the-use-sc1-pluripotin-to-support-mesc-self-renewal-absence

The use of SC1 (Pluripotin) to Support mESC Self-renewal in the Absence of LIF

Mouse embryonic stem (ES) cells are conventionally cultured with Leukemia Inhibitory Factor (LIF) to maintain self-renewal.1 However, LIF is expensive and ...

generation-induced-pluripotent-stem-cells-reprogramming-human

Generation of Induced Pluripotent Stem Cells by Reprogramming Human Fibroblasts with the Stemgent Human TF Lentivirus Set

In 2006, Yamanaka and colleagues first demonstrated that retrovirus-mediated delivery and expression of Oct4, Sox2, c-Myc and Klf4 is capable of inducing ...

Stemgent

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&#x9006;&#x8F6C;&#x5F55;&#x75C5;&#x6BD2;&#x6D88;&#x58F0;&#x5668;&#x963B;&#x65AD;&#x53D7; cHS4 &#x7EDD;&#x7F18;&#x5B50;&#x662F;&#x72EC;&#x7ACB; ctcf &#x7ED3;&#x6784;&#x57DF;&#x3002;

Silencing of retrovirus vectors poses a significant obstacle to genetic manipulation of stem cells and their use in gene therapy. We describe a mammalian silencer blocking assay using insulator elements positioned between retrovirus silencer elements and an LCRbeta-globin reporter transgene. In transgenic mice, we show that retrovirus silencers are blocked by the cHS4 insulator. Silencer blocking is independent of the CTCF binding site and is most effective when flanking the internal reporter transgene. These data distinguish silencer blocking activity by cHS4 from its enhancer blocking activity. Retrovirus vectors can be created at high titer with one but not two internal dimer cHS4 cores. cHS4 in the LTRs has no effect on expression in transduced F9 cells, suggesting that position effect blocking is not sufficient to escape silencing. The Drosophila insulators gypsy and Scs fail to block silencing in transgenic mice, but gypsy stimulates vector expression 2-fold when located in the LTRs of an infectious retrovirus. The silencer blocking assay complements existing insulator assays in mammalian cells, provides new insight into mechanisms of insulation and is a valuable tool to identify additional silencer blocking insulators that cooperate with cHS4 to improve stem cell retrovirus vector design.

Retrovirus silencer blocking by the cHS4 insulator is CTCF independent.

Taire de vecteurs r&#xE9;troviraux pose un obstacle important &#xE0; la manipulation g&#xE9;n&#xE9;tique des cellules souches et leur utilisation en th&#xE9;rapie g&#xE9;nique. Nous d&#xE9;crivons un dosage silencieux mammif&#xE8;res de blocage en utilisant des &#xE9;l&#xE9;ments d&#x26;#39;isolateurs positionn&#xE9;s entre les &#xE9;l&#xE9;ments silencieux r&#xE9;trovirus et un transg&#xE8;ne rapporteur LCRbeta-globine. Chez les souris transg&#xE9;niques, nous montrons que silencieux r&#xE9;trovirus sont bloqu&#xE9;s par l&#x26;#39;isolant chs4. Silencieux blocage est ind&#xE9;pendant du site FCCT contraignant et est plus efficace lorsque flanquant le transg&#xE8;ne rapporteur interne. Ces donn&#xE9;es distinguer l&#x26;#39;activit&#xE9; silencieux blocage par chs4 de son amplificateur de blocage de l&#x26;#39;activit&#xE9;. Vecteurs r&#xE9;troviraux peuvent &#xEA;tre cr&#xE9;&#xE9;s &#xE0; un titre &#xE9;lev&#xE9; avec un, mais pas deux internes dim&#xE8;res chs4 noyaux. chs4 dans les LTR n&#x26;#39;a aucun effet sur l&#x26;#39;expression dans les cellules transduites F9, ce qui sugg&#xE8;re que l&#x26;#39;effet de position de blocage n&#x26;#39;est pas suffisant pour &#xE9;chapper &#xE0; r&#xE9;duire au silence. La boh&#xE9;mienne Drosophila isolateurs et Scs ne parviennent pas &#xE0; bloquer les silencing chez les souris transg&#xE9;niques, mais gitane stimule le vecteur d&#x26;#39;expression de 2 fois lorsqu&#x26;#39;ils sont situ&#xE9;s dans les LTR d&#x26;#39;un r&#xE9;trovirus infectieux. Le dosage de blocage silencieux compl&#xE8;te les tests isolants dans les cellules de mammif&#xE8;res, donne un nouvel aper&#xE7;u des m&#xE9;canismes d&#x26;#39;isolation et constitue un outil pr&#xE9;cieux pour identifier les silencieux de blocage suppl&#xE9;mentaire isolateurs qui coop&#xE8;rent avec chs4 pour am&#xE9;liorer les cellules souches vecteur r&#xE9;troviral de conception.

Silencieux r&#xE9;trovirus Blocage par l&#x26;#39;isolateur est chs4 FCCT ind&#xE9;pendant

Retrovirus Schalld&#xE4;mpfer Blockierung durch die cHS4 Isolator ist CTCF unabh&#xE4;ngig.

Silenziamento di retrovirus vettori pose un ostacolo significativo alla manipolazione genetica delle cellule staminali e il loro uso in terapia genica. Descriviamo un silenziatore mammiferi blocco dosaggio utilizzando elementi isolante posizionati tra gli elementi di retrovirus silenziatore e un transgene reporter LCRbeta-globina. Nei topi transgenici, mostriamo che silenziatori retrovirus sono bloccati da isolante cHS4. Blocco silenziatore &egrave; indipendente del sito di legame di CTCF ed &egrave; pi&ugrave; efficacia quando che fiancheggiano il transgene reporter interno. Questi dati distinguono attivit&agrave; blocco silenziatore da cHS4 dalla sua attivit&agrave; di blocco enhancer. Vettori di retrovirus possono essere creati in alto titolo con uno ma non due nuclei cHS4 dimero interna. cHS4 nei litri non ha alcun effetto sull&#39;espressione in cellule trasdotte F9, suggerendo che posizione effetto bloccante non &egrave; sufficiente per sfuggire a tacere. La drosofila isolatori zingara e Scs non riescono a bloccare il silenziamento nei topi transgenici, ma zingara stimola espressione vettoriale 2 volte quando si trova in litri di un retrovirus infettive. I silenziatore blocco dosaggio complementi isolante esistente assays in cellule di mammifero, fornisce una nuova visione in meccanismi di isolamento ed &egrave; un prezioso strumento per identificare isolatori blocco silenziatore supplementare che collaborano con cHS4 per migliorare la cellula formativa retrovirus vector design.

Silenziatore retrovirus blocco da isolatore cHS4 &egrave; CTCF indipendente.

&#x30EC;&#x30C8;&#x30ED;&#x30A6;&#x30A4;&#x30EB;&#x30B9;&#x30D9;&#x30AF;&#x30BF;&#x30FC;&#x306E;&#x30B5;&#x30A4;&#x30EC;&#x30F3;&#x30B7;&#x30F3;&#x30B0;&#x306F;&#x3001;&#x5E79;&#x7D30;&#x80DE;&#x3068;&#x907A;&#x4F1D;&#x5B50;&#x6CBB;&#x7642;&#x306B;&#x304A;&#x3051;&#x308B;&#x305D;&#x308C;&#x3089;&#x306E;&#x4F7F;&#x7528;&#x306E;&#x907A;&#x4F1D;&#x5B50;&#x64CD;&#x4F5C;&#x306B;&#x91CD;&#x5927;&#x306A;&#x969C;&#x5BB3;&#x3092;&#x5F15;&#x304D;&#x8D77;&#x3053;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x6211;&#x3005;&#x306F;&#x30EC;&#x30C8;&#x30ED;&#x30A6;&#x30A4;&#x30EB;&#x30B9;&#x30B5;&#x30A4;&#x30EC;&#x30F3;&#x30B5;&#x30FC;&#x8981;&#x7D20;&#x3068;LCRbeta-&#x30B0;&#x30ED;&#x30D3;&#x30F3;&#x30EC;&#x30DD;&#x30FC;&#x30BF;&#x30FC;&#x907A;&#x4F1D;&#x5B50;&#x3068;&#x306E;&#x9593;&#x306B;&#x4F4D;&#x7F6E;&#x3059;&#x308B;&#x7D76;&#x7E01;&#x4F53;&#x8981;&#x7D20;&#x3092;&#x4F7F;&#x7528;&#x3057;&#x3066;&#x3001;&#x54FA;&#x4E73;&#x985E;&#x306E;&#x30B5;&#x30A4;&#x30EC;&#x30F3;&#x30B5;&#x30FC;&#x30D6;&#x30ED;&#x30C3;&#x30AD;&#x30F3;&#x30B0;&#x30A2;&#x30C3;&#x30BB;&#x30A4;&#x3092;&#x8AAC;&#x660E;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x30C8;&#x30E9;&#x30F3;&#x30B9;&#x30B8;&#x30A7;&#x30CB;&#x30C3;&#x30AF;&#x30DE;&#x30A6;&#x30B9;&#x3067;&#x306F;&#x3001;&#x6211;&#x3005;&#x306F;&#x30EC;&#x30C8;&#x30ED;&#x30A6;&#x30A4;&#x30EB;&#x30B9;&#x30B5;&#x30A4;&#x30EC;&#x30F3;&#x30B5;&#x30FC;&#x304C;cHS4&#x7D76;&#x7E01;&#x4F53;&#x3067;&#x30D6;&#x30ED;&#x30C3;&#x30AF;&#x3055;&#x308C;&#x3066;&#x3044;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x3092;&#x793A;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x308B;&#x3002;&#x30B5;&#x30A4;&#x30EC;&#x30F3;&#x30B5;&#x30FC;&#x30D6;&#x30ED;&#x30C3;&#x30AD;&#x30F3;&#x30B0;&#x306F;CTCF&#x7D50;&#x5408;&#x90E8;&#x4F4D;&#x3068;&#x306F;&#x72EC;&#x7ACB;&#x3057;&#x3066;&#x304A;&#x308A;&#x3001;&#x5185;&#x90E8;&#x306E;&#x30EC;&#x30DD;&#x30FC;&#x30BF;&#x30FC;&#x907A;&#x4F1D;&#x5B50;&#x306B;&#x96A3;&#x63A5;&#x3059;&#x308B;&#x5834;&#x5408;&#x306B;&#x6700;&#x3082;&#x52B9;&#x679C;&#x304C;&#x3042;&#x308A;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x3053;&#x308C;&#x3089;&#x306E;&#x30C7;&#x30FC;&#x30BF;&#x306F;&#x3001;&#x305D;&#x306E;&#x30A8;&#x30F3;&#x30CF;&#x30F3;&#x30B5;&#x30FC;&#x30D6;&#x30ED;&#x30C3;&#x30AD;&#x30F3;&#x30B0;&#x6D3B;&#x6027;&#x304B;&#x3089;cHS4&#x3067;&#x30B5;&#x30A4;&#x30EC;&#x30F3;&#x30B5;&#x30FC;&#x30D6;&#x30ED;&#x30C3;&#x30AD;&#x30F3;&#x30B0;&#x30A2;&#x30AF;&#x30C6;&#x30A3;&#x30D3;&#x30C6;&#x30A3;&#x3092;&#x533A;&#x5225;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x30EC;&#x30C8;&#x30ED;&#x30A6;&#x30A4;&#x30EB;&#x30B9;&#x30D9;&#x30AF;&#x30BF;&#x30FC;&#x306F;&#x3001;1&#x3067;&#x306F;&#x306A;&#x304F;&#x4E8C;&#x3064;&#x306E;&#x5185;&#x90E8;&#x30C0;&#x30A4;&#x30DE;&#x30FC;cHS4&#x30B3;&#x30A2;&#x3067;&#x9AD8;&#x529B;&#x4FA1;&#x3067;&#x4F5C;&#x6210;&#x3059;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x304C;&#x3067;&#x304D;&#x307E;&#x3059;&#x3002; LTR&#x306E;&#x3067;cHS4&#x306F;&#x3001;&#x30D6;&#x30ED;&#x30C3;&#x30AD;&#x30F3;&#x30B0;&#x4F4D;&#x7F6E;&#x306E;&#x52B9;&#x679C;&#x306F;&#x30B5;&#x30A4;&#x30EC;&#x30F3;&#x8131;&#x51FA;&#x3059;&#x308B;&#x306E;&#x306B;&#x5341;&#x5206;&#x3067;&#x306F;&#x306A;&#x3044;&#x3053;&#x3068;&#x3092;&#x793A;&#x5506;&#x3057;&#x3001;F9&#x7D30;&#x80DE;&#x3092;&#x5F62;&#x8CEA;&#x5C0E;&#x5165;&#x306B;&#x304A;&#x3051;&#x308B;&#x767A;&#x73FE;&#x306B;&#x5F71;&#x97FF;&#x3092;&#x200B;&#x200B;&#x4E0E;&#x3048;&#x307E;&#x305B;&#x3093;&#x3002;&#x30B7;&#x30E7;&#x30A6;&#x30B8;&#x30E7;&#x30A6;&#x30D0;&#x30A8;&#x306E;&#x7D76;&#x7E01;&#x4F53;&#x306E;&#x30B8;&#x30D7;&#x30B7;&#x30FC;&#x3068;SCS&#x306F;&#x3001;&#x30C8;&#x30E9;&#x30F3;&#x30B9;&#x30B8;&#x30A7;&#x30CB;&#x30C3;&#x30AF;&#x30DE;&#x30A6;&#x30B9;&#x3067;&#x306E;&#x30B5;&#x30A4;&#x30EC;&#x30F3;&#x30B7;&#x30F3;&#x30B0;&#x3092;&#x30D6;&#x30ED;&#x30C3;&#x30AF;&#x3059;&#x308B;&#x305F;&#x3081;&#x306B;&#x5931;&#x6557;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x304C;&#x3001;&#x611F;&#x67D3;&#x6027;&#x30EC;&#x30C8;&#x30ED;&#x30A6;&#x30A4;&#x30EB;&#x30B9;&#x306E;LTR&#x306E;&#x306B;&#x4F4D;&#x7F6E;&#x3057;&#x305F;&#x3068;&#x304D;&#x306B;&#x30B8;&#x30D7;&#x30B7;&#x30FC;&#x306F;&#x3001;2&#x500D;&#x306E;&#x30D9;&#x30AF;&#x30C8;&#x30EB;&#x8868;&#x73FE;&#x3092;&#x523A;&#x6FC0;&#x3059;&#x308B;&#x3002;&#x30B5;&#x30A4;&#x30EC;&#x30F3;&#x30B5;&#x30FC;&#x30D6;&#x30ED;&#x30C3;&#x30AD;&#x30F3;&#x30B0;&#x30A2;&#x30C3;&#x30BB;&#x30A4;&#x3067;&#x306F;&#x3001;&#x54FA;&#x4E73;&#x52D5;&#x7269;&#x7D30;&#x80DE;&#x306B;&#x5B58;&#x5728;&#x3059;&#x308B;&#x7D76;&#x7E01;&#x4F53;&#x30A2;&#x30C3;&#x30BB;&#x30A4;&#x3092;&#x88DC;&#x5B8C;&#x3059;&#x308B;&#x65AD;&#x71B1;&#x306E;&#x30E1;&#x30AB;&#x30CB;&#x30BA;&#x30E0;&#x306B;&#x65B0;&#x3057;&#x3044;&#x6D1E;&#x5BDF;&#x3092;&#x63D0;&#x200B;&#x200B;&#x4F9B;&#x3057;&#x3001;&#x5E79;&#x7D30;&#x80DE;&#x306E;&#x30EC;&#x30C8;&#x30ED;&#x30A6;&#x30A4;&#x30EB;&#x30B9;&#x30D9;&#x30AF;&#x30BF;&#x30FC;&#x306E;&#x8A2D;&#x8A08;&#x3092;&#x6539;&#x5584;&#x3059;&#x308B;&#x305F;&#x3081;&#x306B;cHS4&#x3068;&#x5354;&#x529B;&#x7D76;&#x7E01;&#x4F53;&#x3092;&#x906E;&#x65AD;&#x3059;&#x308B;&#x8FFD;&#x52A0;&#x306E;&#x30B5;&#x30A4;&#x30EC;&#x30F3;&#x30B5;&#x30FC;&#x3092;&#x8B58;&#x5225;&#x3059;&#x308B;&#x305F;&#x3081;&#x306E;&#x8CB4;&#x91CD;&#x306A;&#x30C4;&#x30FC;&#x30EB;&#x3067;&#x3059;&#x3002;

CHS4&#x30A4;&#x30F3;&#x30B7;&#x30E5;&#x30EC;&#x30FC;&#x30BF;&#x306B;&#x3088;&#x308B;&#x906E;&#x65AD;&#x30EC;&#x30C8;&#x30ED;&#x30B5;&#x30A4;&#x30EC;&#x30F3;&#x30B5;&#x30FC;&#x306F;CTCF&#x72EC;&#x7ACB;&#x3067;&#x3059;&#x3002;

