagi primari da topi knockout Neu4. Tamiflu (oseltamivir fosfato), tossina di pertussis (PTX), un inibitore specifico delle proteine G&alpha;i della G-proteina coupled receptor (GPCR) e l&#39;inibitore della vasta gamma di matrix metalloproteinase (MMP) galardin applicato per vivere cellule primarie di macrofago BM blocco completamente formazione complesso TLR4/MyD88 TQ-indotta. Mediante analisi western blot e immunocitochimica, Tamiflu, galardin e PTX inibire l&#39;attivazione di NF&kappa;B indotta da Neu4 attivit&agrave; associate TQ-stimolato BMC-2 cellule, le cellule HEK-TLR4/MD2 e macrofagi BM primari da topi WT. Analisi EMSA su cellule nucleari HEK-TLR4/MD2 estratti confermano che la localizzazione nucleare e DNA binding di attivazione indotta da TQ NF&kappa;B in maniera bifasica entro 30 min Co-immunoprecipitazione esperimenti rivelano per la prima volta che la MMP-9 pu&ograve; essere un importante collegamento intermedio nell&#39;attivit&agrave; Neu4-TQ-induced tortuosamente targeting TLR4 recettori. Centrale di questo processo &egrave; che Neu4 forma un complesso con MMP-9, che &egrave; gi&agrave; associato a recettori TLR4. Analisi spettrofotometro fluorescenza delle cellule CD14-THP1 live trattati con TQ mostrano Neu4 sialidasi attivit&agrave; oltre 5 min utilizzando analisi di citometria a flusso, le cellule CD14-THP1 trattati con stabile espresso TQ livelli della proteina di Neu4, TLR4 e MMP9 sul cellulare di superficie oltre 30 min ad eccezione di una marcata diminuzione di MMP9 a 15 min usando cytokine matrice profiling analisi del siero, topi knockout Neu4 rispondono male a TQ nella produzione di citochine pro-infiammatorie e chemochine dopo trattamento di 5 h rispetto al wild-type o topi di catepsina A hypomorphic con un secondario topi carenti di 90% Neu1. I nostri risultati stabiliscono un paradigma di segnalazione senza precedenti per attivit&agrave; sialidasi Neu4 TQ-indotta. Significa che la MMP-9 costituisce un&#39;importante piattaforma di segnalazione molecolare nel complesso TLR4 recettori presso il ectodomain e funge da collegamento intermedio per sialidasi Neu4 TQ-indotta nella generazione di un recettore funzionale con conseguente attivazione di NF&kappa;B e produzione di citochine pro-infiammatorie in vivo.

Thymoquinone-induced Neu4 sialidasi attiva NF&kappa;B in macrofago cellule e le citochine pro-infiammatorie in vivo.