&#xB808;&#xD2B8;&#xB85C; &#xBC14;&#xC774;&#xB7EC;&#xC2A4; &#xBCA1;&#xD130; &#xD3EC;&#xC988;&#xC758; &#xC785;&#xC744; &#xC720;&#xC804;&#xC790; &#xC870;&#xC791;, &#xC904;&#xAE30; &#xC138;&#xD3EC; &#xBC0F; &#xC720;&#xC804;&#xC790; &#xCE58;&#xB8CC;&#xC5D0; &#xADF8;&#xB4E4;&#xC758; &#xC0AC;&#xC6A9;&#xC758; &#xC911;&#xC694; &#xD55C; &#xC7A5;&#xC560;&#xBB3C;. &#xC6B0;&#xB9AC; &#xD3EC;&#xC720;&#xB958; &#xC18C;&#xC74C; &#xCC28;&#xB2E8; &#xB808;&#xD2B8; &#xC18C;&#xC74C; &#xC694;&#xC18C;&#xC640; LCRbeta globin &#xB9AC;&#xD3EC;&#xD130; transgene &#xC0AC;&#xC774; &#xC808;&#xC5F0;&#xCCB4; &#xC694;&#xC18C;&#xB97C; &#xC0AC;&#xC6A9; &#xD558; &#xC5EC; &#xBD84;&#xC11D; &#xACB0;&#xACFC; &#xC124;&#xBA85; &#xD569;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xC720;&#xC804;&#xC790; &#xBCC0;&#xD615; &#xC950;&#xC5D0; &#xC6B0;&#xB9AC; &#xB2EC; &#xC558; &#xC8E0; &#xB808;&#xD2B8; cHS4 &#xC808;&#xC5F0;&#xCCB4;&#xC5D0; &#xC758;&#xD574; &#xCC28;&#xB2E8; &#xB429;&#xB2C8;&#xB2E4; &#xBCF4;&#xC5EC;&#xC90D;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xC18C;&#xC74C; &#xCC28;&#xB2E8; CTCF &#xBC14;&#xC778;&#xB529; &#xC0AC;&#xC774;&#xD2B8;&#xC758; &#xB3C5;&#xB9BD;&#xC801; &#xC774;&#xBA70; &#xB0B4;&#xBD80; &#xB9AC;&#xD3EC;&#xD130; transgene &#xB178;&#xB9B4; &#xB54C; &#xAC00;&#xC7A5; &#xD6A8;&#xACFC;&#xC801;&#xC785;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xC774;&#xB7EC;&#xD55C; &#xB370;&#xC774;&#xD130;&#xC758; &#xC99D;&#xAC15; &#xCC28;&#xB2E8; &#xD65C;&#xB3D9;&#xC5D0;&#xC11C; Chs4&#xC5D0; &#xC758;&#xD574; &#xC18C;&#xC74C; &#xCC28;&#xB2E8; &#xD65C;&#xB3D9;&#xC744; &#xAD6C;&#xBCC4;. &#xD55C;&#xB9CC; &#xB450; &#xB0B4;&#xBD80; dimer cHS4 &#xCF54;&#xC5B4;&#xC640; &#xB192;&#xC740; &#xB808;&#xD2B8;&#xB85C; &#xBC14;&#xC774;&#xB7EC;&#xC2A4; &#xBCA1;&#xD130;&#xB97C; &#xB9CC;&#xB4E4; &#xC218; &#xC788;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4;. Chs4&#xB294; Ltrs&#xC5D0; &#xC704;&#xCE58; &#xD6A8;&#xACFC; &#xCC28;&#xB2E8; &#xADF8;&#xB294; &#xC785;&#xC744; &#xD0C8;&#xCD9C;&#xC744; &#xC81C;&#xC548; transduced f 9 &#xC140;&#xC5D0; &#xC2DD;&#xC5D0; &#xC601;&#xD5A5;&#xC744; &#xC8FC;&#xC9C0; &#xC54A;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4; &#xC788;&#xB2E4;. Drosophila &#xC808;&#xC5F0;&#xCCB4; &#xC9D1;&#xC2DC;&#xC640; Scs &#xC720;&#xC804;&#xC790; &#xBCC0;&#xD615; &#xC0DD;&#xC950;&#xC5D0;&#xC11C; &#xC785;&#xC744; &#xCC28;&#xB2E8; &#xD558;&#xC9C0; &#xBABB;&#xD558;&#xB294; &#xC788;&#xC9C0;&#xB9CC; &#xC9D1;&#xC2DC; &#xC790;&#xADF9; &#xBCA1;&#xD130; &#xC2DD; 2-fold &#xC804;&#xC5FC; &#xC131; &#xB808;&#xD2B8; Ltrs&#xC5D0; &#xC788;&#xB294; &#xACBD;&#xC6B0;&#xC5D0;. &#xC18C;&#xC74C; &#xCC28;&#xB2E8; &#xBD84;&#xC11D; &#xACB0;&#xACFC; &#xBCF4;&#xC644; &#xAE30;&#xC874; &#xC808;&#xC5F0;&#xCCB4; &#xD3EC;&#xC720;&#xB958; &#xC138;&#xD3EC;&#xC5D0;&#xC11C; &#xBD84;&#xC11D; &#xC2E4;&#xD5D8; &#xC808;&#xC5F0;&#xC758; &#xBA54;&#xCEE4;&#xB2C8;&#xC998;&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xC0C8;&#xB85C;&#xC6B4; &#xD1B5;&#xCC30;&#xB825;&#xC744; &#xC81C;&#xACF5; &#xD558; &#xACE0; &#xC904;&#xAE30; &#xC138;&#xD3EC; &#xB808;&#xD2B8;&#xB97C; &#xAC1C;&#xC120; &#xD558;&#xAE30; &#xC704;&#xD574; Chs4&#xC640; &#xD611;&#xB825; &#xCD94;&#xAC00; &#xC18C;&#xC74C; &#xCC28;&#xB2E8; &#xC808;&#xC5F0;&#xCCB4;&#xB97C; &#xC2DD;&#xBCC4; &#xD558;&#xAE30; &#xC704;&#xD574; &#xAC00;&#xCE58; &#xC788;&#xB294; &#xB3C4;&#xAD6C; &#xBCA1;&#xD130; &#xB514;&#xC790;&#xC778;.

&#xB808;&#xD2B8; &#xC18C;&#xC74C; &#xAE30; cHS4 &#xC808;&#xC5F0;&#xCCB4;&#xB85C; &#xCC28;&#xB2E8; CTCF &#xB3C5;&#xB9BD;&#xC801; &#xC774;&#xB2E4;.

El silenciamiento de los vectores de retrovirus supone un grave obst&#xE1;culo a la manipulaci&#xF3;n gen&#xE9;tica de c&#xE9;lulas madre y su uso en terapia g&#xE9;nica. Se describe un ensayo de silenciador de los mam&#xED;feros de bloqueo con elementos aislantes colocadas entre los elementos silenciadores retrovirus y un reportero de transg&#xE9;nicos LCRbeta-globina. En ratones transg&#xE9;nicos, nos muestran que los silenciadores de retrovirus son bloqueados por el aislante cHS4. Silenciador bloqueo es independiente del sitio de uni&#xF3;n CTCF y es m&#xE1;s eficaz cuando flanquean el transg&#xE9;n reportero interna. Estos datos distinguir actividad silenciador de bloqueo por cHS4 de su mejorador de la actividad de bloqueo. Vectores de retrovirus se pueden crear en el t&#xED;tulo de altura con una pero no dos internos d&#xED;mero cHS4 n&#xFA;cleos. cHS4 en las LTRs no tiene ning&#xFA;n efecto sobre la expresi&#xF3;n en c&#xE9;lulas transducidas F9, lo que sugiere que efecto de la posici&#xF3;n de bloqueo no es suficiente para escapar silenciar. El gitano Drosophila aislantes y Scs no logran bloquear el silenciamiento en ratones transg&#xE9;nicos, pero estimula la expresi&#xF3;n gitana vector 2 veces cuando se encuentra en los LTR de un retrovirus infeccioso. El ensayo silencioso bloqueo complementa los ensayos de aislantes en las c&#xE9;lulas de mam&#xED;feros, proporciona una nueva comprensi&#xF3;n de los mecanismos de aislamiento y es una valiosa herramienta para identificar silenciador adicional de bloqueo aisladores que cooperan con cHS4 para mejorar los retrovirus de c&#xE9;lulas madre de dise&#xF1;o vectorial.

Silenciador de Retrovirus bloqueo por el aislante es CHS4 CTCF Independiente

&#x9006;&#x8F6C;&#x5F55;&#x75C5;&#x6BD2;&#x6C89;&#x9ED8;&#x5728;&#x5E72;&#x7EC6;&#x80DE;&#x4E2D;&#x4EA7;&#x751F;&#x6C89;&#x9ED8;&#x6216;&#x6591;&#x9A73;&#x9646;&#x79BB;&#x7684;&#x5BC4;&#x4E3B;&#x3002;&#x989D;&#x5916;&#x7684;&#x5185;&#x5B58;&#x548C;&#x706D;&#x7EDD;&#x673A;&#x5236;&#x5728;&#x5206;&#x5316;&#x8FC7;&#x7A0B;&#x4E2D;&#x91C7;&#x53D6;&#x884C;&#x52A8;&#x3002;&#x5728;&#x8FD9;&#x91CC;&#x6211;&#x4EEC;&#x663E;&#x793A;&#x662F; de novo &#x7532;&#x57FA; &#xFF08;dnmt3a &#x548C; dnmt3b&#xFF09; &#x7A7A;&#x7684;&#x9F20;&#x6807; (ES) &#x80DA;&#x80CE;&#x5E72;&#x7EC6;&#x80DE;&#x7684;&#x9006;&#x8F6C;&#x5F55;&#x75C5;&#x6BD2;&#x662F;&#x6C89;&#x9ED8;&#x6216;&#x6591;&#x9A73;&#x9646;&#x79BB;&#x3002;&#x5185;&#x5B58;&#x5728;&#x5206;&#x5316;&#xFF0C;&#x671F;&#x95F4;&#x4FDD;&#x6301;&#x548C;&#x706D;&#x7EDD;&#x53D1;&#x751F;&#x5728;&#x6591;&#x9A73;&#x9646;&#x79BB;&#x7684;&#x9006;&#x8F6C;&#x5F55;&#x75C5;&#x6BD2;&#xFF0C;&#x8868;&#x660E; DNA &#x7532;&#x57FA;&#x5316;&#x53EF;&#x6709;&#x53EF;&#x65E0;&#x7684;&#x9006;&#x8F6C;&#x5F55;&#x75C5;&#x6BD2;&#x6C89;&#x9ED8;&#x7684;&#x6240;&#x6709;&#x7A97;&#x4F53;&#x4E0A;&#x3002;&#x6C89;&#x9ED8;&#x548C;&#x6591;&#x9A73;&#x9646;&#x79BB;&#x7684;&#x5BC4;&#x4E3B;&#x7684; hypoacetylated &#x7EC4;&#x86CB;&#x767D; H3 &#x6807;&#x8BB0;&#xFF0C;&#x5E76;&#x4E14;&#x7ED1;&#x5B9A; H1&#x3002;&#x91CE;&#x751F;&#x578B;&#x80DA;&#x80CE;&#x5E72;&#x7EC6;&#x80DE;&#x7814;&#x7A76;&#xFF0C;&#x6C89;&#x9ED8;&#x548C;&#x6591;&#x9A73;&#x9646;&#x79BB;&#x7684; proviruses &#x7532;&#x57FA;&#x5316;&#x548C; H3&#x3001; MeCP2 &#x548C;&#x5C11; H1 hypoacetylated &#x7684;&#x7EA6;&#x675F;&#x3002;5 AzaC &#x5728;&#x8FD9;&#x65B9;&#x9762;&#x7684;&#x90E8;&#x5206;&#x6FC0;&#x6D3B;&#x7684;&#x6C89;&#x9ED8;&#x3001; &#x6591;&#x9A73;&#x548C;&#x706D;&#x7EDD;&#x3002;&#x6162;&#x75C5;&#x6BD2;&#x8F7D;&#x4F53;&#x4E5F;&#x6C89;&#x9ED8;&#x6216;&#x6591;&#x9A73;&#x9646;&#x79BB;&#xFF0C;&#x6C89;&#x9ED8;&#x67D3;&#x8272;&#x8D28;&#xFF0C;&#x5C55;&#x54C1;&#x8BB0;&#x5FC6;&#x548C;&#x706D;&#x7EDD;&#x7684;&#x6807;&#x8BB0;&#x3002;&#x6211;&#x4EEC;&#x5F97;&#x51FA;&#x7ED3;&#x8BBA;&#xFF1A; &#x9006;&#x8F6C;&#x5F55;&#x75C5;&#x6BD2;&#x6C89;&#x9ED8;&#x7684;&#x666E;&#x904D;&#x7684;&#x8868;&#x89C2;&#x9057;&#x4F20;&#x6807;&#x8BB0;&#x5EFA;&#x7ACB;&#x901A;&#x8FC7;&#x591A;&#x4E2A;&#x8868;&#x89C2;&#x9057;&#x4F20;&#x7684;&#x4FEE;&#x6539;&#xFF0C;&#x5176;&#x4E2D;&#x5305;&#x62EC;&#xFF0C;&#x4F46;&#x4E0D;&#x662F;&#x9700;&#x8981; DNA &#x7532;&#x57FA;&#x5316;&#x7684;&#x52A8;&#x6001;&#x76F8;&#x4E92;&#x4F5C;&#x7528;&#x7684;&#x6C89;&#x9ED8;&#x67D3;&#x8272;&#x8D28;&#x3002;&#x7ADE;&#x4E89;&#x7684; H1 &#x548C; MeCP2 &#x7ED3;&#x5408;&#x7684;&#x5206;&#x5B50;&#x673A;&#x5236;&#x53EF;&#x80FD;&#x5360;&#x8868;&#x89C2;&#x9057;&#x4F20;&#x56E0;&#x7D20;&#x76F8;&#x4E92;&#x4F5C;&#x7528;&#xFF0C;&#x5E76;&#x8BA8;&#x8BBA;&#x6591;&#x9A73;&#x7684;&#x5178;&#x8303;&#x3002;

&#x9006;&#x8F6C;&#x5F55;&#x75C5;&#x6BD2;&#x6C89;&#x9ED8;&#x3001; &#x8336;&#x9053;&#x3001; &#x6D88;&#x5149;&#x3001; &#x548C;&#x5185;&#x5B58;&#x88AB;&#x53D7;&#x63A7;&#x5236;&#x7684;&#x591A;&#x4E2A;&#x8868;&#x89C2;&#x9057;&#x4F20;&#x53D8;&#x5316;&#x7684;&#x52A8;&#x6001;&#x76F8;&#x4E92;&#x4F5C;&#x7528;&#x3002;

Retrovirus silencing in stem cells produces silent or variegated provirus. Additional memory and extinction mechanisms act during differentiation. Here we show that retrovirus is silent or variegated in mouse embryonic stem (ES) cells that are de novo methyltransferase (dnmt3a and dnmt3b) null. Memory is maintained during differentiation, and extinction occurs on variegated retrovirus, indicating that DNA methylation is dispensable for all forms of retrovirus silencing. Silent and variegated provirus are marked by hypoacetylated histone H3 and bound H1. In wild-type ES cells, silent and variegated proviruses are methylated and bound by hypoacetylated H3, MeCP2, and less H1. Silencing, variegation, and extinction are partially reactivated by 5-AzaC in this context. Lentivirus vectors are also silent or variegated, marked by silent chromatin, and exhibit memory and extinction. We conclude that the universal epigenetic mark of retrovirus silencing is silent chromatin established via the dynamic interplay of multiple epigenetic modifications that include but do not require DNA methylation. A molecular mechanism of competitive H1 and MeCP2 binding may account for this epigenetic interplay, and a model for variegation is discussed.

Retrovirus silencing, variegation, extinction, and memory are controlled by a dynamic interplay of multiple epigenetic modifications.

Silence des r&#xE9;trovirus dans les cellules souches produit provirus silencieuse ou panach&#xE9;es. De la m&#xE9;moire suppl&#xE9;mentaire et les m&#xE9;canismes d&#x26;#39;extinction d&#x26;#39;agir lors de la diff&#xE9;renciation. Ici, nous montrons que les r&#xE9;trovirus est silencieuse ou panach&#xE9;es de souris embryonnaires souches (ES) des cellules qui sont de novo m&#xE9;thyltransf&#xE9;rase (Dnmt3A et DNMT3B) nulle. La m&#xE9;moire est maintenu lors de la diff&#xE9;renciation, et l&#x26;#39;extinction se produit sur les r&#xE9;trovirus vari&#xE9;, ce qui indique que m&#xE9;thylation de l&#x26;#39;ADN n&#x26;#39;est pas indispensable pour toutes les formes de silence r&#xE9;trovirus. Provirus silencieux et bigarr&#xE9; sont marqu&#xE9;es par hypoacetylated histone H3 et H1 li&#xE9;. Dans les cellules ES de type sauvage, provirus silencieux et bigarr&#xE9; sont m&#xE9;thyl&#xE9;s et li&#xE9; par hypoacetylated H3, MeCP2, et moins H1. Silencing, panach&#xE9;es, et l&#x26;#39;extinction sont partiellement r&#xE9;activ&#xE9;e par le 5-AzaC dans ce contexte. Vecteurs lentivirus sont &#xE9;galement muettes ou panach&#xE9;es, marqu&#xE9;e par la chromatine silencieuse, et la m&#xE9;moire d&#x26;#39;exposition et de l&#x26;#39;extinction. Nous concluons que la marque universelle de silence &#xE9;pig&#xE9;n&#xE9;tique r&#xE9;trovirus est chromatine silencieuse &#xE9;tablie via l&#x26;#39;interaction dynamique de multiples modifications &#xE9;pig&#xE9;n&#xE9;tiques qui incluent, mais ne n&#xE9;cessitent pas de m&#xE9;thylation de l&#x26;#39;ADN. Un m&#xE9;canisme mol&#xE9;culaire de la concurrence H1 et MeCP2 liaison peut rendre compte de cette interaction &#xE9;pig&#xE9;n&#xE9;tique, et un mod&#xE8;le pour panachure est discut&#xE9;e.

Silencing r&#xE9;trovirus, Variegation, Extinction, et de m&#xE9;moire sont contr&#xF4;l&#xE9;es par une interaction dynamique de multiples modifications &#xE9;pig&#xE9;n&#xE9;tiques

Retrovirus-Silencing, Buntheit, Aussterben, und der Speicher werden durch ein dynamisches Zusammenspiel von mehreren epigenetische Modifikationen gesteuert.