&#x6804;&#x990A;&#x88DC;&#x52A9;&#x98DF;&#x54C1;&#x30D6;&#x30E9;&#x30C3;&#x30AF;&#x30AF;&#x30DF;&#x30F3;&#x6CB9;&#x7531;&#x6765;&#x306E;Thymoquinone&#xFF08;TQ&#xFF09;&#x306F;&#x751F;&#x7D30;&#x80DE;&#x3067;Neu4&#x30B7;&#x30A2;&#x30EA;&#x30C0;&#x30FC;&#x30BC;&#x6D3B;&#x6027;&#xFF08;Glycoconj J DOI 10.1007/s10719-010-9281-6&#xFF09;&#x306E;&#x65B0;&#x898F;&#x30A2;&#x30B4;&#x30CB;&#x30B9;&#x30C8;&#x3067;&#x3042;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x304C;&#x5831;&#x544A;&#x3055;&#x308C;&#x3066;&#x3044;&#x307E;&#x3059;&#x3002; TQ&#x306B;&#x3088;&#x308B;&#x7D30;&#x80DE;&#x8868;&#x9762;&#x4E0A;Neu4&#x30B7;&#x30A2;&#x30EA;&#x30C0;&#x30FC;&#x30BC;&#x306E;&#x6D3B;&#x6027;&#x5316;&#x306F;G&#x30BF;&#x30F3;&#x30D1;&#x30AF;&#x8CEA;&#x30B5;&#x30D6;&#x30E6;&#x30CB;&#x30C3;&#x30C8;&#x30BF;&#x30F3;&#x30D1;&#x30AF;&#x8CEA;&#x3068;&#x30DE;&#x30C8;&#x30EA;&#x30C3;&#x30AF;&#x30B9;&#x30E1;&#x30BF;&#x30ED;&#x30D7;&#x30ED;&#x30C6;&#x30A4;&#x30CA;&#x30FC;&#x30BC;-9&#x306E;&#x6D3B;&#x6027;&#x5316;&#x306E;&#x6A19;&#x7684;&#x7D30;&#x80DE;&#x819C;&#x3092;&#x7D4C;&#x7531;&#x3057;&#x3066;GPCR&#x30B7;&#x30B0;&#x30CA;&#x30EA;&#x30F3;&#x30B0;&#x3092;&#x4F34;&#x3046;&#x3053;&#x3068;&#x304C;&#x5224;&#x660E;&#x3057;&#x305F;&#x3002;&#x4ED6;&#x306E;&#x5831;&#x544A;&#x306B;&#x53CD;&#x3057;&#x3066;&#x3001;TQ&#x306F;&#x3001;in vitro&#x3067;&#x306A;&#x304F;&#x6297;&#x708E;&#x75C7;&#x52B9;&#x679C;&#x304C;&#x3042;&#x308A;&#x307E;&#x305B;&#x3093;&#x3067;&#x3057;&#x305F;&#x3002;&#x3053;&#x3053;&#x3067;&#x306F;&#x3001;MyD88/TLR4&#x8907;&#x200B;&#x200B;&#x5408;&#x4F53;&#x5F62;&#x6210;&#x3068;&#x305D;&#x306E;&#x5F8C;&#x306E;NF&#x3BA;B&#x306E;&#x6D3B;&#x6027;&#x5316;&#x200B;&#x200B;&#x306F;&#x3001;TQ-&#x523A;&#x6FC0;&#x30E9;&#x30A4;&#x30D6;&#x4E3B;&#x8981;&#x306A;&#x9AA8;&#x9AC4;&#xFF08;BM&#xFF09;WT&#x3068;Neu1&#x6B20;&#x640D;&#x30DE;&#x30A6;&#x30B9;&#x3001;HEK-TLR4/MD2&#x7D30;&#x80DE;&#x3068;BMC&#x304B;&#x3089;&#x306E;&#x30DE;&#x30AF;&#x30ED;&#x30D5;&#x30A1;&#x30FC;&#x30B8;&#x7D30;&#x80DE;&#x306B;&#x95A2;&#x9023;&#x4ED8;&#x3051;&#x3089;&#x308C;&#x3066;&#x3044;&#x308B;Neu4&#x6D3B;&#x52D5;&#x306B;&#x3088;&#x3063;&#x3066;&#x8A98;&#x767A;&#x3055;&#x308C;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x3092;&#x793A;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x308B;-2&#x30DE;&#x30AF;&#x30ED;&#x30D5;&#x30A1;&#x30FC;&#x30B8;&#x7D30;&#x80DE;&#x682A;&#x3067;&#x306F;&#x306A;&#x304F;Neu4&#x30CE;&#x30C3;&#x30AF;&#x30A2;&#x30A6;&#x30C8;&#x30DE;&#x30A6;&#x30B9;&#x304B;&#x3089;&#x306E;&#x4E3B;&#x306A;&#x30DE;&#x30AF;&#x30ED;&#x30D5;&#x30A1;&#x30FC;&#x30B8;&#x7D30;&#x80DE;&#x3092;&#x7528;&#x3044;&#x305F;&#x3002;&#x30BF;&#x30DF;&#x30D5;&#x30EB;&#xFF08;&#x30EA;&#x30F3;&#x9178;&#x30AA;&#x30BB;&#x30EB;&#x30BF;&#x30DF;&#x30D3;&#x30EB;&#xFF09;&#x3001;&#x767E;&#x65E5;&#x54B3;&#x6BD2;&#x7D20;&#xFF08;PTX&#xFF09;&#x3001;G&#x30BF;&#x30F3;&#x30D1;&#x30AF;&#x8CEA;&#x5171;&#x5F79;&#x53D7;&#x5BB9;&#x4F53;&#xFF08;GPCR&#xFF09;&#x3068;galardin&#x30D7;&#x30E9;&#x30A4;&#x30DE;&#x30EA;BM&#x30DE;&#x30AF;&#x30ED;&#x30D5;&#x30A1;&#x30FC;&#x30B8;&#x7D30;&#x80DE;&#x3092;&#x751F;&#x304D;&#x3066;&#x9069;&#x7528;&#x3055;&#x308C;&#x305F;&#x30DE;&#x30C8;&#x30EA;&#x30C3;&#x30AF;&#x30B9;&#x30E1;&#x30BF;&#x30ED;&#x30D7;&#x30ED;&#x30C6;&#x30A2;&#x30FC;&#x30BC;&#xFF08;MMP&#xFF09;&#x306E;&#x5E83;&#x7BC4;&#x306A;&#x963B;&#x5BB3;&#x5264;&#x306E;G&#x30BF;&#x30F3;&#x30D1;&#x30AF;&#x8CEA;&#x30BF;&#x30F3;&#x30D1;&#x30AF;&#x8CEA;&#x306E;&#x7279;&#x7570;&#x7684;&#x963B;&#x5BB3;&#x5264;&#x306F;&#x3001;&#x5B8C;&#x5168;&#x306B;&#x30D6;&#x30ED;&#x30C3;&#x30AF;TQ- MyD88/TLR4&#x8907;&#x200B;&#x200B;&#x5408;&#x4F53;&#x5F62;&#x6210;&#x3092;&#x8A98;&#x767A;&#x3057;&#x305F;&#x3002;&#x514D;&#x75AB;&#x7D30;&#x80DE;&#x5316;&#x5B66;&#x3068;&#x30A6;&#x30A7;&#x30B9;&#x30BF;&#x30F3;&#x30D6;&#x30ED;&#x30C3;&#x30C8;&#x5206;&#x6790;&#x3092;&#x4F7F;&#x7528;&#x3057;&#x3066;&#x3001;&#x30BF;&#x30DF;&#x30D5;&#x30EB;&#x3001;galardin&#x3068;PTX&#x306F;&#x3001;TQ-&#x523A;&#x6FC0;BMC-2&#x7D30;&#x80DE;&#x3001;HEK-TLR4/MD2&#x7D30;&#x80DE;&#x3068;WT&#x30DE;&#x30A6;&#x30B9;&#x304B;&#x3089;&#x306E;&#x4E3B;&#x306A;BM&#x30DE;&#x30AF;&#x30ED;&#x30D5;&#x30A1;&#x30FC;&#x30B8;&#x306B;&#x95A2;&#x9023;&#x4ED8;&#x3051;&#x3089;&#x308C;&#x3066;&#x3044;&#x308B;Neu4&#x6D3B;&#x52D5;&#x306B;&#x3088;&#x3063;&#x3066;&#x8A98;&#x5C0E;&#x3055;&#x308C;&#x308B;NF&#x3BA;B&#x6D3B;&#x6027;&#x5316;&#x3092;&#x963B;&#x5BB3;&#x3059;&#x308B;&#x3002; HEK-TLR4/MD2&#x6838;&#x7D30;&#x80DE;&#x62BD;&#x51FA;&#x7269;&#x306B;EMSA&#x5206;&#x6790;&#x3067;&#x306F;&#x3001;30&#x5206;&#x4EE5;&#x5185;&#x306B;&#x76F8;&#x6027;&#x7684;&#x306B;TQ-&#x8A98;&#x5C0E;NF&#x3BA;B&#x6D3B;&#x6027;&#x5316;&#x306E;&#x6838;&#x5C40;&#x5728;&#x3068;DNA&#x7D50;&#x5408;&#x3092;&#x78BA;&#x8A8D;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x5171;&#x514D;&#x75AB;&#x6C88;&#x964D;&#x5B9F;&#x9A13;&#x3067;&#x306F;&#x3001;MMP-9&#x306F;circuitously TLR4&#x53D7;&#x5BB9;&#x4F53;&#x3092;&#x6A19;&#x7684;&#x3068;TQ-&#x8A98;&#x5C0E;Neu4&#x6D3B;&#x6027;&#x306B;&#x91CD;&#x8981;&#x306A;&#x4E2D;&#x9593;&#x30EA;&#x30F3;&#x30AF;&#x3067;&#x3042;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x304C;&#x521D;&#x3081;&#x3066;&#x660E;&#x3089;&#x304B;&#x306B;&#x3057;&#x305F;&#x3002;&#x3053;&#x306E;&#x30D7;&#x30ED;&#x30BB;&#x30B9;&#x306E;&#x4E2D;&#x5FC3;Neu4&#x30D5;&#x30A9;&#x30FC;&#x30E0;&#x65E2;&#x306B;TLR4&#x53D7;&#x5BB9;&#x4F53;&#x306B;&#x7D50;&#x5408;&#x3055;&#x308C;&#x305F;MMP-9&#x3001;&#x3068;&#x8907;&#x96D1;&#x306A;&#x3053;&#x3068;&#x3067;&#x3042;&#x308B;&#x3002; TQ&#x3067;&#x51E6;&#x7406;&#x3055;&#x308C;&#x305F;&#x30E9;&#x30A4;&#x30D6;CD14-THP1&#x7D30;&#x80DE;&#x306E;&#x86CD;&#x5149;&#x5206;&#x5149;&#x5206;&#x6790;&#x3067;&#x306F;&#x3001;5&#x5206;&#x9593;&#x306B;&#x308F;&#x305F;&#x3063;&#x3066;Neu4&#x30B7;&#x30A2;&#x30EA;&#x30C0;&#x30FC;&#x30BC;&#x6D3B;&#x6027;&#x3092;&#x793A;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x30D5;&#x30ED;&#x30FC;&#x30B5;&#x30A4;&#x30C8;&#x30E1;&#x30C8;&#x30EA;&#x30FC;&#x89E3;&#x6790;&#x3001;15&#x5206;&#x3067;MMP9&#x306E;&#x9855;&#x8457;&#x306A;&#x6E1B;&#x5C11;&#x3092;&#x9664;&#x3044;&#x3066;30&#x5206;&#x9593;&#x304B;&#x3051;&#x3066;&#x7D30;&#x80DE;&#x8868;&#x9762;&#x4E0A;&#x306E;Neu4&#x3001;TLR4&#x3068;MMP9&#x306E;TQ&#x6025;&#x884C;&#x5B89;&#x5B9A;&#x3057;&#x305F;&#x30BF;&#x30F3;&#x30D1;&#x30AF;&#x8CEA;&#x30EC;&#x30D9;&#x30EB;&#x3067;&#x51E6;&#x7406;&#x3055;&#x308C;&#x305F;CD14-THP1&#x7D30;&#x80DE;&#x3092;&#x7528;&#x3044;&#x305F;&#x3002;&#x8840;&#x6E05;&#x4E2D;&#x306E;&#x30B5;&#x30A4;&#x30C8;&#x30AB;&#x30A4;&#x30F3;&#x30A2;&#x30EC;&#x30A4;&#x30D7;&#x30ED;&#x30D5;&#x30A1;&#x30A4;&#x30EA;&#x30F3;&#x30B0;&#x5206;&#x6790;&#x3092;&#x7528;&#x3044;&#x3066;&#x3001;Neu4&#x30CE;&#x30C3;&#x30AF;&#x30A2;&#x30A6;&#x30C8;&#x30DE;&#x30A6;&#x30B9;&#x306F;&#x3001;&#x30BB;&#x30AB;&#x30F3;&#x30C0;&#x30EA;90&#x30D1;&#x30FC;&#x30BB;&#x30F3;&#x30C8;Neu1&#x6B20;&#x640D;&#x30DE;&#x30A6;&#x30B9;&#x3068;&#x30DE;&#x30A6;&#x30B9;&#x306F;&#x91CE;&#x751F;&#x578B;&#x307E;&#x305F;&#x306F;hypomorphic&#x30AB;&#x30C6;&#x30D7;&#x30B7;&#x30F3;&#x3068;&#x6BD4;&#x8F03;&#x3057;&#x3066;5&#x6642;&#x9593;&#x306E;&#x6CBB;&#x7642;&#x5F8C;&#x306B;&#x708E;&#x75C7;&#x6027;&#x30B5;&#x30A4;&#x30C8;&#x30AB;&#x30A4;&#x30F3;&#x304A;&#x3088;&#x3073;&#x30B1;&#x30E2;&#x30AB;&#x30A4;&#x30F3;&#x306E;&#x751F;&#x7523;&#x306B;TQ&#x306B;&#x307B;&#x3068;&#x3093;&#x3069;&#x53CD;&#x5FDC;&#x3057;&#x306A;&#x3044;&#x3002;&#x4ECA;&#x56DE;&#x306E;&#x77E5;&#x898B;&#x306F;&#x3001;TQ-&#x8A98;&#x5C0E;Neu4&#x30B7;&#x30A2;&#x30EA;&#x30C0;&#x30FC;&#x30BC;&#x6D3B;&#x6027;&#x306E;&#x305F;&#x3081;&#x306E;&#x524D;&#x4F8B;&#x306E;&#x306A;&#x3044;&#x30B7;&#x30B0;&#x30CA;&#x30EB;&#x4F1D;&#x9054;&#x30D1;&#x30E9;&#x30C0;&#x30A4;&#x30E0;&#x3092;&#x78BA;&#x7ACB;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x305D;&#x308C;&#x306F;&#x3001;&#x305D;&#x306E;&#x5F8C;&#x306E;NF&#x3BA;B&#x306E;&#x6D3B;&#x6027;&#x5316;&#x200B;&#x200B;&#x3068;in vivo&#x3067;&#x306E;&#x524D;&#x708E;&#x75C7;&#x6027;&#x30B5;&#x30A4;&#x30C8;&#x30AB;&#x30A4;&#x30F3;&#x7523;&#x751F;&#x306E;&#x6A5F;&#x80FD;&#x7684;&#x53D7;&#x5BB9;&#x4F53;&#x3092;&#x751F;&#x6210;&#x3059;&#x308B;&#x305F;&#x3081;&#x306E;TQ-&#x8A98;&#x5C0E;Neu4&#x30B7;&#x30A2;&#x30EA;&#x30C0;&#x30FC;&#x30BC;&#x306E;&#x4E2D;&#x9593;&#x30EA;&#x30F3;&#x30AF;&#x3068;&#x3057;&#x3066;&#x7D30;&#x80DE;&#x5916;&#x30C9;&#x30E1;&#x30A4;&#x30F3;&#x3068;&#x884C;&#x70BA;&#x306B;&#x304A;&#x3051;&#x308B;TLR4&#x53D7;&#x5BB9;&#x4F53;&#x3068;&#x306E;&#x8907;&#x5408;&#x4F53;&#x306E;&#x91CD;&#x8981;&#x306A;&#x5206;&#x5B50;&#x30B7;&#x30B0;&#x30CA;&#x30EA;&#x30F3;&#x30B0;&#x30D7;&#x30E9;&#x30C3;&#x30C8;&#x30D5;&#x30A9;&#x30FC;&#x30E0;&#x305D;&#x306E;MMP-9&#x30D5;&#x30A9;&#x30FC;&#x30E0;&#x3092;&#x610F;&#x5473;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;