Retrovirus silenziamento nelle cellule staminali produce provirus silenzioso o variegato. Ulteriori meccanismi di memoria ed estinzione agiscono durante la differenziazione. Qui vi mostriamo che retrovirus &egrave; silenzioso o variegato nelle cellule staminali embrionali (ES) del mouse che sono de novo metiltransferasi (dnmt3a e dnmt3b) null. Memoria viene mantenuta durante la differenziazione, ed estinzione si verifica su retrovirus variegato, indicando che la metilazione del DNA &egrave; superflua per tutte le forme di silenziamento retrovirus. Silenzioso e variegato provirus sono contrassegnati da hypoacetylated dell&#39;istone H3 e vincolato H1. In cellule ES wild-type, silenzioso e variegato provirus sono metilati e vincolati da hypoacetylated H3, MeCP2 e meno H1. Silenziamento, variegatura ed estinzione sono parzialmente riattivati da 5-AzaC in questo contesto. Vettori lentivirus sono anche silenzioso o variegato, segnata da cromatina silent e Mostra memoria ed estinzione. Possiamo concludere che il marchio epigenetico universale del retrovirus silenzio &egrave; silenziosa della cromatina stabilita tramite l&#39;interazione dinamica di pi&ugrave; modifiche epigenetiche che includono, ma non necessitano di metilazione del DNA. Un meccanismo molecolare di legame competitivo H1 e MeCP2 pu&ograve; spiegare questa interazione epigenetica, e un modello per la variegatura &egrave; discusso.

Silenziamento retrovirus, variegatura, estinzione e memoria sono controllati da una dinamica interazione di molteplici modificazioni epigenetiche.

&#x5E79;&#x7D30;&#x80DE;&#x306E;&#x30EC;&#x30C8;&#x30ED;&#x30A6;&#x30A4;&#x30EB;&#x30B9;&#x306E;&#x30B5;&#x30A4;&#x30EC;&#x30F3;&#x30B7;&#x30F3;&#x30B0;&#x306F;&#x3001;&#x30B5;&#x30A4;&#x30EC;&#x30F3;&#x30C8;&#x307E;&#x305F;&#x306F;&#x591A;&#x5F69;&#x306A;&#x30D7;&#x30ED;&#x30A6;&#x30A4;&#x30EB;&#x30B9;&#x3092;&#x751F;&#x6210;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x8FFD;&#x52A0;&#x306E;&#x30E1;&#x30E2;&#x30EA;&#x3068;&#x7D76;&#x6EC5;&#x306E;&#x30E1;&#x30AB;&#x30CB;&#x30BA;&#x30E0;&#x306F;&#x5206;&#x5316;&#x4E2D;&#x306B;&#x52D5;&#x4F5C;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x3053;&#x3053;&#x3067;&#x6211;&#x3005;&#x306F;&#x3001;&#x30EC;&#x30C8;&#x30ED;&#x30A6;&#x30A4;&#x30EB;&#x30B9;&#x306F;&#x3001;de novo&#x306E;&#x30E1;&#x30C1;&#x30EB;&#x30C8;&#x30E9;&#x30F3;&#x30B9;&#x30D5;&#x30A7;&#x30E9;&#x30FC;&#x30BC;&#xFF08;dnmt3a&#x3068;DNMT3B&#xFF09;null&#x3067;&#x3042;&#x308B;&#x30DE;&#x30A6;&#x30B9;&#x80DA;&#x6027;&#x5E79;&#xFF08;ES&#xFF09;&#x7D30;&#x80DE;&#x3067;&#x30B5;&#x30A4;&#x30EC;&#x30F3;&#x30C8;&#x30A4;&#x30F3;&#x30B9;&#x30C8;&#x30FC;&#x30EB;&#x307E;&#x305F;&#x306F;&#x591A;&#x5F69;&#x3067;&#x3042;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x3092;&#x793A;&#x3059;&#x3002;&#x30E1;&#x30E2;&#x30EA;&#x306F;&#x3001;&#x5206;&#x5316;&#x306E;&#x904E;&#x7A0B;&#x3067;&#x7DAD;&#x6301;&#x3055;&#x308C;&#x3001;&#x7D76;&#x6EC5;&#x306F;&#x3001;DNA&#x30E1;&#x30C1;&#x30EB;&#x5316;&#x306F;&#x3001;&#x30EC;&#x30C8;&#x30ED;&#x30A6;&#x30A4;&#x30EB;&#x30B9;&#x306E;&#x30B5;&#x30A4;&#x30EC;&#x30F3;&#x30B7;&#x30F3;&#x30B0;&#x306E;&#x3059;&#x3079;&#x3066;&#x306E;&#x5F62;&#x614B;&#x306E;&#x305F;&#x3081;&#x306B;&#x4E0D;&#x8981;&#x3067;&#x3042;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x3092;&#x793A;&#x3059;&#x3001;&#x591A;&#x5F69;&#x306A;&#x30EC;&#x30C8;&#x30ED;&#x30A6;&#x30A4;&#x30EB;&#x30B9;&#x3067;&#x767A;&#x751F;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x30B5;&#x30A4;&#x30EC;&#x30F3;&#x30C8;&#xB7;&#x30A4;&#x30F3;&#x30B9;&#x30C8;&#x30FC;&#x30EB;&#x3068;&#x591A;&#x5F69;&#x306A;&#x30D7;&#x30ED;&#x30A6;&#x30A4;&#x30EB;&#x30B9;&#x306F;hypoacetylated&#x30D2;&#x30B9;&#x30C8;&#x30F3;H3&#x3068;&#x7D50;&#x5408;&#x3057;&#x305F;H1&#x3067;&#x30DE;&#x30FC;&#x30AF;&#x3055;&#x308C;&#x3066;&#x3044;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x91CE;&#x751F;&#x578B;ES&#x7D30;&#x80DE;&#x3067;&#x306F;&#x3001;&#x30B5;&#x30A4;&#x30EC;&#x30F3;&#x30C8;&#x3068;&#x591A;&#x5F69;&#x306A;&#x30D7;&#x30ED;&#x30A6;&#x30A4;&#x30EB;&#x30B9;&#x306F;&#x30E1;&#x30C1;&#x30EB;&#x5316;&#x3055;&#x308C;&#x3066;&#x3044;&#x308B;&#x3068;hypoacetylated H3&#x3001;MeCP2&#x306F;&#x3001;&#x5C11;&#x306A;&#x3044;H1&#x306B;&#x3088;&#x3063;&#x3066;&#x30D0;&#x30A4;&#x30F3;&#x30C9;&#x3055;&#x308C;&#x3066;&#x3044;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x30B5;&#x30A4;&#x30EC;&#x30F3;&#x3001;&#x6591;&#x5165;&#x308A;&#x3001;&#x305D;&#x3057;&#x3066;&#x7D76;&#x6EC5;&#x306E;&#x4E00;&#x90E8;&#x306F;&#x3053;&#x306E;&#x30B3;&#x30F3;&#x30C6;&#x30AD;&#x30B9;&#x30C8;&#x3067;&#x306F;5-AzaC&#x306B;&#x3088;&#x3063;&#x3066;&#x30A2;&#x30AF;&#x30C6;&#x30A3;&#x30D6;&#x5316;&#x3055;&#x308C;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x30EC;&#x30F3;&#x30C1;&#x30A6;&#x30A4;&#x30EB;&#x30B9;&#x30D9;&#x30AF;&#x30BF;&#x30FC;&#x306F;&#x3001;&#x30B5;&#x30A4;&#x30EC;&#x30F3;&#x30C8;&#x30AF;&#x30ED;&#x30DE;&#x30C1;&#x30F3;&#x3001;&#x5C55;&#x793A;&#x30E1;&#x30E2;&#x30EA;&#x3068;&#x7D76;&#x6EC5;&#x306B;&#x3088;&#x3063;&#x3066;&#x30DE;&#x30FC;&#x30AF;&#x3055;&#x308C;&#x3001;&#x307E;&#x305F;&#x3001;&#x30B5;&#x30A4;&#x30EC;&#x30F3;&#x30C8;&#xB7;&#x30E2;&#x30FC;&#x30C9;&#x307E;&#x305F;&#x306F;&#x591A;&#x5F69;&#x3067;&#x3059;&#x3002;&#x6211;&#x3005;&#x306F;&#x30EC;&#x30C8;&#x30ED;&#x30A6;&#x30A4;&#x30EB;&#x30B9;&#x306E;&#x30B5;&#x30A4;&#x30EC;&#x30F3;&#x30B7;&#x30F3;&#x30B0;&#x306E;&#x666E;&#x904D;&#x7684;&#x306A;&#x30A8;&#x30D4;&#x30B8;&#x30A7;&#x30CD;&#x30C6;&#x30A3;&#x30C3;&#x30AF;&#x30DE;&#x30FC;&#x30AF;&#x304C;&#x542B;&#x307E;&#x308C;&#x307E;&#x3059;&#x304C;&#x3001;DNA&#x30E1;&#x30C1;&#x30EB;&#x5316;&#x3092;&#x5FC5;&#x8981;&#x3068;&#x3057;&#x306A;&#x3044;&#x8907;&#x6570;&#x306E;&#x30A8;&#x30D4;&#x30B8;&#x30A7;&#x30CD;&#x30C6;&#x30A3;&#x30C3;&#x30AF;&#x306A;&#x4FEE;&#x98FE;&#x306E;&#x52D5;&#x7684;&#x306A;&#x76F8;&#x4E92;&#x4F5C;&#x7528;&#x3092;&#x4ECB;&#x3057;&#x3066;&#x78BA;&#x7ACB;&#x3055;&#x308C;&#x305F;&#x30B5;&#x30A4;&#x30EC;&#x30F3;&#x30C8;&#x30AF;&#x30ED;&#x30DE;&#x30C1;&#x30F3;&#x3067;&#x3042;&#x308B;&#x3068;&#x7D50;&#x8AD6;&#x4ED8;&#x3051;&#x3066;&#x3044;&#x308B;&#x3002;&#x7AF6;&#x4E89;&#x529B;&#x306E;&#x3042;&#x308B;H1&#x3068;MeCP2&#x306F;&#x7D50;&#x5408;&#x306E;&#x5206;&#x5B50;&#x6A5F;&#x69CB;&#x306F;&#x3001;&#x3053;&#x306E;&#x30A8;&#x30D4;&#x30B8;&#x30A7;&#x30CD;&#x30C6;&#x30A3;&#x30C3;&#x30AF;&#x306A;&#x76F8;&#x4E92;&#x4F5C;&#x7528;&#x3092;&#x8AAC;&#x660E;&#x3059;&#x308B;&#x304B;&#x3082;&#x3057;&#x308C;&#x306A;&#x3044;&#x3001;&#x3068;&#x6591;&#x5165;&#x308A;&#x306E;&#x30E2;&#x30C7;&#x30EB;&#x304C;&#x8AAC;&#x660E;&#x3055;&#x308C;&#x3066;&#x3044;&#x307E;&#x3059;&#x3002;

&#x30EC;&#x30C8;&#x30ED;&#x30A6;&#x30A4;&#x30EB;&#x30B9;&#x306E;&#x30B5;&#x30A4;&#x30EC;&#x30F3;&#x30B7;&#x30F3;&#x30B0;&#x3001;&#x6591;&#x5165;&#x308A;&#x3001;&#x7D76;&#x6EC5;&#x3057;&#x3001;&#x30E1;&#x30E2;&#x30EA;&#x306F;&#x8907;&#x6570;&#x306E;&#x30A8;&#x30D4;&#x30B8;&#x30A7;&#x30CD;&#x30C6;&#x30A3;&#x30C3;&#x30AF;&#x306A;&#x4FEE;&#x98FE;&#x306E;&#x30C0;&#x30A4;&#x30CA;&#x30DF;&#x30C3;&#x30AF;&#x306A;&#x76F8;&#x4E92;&#x4F5C;&#x7528;&#x306B;&#x3088;&#x3063;&#x3066;&#x5236;&#x5FA1;&#x3055;&#x308C;&#x308B;

&#xC904;&#xAE30; &#xC138;&#xD3EC;&#xC5D0; &#xB808;&#xD2B8; &#xC785;&#xC744; &#xCE68;&#xBB35; &#xB610;&#xB294; &#xC7A1; &#xC0C9; provirus&#xB97C; &#xC0DD;&#xC131; &#xD569;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xCD94;&#xAC00; &#xBA54;&#xBAA8;&#xB9AC; &#xBC0F; &#xBA78;&#xC885; &#xBA54;&#xCEE4;&#xB2C8;&#xC998; &#xCC28;&#xBCC4;&#xD654; &#xC911; &#xD589;&#xB3D9;. &#xC5EC;&#xAE30; &#xC6B0;&#xB9AC;&#xAC00; &#xADF8; &#xB808;&#xD2B8; &#xB4DC; &#xB178; &#xBCF4; methyltransferase (dnmt3a&#xC640; dnmt3b) null&#xC740; &#xB9C8;&#xC6B0;&#xC2A4; &#xBC30;&#xC544; &#xC904;&#xAE30; (ES&#xC758;) &#xC138;&#xD3EC;&#xC5D0; &#xCE68;&#xBB35; &#xB610;&#xB294; &#xC7A1; &#xC0C9;&#xC740; &#xBCF4;&#xC5EC;&#xC90D;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xCC28;&#xBCC4;&#xD654;, &#xD558;&#xB294; &#xB3D9;&#xC548; &#xBA54;&#xBAA8;&#xB9AC;&#xB97C; &#xC720;&#xC9C0; &#xD558; &#xACE0; &#xBA78;&#xC885; DNA &#xBA54; &#xD2F8; &#xD654;&#xB294; &#xBAA8;&#xB4E0; &#xD615;&#xD0DC;&#xC758; &#xB808;&#xD2B8; &#xC785;&#xC744; &#xC704;&#xD574; &#xBD88;&#xAC00;&#xACB0; &#xB098;&#xD0C0;&#xB0B4;&#xB294; &#xC7A1; &#xC0C9;&#xB41C; &#xB808;&#xD2B8;&#xC5D0; &#xBC1C;&#xC0DD; &#xD569;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xCE68;&#xBB35; &#xD558; &#xACE0; &#xC7A1; &#xC0C9; provirus hypoacetylated &#xD788;&#xC2A4;&#xD1A4; h 3&#xC73C;&#xB85C; &#xD45C;&#xC2DC; &#xB418; &#xACE0; &#xBC14;&#xC778;&#xB529;&#xB41C; H1. &#xC57C;&#xC0DD;-&#xD0C0;&#xC785; ES &#xC138;&#xD3EC;&#xC5D0; &#xCE68;&#xBB35; &#xD558; &#xACE0; &#xC7A1; &#xC0C9; proviruses&#xB294; &#xAC20; &#xACE0; H3, MeCP2, &#xADF8;&#xB9AC;&#xACE0; &#xC801;&#xC740; H1 hypoacetylated&#xC5D0; &#xC758;&#xD574; &#xAD6C;&#xC18D;. &#xCE68;&#xBB35;, &#xC7A1; &#xC0C9;, &#xADF8;&#xB9AC;&#xACE0; &#xBA78;&#xC885; &#xBD80;&#xBD84;&#xC801;&#xC73C;&#xB85C; 5-Azac&#xC774;&#xC774; &#xB9E5;&#xB77D;&#xC5D0; &#xC758;&#xD574; &#xB2E4;&#xC2DC; &#xD65C;&#xC131;&#xD654; &#xD569;&#xB2C8;&#xB2E4;. Lentivirus &#xBCA1;&#xD130;&#xB294; &#xB610;&#xD55C; &#xC790;&#xB3D9; &#xB610;&#xB294; &#xC7A1; &#xC0C9;, &#xCE68;&#xBB35; chromatin &#xBC0F; &#xC804;&#xC2DC; &#xBA54;&#xBAA8;&#xB9AC; &#xBC0F; &#xBA78;&#xC885;&#xC5D0; &#xC758;&#xD574; &#xD45C;&#xC2DC;. &#xC6B0;&#xB9AC;&#xAC00; &#xB808;&#xD2B8; &#xCE68;&#xBB35;&#xC758; &#xBCF4;&#xD3B8;&#xC801;&#xC778; epigenetic &#xB9C8;&#xD06C; &#xD3EC;&#xD568; &#xD558;&#xC9C0;&#xB9CC; DNA &#xBA54; &#xD2F8; &#xD654;&#xB97C; &#xD558;&#xC9C0; &#xC54A;&#xC544;&#xB3C4; &#xC5EC;&#xB7EC; epigenetic &#xC218;&#xC815; &#xB3D9;&#xC801; &#xC0C1;&#xD638; &#xC791;&#xC6A9;&#xC744; &#xD1B5;&#xD574; &#xC124;&#xB9BD; &#xCE68;&#xBB35; chromatin &#xACB0;&#xB860;. &#xACBD;&#xC7C1;&#xB825; &#xC788;&#xB294; H1 &#xBC14;&#xC778;&#xB529;&#xACFC; Mecp2&#xC758; &#xBD84;&#xC790; &#xBA54;&#xCEE4;&#xB2C8;&#xC998; epigenetic&#xC774; &#xC0C1;&#xD638; &#xC791;&#xC6A9;&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xACC4;&#xC815; &#xC218;&#xC640; &#xC7A1; &#xC0C9;&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xBAA8;&#xB378;&#xC5D0; &#xB300;&#xD574;&#xC11C;&#xB294; &#xC124;&#xBA85;.

&#xB808;&#xD2B8; &#xC785;&#xC744;, &#xC7A1; &#xC0C9;, &#xBA78;&#xC885;, &#xADF8;&#xB9AC;&#xACE0; &#xBA54;&#xBAA8;&#xB9AC;&#xC758; &#xC5EC;&#xB7EC; epigenetic &#xC218;&#xC815; &#xB3D9;&#xC801; &#xC0C1;&#xD638; &#xC791;&#xC6A9;&#xC5D0; &#xC758;&#xD574; &#xC81C;&#xC5B4; &#xB429;&#xB2C8;&#xB2E4;.

Silenciamiento de retrovirus en c&#xE9;lulas madre produce provirus en silencio o abigarrado. La memoria adicional y los mecanismos de extinci&#xF3;n de actuar durante la diferenciaci&#xF3;n. Aqu&#xED; nos muestran que los retrovirus es en silencio o en el abigarrado madre embrionarias de rat&#xF3;n (ES) las c&#xE9;lulas que son de novo metiltransferasa (DNMT3a y DNMT3b) nulo. La memoria se mantiene durante la diferenciaci&#xF3;n, y la extinci&#xF3;n se produce en los retrovirus variado, lo que indica que la metilaci&#xF3;n del ADN es prescindible para todas las formas de silenciamiento de los retrovirus. Provirus silencioso y variada est&#xE1;n marcados por hipoacetiladas histona H3 y H1 consolidado. En las c&#xE9;lulas madre embrionarias de tipo salvaje, provirus silenciosos y variadas son metilados y obligado por hipoacetiladas H3, MeCP2, y menos H1. El silenciamiento, variaci&#xF3;n, y la extinci&#xF3;n est&#xE1;n parcialmente reactivada por 5-AzaC en este contexto. Vectores lentivirus tambi&#xE9;n est&#xE1;n en silencio o variado, marcado por la cromatina en silencio, y la memoria de exposici&#xF3;n y la extinci&#xF3;n. Llegamos a la conclusi&#xF3;n de que la marca universal de silenciamiento epigen&#xE9;tico de la cromatina en silencio retrovirus es establecida a trav&#xE9;s de la interacci&#xF3;n din&#xE1;mica de las m&#xFA;ltiples modificaciones epigen&#xE9;ticas, que incluyen, pero no requieren la metilaci&#xF3;n del ADN. Un mecanismo molecular de la competencia H1 y vinculante MeCP2 puede dar cuenta de esta interacci&#xF3;n epigen&#xE9;tica, y un modelo de variegaci&#xF3;n se discute.

El silenciamiento de Retrovirus, variaci&#xF3;n, la extinci&#xF3;n, y la memoria son controlados por un juego din&#xE1;mico de m&#xFA;ltiples modificaciones epigen&#xE9;ticas

&beta; &#x8F6C;&#x57FA;&#x56E0;&#x8F68;&#x8FF9;&#x63A7;&#x5236;&#x533A;&#x57DF; (LCR) &#x53D7;&#x89C4;&#x7BA1;&#x4E3B;&#x8981;&#x662F;&#x7531;&#x94FE;&#x63A5;&#x7EC6;&#x83CC;&#x8BB0;&#x8005;&#x57FA;&#x56E0;&#x5728;&#x8F6C;&#x57FA;&#x56E0;&#x5C0F;&#x9F20;&#x4E2D;&#x6C89;&#x9ED8;&#x7684;&#x3002;&#x589E;&#x5F3A;&#x578B;&#x7EFF;&#x8272;&#x8367;&#x5149;&#x86CB;&#x767D; (eGFP) &#x4ECE;&#x6C34;&#x6BCD;&#x662F;&#x4E00;&#x4E2A;&#x66FF;&#x4EE3;&#x7684;&#x8BB0;&#x8005;&#x7528;&#x9006;&#x8F6C;&#x5F55;&#x75C5;&#x6BD2;&#x8F7D;&#x4F53; LCRbeta-&#x73E0;&#x86CB;&#x767D;&#x57FA;&#x56E0;&#x8F6C;&#x79FB;&#x5230;&#x9AA8;&#x9AD3;&#x3002;&#x6211;&#x4EEC;&#x5728;&#x8FD9;&#x91CC;&#x5C55;&#x793A;&#x7EFF;&#x8272;&#x8367;&#x5149;&#x86CB;&#x767D;&#x7F16;&#x7801;&#x5E8F;&#x5217;&#x6C89;&#x9ED8; LCRbeta-&#x73E0;&#x86CB;&#x767D;&#x7684;&#x8F6C;&#x57FA;&#x56E0;&#x5C0F;&#x9F20;&#xFF0C;&#x4F46;&#x5987;&#x5973;&#x53D1;&#x8D77;&#x4EBA;&#x5E76;&#x672A;&#x5F15;&#x53D1;&#x8FD9;&#x79CD;&#x6C89;&#x9ED8;&#x3002;&#x7531;&#x4E8E;&#x7EFF;&#x8272;&#x8367;&#x5149;&#x86CB;&#x767D;&#x542B;&#x6709; 60 &#x7684;&#x4E2D;&#x592E;&#x4EBA;&#x6C11;&#x653F;&#x5E9C; dinucleotides&#xFF0C;&#x662F; DNA &#x7532;&#x57FA;&#x5316;&#x7684;&#x76EE;&#x6807;&#xFF0C;&#x6211;&#x4EEC;&#x5408;&#x6210;&#x4E00;&#x79CD;&#x65B0;&#x578B;&#x65E0;&#x4E2D;&#x592E;&#x4EBA;&#x6C11;&#x653F;&#x5E9C;&#x7684;&#x53D8;&#x4F53;&#xFF0C;&#x79F0;&#x4E3A; dmGFP&#x3002;&#x5176;&#x5B9E;&#x7528;&#x7A0B;&#x5E8F; MSCV &#x9006;&#x8F6C;&#x5F55;&#x75C5;&#x6BD2;&#x8F7D;&#x4F53;&#x4ECB;&#x5BFC;&#x7684;&#x75C5;&#x6BD2; 5&#39;LTR &#x6216;&#x5185;&#x90E8;&#x5987;&#x5973;&#x6216; EF1alpha &#x542F;&#x52A8;&#x5B50;&#x63A7;&#x5236;&#x4E2D;&#x5F97;&#x5230;&#x4F53;&#x73B0;&#x3002;&#x5177;&#x4F53;&#x8367;&#x5149;&#x68C0;&#x6D4B;&#x5230;&#x4ECE;&#x7EFF;&#x8272;&#x8367;&#x5149;&#x86CB;&#x767D;&#xFF0C;&#x4EE5;&#x53CA;&#x5728;&#x8F83;&#x4F4E;&#x7684;&#x7EA7;&#x522B;&#xFF0C;&#x4ECE; dmGFP&#xFF0C;&#x8F6C;&#x5BFC;&#x5C0F;&#x9F20; CFU-S &#x548C;&#x80DA;&#x80CE;&#x5E72;&#x7EC6;&#x80DE;&#x3002;&#x867D;&#x7136;&#x7EFF;&#x8272;&#x8367;&#x5149;&#x86CB;&#x767D;&#x5F88;&#x5C11;&#x88AB;&#x538B;&#x5236;&#x5728;&#x83CC;&#x843D; S &#x4E2D;&#xFF0C;dmGFP &#x4E0D;&#x662F;&#x6C89;&#x5BC2;&#x5728;&#x8FD9;&#x4E9B;&#x7956;&#x7EC6;&#x80DE;&#x4E2D;&#x3002;&#x6B64;&#x5916;&#xFF0C;&#x7F16;&#x7801;&#x5E8F;&#x5217;&#x7684; dmGFP &#x4E0D;&#x6C89;&#x9ED8; LCRbeta-&#x73E0;&#x86CB;&#x767D;&#x8F6C;&#x57FA;&#x56E0;&#x5C0F;&#x9F20;&#xFF0C;&#x663E;&#x793A;&#x6C89;&#x9ED8;&#x673A;&#x5236;&#x7684;&#x7EFF;&#x8272;&#x8367;&#x5149;&#x86CB;&#x767D;&#x7684;&#x884C;&#x4E3A;&#x4E3B;&#x8981;&#x662F;&#x901A;&#x8FC7;&#x4E2D;&#x592E;&#x4EBA;&#x6C11;&#x653F;&#x5E9C; dinucleotides&#x3002;&#x7136;&#x800C;&#xFF0C;LCRbeta-&#x73E0;&#x86CB;&#x767D;&#x8868;&#x8FBE;&#x4ECD;&#x4E0D;&#x7406;&#x60F3;&#xFF0C;&#x6307;&#x793A;&#x5176;&#x4ED6;&#x6C89;&#x9ED8;&#x9014;&#x5F84;&#x627F;&#x8BA4;&#x5728;&#x6CA1;&#x6709;&#x4E2D;&#x592E;&#x4EBA;&#x6C11;&#x653F;&#x5E9C; dinucleotides dmGFP&#x3002;&#x6211;&#x4EEC;&#x5F97;&#x51FA;&#x7ED3;&#x8BBA; dmGFP &#x6539;&#x5584;&#x6C89;&#x9ED8;&#xFF0C;&#x4F46; nonmammalian &#x8BB0;&#x8005;&#x6CA1;&#x6709;&#x83B7;&#x5F97;&#x6700;&#x4F18; LCRbeta-&#x73E0;&#x86CB;&#x767D;&#x8868;&#x8FBE;&#x3002;

&#x7EFF;&#x8272;&#x8367;&#x5149;&#x86CB;&#x767D;&#x62A5;&#x544A;&#x57FA;&#x56E0;&#x6C89;&#x9ED8;&#x901A;&#x8FC7;&#x4E2D;&#x592E;&#x4EBA;&#x6C11;&#x653F;&#x5E9C; dinucleotides LCRbeta-&#x73E0;&#x86CB;&#x767D;&#x8F6C;&#x57FA;&#x56E0;&#x8868;&#x8FBE;&#x3002;

beta-Globin transgenes regulated by the locus control region (LCR) are dominantly silenced by linked bacterial reporter genes in transgenic mice. Enhanced green fluorescent protein (eGFP) from jellyfish is an alternative reporter used in retrovirus vectors to transfer LCRbeta-globin genes into bone marrow. We show here that the eGFP coding sequence silences LCRbeta-globin in transgenic mice, but the PGK promoter did not provoke such silencing. As eGFP contains 60 CpG dinucleotides, which are targets of DNA methylation, we synthesized a novel CpG-free variant called dmGFP. Its utility was demonstrated in MSCV retrovirus vectors transcriptionally controlled by the viral 5'LTR or internal PGK or EF1alpha promoter. Specific fluorescence was detected from eGFP, and at lower levels from dmGFP, in transduced mouse CFU-S and embryonic stem cells. While eGFP was rarely silenced in CFU-S, dmGFP was not silenced in these progenitors. Moreover, the dmGFP coding sequence did not silence LCRbeta-globin in transgenic mice, showing that the eGFP silencing mechanism acts primarily via CpG dinucleotides. However, LCRbeta-globin expression remained suboptimal, indicating that other silencing pathways recognize dmGFP in the absence of CpG dinucleotides. We conclude that dmGFP ameliorates silencing, but optimal LCRbeta-globin expression is obtained in the absence of nonmammalian reporters.

eGFP reporter genes silence LCRbeta-globin transgene expression via CpG dinucleotides.

la b&#xEA;ta-globine transg&#xE8;nes r&#xE9;glement&#xE9;s par la r&#xE9;gion de contr&#xF4;le locus (LCR) sont r&#xE9;duits au silence par dominante li&#xE9;s g&#xE8;nes rapporteurs bact&#xE9;riennes chez les souris transg&#xE9;niques. Am&#xE9;lioration de la prot&#xE9;ine fluorescente verte (eGFP) de la m&#xE9;duse est un journaliste alternative utilis&#xE9;e dans les vecteurs r&#xE9;troviraux pour transf&#xE9;rer LCRbeta-globine dans la moelle osseuse. Nous montrons ici que l&#x26;#39;eGFP de codage de s&#xE9;quences silences LCRbeta-globine chez des souris transg&#xE9;niques, mais le promoteur PGK n&#x26;#39;a pas provoqu&#xE9; une telle silence. Comme eGFP contient 60 dinucl&#xE9;otides CpG, qui sont les cibles de m&#xE9;thylation de l&#x26;#39;ADN, nous avons synth&#xE9;tis&#xE9; un roman sans CpG variante appel&#xE9;e dmGFP. Son utilit&#xE9; a &#xE9;t&#xE9; d&#xE9;montr&#xE9;e dans des vecteurs r&#xE9;troviraux MSCV transcriptionnellement contr&#xF4;l&#xE9;es par le LTR 5 &#x26;#39;virale ou interne promoteur PGK ou EF1alpha. Fluorescence sp&#xE9;cifique a &#xE9;t&#xE9; d&#xE9;tect&#xE9;e &#xE0; partir de eGFP, et &#xE0; des niveaux inf&#xE9;rieurs de dmGFP, dans transduites souris CFU-S et les cellules souches embryonnaires. Alors que eGFP a rarement &#xE9;t&#xE9; r&#xE9;duits au silence dans les CFU-S, n&#x26;#39;a pas &#xE9;t&#xE9; r&#xE9;duit au silence dmGFP dans ces prog&#xE9;niteurs. En outre, la s&#xE9;quence de codage dmGFP n&#x26;#39;a pas taire LCRbeta-globine chez des souris transg&#xE9;niques, montrant que le m&#xE9;canisme de silence eGFP agit principalement par l&#x26;#39;interm&#xE9;diaire des dinucl&#xE9;otides CpG. Toutefois, LCRbeta-globine expression est rest&#xE9;e sous-optimale, ce qui indique que les voies de silencieux d&#x26;#39;autres reconnaissent dmGFP en l&#x26;#39;absence de dinucl&#xE9;otides CpG. Nous concluons que dmGFP am&#xE9;liore taire, mais optimale LCRbeta-globine expression est obtenue en l&#x26;#39;absence de journalistes non mammif&#xE8;res.

Reporter EGFP g&#xE8;nes Silence LCRbeta-globine expression du transg&#xE8;ne Via dinucl&#xE9;otides CpG

eGFP Reportergenen Stille LCRbeta-Globin Transgenexpression &#xFC;ber CpG-Dinukleotide.

beta-globina transgeni regolamentate dalla regione di controllo del locus (LCR) sono prevalentemente messo a tacere da geni collegati reporter batterica in topi transgenici. Enhanced green fluorescent protein (eGFP) da Medusa &egrave; un reporter alternativi utilizzati nei vettori retrovirus per trasferire geni LCRbeta-globina in midollo osseo. Mostriamo qui che eGFP codifica silenzi sequenza LCRbeta-globina in topi transgenici, ma il promotore PGK non provocare tale silenzio. Come eGFP contiene 60 dinucleotidi, quali sono gli obiettivi di metilazione del DNA, abbiamo sintetizzato un romanzo privo di CpG variante chiamata dmGFP. Sua utilit&agrave; &egrave; stata dimostrata in MSCV retrovirus vettori transcriptionally controllati dal promotore virale 5&#39;LTR o PGK interno o EF1alpha. Fluorescenza specifica &egrave; stato rilevato da eGFP e a livelli inferiori da dmGFP, in mouse trasdotte CFU-S e cellule staminali embrionali. Mentre eGFP raramente &egrave; stato messo a tacere in CFU-S, dmGFP non &egrave; stato zittito in questi progenitori. Inoltre, la sequenza codificante di dmGFP non ha fatto silenzio LCRbeta-globina in topi transgenici, mostrando che il meccanismo di silenziamento eGFP agisce principalmente tramite dinucleotidi. Tuttavia, espressione LCRbeta-globina &egrave; rimasto non ottimali, che indica che altre vie, silenziamento riconoscano dmGFP in assenza di dinucleotidi. Concludiamo che dmGFP migliora mettendo a tacere, ma espressione LCRbeta-globina ottimale si ottiene in assenza di giornalisti nonmammalian.

geni reporter eGFP silenzio espressione del transgene LCRbeta-globina via dinucleotidi.