Thymoquinone&#x8A98;&#x8D77;Neu4&#x30B7;&#x30A2;&#x30EA;&#x30C0;&#x30FC;&#x30BC;&#x306F;&#x3001;&#x751F;&#x4F53;&#x5185;&#x3067;&#x30DE;&#x30AF;&#x30ED;&#x30D5;&#x30A1;&#x30FC;&#x30B8;&#x7D30;&#x80DE;&#x3068;&#x708E;&#x75C7;&#x6027;&#x30B5;&#x30A4;&#x30C8;&#x30AB;&#x30A4;&#x30F3;&#x3067;NF&#x3BA;B&#x3092;&#x30A2;&#x30AF;&#x30C6;&#x30A3;&#x30D6;&#x306B;&#x3057;&#x307E;&#x3059;

Thymoquinone (TQ) nutraceutical &#xBE14;&#xB799; &#xCEE4; &#xBBFC; &#xC624;&#xC77C;&#xC5D0;&#xC11C; &#xD30C;&#xC0DD; &#xB41C;&#xC740; &#xB77C;&#xC774;&#xBE0C; &#xC140; (Glycoconj J DOI 10.1007/s10719-010-9281-6)&#xC5D0;&#xC11C; Neu4 sialidase &#xD65C;&#xB3D9;&#xC758; &#xC0C8;&#xB85C;&#xC6B4; &#xAE38; &#xD56D; &#xC81C; &#xAC83;&#xC73C;&#xB85C; &#xBCF4;&#xACE0; &#xB418;&#xC5C8;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4;. TQ &#xD558; &#xC5EC; &#xC138;&#xD3EC; &#xD45C;&#xBA74;&#xC5D0; Neu4 sialidase&#xC758; &#xD65C;&#xC131;&#xD654; G&alpha;i &#xC18C; &#xB2E8;&#xC704; &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8; &#xB9E4;&#xD2B8;&#xB9AD;&#xC2A4; metalloproteinase 9 &#xC815;&#xD488; &#xC778;&#xC99D;&#xC758; &#xB300;&#xC0C1;&#xC73C;&#xB85C; &#xBA64;&#xBE0C;&#xB808;&#xC778;&#xC744; &#xD1B5;&#xD574; GPCR &#xC2E0;&#xD638;&#xB97C; &#xD3EC;&#xD568; &#xBC1C;&#xACAC; &#xB410;&#xB2E4;. &#xB2E4;&#xB978; &#xBCF4;&#xACE0;&#xC11C;&#xC5D0; &#xBC18;&#xD558;&#xB294; TQ &#xCCB4; &#xC678; &#xD56D; &#xC5FC;&#xC99D; &#xD6A8;&#xACFC; &#xC5C6;&#xC774; &#xD588;&#xB2E4;. &#xC5EC;&#xAE30;, &#xC6B0;&#xB9AC;&#xB294; MyD88/TLR4 &#xBCF5;&#xC7A1; &#xD55C; &#xD615;&#xC131; &#xBC0F; &#xD6C4;&#xC18D; NF&kappa;B &#xD65C;&#xC131;&#xD654; TQ &#xC790;&#xADF9; &#xB77C;&#xC774;&#xBE0C; &#xC8FC; &#xACE8; (BM) macrophage &#xC140; WT &#xBC0F; Neu1 &#xBD88;&#xCDA9;&#xBD84; &#xD55C; &#xC950;&#xC5D0;&#xC11C; m d HEK TLR4 2/&#xC140;&#xC640; BMC 2 macrophage &#xC140; &#xB77C;&#xC778; &#xD558;&#xC9C0;&#xB9CC; &#xAE30;&#xBCF8; macrophage &#xC140; Neu4 &#xB179;&#xC544;&#xC6C3; &#xB9C8;&#xC6B0;&#xC2A4;&#xC5D0;&#xC11C; &#xC5F0;&#xACB0; &#xB41C; Neu4 &#xD65C;&#xB3D9;&#xC5D0; &#xC758;&#xD574; &#xC720;&#xBC1C; &#xB429;&#xB2C8;&#xB2E4; &#xBCF4;&#xC5EC;&#xC90D;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xD0C0;&#xBBF8;&#xD50C;&#xB8E8; (oseltamivir &#xC778;&#xC0B0; &#xC5FC;), &#xBC31; &#xC77C; &#xD574; &#xB3C5; &#xC18C; (PTX), G-&#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8;&#xC758; G&alpha;i &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8;&#xC758; &#xD2B9;&#xC815; &#xC5B5;&#xC81C;&#xC81C; &#xACB0;&#xD569; &#xC218;&#xC6A9; &#xCCB4; (GPCR)&#xC640; &#xB9E4;&#xD2B8;&#xB9AD;&#xC2A4; metalloproteinase (MMP) galardin&#xC758; &#xAD11;&#xBC94;&#xC704; &#xD55C; &#xC5B5;&#xC81C;&#xC81C; &#xC8FC;&#xC694; BM macrophage &#xC140; &#xBE14;&#xB85D; &#xC644;&#xC804;&#xD788; TQ &#xC720;&#xB3C4; MyD88/TLR4 &#xBCF5;&#xC7A1; &#xD55C; &#xD615;&#xC131; &#xB77C;&#xC774;&#xBE0C;&#xC5D0; &#xC801;&#xC6A9;. Immunocytochemistry &#xC11C;&#xCABD; &#xC624; &#xC810; &#xBD84;&#xC11D;&#xC5D0; &#xC0AC;&#xC6A9; &#xD558; &#xC5EC;, &#xD0C0; &#xBBF8; &#xD50C; &#xB8E8;, galardin &#xBC0F; PTX TQ &#xC790;&#xADF9; BMC 2 &#xC804;&#xC9C0;&#xC640; HEK-TLR4/MD2 &#xC140; WT &#xC950;&#xC5D0;&#xC11C; &#xC8FC;&#xC694; BM &#xC138;&#xD3EC;&#xC640; &#xC5F0;&#xACB0; &#xB41C; Neu4 &#xD65C;&#xB3D9;&#xC5D0; &#xC758;&#xD574; &#xC720;&#xB3C4; &#xB41C; NF&kappa;B &#xD65C;&#xC131;&#xD654;&#xB97C; &#xC5B5;&#xC81C; &#xD569;&#xB2C8;&#xB2E4;. EMSA &#xBD84;&#xC11D; m d HEK TLR4 2/&#xD575; &#xC138;&#xD3EC;&#xC5D0; &#xCD94;&#xCD9C; &#xBB3C; &#xD655;&#xC778; &#xD575; &#xC9C0;&#xC5ED;&#xD654; &#xBC0F; 30 &#xBD84; Co immunoprecipitation &#xC2E4;&#xD5D8; &#xC774;&#xB0B4; &#xB098;&#xC544;&#xC84C;&#xB2E4; &#xBC29;&#xC2DD;&#xC5D0;&#xC11C; TQ &#xC720;&#xB3C4; NF&kappa;B &#xC815;&#xD488; &#xC778;&#xC99D; DNA &#xBC14;&#xC778;&#xB529; MMP 9 circuitously TLR4 &#xC218;&#xC6A9; &#xCCB4;&#xB97C; &#xB300;&#xC0C1;&#xC73C;&#xB85C; Neu4 TQ &#xC720;&#xB3C4; &#xD65C;&#xB3D9;&#xC5D0; &#xC911;&#xC694; &#xD55C; &#xC911;&#xAC04; &#xB9C1;&#xD06C; &#xB420; &#xC218; &#xC788;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4; &#xCC98;&#xC74C;&#xC73C;&#xB85C; &#xACF5;&#xAC1C;. &#xC774; &#xACFC;&#xC815;&#xC758; &#xC911;&#xC2EC; TLR4 &#xC218;&#xC6A9; &#xCCB4;&#xC5D0; &#xBC14;&#xC778;&#xB529;&#xB41C; Neu4 MMP 9, &#xC774;&#xBBF8; &#xBCF5;&#xC7A1; &#xD55C; &#xD615;&#xD0DC;. &#xB77C;&#xC774;&#xBE0C; CD14-THP1 &#xC140;&#xC758; &#xD615;&#xAD11; &#xBD84; &#xAD11; &#xAD11;&#xB3C4; &#xACC4; &#xBD84;&#xC11D;&#xC73C;&#xB85C; &#xCE58;&#xB8CC; TQ &#xD45C;&#xC2DC; Neu4 sialidase &#xD65C;&#xB3D9; 5 &#xBD84; &#xC774;&#xC0C1; &#xC0AC;&#xC6A9; &#xD558; &#xC5EC; &#xD750;&#xB984; cytometry &#xBD84;&#xC11D;, CD14-THP1 &#xC138;&#xD3EC; &#xCE58;&#xB8CC; TQ &#xC775;&#xC2A4;&#xD504;&#xB808;&#xC2A4; &#xC548;&#xC815; &#xC0DD;&#xC0B0; &#xD504;&#xB85C; &#xC5FC;&#xC99D; &#xC131; cytokines, chemokines &#xC57C;&#xC0DD;-&#xD0C0;&#xC785;&#xC5D0; &#xBE44;&#xD574; 5-h &#xCE58;&#xB8CC; &#xD6C4;&#xC5D0; TQ&#xB97C; &#xC81C;&#xB300;&#xB85C; Neu4 &#xB179;&#xC544;&#xC6C3; &#xB9C8;&#xC6B0;&#xC2A4; &#xC751;&#xB2F5; &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8; &#xC218;&#xC900;&#xC758; Neu4, TLR4 &#xBC0F; &#xC140; MMP9 &#xD45C;&#xBA74; MMP9 &#xD608; &#xCCAD; &#xBD84;&#xC11D; &#xD504;&#xB85C; &#xD30C;&#xC77C;&#xB9C1; 15 &#xBD84; &#xC0AC;&#xC6A9; cytokine &#xBC30;&#xC5F4;&#xC5D0; &#xD45C;&#xC2DC; &#xB41C; &#xAC10;&#xC18C;&#xB97C; &#xC81C;&#xC678; &#xD558; &#xACE0; 30 &#xBD84; &#xC774;&#xC0C1;, &#xB610;&#xB294; hypomorphic &#xBCF4;&#xC870; 90 %neu1 &#xACB0;&#xD54D; &#xB9C8;&#xC6B0;&#xC2A4; cathepsin A &#xC950;. &#xC6B0;&#xB9AC;&#xC758; &#xC5F0;&#xAD6C; &#xACB0;&#xACFC; TQ &#xC720;&#xB3C4; Neu4 sialidase &#xD65C;&#xB3D9;&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xC804;&#xB840; &#xC5C6;&#xB294; &#xC2E0;&#xD638; &#xD328;&#xB7EC;&#xB2E4;&#xC784;&#xC744; &#xC124;&#xC815;&#xD569;&#xB2C8;&#xB2E4;. MMP 9 TLR4 &#xC218;&#xC6A9; &#xCCB4;&#xB294; ectodomain&#xC5D0; &#xC788;&#xB294; &#xBCF5;&#xC7A1; &#xD55C;&#xC5D0;&#xC11C; &#xC911;&#xC694; &#xD55C; &#xBD84;&#xC790; &#xC2E0;&#xD638; &#xD50C;&#xB7AB;&#xD3FC;&#xC744; &#xD615;&#xC131; &#xD558; &#xACE0; &#xD6C4;&#xC18D; NF&kappa;B &#xD65C;&#xC131;&#xD654;&#xC640; &#xD504;&#xB85C;-&#xC5FC;&#xC99D; &#xC131; cytokine &#xC0DD;&#xC0B0; in vivo &#xAE30;&#xB2A5; &#xC218;&#xC6A9; &#xCCB4; &#xC0DD;&#xC131;&#xC5D0; TQ &#xC720;&#xB3C4; Neu4 sialidase&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xC911;&#xAC04; &#xB9C1;&#xD06C;&#xB85C; &#xC5ED;&#xD560;&#xC744; &#xB098;&#xD0C0;&#xB0C5;&#xB2C8;&#xB2E4;.