&#x907A;&#x4F1D;&#x5B50;&#x5EA7;&#x5236;&#x5FA1;&#x9818;&#x57DF;&#xFF08;LCR&#xFF09;&#x306B;&#x3088;&#x3063;&#x3066;&#x898F;&#x5236;&#x3B2;-&#x30B0;&#x30ED;&#x30D3;&#x30F3;&#x5C0E;&#x5165;&#x907A;&#x4F1D;&#x5B50;&#x306F;&#x512A;&#x6027;&#x30C8;&#x30E9;&#x30F3;&#x30B9;&#x30B8;&#x30A7;&#x30CB;&#x30C3;&#x30AF;&#x30DE;&#x30A6;&#x30B9;&#x3067;&#x30EA;&#x30F3;&#x30AF;&#x3055;&#x308C;&#x305F;&#x7D30;&#x83CC;&#x306E;&#x30EC;&#x30DD;&#x30FC;&#x30BF;&#x30FC;&#x907A;&#x4F1D;&#x5B50;&#x304C;&#x30B5;&#x30A4;&#x30EC;&#x30F3;&#x30B7;&#x30F3;&#x30B0;&#x3055;&#x308C;&#x3066;&#x3044;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x30AF;&#x30E9;&#x30B2;&#x304B;&#x3089;&#x5F37;&#x5316;&#x3055;&#x308C;&#x305F;&#x7DD1;&#x8272;&#x86CD;&#x5149;&#x30BF;&#x30F3;&#x30D1;&#x30AF;&#x8CEA;&#xFF08;EGFP&#xFF09;&#x306F;&#x3001;&#x9AA8;&#x9AC4;&#x306B;LCRbeta-&#x30B0;&#x30ED;&#x30D3;&#x30F3;&#x907A;&#x4F1D;&#x5B50;&#x3092;&#x8EE2;&#x9001;&#x3059;&#x308B;&#x305F;&#x3081;&#x306B;&#x30EC;&#x30C8;&#x30ED;&#x30A6;&#x30A4;&#x30EB;&#x30B9;&#x30D9;&#x30AF;&#x30BF;&#x30FC;&#x3067;&#x4F7F;&#x7528;&#x3055;&#x308C;&#x3066;&#x3044;&#x308B;&#x5225;&#x306E;&#x30EC;&#x30DD;&#x30FC;&#x30BF;&#x30FC;&#x3067;&#x3059;&#x3002;&#x6211;&#x3005;&#x306F;&#x30C8;&#x30E9;&#x30F3;&#x30B9;&#x30B8;&#x30A7;&#x30CB;&#x30C3;&#x30AF;&#x30DE;&#x30A6;&#x30B9;&#x306E;&#x30B7;&#x30FC;&#x30B1;&#x30F3;&#x30B9;&#x7121;&#x97F3;LCRbeta-&#x30B0;&#x30ED;&#x30D3;&#x30F3;&#x3092;&#x30B3;&#x30FC;&#x30C9;&#x3059;&#x308B;eGFP&#x306E;&#x3067;&#x3059;&#x304C;&#x3001;PGK&#x30D7;&#x30ED;&#x30E2;&#x30FC;&#x30BF;&#x30FC;&#x304C;&#x305D;&#x306E;&#x3088;&#x3046;&#x306A;&#x30B5;&#x30A4;&#x30EC;&#x30F3;&#x30B7;&#x30F3;&#x30B0;&#x3092;&#x8A98;&#x767A;&#x3057;&#x306A;&#x304B;&#x3063;&#x305F;&#x3053;&#x3068;&#x3092;&#x3053;&#x3053;&#x306B;&#x8868;&#x793A;&#x3055;&#x308C;&#x307E;&#x3059;&#x3002; EGFP&#x306F;DNA&#x30E1;&#x30C1;&#x30EB;&#x5316;&#x306E;&#x30BF;&#x30FC;&#x30B2;&#x30C3;&#x30C8;&#x3067;&#x3042;&#x308B;60 CpG&#x30B8;&#x30CC;&#x30AF;&#x30EC;&#x30AA;&#x30C1;&#x30C9;&#x3092;&#x200B;&#x200B;&#x542B;&#x3093;&#x3067;&#x3044;&#x308B;&#x3068;&#x3057;&#x3066;&#x3001;&#x6211;&#x3005;&#x306F;dmGFP&#x3068;&#x547C;&#x3070;&#x308C;&#x308B;&#x5C0F;&#x8AAC;&#x306E;CpG&#x30D5;&#x30EA;&#x30FC;&#x5909;&#x7570;&#x4F53;&#x3092;&#x5408;&#x6210;&#x3057;&#x305F;&#x3002;&#x305D;&#x306E;&#x30E6;&#x30FC;&#x30C6;&#x30A3;&#x30EA;&#x30C6;&#x30A3;&#x306F;&#x3001;&#x8EE2;&#x5199;&#x30A6;&#x30A4;&#x30EB;&#x30B9;5&#x26;#39;LTR&#x307E;&#x305F;&#x306F;&#x5185;&#x90E8;PGK&#x307E;&#x305F;&#x306F;EF1alpha&#x30D7;&#x30ED;&#x30E2;&#x30FC;&#x30BF;&#x30FC;&#x306B;&#x3088;&#x3063;&#x3066;&#x5236;&#x5FA1;&#x3055;&#x308C;&#x308B;MSCV&#x30EC;&#x30C8;&#x30ED;&#x30A6;&#x30A4;&#x30EB;&#x30B9;&#x30D9;&#x30AF;&#x30BF;&#x30FC;&#x3067;&#x5B9F;&#x8A3C;&#x3055;&#x308C;&#x305F;&#x3002;&#x7279;&#x5B9A;&#x306E;&#x86CD;&#x5149;&#x304C;eGFP&#x3092;&#x304B;&#x3089;&#x3001;&#x3068;dmGFP&#x304B;&#x3089;&#x4F4E;&#x3044;&#x30EC;&#x30D9;&#x30EB;&#x3067;&#x691C;&#x51FA;&#x3055;&#x308C;&#x305F;&#x3001;&#x306B;&#x306F;&#x3001;&#x30DE;&#x30A6;&#x30B9;CFU-S&#x3068;&#x80DA;&#x6027;&#x5E79;&#x7D30;&#x80DE;&#x3092;&#x5C0E;&#x5165;&#x3057;&#x305F;&#x3002; eGFP&#x306E;&#x306F;&#x3081;&#x3063;&#x305F;&#x306B;CFU-S&#x306B;&#x6C88;&#x9ED9;&#x3055;&#x308C;&#x3066;&#x3044;&#x306A;&#x3044;&#x3082;&#x306E;&#x306E;&#x3001;dmGFP&#x306F;&#x3001;&#x3053;&#x308C;&#x3089;&#x306E;&#x524D;&#x99C6;&#x7D30;&#x80DE;&#x3067;&#x6C88;&#x9ED9;&#x3055;&#x308C;&#x3066;&#x3044;&#x307E;&#x305B;&#x3093;&#x3002;&#x307E;&#x305F;&#x3001;dmGFP&#x30B3;&#x30FC;&#x30C9;&#x914D;&#x5217;&#x306F;&#x3001;EGFP&#x306E;&#x30B5;&#x30A4;&#x30EC;&#x30F3;&#x30B7;&#x30F3;&#x30B0;&#x306E;&#x30E1;&#x30AB;&#x30CB;&#x30BA;&#x30E0;&#x306F;&#x4E3B;&#x306B;CpG&#x30B8;&#x30CC;&#x30AF;&#x30EC;&#x30AA;&#x30C1;&#x30C9;&#x3092;&#x200B;&#x200B;&#x4ECB;&#x3057;&#x3066;&#x4F5C;&#x7528;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x3092;&#x793A;&#x3059;&#x3001;&#x30C8;&#x30E9;&#x30F3;&#x30B9;&#x30B8;&#x30A7;&#x30CB;&#x30C3;&#x30AF;&#x30DE;&#x30A6;&#x30B9;&#x3067;LCRbeta-&#x30B0;&#x30ED;&#x30D3;&#x30F3;&#x3092;&#x9ED9;&#x3089;&#x3066;&#x3044;&#x307E;&#x305B;&#x3093;&#x3067;&#x3057;&#x305F;&#x3002;&#x3057;&#x304B;&#x3057;&#x3001;LCRbeta-&#x30B0;&#x30ED;&#x30D3;&#x30F3;&#x767A;&#x73FE;&#x306F;&#x3001;&#x4ED6;&#x306E;&#x30B5;&#x30A4;&#x30EC;&#x30F3;&#x30B7;&#x30F3;&#x30B0;&#x7D4C;&#x8DEF;&#x306F;CpG&#x30B8;&#x30CC;&#x30AF;&#x30EC;&#x30AA;&#x30C1;&#x30C9;&#x306E;&#x5B58;&#x5728;&#x4E0B;&#x3067;dm&#x200B;&#x200B;GFP&#x3092;&#x8A8D;&#x8B58;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x3092;&#x793A;&#x3059;&#x3001;&#x6B21;&#x5584;&#x306E;&#x307E;&#x307E;&#x3067;&#x3042;&#x3063;&#x305F;&#x3002;&#x6211;&#x3005;&#x306F;dmGFP&#x306F;&#x30B5;&#x30A4;&#x30EC;&#x30F3;&#x30B7;&#x30F3;&#x30B0;&#x304C;&#x3001;&#x6700;&#x9069;&#x306A;LCRbeta-&#x30B0;&#x30ED;&#x30D3;&#x30F3;&#x306E;&#x767A;&#x73FE;&#x304C;&#x54FA;&#x4E73;&#x985E;&#x4EE5;&#x5916;&#x306E;&#x8A18;&#x8005;&#x306E;&#x4E0D;&#x5728;&#x4E0B;&#x3067;&#x5F97;&#x3089;&#x308C;&#x305F;&#x6539;&#x5584;&#x3059;&#x308B;&#x3068;&#x7D50;&#x8AD6;&#x4ED8;&#x3051;&#x3066;&#x3044;&#x308B;&#x3002;

EGFP&#x30EC;&#x30DD;&#x30FC;&#x30BF;&#x30FC;&#x907A;&#x4F1D;&#x5B50;CpG&#x30B8;&#x30CC;&#x30AF;&#x30EC;&#x30AA;&#x30C1;&#x30C9;&#x306E;Via&#x6C88;&#x9ED9;LCRbeta-&#x30B0;&#x30ED;&#x30D3;&#x30F3;&#x907A;&#x4F1D;&#x5B50;&#x306E;&#x767A;&#x73FE;&#x3092;

&#xB85C;&#xCEE4; &#xC2A4; &#xC81C;&#xC5B4; &#xC601;&#xC5ED; (LCR)&#xC5D0; &#xC758;&#xD574; &#xADDC;&#xC81C; beta Globin transgenes &#xC9C0;&#xBC30;&#xC801; &#xC720;&#xC804;&#xC790; &#xBCC0;&#xD615; &#xB9C8;&#xC6B0;&#xC2A4;&#xC5D0; &#xC5F0;&#xACB0; &#xB41C; &#xC138;&#xADE0; &#xB9AC;&#xD3EC;&#xD130; &#xC720;&#xC804;&#xC790;&#xC5D0; &#xC758;&#xD574; &#xC790;&#xB3D9;&#xC73C;&#xB85C; &#xC801;&#xC6A9;. &#xD5A5;&#xC0C1; &#xB41C; &#xB179;&#xC0C9; &#xD615;&#xAD11; &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8; (eGFP) &#xD574;&#xD30C;&#xB9AC;&#xC5D0;&#xC11C; &#xB808;&#xD2B8;&#xB85C; &#xBC14;&#xC774;&#xB7EC;&#xC2A4; &#xBCA1;&#xD130;&#xC5D0; &#xACE8; &#xC218;&#xB85C; LCRbeta globin &#xC720;&#xC804;&#xC790;&#xB97C; &#xC804;&#xC1A1; &#xD558;&#xB294; &#xB370; &#xC0AC;&#xC6A9; &#xD558;&#xB294; &#xB300;&#xCCB4; &#xAE30;&#xC790;&#xC785;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xC6B0;&#xB9AC;&#xAC00; &#xBCF4;&#xC5EC; &#xC5EC;&#xAE30; &#xCF54;&#xB529; &#xC2DC;&#xD000;&#xC2A4; &#xCE68;&#xBB35; LCRbeta globin &#xC720;&#xC804;&#xC790; &#xBCC0;&#xD615; &#xC0DD;&#xC950; &#xD558;&#xC9C0;&#xB9CC; PGK &#xBC1C;&#xAE30;&#xC778;&#xC5D0; eGFP &#xAC19;&#xC740; &#xC785;&#xC744; &#xC790;&#xADF9; &#xD558;&#xC9C0; &#xC54A;&#xC558;&#xB2E4;. EGFP &#xB4E4;&#xC5B4; 60 &#xD3EC;&#xC7A5; &#xC18C;&#xBE44;&#xC7AC; &#xADF8; DNA &#xBA54; &#xD2F8; &#xD654;&#xC758; &#xBAA9;&#xD45C;&#xB294; &#xC6B0;&#xB9AC; &#xC18C;&#xC124; &#xD3EC;&#xC7A5; &#xC18C;&#xBE44;&#xC7AC; &#xC5C6;&#xB294; &#xBCC0;&#xC885; dmGFP &#xB77C;&#xB294; &#xD569;&#xC131;. &#xADF8; &#xC720;&#xD2F8;&#xB9AC;&#xD2F0;&#xB294; MSCV &#xB808;&#xD2B8; &#xBCA1;&#xD130; &#xBC14;&#xC774;&#xB7EC;&#xC2A4; 5&#39;LTR &#xB610;&#xB294; &#xB0B4;&#xBD80; PGK &#xB610;&#xB294; EF1alpha &#xBAA8;&#xD130;&#xC5D0; &#xC758;&#xD574; &#xC81C;&#xC5B4; transcriptionally&#xC5D0;&#xC11C; &#xC2DC;&#xC5F0; &#xD588;&#xB2E4;. &#xD2B9;&#xC815; &#xD615;&#xAD11; eGFP, &#xBC0F; transduced &#xB9C8;&#xC6B0;&#xC2A4; CFU S&#xC5D0;&#xC11C;&#xC5D0;&#xC11C; Dmgfp&#xC5D0;&#xC11C; &#xB0AE;&#xC740; &#xC218;&#xC900; &#xBC0F; &#xBC30;&#xC544; &#xC904;&#xAE30; &#xC138;&#xD3EC;&#xC5D0;&#xC11C; &#xBC1C;&#xACAC; &#xB418;&#xC5C8;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4;. Egfp&#xB294; &#xAC70;&#xC758; CFU S&#xC5D0; &#xC785; &#xB9C9; &#xC74C;&#xC744;, &#xD558;&#xB294; &#xB3D9;&#xC548; Dmgfp&#xB294; &#xC774;&#xB7EC;&#xD55C; progenitors&#xC5D0; &#xCE68;&#xBB35; &#xD558;&#xC9C0;. &#xB610;&#xD55C;, &#xCF54;&#xB529; &#xC2DC;&#xD000;&#xC2A4; dmGFP &#xC720;&#xC804;&#xC790; &#xBCC0;&#xD615; &#xC0DD;&#xC950;, &#xBA54;&#xCEE4;&#xB2C8;&#xC998;&#xC744; &#xC785;&#xC744; eGFP CpG &#xADF8;&#xB97C; &#xD1B5;&#xD574; &#xC8FC;&#xB85C; &#xC5ED;&#xD560; &#xD398;&#xC774;&#xC9C0;&#xC5D0;&#xC11C; LCRbeta globin&#xB97C; &#xCE68;&#xBB35; &#xD558;&#xC9C0; &#xC54A;&#xC558;&#xB2E4;. &#xADF8;&#xB7EC;&#xB098;, LCRbeta globin &#xC2DD; &#xCC28;&#xC120; &#xB098;&#xD0C0;&#xB0B4;&#xB294; &#xB2E4;&#xB978; silencing &#xACBD;&#xB85C; &#xC778;&#xC2DD; dmGFP CpG &#xADF8;&#xC758; &#xBD80;&#xC7AC;&#xC5D0; &#xB0A8;&#xC544; &#xC788;&#xC5C8;&#xB2E4;. &#xC6B0;&#xB9AC;&#xB294; dmGFP ameliorates &#xCE68;&#xBB35;, &#xD558;&#xC9C0;&#xB9CC; &#xCD5C;&#xC801;&#xC758; LCRbeta globin &#xC2DD; nonmammalian &#xAE30;&#xC790; &#xB4E4;&#xC758; &#xBD80;&#xC7AC;&#xC5D0;&#xC11C; &#xC5BB;&#xC740; &#xACB0;&#xB860;.

eGFP &#xAE30;&#xC790; &#xC720;&#xC804;&#xC790; &#xCE68;&#xBB35; LCRbeta globin transgene &#xC2DD; &#xD3EC;&#xC7A5; &#xC18C;&#xBE44;&#xC7AC; &#xADF8;&#xB97C; &#xD1B5;&#xD574;.

beta-globina transgenes reguladas por la regi&#xF3;n controladora de locus (LCR) son predominantemente silenciada por los genes ligados al reportero de bacterias en ratones transg&#xE9;nicos. Aumento de la prote&#xED;na verde fluorescente (eGFP) a partir de las medusas es un periodista alternativo que se utiliza en los vectores de retrovirus para transferir los genes de globina LCRbeta-en la m&#xE9;dula &#xF3;sea. Mostramos aqu&#xED; que la codificaci&#xF3;n de eGFP silencios secuencia LCRbeta globina en ratones transg&#xE9;nicos, pero el promotor PGK no provocar el silenciamiento tal. Como eGFP contiene 60 dinucle&#xF3;tidos CpG, que son los objetivos de la metilaci&#xF3;n del ADN, se sintetiz&#xF3; una novela CpG sin variante llamada dmGFP. Su utilidad se demuestra en vectores de retrovirus MSCV transcripcionalmente controlados por el 5&#x26;#39;LTR viral o promotor interno PGK o EF1alpha. Fluorescencia espec&#xED;fica se detect&#xF3; en eGFP, y en los niveles inferiores de dmGFP, en transduced rat&#xF3;n CFU-S y las c&#xE9;lulas madre embrionarias. Mientras eGFP fue silenciado raramente en CFU-S, dmGFP no fue silenciado en estos progenitores. Adem&#xE1;s, la secuencia de codificaci&#xF3;n dmGFP no silenciar LCRbeta-globina en ratones transg&#xE9;nicos, mostrando que el mecanismo de silenciamiento eGFP act&#xFA;a principalmente a trav&#xE9;s de dinucle&#xF3;tidos CpG. Sin embargo, LCRbeta-globina la expresi&#xF3;n segu&#xED;a siendo sub&#xF3;ptimo, lo que indica que las v&#xED;as de silenciamiento de otros reconocen dmGFP en ausencia de dinucle&#xF3;tidos CpG. Se concluye que dmGFP aminora silenciar, pero &#xF3;ptima LCRbeta-globina expresi&#xF3;n se obtiene en ausencia de la prensa no mam&#xED;feros.