Neu4 sialidase Thymoquinone&#xC744; &#xC774;&#xC6A9;&#xD55C; NF&kappa;B macrophage &#xC140; &#xD504;&#xB85C; &#xC5FC;&#xC99D; &#xC131; cytokines in vivo&#xC5D0;&#xC11C; &#xD65C;&#xC131;&#xD654; &#xB429;&#xB2C8;&#xB2E4;.

Timoquinona (TQ) derivado del aceite de comino negro nutrac&#xE9;utico ha sido informado de que un agonista de la novela de la actividad sialidasa Neu4 en c&#xE9;lulas vivas (DOI 10.1007/s10719-010-9281-6 Glycoconj J). La activaci&#xF3;n de Neu4 sialidasa en la superficie celular por TQ se encontr&#xF3; que implican a GPCR se&#xF1;alizaci&#xF3;n a trav&#xE9;s de la membrana focalizaci&#xF3;n de prote&#xED;nas de las subunidades G&#x3B1;i y la matriz metaloproteinasa-9 de activaci&#xF3;n. A diferencia de otros informes, CA no tiene efectos anti-inflamatorios in vitro. Aqu&#xED;, mostramos que MyD88/TLR4 la formaci&#xF3;n de complejos y la activaci&#xF3;n de NFkB posteriores son inducidos por la actividad asociada con Neu4 TQ-estimulado la m&#xE9;dula &#xF3;sea en vivo primaria (BM) los macr&#xF3;fagos de ratones WT y deficientes Neu1, las c&#xE9;lulas HEK-TLR4/MD2 y BMC -2 l&#xED;nea celular de macr&#xF3;fagos, pero no con los macr&#xF3;fagos primarios de los ratones knock-out Neu4. Tamiflu (oseltamivir fosfato), la toxina pertussis (PTX), un inhibidor espec&#xED;fico de prote&#xED;nas G&#x3B1;i de receptor acoplado a prote&#xED;na G (GPCR) y el inhibidor de la amplia gama de metaloproteinasas de matriz (MMP) galardina aplicado en las c&#xE9;lulas primarias de los macr&#xF3;fagos BM bloquear completamente TQ- inducida MyD88/TLR4 formaci&#xF3;n del complejo. Utilizando inmunocitoqu&#xED;mica y an&#xE1;lisis de Western blot, el Tamiflu, galardina y PTX inhibir la activaci&#xF3;n de NFkB inducida por Neu4 actividad asociada con la CA-estimulado BMC-2 c&#xE9;lulas, las c&#xE9;lulas HEK-TLR4/MD2 y primaria macr&#xF3;fagos de ratones WT BM. An&#xE1;lisis de la EMSA en extractos de c&#xE9;lulas nucleares HEK-TLR4/MD2 confirmar la localizaci&#xF3;n nuclear y de uni&#xF3;n al ADN de la CA-inducida por la activaci&#xF3;n NFkB en una forma bif&#xE1;sica en 30 minutos. Co-inmunoprecipitaci&#xF3;n experimentos revelan por primera vez que la MMP-9 puede ser un enlace intermedio importante en la CA inducida Neu4 actividad tortuosamente focalizaci&#xF3;n TLR4 receptores. Centro de este proceso es que Neu4 forma un complejo con la MMP-9, que ya est&#xE1; enlazado a receptores TLR4. An&#xE1;lisis espectrofot&#xF3;metro de fluorescencia de vivos CD14-THP1 c&#xE9;lulas tratadas con TQ actividad sialidasa muestran Neu4 durante 5 min. El uso de an&#xE1;lisis de citometr&#xED;a de flujo, CD14-THP1 c&#xE9;lulas tratadas con los niveles de prote&#xED;na TQ expresas estables de Neu4, TLR4 y MMP9 en la superficie celular durante 30 minutos a excepci&#xF3;n de una marcada disminuci&#xF3;n de MMP9 a los 15 min. Utilizando an&#xE1;lisis de perfiles de citoquinas de la matriz de suero, Neu4 ratones knock-out no responden bien a la CA en la producci&#xF3;n de citoquinas pro-inflamatorias y quimiocinas despu&#xE9;s de 5-h de tratamiento en comparaci&#xF3;n con la catepsina de tipo salvaje o hypomorphic A los ratones con un intermedio 90% Neu1 ratones deficientes. Nuestros resultados establecen un paradigma sin precedentes para la se&#xF1;alizaci&#xF3;n de CA inducida por la actividad sialidasa Neu4. Significa que la MMP-9 forma una importante plataforma de se&#xF1;alizaci&#xF3;n molecular en el complejo con TLR4 receptores en el ectodominio y act&#xFA;a como el eslab&#xF3;n intermedio de CA inducida Neu4 sialidasa en la generaci&#xF3;n de un receptor funcional con la activaci&#xF3;n de NFkB posterior y pro-inflamatorias producci&#xF3;n de citoquinas in vivo.

Timoquinona inducida Neu4 sialidasa activa NFkB en las c&#xE9;lulas de los macr&#xF3;fagos y las citoquinas pro-inflamatorias en Vivo

(TLRs) &#x54FA;&#x4E73;&#x52A8;&#x7269; Toll &#x6837;&#x53D7;&#x4F53;&#x4FE1;&#x53F7;&#x901A;&#x8DEF;&#x597D;&#x7684;&#x7279;&#x70B9;&#xFF0C;&#x4F46;&#x5176;&#x4E2D; TLRs &#x88AB;&#x6FC0;&#x6D3B;&#x540E;&#x914D;&#x4F53;&#x7ED3;&#x5408;&#x4ECD;&#x5DEE;&#x5B9A;&#x4E49;&#x7684;&#x786E;&#x5207;&#x673A;&#x5236;&#x3002;&#x6700;&#x8FD1;&#xFF0C;&#x6211;&#x4EEC;&#x62A5;&#x9053;&#x4E86;&#x4E00;&#x79CD;&#x65B0;&#x578B;&#x819C;&#x553E;&#x6DB2;&#x9178;&#x9176;&#x63A7;&#x5236;&#x673A;&#x5236;&#xFF0C;&#x53D6;&#x51B3;&#x4E8E;&#x914D;&#x4F53;&#x7ED1;&#x5B9A;&#x5230;&#x5176;&#x5355;&#x53CD;&#x8BF1;&#x4F7F;&#x54FA;&#x4E73;&#x52A8;&#x7269;&#x795E;&#x7ECF;&#x6C28;&#x9178;&#x9176;-1 (Neu1) &#x7684;&#x6D3B;&#x52A8;&#xFF0C;&#x6765;&#x5F71;&#x54CD;&#x53D7;&#x4F53; desialylation &#x548C;&#x968F;&#x540E;&#x8BF1;&#x4F7F;&#x5355;&#x53CD;&#x53D7;&#x4F53;&#x6FC0;&#x6D3B;&#x548C;&#x751F;&#x4EA7;&#x7684;&#x4E00;&#x6C27;&#x5316;&#x6C2E;&#x548C;&#x708E;&#x6027;&#x7EC6;&#x80DE;&#x56E0;&#x5B50;&#x7684;&#x6811;&#x7A81;&#x72B6;&#x548C;&#x5DE8;&#x566C;&#x7EC6;&#x80DE;&#x3002;&#x5355;&#x53CD; &alpha;-2&#xFF0C;3-&#x553E;&#x6DB2;&#x6B8B;&#x7559;&#xFF0C;Neu1 &#x5C06;&#x88AB;&#x89C6;&#x4E3A;&#x6C34;&#x89E3;&#x7684;&#x5177;&#x4F53;&#x76EE;&#x6807;&#x3002;&#x5728;&#x8FD9;&#x91CC;&#xFF0C;&#x6211;&#x4EEC;&#x62A5;&#x544A;&#x4FE1;&#x53F7;&#x6A21;&#x5F0F;&#x53D1;&#x8D77;&#x7684;&#x5185;&#x6BD2;&#x7D20;&#x8102;&#x591A;&#x7CD6; (LPS) &#x7ED1;&#x5B9A;&#x5230; TLR4 &#x8981;&#x52A0;&#x5F3A; G &#x86CB;&#x767D;&#x5076;&#x8054;&#x53D7;&#x4F53; (&#x6C14;&#x76F8;) &#x4FE1;&#x53F7;&#x901A;&#x8FC7;&#x819C; G&alpha;(i) &#x4E9A;&#x57FA;&#x86CB;&#x767D;&#x548C;&#x57FA;&#x8D28;&#x91D1;&#x5C5E;&#x86CB;&#x767D;&#x9176;-9 (MMP9) &#x6FC0;&#x6D3B;&#xFF0C;&#x4FC3;&#x4F7F; Neu1 &#x819C;&#x3002;&#x4E2D;&#x592E;&#x5BF9;&#x8FD9;&#x4E00;&#x8FDB;&#x7A0B;&#x662F;&#x4E00;&#x4E2A; Neu1 MMP9 &#x590D;&#x6742;&#x7ED1;&#x5B9A;&#x5230; TLR4 &#x5E7C;&#x7A1A;&#x7684;&#x5DE8;&#x566C;&#x7EC6;&#x80DE;&#x7684;&#x7EC6;&#x80DE;&#x8868;&#x9762;&#x3002;MMP9 &#x548C;&#x6C14;&#x76F8;&#x5316;&#x5B66;&#x8FD8;&#x539F; G&alpha; (i) &#x7684;&#x7279;&#x5F02;&#x6027;&#x6291;&#x5236;-&#x4FE1;&#x53F7;&#x86CB;&#x767D;&#x8102;&#x591A;&#x7CD6;&#x8BF1;&#x5BFC;&#x7684; Neu1 &#x5757;&#x6D3B;&#x52A8;&#x548C; NF&kappa;B &#x6FC0;&#x6D3B;&#x3002;&#x6C89;&#x9ED8;&#x4F7F;&#x7528;&#x6162;&#x75C5;&#x6BD2; MMP9 shRNA &#x8F6C;&#x5BFC;&#x6216; siRNA &#x8F6C;&#x67D3;&#x7684;&#x5DE8;&#x566C;&#x7EC6;&#x80DE;&#x548C; MMP9 MMP9 mRNA &#x6572;&#x539F;&#x53D1;&#x6027;&#x5DE8;&#x566C;&#x7EC6;&#x80DE;&#x7EC6;&#x80DE;&#x663E;&#x8457;&#x51CF;&#x5C11;&#x7684; Neu1 &#x6D3B;&#x52A8;&#x548C; NF&kappa;B &#x6FC0;&#x6D3B;&#x4E0E;&#x8102;&#x591A;&#x7CD6;&#x8BF1;&#x5BFC;&#x7EC6;&#x80DE;&#x76F8;&#x5173;&#x8054;&#x3002;&#x8FD9;&#x4E9B;&#x7814;&#x7A76;&#x7ED3;&#x679C;&#x63ED;&#x793A;&#x65B0;&#x578B; Neu1 &#x548C; MMP9-&#x76F8;&#x58F0;&#x8054;&#x76DF;&#x4E0E; TLR4 &#x81F3;&#x5173;&#x91CD;&#x8981;&#x7684;&#x914D;&#x4F53;&#x6FC0;&#x6D3B;&#x7684; TLRs &#x548C;&#x968F;&#x540E;&#x7684;&#x7EC6;&#x80DE;&#x4FE1;&#x53F7;&#x8F6C;&#x5BFC;&#x7684;&#x7EC6;&#x80DE;&#x8868;&#x9762;&#x5206;&#x5B50;&#x7EC4;&#x7EC7;&#x4FE1;&#x53F7;&#x7684;&#x5E73;&#x53F0;&#x3002;

Neu1 &#x553E;&#x6DB2;&#x9178;&#x9176;&#x548C;&#x57FA;&#x8D28;&#x91D1;&#x5C5E;&#x86CB;&#x767D;&#x9176; 9 &#x76F8;&#x58F0;&#x662F; Toll &#x6837;&#x53D7;&#x4F53;&#x6FC0;&#x6D3B;&#x548C;&#x7EC6;&#x80DE;&#x4FE1;&#x53F7;&#x8F6C;&#x5BFC;&#x7684;&#x5173;&#x952E;&#x3002;

The signaling pathways of mammalian Toll-like receptors (TLRs) are well characterized, but the precise mechanism(s) by which TLRs are activated upon ligand binding remains poorly defined. Recently, we reported a novel membrane sialidase-controlling mechanism that depends on ligand binding to its TLR to induce mammalian neuraminidase-1 (Neu1) activity, to influence receptor desialylation, and subsequently to induce TLR receptor activation and the production of nitric oxide and proinflammatory cytokines in dendritic and macrophage cells. The Î±-2,3-sialyl residue of TLR was identified as the specific target for hydrolysis by Neu1. Here, we report a membrane signaling paradigm initiated by endotoxin lipopolysaccharide (LPS) binding to TLR4 to potentiate G protein-coupled receptor (GPCR) signaling via membrane GÎ±(i) subunit proteins and matrix metalloproteinase-9 (MMP9) activation to induce Neu1. Central to this process is that a Neu1-MMP9 complex is bound to TLR4 on the cell surface of naive macrophage cells. Specific inhibition of MMP9 and GPCR GÎ±(i)-signaling proteins blocks LPS-induced Neu1 activity and NFÎºB activation. Silencing MMP9 mRNA using lentivirus MMP9 shRNA transduction or siRNA transfection of macrophage cells and MMP9 knock-out primary macrophage cells significantly reduced Neu1 activity and NFÎºB activation associated with LPS-treated cells. These findings uncover a molecular organizational signaling platform of a novel Neu1 and MMP9 cross-talk in alliance with TLR4 on the cell surface that is essential for ligand activation of TLRs and subsequent cellular signaling.