Reportero EGFP genes silencio LCRbeta-globina la expresi&#xF3;n del transgen Via dinucle&#xF3;tidos CpG

&#x9762;&#x4E34;&#x5728;&#x5E72;&#x7EC6;&#x80DE;&#x4E2D;&#x7684;&#x57FA;&#x56E0;&#x6CBB;&#x7597;&#x7684;&#x969C;&#x788D;&#x5C31;&#x662F;&#x5411;&#x91CF;&#x7684;&#x8F6C;&#x5F55;&#x6C89;&#x9ED8;&#x3002;&#x5728;&#x8FD9;&#x91CC;&#xFF0C;&#x6211;&#x4EEC;&#x8BA8;&#x8BBA;&#x6700;&#x8FD1;&#x7684;&#x6570;&#x636E;&#x8868;&#x660E;&#xFF0C;oncoretrovirus &#x548C;&#x6162;&#x75C5;&#x6BD2;&#x8F7D;&#x4F53; DNA &#x7532;&#x57FA;&#x5316;&#x548C;&#x7EC4;&#x86CB;&#x767D;&#x7684;&#x4FEE;&#x6539;&#x5BFC;&#x81F4;&#x7684;&#x591A;&#x4E2A;&#x8868;&#x89C2;&#x9057;&#x4F20;&#x901A;&#x8DEF;&#x7684;&#x58F0;&#x97F3;&#x88AB;&#x538B;&#x5236;&#x3002;&#x8FD9;&#x4E24;&#x4E2A;&#x5411;&#x91CF;&#x7C7B;&#x578B;&#x53EF;&#x4EE5;&#x5728;&#x5E72;&#x7EC6;&#x80DE;&#x4E2D;&#x6742;&#x8272;&#x548C;&#x8868;&#x8FBE;&#x5F80;&#x5F80;&#x7184;&#x706D;&#x5728;&#x5206;&#x5316;&#x8FC7;&#x7A0B;&#x3002;&#x6211;&#x4EEC;&#x5EFA;&#x8BAE;&#x8868;&#x89C2;&#x9057;&#x4F20;&#x901A;&#x8DEF;&#x7ADE;&#x4E89;&#x7684;&#x62DB;&#x52DF;&#x7EC4;&#x86CB;&#x767D;&#x5316;&#x9176;&#x3001; de novo &#x7532;&#x57FA;&#x8F6C;&#x79FB;&#x9176;&#x3001; &#x7EC4;&#x86CB;&#x767D; H1 &#x548C; MeCP2 &#x5BC4;&#x4E3B;&#x4E3A;&#x9006;&#x8F6C;&#x5F55;&#x75C5;&#x6BD2;&#x6C89;&#x9ED8;&#x7684;&#x4E00;&#x79CD;&#x65B0;&#x7684;&#x6A21;&#x578B;&#x3002;&#x8FD9;&#x4E9B;&#x67D3;&#x8272;&#x8D28;&#x4FEE;&#x6539;&#x53EF;&#x80FD;&#x884C;&#x52A8;&#x4E0E;&#x5F02;&#x67D3;&#x8272;&#x8D28;&#x6216;&#x9644;&#x8FD1;&#x7684;&#x5730;&#x65B9;&#x96C6;&#x6210;&#x7AD9;&#x70B9;&#x5206;&#x522B;&#x8BBE;&#x7ACB;&#x6C89;&#x9ED8;&#x6216;&#x6591;&#x9A73;&#x7684;&#x97F3;&#x4E50;&#x4F1A;&#x3002;&#x5E72;&#x7EC6;&#x80DE;&#x7684;&#x9006;&#x8F6C;&#x5F55;&#x75C5;&#x6BD2;&#x8F7D;&#x4F53;&#x8BBE;&#x8BA1;&#x5E94;&#x5220;&#x9664;&#x75C5;&#x6BD2;&#x6D88;&#x58F0;&#x5668;&#x5143;&#x7D20;&#x3001; &#x628A;&#x5F3A;&#x79EF;&#x6781;&#x8C03;&#x63A7;&#x5143;&#x4EF6;&#x548C;&#x7EDD;&#x7F18;&#x5B50;&#xFF0C;&#x5E76;&#x907F;&#x514D;&#x975E;&#x54FA;&#x4E73;&#x52A8;&#x7269;&#x8BB0;&#x8005;&#x57FA;&#x56E0;&#x3002;&#x6B64;&#x5916;&#xFF0C;&#x4E0D;&#x65AD;&#x5730;&#x91CD;&#x65B0;&#x586B;&#x5145;&#x4E00;&#x4E2A;&#x65E5;&#x76CA;&#x4E25;&#x91CD;&#x7684;&#x80BF;&#x7624;&#x7684;&#x80BF;&#x7624;&#x5E72;&#x7EC6;&#x80DE;&#x53EF;&#x80FD;&#x4E0E;&#x6B63;&#x5E38;&#x5E72;&#x7EC6;&#x80DE;&#x5171;&#x4EAB;&#x6C89;&#x9ED8;&#x7684;&#x9014;&#x5F84;&#x3002;&#x6700;&#x7EC8;&#xFF0C;&#x4F18;&#x5316;&#x7684;&#x77E2;&#x91CF;&#x8BBE;&#x8BA1;&#x53EF;&#x80FD;&#x662F;&#x6B63;&#x5E38;&#x548C;&#x764C;&#x75C7;&#x5E72;&#x7EC6;&#x80DE;&#x7684;&#x57FA;&#x56E0;&#x6CBB;&#x7597;&#x7684;&#x5B9D;&#x8D35;&#x5DE5;&#x5177;&#x3002;

&#x9006;&#x8F6C;&#x5F55;&#x75C5;&#x6BD2;&#x6C89;&#x9ED8;&#x548C;&#x77E2;&#x91CF;&#x8BBE;&#x8BA1;&#xFF1A; &#x5BF9;&#x6B63;&#x5E38;&#x548C;&#x764C;&#x75C7;&#x5E72;&#x7EC6;&#x80DE;&#x7684;&#x76F8;&#x5173;&#x6027;&#x5417;&#xFF1F;

An obstacle confronting gene therapy in stem cells is transcriptional silencing of the vector. Here, we discuss recent data indicating that oncoretrovirus and lentivirus vectors are silenced by multiple epigenetic pathways that result in DNA methylation and histone modifications. Both vector types can be variegated in stem cells and expression is often extinguished during differentiation. We propose a novel model of retrovirus silencing in which epigenetic pathways compete to recruit histone deacetylases, de novo methyltransferases, histone H1 and MeCP2 to the provirus. These chromatin modifications may act in concert with heterochromatin at or near the integration site to establish silencing or variegation respectively. Retrovirus vector designs for stem cells should delete virus silencer elements, incorporate strong positive regulatory elements and insulators, and avoid non-mammalian reporter genes. In addition, cancer stem cells that continually repopulate a growing tumour may share silencing pathways with normal stem cells. Ultimately, optimized vector designs may prove to be valuable tools for gene therapy of both normal and cancer stem cells.

Retrovirus silencing and vector design: relevance to normal and cancer stem cells?

Un obstacle auquel font face la th&#xE9;rapie g&#xE9;nique dans les cellules souches est le silencing transcriptionnel du vecteur. Ici, nous discutons des donn&#xE9;es r&#xE9;centes indiquant que les vecteurs oncor&#xE9;trovirus et lentivirus sont r&#xE9;duits au silence par de multiples voies &#xE9;pig&#xE9;n&#xE9;tiques qui se traduisent par m&#xE9;thylation de l&#x26;#39;ADN et des modifications des histones. Les deux types de vecteurs peuvent &#xEA;tre panach&#xE9;es dans les cellules souches et d&#x26;#39;expression est souvent &#xE9;teint lors de la diff&#xE9;renciation. Nous proposons un nouveau mod&#xE8;le de silence r&#xE9;trovirus dans lequel voies &#xE9;pig&#xE9;n&#xE9;tiques en concurrence pour recruter des histones d&#xE9;sac&#xE9;tylases, De m&#xE9;thyltransf&#xE9;rases novo, l&#x26;#39;histone H1 et MeCP2 &#xE0; l&#x26;#39;provirus. Ces modifications de la chromatine peuvent agir de concert avec l&#x26;#39;h&#xE9;t&#xE9;rochromatine au niveau ou &#xE0; proximit&#xE9; du site d&#x26;#39;int&#xE9;gration pour &#xE9;tablir silencieux ou panach&#xE9;es, respectivement. Dessins vecteur r&#xE9;troviral pour les cellules souches devrait supprimer des &#xE9;l&#xE9;ments de virus silencieux, incorporer de fortes positifs des &#xE9;l&#xE9;ments de r&#xE9;gulation et des isolants, et d&#x26;#39;&#xE9;viter les g&#xE8;nes rapporteurs non-mammif&#xE8;res. En outre, les cellules souches canc&#xE9;reuses qui ne cessent de repeupler une tumeur de plus en plus peuvent partager les voies avec silencing cellules souches normales. En fin de compte, dessins vectoriels optimis&#xE9;s peuvent s&#x26;#39;av&#xE9;rer des outils pr&#xE9;cieux pour la th&#xE9;rapie g&#xE9;nique des cellules souches &#xE0; la fois normales et canc&#xE9;reuses.

Silencing R&#xE9;trovirus et Vector Design: Pertinence par rapport aux cellules souches normales et canc&#xE9;reuses?

Retrovirus-Silencing-und Vektor-Design: Bedeutung f&#xFC;r die normale und Krebsstammzellen?

Un ostacolo affrontando la terapia genica in cellule staminali &egrave; un silenziamento trascrizionale del vettore. Qui discutiamo di dati recenti indicano che oncoretrovirus e vettori lentivirus sono zittiti da molteplici percorsi epigenetiche che si traducono in DNA metilazione e istone modifiche. Entrambi i tipi di vettore possono essere variegati in cellule staminali ed espressione spesso si spegne durante la differenziazione. Vi proponiamo un modello di romanzo del retrovirus silenzio in cui vie epigenetiche competono a reclutare deacetylases dell&#39;istone, de novo methyltransferases dell&#39;istone H1 e MeCP2 per il provirus. Queste modificazioni della cromatina possono agire di concerto con eterocromatina presso o vicino al sito di integrazione per determinare rispettivamente il silenziamento o variegatura. Disegni vettoriali retrovirus per cellule staminali dovrebbero eliminare virus silenziatore elementi, incorporare gli isolanti e forti elementi regolatori positivi ed evitare di geni reporter di mammiferi. Cellule staminali, cancro che continuamente ripopolare un tumore crescente puo &#39; condividere alcune vie di silenziamento con cellule staminali normali. In definitiva, disegni vettoriali ottimizzato possono rivelarsi strumenti preziosi per la terapia genica delle cellule staminali normali e il cancro.

Disegno vettoriale e silenziamento retrovirus: rilevanza alle cellule staminali normali e cancro?

&#x5E79;&#x7D30;&#x80DE;&#x3067;&#x907A;&#x4F1D;&#x5B50;&#x6CBB;&#x7642;&#x304C;&#x76F4;&#x9762;&#x3059;&#x308B;&#x969C;&#x5BB3;&#x306F;&#x3001;&#x30D9;&#x30AF;&#x30BF;&#x30FC;&#x306E;&#x8EE2;&#x5199;&#x30B5;&#x30A4;&#x30EC;&#x30F3;&#x30B7;&#x30F3;&#x30B0;&#x3067;&#x3042;&#x308B;&#x3002;&#x3053;&#x3053;&#x3067;&#x306F;&#x3001;oncoretrovirus&#x3068;&#x30EC;&#x30F3;&#x30C1;&#x30A6;&#x30A4;&#x30EB;&#x30B9;&#x30D9;&#x30AF;&#x30BF;&#x30FC;&#x306F;&#x3001;DNA&#x30E1;&#x30C1;&#x30EB;&#x5316;&#x3068;&#x30D2;&#x30B9;&#x30C8;&#x30F3;&#x4FEE;&#x98FE;&#x306E;&#x7D50;&#x679C;&#x3001;&#x8907;&#x6570;&#x306E;&#x30A8;&#x30D4;&#x30B8;&#x30A7;&#x30CD;&#x30C6;&#x30A3;&#x30C3;&#x30AF;&#x306A;&#x7D4C;&#x8DEF;&#x306B;&#x3088;&#x3063;&#x3066;&#x6C88;&#x9ED9;&#x3055;&#x308C;&#x3066;&#x3044;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x3092;&#x793A;&#x3059;&#x6700;&#x8FD1;&#x306E;&#x30C7;&#x30FC;&#x30BF;&#x306B;&#x3064;&#x3044;&#x3066;&#x8AAC;&#x660E;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x4E21;&#x65B9;&#x306E;&#x30D9;&#x30AF;&#x30C8;&#x30EB;&#x578B;&#x306F;&#x3001;&#x591A;&#x304F;&#x306E;&#x5206;&#x5316;&#x306E;&#x9593;&#x306B;&#x6D88;&#x6EC5;&#x3055;&#x308C;&#x3066;&#x3044;&#x308B;&#x5E79;&#x7D30;&#x80DE;&#x3068;&#x5F0F;&#x306E;&#x4E2D;&#x3067;&#x591A;&#x5F69;&#x306B;&#x3059;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x304C;&#x3067;&#x304D;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x6211;&#x3005;&#x306F;&#x3001;&#x30A8;&#x30D4;&#x30B8;&#x30A7;&#x30CD;&#x30C6;&#x30A3;&#x30C3;&#x30AF;&#x306A;&#x7D4C;&#x8DEF;&#x304C;&#x30D7;&#x30ED;&#x30A6;&#x30A4;&#x30EB;&#x30B9;&#x306B;&#x30D2;&#x30B9;&#x30C8;&#x30F3;&#x8131;&#x30A2;&#x30BB;&#x30C1;&#x30EB;&#x5316;&#x9175;&#x7D20;&#x3001;de novo&#x306E;&#x30E1;&#x30C1;&#x30EB;&#x30C8;&#x30E9;&#x30F3;&#x30B9;&#x30D5;&#x30A7;&#x30E9;&#x30FC;&#x30BC;&#x3001;&#x30D2;&#x30B9;&#x30C8;&#x30F3;H1&#x3068;MeCP2&#x306F;&#x52DF;&#x96C6;&#x3092;&#x7AF6;&#x3046;&#x30EC;&#x30C8;&#x30ED;&#x30A6;&#x30A4;&#x30EB;&#x30B9;&#x306E;&#x30B5;&#x30A4;&#x30EC;&#x30F3;&#x30B7;&#x30F3;&#x30B0;&#x306E;&#x65B0;&#x898F;&#x30E2;&#x30C7;&#x30EB;&#x3092;&#x63D0;&#x6848;&#x3059;&#x308B;&#x3002;&#x3053;&#x308C;&#x3089;&#x306E;&#x30AF;&#x30ED;&#x30DE;&#x30C1;&#x30F3;&#x4FEE;&#x98FE;&#x306F;&#x3001;&#x305D;&#x308C;&#x305E;&#x308C;&#x30B5;&#x30A4;&#x30EC;&#x30F3;&#x307E;&#x305F;&#x306F;&#x6591;&#x5165;&#x308A;&#x3092;&#x78BA;&#x7ACB;&#x3059;&#x308B;&#x305F;&#x3081;&#x306B;&#x7D71;&#x5408;&#x90E8;&#x4F4D;&#x307E;&#x305F;&#x306F;&#x305D;&#x306E;&#x8FD1;&#x304F;&#x30D8;&#x30C6;&#x30ED;&#x30AF;&#x30ED;&#x30DE;&#x30C1;&#x30F3;&#x3068;&#x5354;&#x8ABF;&#x3057;&#x3066;&#x884C;&#x52D5;&#x3059;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x304C;&#x3042;&#x308A;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x5E79;&#x7D30;&#x80DE;&#x306E;&#x30EC;&#x30C8;&#x30ED;&#x30A6;&#x30A4;&#x30EB;&#x30B9;&#x30D9;&#x30AF;&#x30BF;&#x30FC;&#x306E;&#x30C7;&#x30B6;&#x30A4;&#x30F3;&#x306F;&#x3001;&#x5F37;&#x3044;&#x6B63;&#x306E;&#x8ABF;&#x7BC0;&#x30A8;&#x30EC;&#x30E1;&#x30F3;&#x30C8;&#x3068;&#x7D76;&#x7E01;&#x4F53;&#x3092;&#x7D44;&#x307F;&#x8FBC;&#x3080;&#x3053;&#x3068;&#x3001;&#x304A;&#x3088;&#x3073;&#x975E;&#x54FA;&#x4E73;&#x985E;&#x306E;&#x30EC;&#x30DD;&#x30FC;&#x30BF;&#x30FC;&#x907A;&#x4F1D;&#x5B50;&#x3092;&#x56DE;&#x907F;&#x3059;&#x308B;&#x306B;&#x306F;&#x3001;&#x30A6;&#x30A4;&#x30EB;&#x30B9;&#x306E;&#x30B5;&#x30A4;&#x30EC;&#x30F3;&#x30B5;&#x30FC;&#x306E;&#x8981;&#x7D20;&#x3092;&#x524A;&#x9664;&#x3059;&#x308B;&#x5FC5;&#x8981;&#x304C;&#x3042;&#x308A;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x3055;&#x3089;&#x306B;&#x3001;&#x7D99;&#x7D9A;&#x7684;&#x306B;&#x6210;&#x9577;&#x3059;&#x308B;&#x816B;&#x760D;&#x3092;&#x518D;&#x79FB;&#x690D;&#x304C;&#x3093;&#x5E79;&#x7D30;&#x80DE;&#x306F;&#x6B63;&#x5E38;&#x5E79;&#x7D30;&#x80DE;&#x3068;&#x30B5;&#x30A4;&#x30EC;&#x30F3;&#x30B7;&#x30F3;&#x30B0;&#x7D4C;&#x8DEF;&#x3092;&#x5171;&#x6709;&#x3059;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x304C;&#x3042;&#x308A;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x6700;&#x7D42;&#x7684;&#x306B;&#x306F;&#x3001;&#x6700;&#x9069;&#x5316;&#x3055;&#x308C;&#x305F;&#x30D9;&#x30AF;&#x30C8;&#x30EB;&#x306E;&#x30C7;&#x30B6;&#x30A4;&#x30F3;&#x306F;&#x3001;&#x4E21;&#x65B9;&#x306E;&#x6B63;&#x5E38;&#x304A;&#x3088;&#x3073;&#x764C;&#x5E79;&#x7D30;&#x80DE;&#x306E;&#x907A;&#x4F1D;&#x5B50;&#x6CBB;&#x7642;&#x306E;&#x305F;&#x3081;&#x306E;&#x8CB4;&#x91CD;&#x306A;&#x30C4;&#x30FC;&#x30EB;&#x306B;&#x306A;&#x308B;&#x304B;&#x3082;&#x3057;&#x308C;&#x306A;&#x3044;&#x3002;

&#x30EC;&#x30C8;&#x30ED;&#x30A6;&#x30A4;&#x30EB;&#x30B9;&#x306E;&#x30B5;&#x30A4;&#x30EC;&#x30F3;&#x30B7;&#x30F3;&#x30B0;&#x3068;&#x30D9;&#x30AF;&#x30BF;&#x30FC;&#x30C7;&#x30B6;&#x30A4;&#x30F3;&#xFF1A;&#x30CE;&#x30FC;&#x30DE;&#x30EB;&#x3068;&#x304C;&#x3093;&#x5E79;&#x7D30;&#x80DE;&#x306B;&#x95A2;&#x9023;&#x6027;&#xFF1F;