Neu1 sialidase and matrix metalloproteinase-9 cross-talk is essential for Toll-like receptor activation and cellular signaling.

Les voies de signalisation de mammif&#xE8;res r&#xE9;cepteurs Toll-like (TLR) sont bien caract&#xE9;ris&#xE9;s, mais le m&#xE9;canisme pr&#xE9;cis (s) par lequel les TLR sont activ&#xE9;s lors de la liaison ligand reste mal d&#xE9;finie. R&#xE9;cemment, nous avons enregistr&#xE9; une nouvelle membrane sialidase contr&#xF4;le m&#xE9;canisme qui d&#xE9;pend de la liaison du ligand &#xE0; son TLR d&#x26;#39;induire l&#x26;#39;activit&#xE9; des mammif&#xE8;res neuraminidase-1 (Neu1), d&#x26;#39;influencer d&#xE9;sialylation r&#xE9;cepteur, et par la suite pour induire l&#x26;#39;activation des r&#xE9;cepteurs TLR et la production d&#x26;#39;oxyde nitrique et pro-inflammatoires cytokines dans les cellules dendritiques et des macrophages. Le &#x3B1;-2 ,3-sialyl r&#xE9;sidu de TLR a &#xE9;t&#xE9; identifi&#xE9;e comme la cible sp&#xE9;cifique pour l&#x26;#39;hydrolyse par Neu1. Nous rapportons ici un paradigme de signalisation initi&#xE9;e par la membrane lipopolysaccharide endotoxine (LPS) de liaison &#xE0; TLR4 pour potentialiser G r&#xE9;cepteur coupl&#xE9; aux prot&#xE9;ines (RCPG) par l&#x26;#39;interm&#xE9;diaire de signalisation membrane Ga (i) les prot&#xE9;ines de sous-unit&#xE9;s et de la matrice m&#xE9;talloprot&#xE9;inase-9 (MMP9) pour induire l&#x26;#39;activation Neu1. Au centre de ce processus, c&#x26;#39;est que un complexe Neu1-MMP9 est li&#xE9; &#xE0; TLR4 &#xE0; la surface cellulaire des cellules macrophages na&#xEF;fs. Inhibition sp&#xE9;cifique de la MMP9 et GPCR Ga (i)-prot&#xE9;ines de signalisation induite par le LPS blocs Neu1 activit&#xE9; d&#x26;#39;activation et NFkB. Taire MMP9 ARNm en utilisant des lentivirus MMP9 transduction shRNA ou transfection de siRNA de cellules macrophages et MMP9 knock-out cellules macrophages primaires consid&#xE9;rablement r&#xE9;duit l&#x26;#39;activit&#xE9; et l&#x26;#39;activation Neu1 NFKB associ&#xE9;e &#xE0; des cellules LPS-trait&#xE9;s. Ces r&#xE9;sultats d&#xE9;couvrir une plate-forme de signalisation mol&#xE9;culaire de l&#x26;#39;organisation d&#x26;#39;un roman Neu1 et MMP9 diaphonie en alliance avec TLR4 &#xE0; la surface cellulaire qui est essentiel pour l&#x26;#39;activation ligand des TLR et la suite de signalisation cellulaire.

Neu1 sialidase et Matrix Metalloproteinase-9 de la Croix-talk est essentielle pour l&#x26;#39;activation des r&#xE9;cepteurs Toll-like et de signalisation cellulaires

Die Signalwege S&auml;ugetier-Toll-Like Rezeptoren (TLRs) sind gut charakterisiert durch die TLRs bei Ligand-Bindung bleibt schlecht definierten aktiviert sind, aber die genauen Mechanismen. Vor kurzem berichteten wir einen neuartigen Membran Sialidase-Steuerung Mechanismus, der Ligand-Bindung an seine TLR S&auml;ugetier-Neuraminidase-1 (Neu1) Aktivit&auml;t, veranlassen Rezeptor Desialylation zu beeinflussen, und anschlie&szlig;end TLR-Aktivierung und die Produktion von Stickstoffmonoxid und Proinflammatory Cytokines in dendritischen induzieren abh&auml;ngt und Makrophagen-Zellen. Neu1 nannte als das spezifische Ziel der Hydrolyse &alpha;-2,3-Sialyl R&uuml;ckst&auml;nde von TLR. Hier berichten wir &uuml;ber eine Membran, die Signalisierung Paradigma von Endotoxin Lipopolysaccharid (LPS) Bindung an TLR4 um G-Protein-gekoppelter Rezeptor (GPCR) Signalisierung durch die Membran G&alpha;(i) Untereinheit Proteine und Matrix Metalloprotease-9 (MMP9) Aktivierung Neu1 induzieren potenzieren initiiert. Zentrales Element dieses Prozesses ist, dass ein Neu1-MMP9-Komplex auf der Zelloberfl&auml;che naiver Makrophagen Zellen TLR4 gebunden ist. Spezifische Hemmung der MMP9 und GPCR G&alpha; (i)-Signalisierung Proteine Bl&ouml;cke Neu1 LPS-induzierte Aktivit&auml;t und NF&kappa;B-Aktivierung. Unterdr&uuml;ckender MMP9 mRNA mit Lentiviren MMP9 ShRNA Transduktion oder SiRNA Transfektion von Zellen Makrophagen und MMP9 Zellen Knock-out-prim&auml;ren Makrophagen deutlich reduzierten Neu1 Aktivit&auml;t und NF&kappa;B-Aktivierung LPS behandelten Zellen zugeordnet. Diese Erkenntnisse aufdecken eine molekulare organisatorische Signalling Plattform &uuml;ber eine neuartige Neu1 und MMP9 Nebensprechen im B&uuml;ndnis mit TLR4 auf der Zelloberfl&auml;che, die notwendig f&uuml;r Ligand Aktivierung von TLR und nachfolgende zellulares signalisieren.

Neu1 Sialidase und Matrix-Metalloproteasen-9 Nebensprechen essentiell f&uuml;r Toll-Like-Rezeptor-Aktivierung und zellulare signalisieren.

Le vie di segnalazione dei mammiferi recettori Toll-like (TLR) sono ben caratterizzate, ma i precisi meccanismi comprendono da cui TLR sono attivati su Associazione ligando rimane scarsamente definite. Recentemente, abbiamo segnalato un meccanismo di controllo sialidasi romanzo membrana che dipende dall&#39;associazione ligando alla sua TLR per indurre l&#39;attivit&agrave; dei mammiferi neuraminidasi-1 (Neu1), per influenza del recettore desialylation e successivamente per indurre l&#39;attivazione del recettore TLR e la produzione di ossido nitrico e di citochine proinfiammatorie in dendritiche e macrofagi cellule. Il residuo di &alpha;-2,3-sialil di TLR &egrave; stato identificato come target specifici per idrolisi da Neu1. Riportiamo una segnalazione paradigma avviato legandosi endotossina lipopolisaccaride (LPS) di TLR4 per potenziare G protein-coupled receptor (GPCR) segnalazione tramite membrana G&alpha;(i) subunit&agrave; proteine e matrix metalloproteinase-9 (MMP9) attivazione per indurre Neu1 di membrana. Centrale di questo processo &egrave; che un complesso Neu1-MMP9 &egrave; associato a TLR4 sulla superficie delle cellule delle cellule naive dei macrofagi. Inibizione specifica di MMP9 e G&alpha; GPCR (i)-segnalazione attivit&agrave; blocchi Neu1 LPS-indotta di proteine e l&#39;attivazione di NF&kappa;B. Silenziamento MMP9 mRNA usando lentivirus MMP9 shRNA trasduzione o siRNA transfezione delle celle dei macrofagi e MMP9 knock-out primaria macrofago cellule significativamente ridotta attivit&agrave; Neu1 e attivazione di NF&kappa;B associati con le cellule trattate con LPS. Queste scoperte scoprono una piattaforma di segnalazione molecolare organizzativa di un romanzo Neu1 e MMP9 cross-talk in alleanza con TLR4 sulla superficie della cellula che &egrave; essenziale per l&#39;attivazione del ligando di TLR e successiva segnalazione cellulare.

Neu1 sialidasi e matrix metalloproteinase-9 cross-talk &egrave; essenziale per l&#39;attivazione del recettore Toll-like e di segnalazione cellulare.

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TLR&#x306E;&#x3B1;-2 ,3-&#x30B7;&#x30A2;&#x30EA;&#x30EB;&#x6B8B;&#x6E23;&#x3092;Neu1&#x306B;&#x3088;&#x308B;&#x52A0;&#x6C34;&#x5206;&#x89E3;&#x306E;&#x305F;&#x3081;&#x306B;&#x7279;&#x5B9A;&#x306E;&#x30BF;&#x30FC;&#x30B2;&#x30C3;&#x30C8;&#x3068;&#x3057;&#x3066;&#x540C;&#x5B9A;&#x3055;&#x308C;&#x305F;&#x3002;&#x3053;&#x3053;&#x3067;&#x306F;&#x3001;Neu1&#x3092;&#x8A98;&#x5C0E;&#x3059;&#x308B;&#x819C;G&#x3B1;&#xFF08;i&#xFF09;&#x306E;&#x30B5;&#x30D6;&#x30E6;&#x30CB;&#x30C3;&#x30C8;&#x86CB;&#x767D;&#x8CEA;&#x3068;&#x30DE;&#x30C8;&#x30EA;&#x30C3;&#x30AF;&#x30B9;&#x30E1;&#x30BF;&#x30ED;&#x30D7;&#x30ED;&#x30C6;&#x30A4;&#x30CA;&#x30FC;&#x30BC;9&#xFF08;MMP9&#xFF09;&#x306E;&#x6D3B;&#x6027;&#x5316;&#x3092;&#x4ECB;&#x3057;&#x3066;&#x30B7;&#x30B0;&#x30CA;&#x30EB;&#x4F1D;&#x9054;G&#x30BF;&#x30F3;&#x30D1;&#x30AF;&#x8CEA;&#x5171;&#x5F79;&#x578B;&#x53D7;&#x5BB9;&#x4F53;&#xFF08;GPCR&#xFF09;&#x3092;&#x5897;&#x5F37;&#x3059;&#x308B;TLR4&#x306B;&#x7D50;&#x5408;&#x3059;&#x308B;&#x30A8;&#x30F3;&#x30C9;&#x30C8;&#x30AD;&#x30B7;&#x30F3;&#x30EA;&#x30DD;&#x30DD;&#x30EA;&#x30B5;&#x30C3;&#x30AB;&#x30E9;&#x30A4;&#x30C9;&#xFF08;LPS&#xFF09;&#x306B;&#x3088;&#x3063;&#x3066;&#x958B;&#x59CB;&#x3055;&#x308C;&#x305F;&#x819C;&#x30B7;&#x30B0;&#x30CA;&#x30EB;&#x4F1D;&#x9054;&#x30D1;&#x30E9;&#x30C0;&#x30A4;&#x30E0;&#x3092;&#x5831;&#x544A;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x3053;&#x306E;&#x30D7;&#x30ED;&#x30BB;&#x30B9;&#x306E;&#x4E2D;&#x5FC3;&#x306B;&#x3042;&#x308B;&#x306E;&#x306F;&#x3001;Neu1&#x3001;MMP9&#x8907;&#x5408;&#x4F53;&#x306F;&#x30CA;&#x30A4;&#x30FC;&#x30D6;&#x306A;&#x30DE;&#x30AF;&#x30ED;&#x30D5;&#x30A1;&#x30FC;&#x30B8;&#x7D30;&#x80DE;&#x306E;&#x7D30;&#x80DE;&#x8868;&#x9762;&#x4E0A;&#x306E;TLR4&#x306B;&#x30D0;&#x30A4;&#x30F3;&#x30C9;&#x3055;&#x308C;&#x3066;&#x3044;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x3067;&#x3059;&#x3002;&#x7279;&#x5B9A;&#x306E;MMP9&#x306E;&#x963B;&#x5BB3;&#x3068;GPCRG&#x3B1;&#xFF08;I&#xFF09;&#x306E;&#x30B7;&#x30B0;&#x30CA;&#x30EB;&#x4F1D;&#x9054;&#x30BF;&#x30F3;&#x30D1;&#x30AF;&#x8CEA;&#x306E;&#x30D6;&#x30ED;&#x30C3;&#x30AF;LPS&#x8A98;&#x767A;Neu1&#x6D3B;&#x6027;&#x3068;NF&#x3BA;B&#x306E;&#x6D3B;&#x6027;&#x5316;&#x200B;&#x200B;&#x3002;&#x30DE;&#x30AF;&#x30ED;&#x30D5;&#x30A1;&#x30FC;&#x30B8;&#x7D30;&#x80DE;&#x304A;&#x3088;&#x3073;MMP9&#x30CE;&#x30C3;&#x30AF;&#x30A2;&#x30A6;&#x30C8;&#x4E3B;&#x30DE;&#x30AF;&#x30ED;&#x30D5;&#x30A1;&#x30FC;&#x30B8;&#x7D30;&#x80DE;&#x306E;&#x30EC;&#x30F3;&#x30C1;&#x30A6;&#x30A4;&#x30EB;&#x30B9;MMP9&#x306E;shRNA&#x5C0E;&#x5165;&#x3084;siRNA&#x30C8;&#x30E9;&#x30F3;&#x30B9;&#x30D5;&#x30A7;&#x30AF;&#x30B7;&#x30E7;&#x30F3;&#x3092;&#x4F7F;&#x7528;&#x3057;&#x3066;&#x30B5;&#x30A4;&#x30EC;&#x30F3;MMP9&#x767A;&#x73FE;&#x306F;&#x6709;&#x610F;&#x306B;LPS&#x51E6;&#x7406;&#x3057;&#x305F;&#x7D30;&#x80DE;&#x306B;&#x95A2;&#x9023;&#x4ED8;&#x3051;&#x3089;&#x308C;&#x3066;&#x3044;&#x308B;Neu1&#x6D3B;&#x6027;&#x3068;NF&#x3BA;B&#x306E;&#x6D3B;&#x6027;&#x5316;&#x200B;&#x200B;&#x3092;&#x6E1B;&#x5C11;&#x3055;&#x305B;&#x305F;&#x3002;&#x3053;&#x308C;&#x3089;&#x306E;&#x77E5;&#x898B;&#x306F;&#x3001;&#x5C0F;&#x8AAC;Neu1&#x304A;&#x3088;&#x3073;MMP9 TLR&#x304A;&#x3088;&#x3073;&#x305D;&#x306E;&#x5F8C;&#x306E;&#x7D30;&#x80DE;&#x5185;&#x30B7;&#x30B0;&#x30CA;&#x30EB;&#x4F1D;&#x9054;&#x306E;&#x30EA;&#x30AC;&#x30F3;&#x30C9;&#x6D3B;&#x6027;&#x5316;&#x306B;&#x5FC5;&#x9808;&#x3067;&#x3042;&#x308B;&#x7D30;&#x80DE;&#x8868;&#x9762;&#x4E0A;&#x306E;TLR4&#x3068;&#x306E;&#x63D0;&#x643A;&#x3067;&#x30AF;&#x30ED;&#x30B9;&#x30C8;&#x30FC;&#x30AF;&#x306E;&#x5206;&#x5B50;&#x7D44;&#x7E54;&#x30B7;&#x30B0;&#x30CA;&#x30EA;&#x30F3;&#x30B0;&#x30D7;&#x30E9;&#x30C3;&#x30C8;&#x30D5;&#x30A9;&#x30FC;&#x30E0;&#x3092;&#x660E;&#x3089;&#x304B;&#x306B;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;

Neu1&#x30B7;&#x30A2;&#x30EA;&#x30C0;&#x30FC;&#x30BC;&#x3068;&#x30DE;&#x30C8;&#x30EA;&#x30C3;&#x30AF;&#x30B9;&#x30E1;&#x30BF;&#x30ED;-9&#x30AF;&#x30ED;&#x30B9;&#x30C8;&#x30FC;&#x30AF;&#x306F;&#x3001;Toll&#x69D8;&#x53D7;&#x5BB9;&#x4F53;&#x306E;&#x6D3B;&#x6027;&#x5316;&#x3068;&#x7D30;&#x80DE;&#x5185;&#x30B7;&#x30B0;&#x30CA;&#x30EB;&#x4F1D;&#x9054;&#x306B;&#x5FC5;&#x9808;&#x3067;&#x3042;&#x308B;