&#xC7A5;&#xC560;&#xBB3C;&#xC744; &#xC9C1;&#xBA74; &#xD558; &#xACE0; &#xC904;&#xAE30; &#xC138;&#xD3EC;&#xC5D0;&#xC11C; &#xC720;&#xC804;&#xC790; &#xCE58;&#xB8CC; &#xBCA1;&#xD130;&#xC758; transcriptional &#xCE68;&#xBB35; &#xC774;&#xB2E4;. &#xC5EC;&#xAE30;, &#xC6B0;&#xB9AC;&#xAC00; &#xCD5C;&#xADFC; &#xB370;&#xC774;&#xD130;&#xB294; oncoretrovirus&#xC744; &#xB098;&#xD0C0;&#xB0B4;&#xB294; &#xD1A0;&#xB860;&#xACFC; lentivirus &#xBCA1;&#xD130;&#xB294; DNA &#xBA54; &#xD2F8; &#xD654; &#xBC0F; &#xD788;&#xC2A4;&#xD1A4; &#xC218;&#xC815;&#xC5D0;&#xC11C; &#xBC1C;&#xC0DD; &#xD558;&#xB294; &#xC5EC;&#xB7EC; epigenetic &#xACBD;&#xB85C; &#xC758;&#xD574; &#xC785; &#xB9C9; &#xC74C;&#xC744; &#xD569;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xBCA1;&#xD130; &#xD615;&#xC2DD;&#xC744; &#xBAA8;&#xB450; &#xC904;&#xAE30; &#xC138;&#xD3EC;&#xC5D0; &#xC7A1; &#xC0C9; &#xC218;&#xC640; &#xC2DD; &#xBD84;&#xD654; &#xD558;&#xB294; &#xB3D9;&#xC548; &#xC885;&#xC885; &#xC18C;&#xBA78; &#xC774;&#xB2E4;. &#xC6B0;&#xB9AC;&#xB294; epigenetic &#xACBD;&#xB85C; &#xACBD;&#xC7C1; &#xBAA8;&#xC9D1; histone deacetylases, &#xB4DC; &#xB178; &#xBCF4; methyltransferases, &#xD788;&#xC2A4;&#xD1A4; H1 &#xBC0F; Mecp2&#xB294; provirus &#xB808;&#xD2B8; &#xCE68;&#xBB35;&#xC758; &#xC0C8;&#xB85C;&#xC6B4; &#xBAA8;&#xB378;&#xC744; &#xC81C;&#xC548; &#xD569;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xC774;&#xB7EC;&#xD55C; chromatin &#xC218;&#xC815; &#xC12C;&#xC73C;&#xB85C; &#xC785;&#xC744; &#xB610;&#xB294; &#xC7A1; &#xC0C9;&#xC744; &#xAC01;&#xAC01; &#xC124;&#xC815; &#xD1B5;&#xD569; &#xC0AC;&#xC774;&#xD2B8; &#xAC70;&#xC758; &#xD568;&#xAED8; &#xD589;&#xB3D9; &#xC218; &#xC788;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xC904;&#xAE30; &#xC138;&#xD3EC;&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xB808;&#xD2B8;&#xB85C; &#xBC14;&#xC774;&#xB7EC;&#xC2A4; &#xBCA1;&#xD130; &#xB514;&#xC790;&#xC778; &#xBC14;&#xC774;&#xB7EC;&#xC2A4; &#xC18C;&#xC74C; &#xC694;&#xC18C;&#xB97C; &#xC0AD;&#xC81C;, &#xAC15;&#xD55C; &#xAE0D;&#xC815;&#xC801;&#xC778; &#xADDC;&#xC81C; &#xC694;&#xC18C;&#xC640; &#xC808;&#xC5F0;&#xCCB4;, &#xD1B5;&#xD569; &#xACE0; &#xBE44; &#xD3EC;&#xC720;&#xB958; &#xB9AC;&#xD3EC;&#xD130; &#xC720;&#xC804;&#xC790;&#xB97C; &#xBC29;&#xC9C0; &#xD574;&#xC57C; &#xD569;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xB610;&#xD55C;, &#xC9C0;&#xC18D;&#xC801;&#xC73C;&#xB85C; &#xC131;&#xC7A5; &#xD558; &#xACE0; &#xC788;&#xB294; &#xC885;&#xC591;&#xC744; &#xB2E4;&#xC2DC; &#xC554; &#xC904;&#xAE30; &#xC138;&#xD3EC;&#xB294; &#xC815;&#xC0C1; &#xC904;&#xAE30; &#xC138;&#xD3EC;&#xC640; silencing &#xACBD;&#xB85C; &#xACF5;&#xC720;&#xD560; &#xC218; &#xC788;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xAD81;&#xADF9;&#xC801;&#xC73C;&#xB85C;, &#xCD5C;&#xC801;&#xD654; &#xB41C; &#xBCA1;&#xD130; &#xB514;&#xC790;&#xC778; &#xC815;&#xC0C1; &#xBC0F; &#xC554; &#xC904;&#xAE30; &#xC138;&#xD3EC;&#xC758; &#xC720;&#xC804;&#xC790; &#xCE58;&#xB8CC;&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xADC0;&#xC911; &#xD55C; &#xB3C4;&#xAD6C; &#xC99D;&#xBA85;&#xD560; &#xC218; &#xC788;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4;.

&#xB808;&#xD2B8;&#xB85C; &#xBC14;&#xC774;&#xB7EC;&#xC2A4; &#xBCA1;&#xD130;&#xB97C; &#xC785;&#xC744; &#xB514;&#xC790;&#xC778;: &#xC815;&#xC0C1; &#xBC0F; &#xC554; &#xC904;&#xAE30; &#xC138;&#xD3EC;&#xB97C; &#xAD00;&#xB828;&#xC131;?

Un obst&#xE1;culo frente a la terapia g&#xE9;nica en c&#xE9;lulas madre es silenciamiento transcripcional del vector. En este caso, hablamos de los datos recientes que indican que los vectores oncorretrovirus y lentivirus son silenciados por m&#xFA;ltiples v&#xED;as epigen&#xE9;ticos que dan lugar a la metilaci&#xF3;n del ADN y las modificaciones de histonas. Ambos tipos de vectores puede ser variada en las c&#xE9;lulas madre y la expresi&#xF3;n a menudo se extingui&#xF3; durante la diferenciaci&#xF3;n. Se propone un nuevo modelo de silenciamiento de los retrovirus en la que las v&#xED;as epigen&#xE9;ticas compiten para reclutar desacetilasas de histonas, metiltransferasas de novo, la histona H1 y MeCP2 que el provirus. Estas modificaciones de la cromatina puede actuar en concierto con la heterocromatina en o cerca del sitio de integraci&#xF3;n para establecer el silenciamiento o el abigarramiento, respectivamente. Dise&#xF1;os vectoriales retrovirus de las c&#xE9;lulas madre debe eliminar los elementos de virus silenciador, incorpora importantes elementos positivos de reglamentaci&#xF3;n y aislantes, y evitar la falta de mam&#xED;feros genes reporteros. Adem&#xE1;s, las c&#xE9;lulas madre del c&#xE1;ncer que continuamente vuelven a mostrar un tumor en crecimiento puede compartir las v&#xED;as con el silenciamiento de las c&#xE9;lulas madre normales. En &#xFA;ltima instancia, dise&#xF1;os optimizados de vectores puede llegar a ser herramientas valiosas para la terapia g&#xE9;nica de las c&#xE9;lulas madre normales y el c&#xE1;ncer.

Retrovirus del silencio y el dise&#xF1;o vectorial: Relevancia de las c&#xE9;lulas madre normales y el c&#xE1;ncer?

&#x5316;&#x5B66;&#x6210;&#x5206;&#x786E;&#x5B9A;&#x4ECB;&#x8D28; (CDM) &#x6761;&#x4EF6;&#x63A7;&#x5236;&#x4EBA;&#x7C7B;&#x80DA;&#x80CE;&#x5E72;&#x7EC6;&#x80DE; &#xFF08;hESC&#xFF09; &#x547D;&#x8FD0;&#x4E0D;&#x4EC5;&#x4FBF;&#x5229; hESCs &#x5728;&#x7814;&#x7A76;&#x4E0E;&#x6CBB;&#x7597;&#x4E2D;&#x7684;&#x5B9E;&#x9645;&#x5E94;&#x7528;&#x8FD8;&#x4E3A;&#x57FA;&#x7840;&#x7684;&#x81EA;&#x6211;&#x66F4;&#x65B0;&#x548C;&#x5206;&#x5316;&#xFF0C;&#x65E0;&#x8FDB;&#x7EB8;&#x5668;&#x7EC6;&#x80DE;&#x4E0E;&#x8840;&#x6E05;&#x76F8;&#x5173;&#x7684;&#x591A;&#x4E2A;&#x672A;&#x77E5;&#x548C;&#x53EF;&#x53D8;&#x56E0;&#x7D20;&#x7684;&#x5206;&#x5B50;&#x673A;&#x5236;&#x7814;&#x7A76;&#x63D0;&#x4F9B;&#x4E00;&#x4E2A;&#x826F;&#x597D;&#x7684;&#x5236;&#x5EA6;&#x3002;&#x5728;&#x8FD9;&#x91CC;&#x6211;&#x4EEC;&#x62A5;&#x544A;&#x7B80;&#x5355;&#x7684;&#x6E05;&#x6D01;&#x53D1;&#x5C55;&#x673A;&#x5236;&#x652F;&#x6301; hESCs &#x6210;&#x957F; Matrigel &#x6D82;&#x5C42;&#x8868;&#x9762;&#x4E0A;&#x5BF9;&#x591A;&#x4E2A;&#x901A;&#x9053;&#x7684;&#x6709;&#x6548;&#x81EA;&#x6211;&#x66F4;&#x65B0;&#x3002;&#x5728;&#x8FD9;&#x79CD;&#x6761;&#x4EF6;&#x4E0B;&#x7684;&#x6269;&#x5927;&#x7684; hESCs &#x4FDD;&#x6301;&#x591A;&#x4E2A; hESC &#x7279;&#x5B9A;&#x6807;&#x8BB0;&#x7684;&#x8868;&#x8FBE;&#x5F0F;&#x3001; &#x4FDD;&#x7559;&#x7279;&#x6027; hESC &#x5F62;&#x6001;&#x3001; &#x62E5;&#x6709;&#x6B63;&#x5E38;&#x67D3;&#x8272;&#x4F53;&#x6838;&#x578B;&#x4F53;&#x5916;&#xFF0C;&#x4EE5;&#x53CA;&#x5236;&#x5B9A;&#x7578;&#x80CE;&#x7624;&#x4F53;&#x5185;&#x3002;&#x6B64;&#x5916;&#xFF0C;&#x591A;&#x79CD;&#x751F;&#x957F;&#x56E0;&#x5B50;&#x88AB;&#x53D1;&#x73B0;&#x6709;&#x9009;&#x62E9;&#x6027;&#x5730;&#x8BF1;&#x5BFC;&#x5355;&#x5C42; hESC &#x6587;&#x5316;&#x8D70;&#x5411;&#x795E;&#x7ECF;&#x3001; &#x660E;&#x786E;&#x5185;&#x80DA;&#x5C42;/&#x80F0;&#x817A;&#x548C;&#x65E9;&#x671F;&#x5FC3;&#x808C;&#x7EC6;&#x80DE;&#xFF0C;&#x5206;&#x522B;&#x5728;&#x6211;&#x56FD;&#x6E05;&#x6D01;&#x53D1;&#x5C55;&#x673A;&#x5236;&#x7684;&#x6761;&#x4EF6;&#x3002;&#x56E0;&#x6B64;&#xFF0C;&#x8FD9;&#x4E00;&#x6E05;&#x6D01;&#x53D1;&#x5C55;&#x673A;&#x5236;&#x6761;&#x4EF6;&#x8FDB;&#x4E00;&#x6B65;&#x8868;&#x5F81; hESC &#x81EA;&#x6211;&#x66F4;&#x65B0;&#x548C;&#x5B9A;&#x5411;&#x7684;&#x5206;&#x5316;&#xFF0C;&#x4EE5;&#x53CA;&#x6CBB;&#x7597;&#x7684;&#x65B0;&#x7684;&#x53D1;&#x5C55;&#x63D0;&#x4F9B;&#x4E86;&#x57FA;&#x672C;&#x7684;&#x5E73;&#x53F0;&#x3002;

&#x957F;&#x671F;&#x7684;&#x81EA;&#x6211;&#x66F4;&#x65B0;&#x548C;&#x5B9A;&#x5411;&#x5206;&#x5316;&#x7684;&#x4EBA;&#x7C7B;&#x80DA;&#x80CE;&#x5E72;&#x7EC6;&#x80DE;&#x7684;&#x5316;&#x5B66;&#x6210;&#x5206;&#x786E;&#x5B9A;&#x7684;&#x6761;&#x4EF6;&#x3002;

Chemically defined medium (CDM) conditions for controlling human embryonic stem cell (hESC) fate will not only facilitate the practical application of hESCs in research and therapy but also provide an excellent system for studying the molecular mechanisms underlying self-renewal and differentiation, without the multiple unknown and variable factors associated with feeder cells and serum. Here we report a simple CDM that supports efficient self-renewal of hESCs grown on a Matrigel-coated surface over multiple passages. Expanded hESCs under such conditions maintain expression of multiple hESC-specific markers, retain the characteristic hESC morphology, possess a normal karyotype in vitro, as well as develop teratomas in vivo. Additionally, several growth factors were found to selectively induce monolayer differentiation of hESC cultures toward neural, definitive endoderm/pancreatic and early cardiac muscle cells, respectively, in our CDM conditions. Therefore, this CDM condition provides a basic platform for further characterization of hESC self-renewal and directed differentiation, as well as the development of novel therapies.

Long-term self-renewal and directed differentiation of human embryonic stem cells in chemically defined conditions.

Milieu chimiquement d&#xE9;fini (CDM) pour contr&#xF4;ler les conditions de cellules souches embryonnaires humaines (CSEh) sort ne sera pas seulement de faciliter l&#x26;#39;application pratique de CSEh dans la recherche et la th&#xE9;rapie, mais aussi de fournir un excellent syst&#xE8;me pour &#xE9;tudier les m&#xE9;canismes mol&#xE9;culaires qui sous-tendent l&#x26;#39;auto-renouvellement et de diff&#xE9;renciation, sans le de multiples facteurs inconnus et variable associ&#xE9;e &#xE0; des cellules nourrici&#xE8;res et de s&#xE9;rum. Nous rapportons ici un simple MDP qui prend en charge efficace d&#x26;#39;auto-renouvellement des CSEh cultiv&#xE9;es sur une surface rev&#xEA;tue de Matrigel sur des passages multiples. CSEh &#xE9;tendues dans de telles conditions maintenir l&#x26;#39;expression de plusieurs marqueurs sp&#xE9;cifiques de CSEh, de conserver la morphologie caract&#xE9;ristique des CSEh, poss&#xE8;dent un caryotype normal in vitro, ainsi que de d&#xE9;velopper des t&#xE9;ratomes in vivo. En outre, plusieurs facteurs de croissance ont &#xE9;t&#xE9; trouv&#xE9;s pour induire s&#xE9;lectivement la diff&#xE9;renciation des cultures monocouche CSEh vers neurale, l&#x26;#39;endoderme d&#xE9;finitif / pancr&#xE9;atique et au d&#xE9;but des cellules musculaires cardiaques, respectivement, dans nos conditions au titre du MDP. Par cons&#xE9;quent, cette condition MDP fournit une plate-forme de base pour une caract&#xE9;risation plus pouss&#xE9;e des CSEh auto-renouvellement et la diff&#xE9;renciation dirig&#xE9;e, ainsi que le d&#xE9;veloppement de nouvelles th&#xE9;rapies.

&#xC0; long terme d&#x26;#39;auto-renouvellement et la diff&#xE9;renciation dirig&#xE9;e des cellules souches embryonnaires humaines dans des conditions d&#xE9;finies chimiquement

Chemisch definierte mittlere (CDM) Bedingungen f&uuml;r die Steuerung von menschlichen embryonalen Stammzellen (hESC) Schicksal werden nicht nur zur Erleichterung der praktischen Anwendungdes von Zellkulturen in Forschung und Therapie sondern auch bieten ein ausgezeichnetes System f&uuml;r die Untersuchung der molekularen Mechanismen Selbsterneuerung und Differenzierung, ohne das mehrere unbekannten und Variablen Faktoren im Zusammenhang mit Feeder-Zellen und Serum. Hier berichten wir eine einfache CDM, die effiziente Selbsterneuerung von Zellkulturen auf einer Matrigel beschichtete Oberfl&auml;che in mehreren Passagen gewachsen unterst&uuml;tzt. Erweiterte Zellkulturen unter solchen Bedingungen pflegen Ausdruck mehrere hESC-spezifische Marker, behalten die charakteristischen hESC-Morphologie, besitzen einen unauff&auml;lligen Karyotyp in-vitro-, sowie in-vivo Teratome entwickeln. Dar&uuml;ber hinaus wurden mehrere Wachstumsfaktoren gefunden, um selektiv Monolage Differenzierung hESC Kulturen gegen&uuml;ber neuronalen, definitive Endodermis/Pankreas und fr&uuml;hen Herzmuskel Zellen, bzw. in unseren CDM-Bedingungen hervorzurufen. Daher bietet diese CDM-Bedingung eine grundlegende Plattform f&uuml;r weitere Charakterisierung von hESC Selbsterneuerung und gezielte Differenzierung, sowie die Entwicklung neuartiger Therapien.

Langfristige Selbsterneuerung und gesteuerte Differenzierung von humanen embryonalen Stammzellen in chemisch definierten Bedingungen.