&#xD3EC;&#xC720;&#xB958; &#xC218;&#xC2E0;&#xC790; &#xAC19;&#xC740; &#xC218;&#xC6A9; &#xCCB4; (TLRs)&#xC758; &#xC2E0;&#xD638; &#xACBD;&#xB85C; ligand &#xBC14;&#xC778;&#xB529; &#xC720;&#xACE8; &#xAC00;&#xB09C; &#xD558; &#xAC8C; &#xC815;&#xC758; &#xB41C; &#xB530;&#xB77C; Tlrs&#xC744; &#xD65C;&#xC131;&#xD654; &#xD558;&#xB294; &#xC815;&#xD655;&#xD55C; &#xC7A5;&#xCE58;&#xB97C; &#xB9C8;&#xB354;&#xBCF4;&#xB4DC;&#xC5D0; &#xC788;&#xC9C0;&#xB9CC; &#xC798; &#xD2B9;&#xC9D5;. &#xCD5C;&#xADFC;, &#xC6B0;&#xB9AC; &#xBCF4;&#xACE0; ligand &#xBC14;&#xC778;&#xB529; &#xD3EC;&#xC720;&#xB958; &#xC751;&#xC9D1;-1 (Neu1) &#xD65C;&#xB3D9;&#xC744; &#xC720;&#xB3C4; &#xD558;&#xB294; TLR &#xC218;&#xC6A9; &#xCCB4; desialylation&#xC5D0; &#xC601;&#xD5A5;&#xC744; &#xD558; &#xACE0; &#xC774;&#xD6C4;&#xC5D0; TLR &#xC218;&#xC6A9; &#xCCB4; &#xD65C;&#xC131;&#xD654; &#xBC0F; &#xC9C8;&#xC18C; &#xC0B0;&#xD654;&#xBB3C;&#xACFC; &#xC218;&#xC9C0;&#xC0C1;&#xC5D0; proinflammatory cytokines&#xC758; &#xC0DD;&#xC0B0;&#xC744; &#xC720;&#xB3C4; &#xD558;&#xB294; &#xC18C;&#xC124; &#xB9C9; sialidase &#xC81C;&#xC5B4; &#xBA54;&#xCEE4;&#xB2C8;&#xC998; &#xBC0F; macrophage &#xC140;. TLR&#xC758; &alpha;-2, 3-sialyl &#xC794;&#xB958;&#xBB3C;&#xC740; neu1&#xC5D0; &#xC758;&#xD574; &#xAC00;&#xC218;&#xBD84;&#xD574;&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xD2B9;&#xC815; &#xB300;&#xC0C1;&#xC73C;&#xB85C; &#xD655;&#xC778; &#xB418;&#xC5C8;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xC5EC;&#xAE30;, &#xC6B0;&#xB9AC; &#xBCF4;&#xACE0; &#xB9C9; &#xD328;&#xB7EC;&#xB2E4;&#xC784; &#xC218;&#xC6A9; G &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8; &#xACB0;&#xD569; &#xCCB4; (GPCR) Neu1 &#xC720;&#xB3C4; &#xB9C9; G&alpha;(i) &#xC18C; &#xB2E8;&#xC704; &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8; &#xBC0F; &#xB9E4;&#xD2B8;&#xB9AD;&#xC2A4; metalloproteinase-9 (MMP9)&#xB97C; &#xC815;&#xD488; &#xC778;&#xC99D;&#xC744; &#xD1B5;&#xD574; &#xC2E0;&#xD638; &#xC57D;&#xD6A8; TLR4 &#xC120;&#xCC98;&#xB9AC; lipopolysaccharide (LPS) &#xBC14;&#xC778;&#xB529;&#xD558;&#xC5EC; &#xC2DC;&#xC791; &#xC2E0;&#xD638;. &#xC774; &#xACFC;&#xC815;&#xC5D0; &#xC911;&#xC559;&#xC740; &#xC21C;&#xC9C4;&#xD55C; macrophage &#xC140;&#xC758; &#xC138;&#xD3EC; &#xD45C;&#xBA74;&#xC5D0; tlr4&#xC5D0; Neu1 MMP9 &#xBCF5;&#xC7A1; &#xD55C; &#xBC14;&#xC778;&#xB529;&#xB41C;. &#xD2B9;&#xC815; &#xD55C; &#xC5B5;&#xC81C; MMP9 &#xBC0F; GPCR G&alpha; (i)-NF&kappa;B &#xD65C;&#xC131;&#xD654; &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8; &#xBE14;&#xB85D; Neu1 LPS-&#xC720;&#xBC1C; &#xD65C;&#xB3D9; &#xC2E0;&#xD638;. &#xC785;&#xC744; MMP9 Mrna&#xC758; macrophage &#xC804;&#xC9C0;&#xC640; MMP9 lentivirus MMP9 shRNA &#xBCC0;&#xD658; &#xB610;&#xB294; siRNA transfection&#xB97C; &#xC0AC;&#xC6A9; &#xD558; &#xC5EC; &#xB178;&#xD06C; &#xC544;&#xC6C3; &#xAE30;&#xBCF8; macrophage &#xD604;&#xC800; &#xD558; &#xAC8C; &#xAC10;&#xC18C; &#xB41C; Neu1 &#xD65C;&#xB3D9; &#xBC0F; NF&kappa;B &#xD65C;&#xC131;&#xD654; &#xC140; LPS &#xCC98;&#xB9AC;&#xC640; &#xAD00;&#xB828; &#xB41C; &#xC138;&#xD3EC;. &#xC774;&#xB7EC;&#xD55C; &#xC5F0;&#xAD6C; &#xACB0;&#xACFC; &#xC18C;&#xC124; Neu1 &#xBC0F; MMP9 &#xC7A1;&#xB2F4; TLR4 Tlrs&#xC640; &#xD6C4;&#xC18D; &#xC140;&#xB8F0;&#xB7EC; &#xC2E0;&#xD638;&#xC758; &#xB9AC;&#xAC04;&#xB4DC; &#xD65C;&#xC131;&#xD654;&#xC5D0; &#xD544;&#xC218;&#xC801;&#xC778; &#xC138;&#xD3EC; &#xD45C;&#xBA74;&#xC5D0; &#xC81C;&#xD734;&#xC5D0;&#xC11C;&#xC758; &#xBD84;&#xC790; &#xC870;&#xC9C1; &#xC2E0;&#xD638; &#xD50C;&#xB7AB;&#xD3FC;&#xC744; &#xBC1D;&#xD788;&#xAE30;.

Neu1 sialidase &#xB9E4;&#xD2B8;&#xB9AD;&#xC2A4; metalloproteinase 9 &#xD06C;&#xB85C;&#xC2A4; &#xD1A0;&#xD06C; &#xC218;&#xC2E0;&#xC790; &#xAC19;&#xC740; &#xC218;&#xC6A9; &#xCCB4; &#xD65C;&#xC131;&#xD654; &#xBC0F; &#xC140;&#xB8F0;&#xB7EC; &#xC2E0;&#xD638;&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xD544;&#xC218;&#xC801;&#xC785;&#xB2C8;&#xB2E4;.

Las v&#xED;as de se&#xF1;alizaci&#xF3;n de los mam&#xED;feros receptores Toll-like (TLRs) est&#xE1;n bien caracterizados, pero el mecanismo exacto (s) por el cual se activan los TLR en la uni&#xF3;n del ligando sigue estando mal definido. Recientemente, se inform&#xF3; de una membrana nueva sialidasa de control de mecanismo que depende de la uni&#xF3;n del ligando a su TLR para inducir la actividad de mam&#xED;feros neuraminidasa-1 (Neu1), para influir en desialilaci&#xF3;n receptor, y posteriormente para inducir la activaci&#xF3;n de TLR receptor y la producci&#xF3;n de &#xF3;xido n&#xED;trico y proinflamatorios citocinas en las c&#xE9;lulas dendr&#xED;ticas y los macr&#xF3;fagos. La &#x3B1;-2 ,3-sialil residuo de TLR fue identificado como el objetivo espec&#xED;fico para la hidr&#xF3;lisis por Neu1. Aqu&#xED; se presenta un paradigma de la membrana de se&#xF1;alizaci&#xF3;n iniciada por lipopolisac&#xE1;rido endotoxina (LPS) de la uni&#xF3;n a TLR4 para potenciar la prote&#xED;na G-receptor acoplado (GPCR) de se&#xF1;alizaci&#xF3;n a trav&#xE9;s de la membrana G&#x3B1; (i) prote&#xED;nas de las subunidades y metaloproteinasas de matriz-9 (MMP9) para inducir la activaci&#xF3;n Neu1. Central para este proceso es que un complejo Neu1-MMP9 est&#xE1; obligado a TLR4 en la superficie celular de c&#xE9;lulas macr&#xF3;fagas ingenuas. La inhibici&#xF3;n espec&#xED;fica de MMP9 y G&#x3B1; GPCR (i)-prote&#xED;nas de se&#xF1;alizaci&#xF3;n bloques inducida por LPS Neu1 actividad y la activaci&#xF3;n NFkB. Silenciar MMP9 ARNm utilizando lentivirus shRNA MMP9 transducci&#xF3;n o transfecci&#xF3;n de siRNA de los macr&#xF3;fagos y MMP9 knock-out macr&#xF3;fagos primarios redujo significativamente la actividad Neu1 y la activaci&#xF3;n de NFkB asociado con las c&#xE9;lulas tratadas con LPS. Estos resultados descubren una plataforma molecular de se&#xF1;alizaci&#xF3;n de organizaci&#xF3;n de una novela Neu1 y MMP9 cross-talk, en alianza con TLR4 en la superficie celular, que es esencial para la activaci&#xF3;n de los TLRs ligando y la se&#xF1;alizaci&#xF3;n celular posterior.

Neu1 sialidasa y metaloproteinasas de la matriz-9 Diafon&#xED;a es esencial para la activaci&#xF3;n del receptor Toll-like y la se&#xF1;alizaci&#xF3;n celular

Trisha Finlay

Department of Microbiology and Immunology

Queen's University - Kingston, Ontario

Detection of Neu1 Sialidase Activity in Regulating TOLL-like Receptor Activation