Chimicamente definite condizioni medie (CDM) per il controllo sulle cellule staminali embrionali umane (hESC) destino saranno non solo facilitare l&#39;applicazione pratica delle hESCs nella ricerca e nella terapia, ma forniscono anche un eccellente sistema per studiare i meccanismi molecolari alla base di auto-rinnovamento e differenziazione, senza i pi&ugrave; sconosciuti e variabili fattori associati con siero e cellule di alimentatore. Qui riportiamo un semplice CDM che supporta efficiente auto-rinnovamento delle hESC coltivate su una superficie verniciata Matrigel sopra passaggi multipli. Espanso hESCs in tali condizioni mantenere espressione di marcatori specifici hESC multiple, conservano la morfologia caratteristica hESC, possiedono un cariotipo normale in vitro, come pure sviluppano teratomi in vivo. Inoltre, diversi fattori di crescita sono stati trovati selettivamente indurre differenziazione monostrato di hESC culture verso neurale, definitivo endoderma/pancreatico e presto le cellule del muscolo cardiaco, rispettivamente, nelle nostre condizioni CDM. Pertanto, questa condizione CDM fornisce una piattaforma di base per ulteriore caratterizzazione delle hESC auto-rinnovamento e differenziazione diretto, come pure lo sviluppo di nuove terapie.

A lungo termine auto-rinnovamento e diretta differenziazione delle cellule staminali embrionali umane in condizioni definite chimicamente.

&#x904B;&#x547D;&#x3060;&#x3051;&#x3067;&#x306A;&#x304F;&#x3001;&#x81EA;&#x5DF1;&#x8907;&#x88FD;&#x3068;&#x5206;&#x5316;&#x306E;&#x5206;&#x5B50;&#x6A5F;&#x69CB;&#x3092;&#x7814;&#x7A76;&#x3059;&#x308B;&#x305F;&#x3081;&#x306E;&#x7814;&#x7A76;&#x3068;&#x6CBB;&#x7642;&#x306E;&#x30D2;&#x30C8;ES&#x7D30;&#x80DE;&#x306E;&#x5B9F;&#x7528;&#x5316;&#x3092;&#x4FC3;&#x9032;&#x3059;&#x308B;&#x3060;&#x3051;&#x3067;&#x306A;&#x304F;&#x3001;&#x512A;&#x308C;&#x305F;&#x30B7;&#x30B9;&#x30C6;&#x30E0;&#x3092;&#x63D0;&#x4F9B;&#x3057;&#x307E;&#x305B;&#x3093;&#x30D2;&#x30C8;&#x80DA;&#x6027;&#x5E79;&#x7D30;&#x80DE;&#xFF08;hESC&#x306E;&#xFF09;&#x3092;&#x5236;&#x5FA1;&#x3059;&#x308B;&#x305F;&#x3081;&#x306E;&#x5316;&#x5B66;&#x7684;&#x306B;&#x5B9A;&#x7FA9;&#x3055;&#x308C;&#x305F;&#x57F9;&#x5730;&#xFF08;CDM&#xFF09;&#x306E;&#x6761;&#x4EF6;&#x30D5;&#x30A3;&#x30FC;&#x30C0;&#x30FC;&#x7D30;&#x80DE;&#x3068;&#x8840;&#x6E05;&#x306B;&#x95A2;&#x9023;&#x4ED8;&#x3051;&#x3089;&#x308C;&#x305F;&#x8907;&#x6570;&#x306E;&#x672A;&#x77E5;&#x306E;&#x5909;&#x52D5;&#x8981;&#x56E0;&#x3002;&#x3053;&#x3053;&#x3067;&#x306F;&#x3001;&#x8907;&#x6570;&#x306E;&#x901A;&#x8DEF;&#x3092;&#x4ECB;&#x3057;&#x3066;&#x30DE;&#x30C8;&#x30EA;&#x30B2;&#x30EB;&#x88AB;&#x8986;&#x8868;&#x9762;&#x4E0A;&#x306B;&#x6210;&#x9577;&#x3055;&#x305B;&#x305F;&#x30D2;&#x30C8;ES&#x7D30;&#x80DE;&#x306E;&#x52B9;&#x7387;&#x7684;&#x306A;&#x81EA;&#x5DF1;&#x518D;&#x751F;&#x3092;&#x30B5;&#x30DD;&#x30FC;&#x30C8;&#x3059;&#x308B;&#x5358;&#x7D14;&#x306A;CDM&#x3092;&#x5831;&#x544A;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x3053;&#x306E;&#x3088;&#x3046;&#x306A;&#x72B6;&#x6CC1;&#x306E;&#x4E0B;&#x306B;&#x5C55;&#x958B;&#x3055;&#x308C;&#x305F;&#x30D2;&#x30C8;ES&#x7D30;&#x80DE;&#x306F;&#x3001;&#x8907;&#x6570;&#x306E;hESC&#x306E;&#x7279;&#x7570;&#x7684;&#x30DE;&#x30FC;&#x30AB;&#x30FC;&#x306E;&#x767A;&#x73FE;&#x3092;&#x7DAD;&#x6301;&#x3059;&#x308B;&#x305F;&#x3081;&#x306B;&#x3001;in vitro&#x3067;&#x6B63;&#x5E38;&#x6838;&#x578B;&#x3092;&#x6709;&#x3057;&#x3001;&#x7279;&#x5FB4;&#x7684;&#x306A;hESC&#x306E;&#x5F62;&#x614B;&#x3092;&#x4FDD;&#x6301;&#x3059;&#x308B;&#x3060;&#x3051;&#x3067;&#x306A;&#x304F;&#x3001;in vivo&#x3067;&#x5947;&#x5F62;&#x816B;&#x3092;&#x958B;&#x767A;&#x3057;&#x3066;&#x3044;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x3055;&#x3089;&#x306B;&#x3001;&#x3044;&#x304F;&#x3064;&#x304B;&#x306E;&#x6210;&#x9577;&#x56E0;&#x5B50;&#x306F;&#x3001;&#x5F53;&#x793E;&#x306E;CDM&#x306E;&#x6761;&#x4EF6;&#x3067;&#x3001;&#x305D;&#x308C;&#x305E;&#x308C;&#x9078;&#x629E;&#x7684;&#x306B;&#x795E;&#x7D4C;&#x3001;&#x80DA;&#x4F53;&#x5185;&#x80DA;&#x8449;/&#x81B5;&#x81D3;&#x3001;&#x65E9;&#x671F;&#x5FC3;&#x7B4B;&#x7D30;&#x80DE;&#x306B;&#x5411;&#x304B;&#x3063;&#x3066;hESC&#x306E;&#x6587;&#x5316;&#x306E;&#x5358;&#x5C64;&#x5206;&#x5316;&#x3092;&#x8A98;&#x5C0E;&#x3059;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x304C;&#x5224;&#x660E;&#x3057;&#x305F;&#x3002;&#x3057;&#x305F;&#x304C;&#x3063;&#x3066;&#x3001;&#x3053;&#x306E;CDM&#x306E;&#x6761;&#x4EF6;&#x306F;&#x3055;&#x3089;&#x306B;hESC&#x306E;&#x81EA;&#x5DF1;&#x8907;&#x88FD;&#x3068;&#x5206;&#x5316;&#x306E;&#x6307;&#x793A;&#x306E;&#x7279;&#x6027;&#x3068;&#x540C;&#x69D8;&#x306B;&#x3001;&#x65B0;&#x898F;&#x6CBB;&#x7642;&#x6CD5;&#x306E;&#x958B;&#x767A;&#x306E;&#x305F;&#x3081;&#x306E;&#x57FA;&#x672C;&#x7684;&#x306A;&#x30D7;&#x30E9;&#x30C3;&#x30C8;&#x30D5;&#x30A9;&#x30FC;&#x30E0;&#x3092;&#x63D0;&#x4F9B;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;

&#x9577;&#x671F;&#x7684;&#x306A;&#x81EA;&#x5DF1;&#x518D;&#x751F;&#x304A;&#x3088;&#x3073;&#x5316;&#x5B66;&#x7684;&#x5B9A;&#x7FA9;&#x6761;&#x4EF6;&#x3067;&#x30D2;&#x30C8;&#x80DA;&#x6027;&#x5E79;&#x7D30;&#x80DE;&#x306E;&#x5206;&#x5316;&#x76E3;&#x7763;

&#xC778;&#xAC04; &#xBC30;&#xC544; &#xC904;&#xAE30; &#xC138;&#xD3EC; (hESC) &#xC6B4;&#xBA85;&#xC744; &#xC81C;&#xC5B4; &#xD558;&#xAE30; &#xC704;&#xD55C; &#xD654;&#xD559;&#xC801;&#xC73C;&#xB85C; &#xC815;&#xC758; &#xB41C; &#xC911;&#xAC04; (CDM) &#xC870;&#xAC74; &#xAC83; &#xBFD0;&#xB9CC; &#xC544;&#xB2C8;&#xB77C; &#xC5F0;&#xAD6C;&#xC640; &#xCE58;&#xB8CC;&#xC5D0; Hescs&#xC758; &#xC2E4;&#xC6A9;&#xC801;&#xC778; &#xC751;&#xC6A9; &#xD504;&#xB85C;&#xADF8;&#xB7A8;&#xC744; &#xC6A9;&#xC774; &#xD558; &#xAC8C; &#xC544;&#xB2C8;&#xB77C; &#xB610;&#xD55C; &#xBD84;&#xC790; &#xBA54;&#xCEE4;&#xB2C8;&#xC998; &#xC790;&#xCCB4; &#xAC31;&#xC2E0; &#xBC0F; &#xCC28;&#xBCC4;&#xD654;, &#xD53C;&#xB354; &#xC138;&#xD3EC; &#xBC0F; &#xD608; &#xCCAD; &#xAD00;&#xB828; &#xB41C; &#xC5EC;&#xB7EC; &#xC54C; &#xC218; &#xC5C6;&#xB294; &#xBC0F; &#xBCC0;&#xC218; &#xC694;&#xC778; &#xC5C6;&#xC774; &#xAE30;&#xBCF8; &#xACF5;&#xBD80;&#xB97C; &#xC704;&#xD55C; &#xC6B0;&#xC218;&#xD55C; &#xC2DC;&#xC2A4;&#xD15C;&#xC744; &#xC81C;&#xACF5;. &#xC5EC;&#xAE30;&#xC11C; &#xC6B0;&#xB9AC;&#xAC00; &#xC5EC;&#xB7EC; &#xD1B5;&#xB85C; &#xD1B5;&#xD574; Matrigel &#xCF54;&#xD305; &#xD45C;&#xBA74;&#xC5D0; &#xC131;&#xC7A5; Hescs&#xC758; &#xD6A8;&#xC728;&#xC801;&#xC778; &#xC790;&#xAE30; &#xAC31;&#xC2E0;&#xC744; &#xC9C0; &#xC6D0;&#xD558;&#xB294; &#xAC04;&#xB2E8;&#xD55C; CDM &#xBCF4;&#xACE0;&#xC11C;. &#xAC19;&#xC740; &#xC870;&#xAC74; &#xD558;&#xC5D0;&#xC11C; &#xD655;&#xC7A5; &#xB41C; hESCs &#xD45C;&#xD604;&#xC758; &#xC5EC;&#xB7EC; hESC &#xD2B9;&#xC815; &#xB9C8;&#xCEE4;&#xB97C; &#xC720;&#xC9C0;, &#xD2B9;&#xC131; hESC &#xD615;&#xD0DC;&#xB97C; &#xC720;&#xC9C0;, &#xC815;&#xC0C1;&#xC801;&#xC778; karyotype &#xC2DC;&#xD5D8;&#xAD00;&#xC5D0;&#xC11C; &#xBCF4;&#xC720;&#xC73C;&#xB85C; teratomas vivo&#xC5D0;&#xC11C; &#xAC1C;&#xBC1C;. &#xB610;&#xD55C;, &#xC5EC;&#xB7EC; &#xAC00;&#xC9C0; &#xC131;&#xC7A5; &#xC778;&#xC790;&#xB294; &#xC120;&#xD0DD;&#xC801;&#xC73C;&#xB85C; &#xC6B0;&#xB9AC;&#xC758; CDM &#xC870;&#xAC74;&#xC5D0;&#xC11C; &#xAC01;&#xAC01;, hESC &#xBB38;&#xD654; &#xC2E0;&#xACBD;, &#xD655;&#xC2E4; &#xD55C; endoderm/&#xCDCC;&#xC7A5;&#xC554; &#xBC0F; &#xCD08;&#xAE30; &#xC2EC;&#xC7A5; &#xADFC;&#xC721; &#xC138;&#xD3EC;&#xC758; &#xB2E8;&#xCE35; &#xBD84;&#xD654;&#xB97C; &#xC720;&#xB3C4;&#xC744; &#xBC1C;&#xACAC; &#xD588;&#xB2E4;. &#xB530;&#xB77C;&#xC11C;&#xC774; CDM &#xC870;&#xAC74; &#xC0C8;&#xB85C;&#xC6B4; &#xCE58;&#xB8CC;&#xBC95;&#xC758; &#xAC1C;&#xBC1C;&#xC73C;&#xB85C; &#xB354; hESC &#xC790;&#xAE30; &#xAC31;&#xC2E0;&#xACFC; &#xAC10;&#xB3C5;&#xB41C; &#xCC28;&#xBCC4;&#xD654;&#xC758; &#xD2B9;&#xC131;&#xD654; &#xAE30;&#xBCF8; &#xD50C;&#xB7AB;&#xD3FC;&#xC744; &#xC81C;&#xACF5;&#xD569;&#xB2C8;&#xB2E4;.

&#xD654;&#xD559;&#xC801;&#xC73C;&#xB85C; &#xC815;&#xC758; &#xB41C; &#xC870;&#xAC74;&#xC5D0;&#xC11C; &#xC778;&#xAC04; &#xBC30;&#xC544; &#xC904;&#xAE30; &#xC138;&#xD3EC;&#xC758; &#xC7A5;&#xAE30; &#xC790;&#xAE30; &#xAC31;&#xC2E0;&#xACFC; &#xAC10;&#xB3C5; &#xCC28;&#xBCC4;&#xD654;.

De constituci&#xF3;n qu&#xED;mica definida medio (MDL) para el control de las condiciones de c&#xE9;lulas madre embrionarias humanas (CMEH) el destino no s&#xF3;lo de facilitar la aplicaci&#xF3;n pr&#xE1;ctica de hESCs en la investigaci&#xF3;n y la terapia, sino tambi&#xE9;n proporcionar un excelente sistema para estudiar los mecanismos moleculares que subyacen a la auto-renovaci&#xF3;n y diferenciaci&#xF3;n, sin el m&#xFA;ltiples factores desconocidos y variables asociadas con c&#xE9;lulas alimentadoras y suero. Aqu&#xED; mostramos un simple MDL que apoya eficiente de auto-renovaci&#xF3;n de hESCs cultivadas en una superficie Matrigel recubierto por m&#xFA;ltiples pasajes. HESCs ampliados en condiciones tales mantener expresi&#xF3;n de m&#xFA;ltiples espec&#xED;ficos hCME-marcadores, conservar la morfolog&#xED;a hCME t&#xED;pico, poseen un cariotipo normal in vitro, as&#xED; como desarrollar teratomas in vivo. Adem&#xE1;s, varios factores de crecimiento se encontraron para inducir la diferenciaci&#xF3;n selectiva monocapa de cultivos hESC hacia neuronal, endodermo definitivo / p&#xE1;ncreas y primeras c&#xE9;lulas del m&#xFA;sculo card&#xED;aco, respectivamente, en nuestras condiciones MDL. Por lo tanto, esta condici&#xF3;n del MDL proporciona una plataforma b&#xE1;sica para la caracterizaci&#xF3;n adicional de hESC auto-renovaci&#xF3;n y diferenciaci&#xF3;n dirigida, as&#xED; como el desarrollo de nuevas terapias.

A largo plazo auto-renovaci&#xF3;n y diferenciaci&#xF3;n dirigida de c&#xE9;lulas estaminales embrionarias humanas en condiciones qu&#xED;micamente definidas

&#x57FA;&#x4E8E;&#x5355;&#x5143;&#x683C;&#x7684;&#x5316;&#x5B66;&#x5E93;&#x7684;&#x5C4F;&#x5E55;&#x8FDB;&#x884C;&#x4E86;&#x8BC6;&#x522B;&#x63A7;&#x5236;&#x80DA;&#x80CE;&#x5E72;&#x7EC6;&#x80DE;&#x7684;&#x81EA;&#x6211;&#x66F4;&#x65B0;&#x7684;&#x5C0F;&#x5206;&#x5B50;&#x3002;&#x4EE5;&#x524D;&#x65E0;&#x6742;&#x73AF;&#xFF0C;SC1&#xFF0C;&#x88AB;&#x53D1;&#x73B0;&#xFF0C;&#x4F7F;&#x4EBA;&#x4EEC;&#x5F97;&#x4EE5;&#x4F20;&#x64AD;&#x672A;&#x5206;&#x5316;&#xFF0C;&#x591A;&#x80FD;&#x5E72;&#x5DDE;&#x7684;&#x8FDB;&#x7EB8;&#x5668;&#x7EC6;&#x80DE;&#x3001; &#x8840;&#x6E05;&#x3001; &#x548C;&#x767D;&#x8840;&#x75C5;&#x6291;&#x5236;&#x56E0;&#x5B50;&#x5728;&#x6CA1;&#x6709;&#x5316;&#x5B66;&#x6210;&#x5206;&#x786E;&#x5B9A;&#x6761;&#x4EF6;&#x4E0B;&#x7684;&#x5C0F;&#x9F20;&#x80DA;&#x80CE;&#x5E72;&#x7EC6;&#x80DE;&#x3002;&#x957F;&#x671F; SC1 &#x6269;&#x5927;&#x5C0F;&#x9F20;&#x80DA;&#x80CE;&#x5E72;&#x7EC6;&#x80DE;&#x53EF;&#x4EE5;&#x5206;&#x5316;&#x4E3A;&#x4E09;&#x4E2A;&#x4E3B;&#x8981;&#x7684;&#x80DA;&#x5C42;&#x4F53;&#x5916;&#x7EC6;&#x80DE;&#x8FD8;&#x53EF;&#x4EE5;&#x751F;&#x6210;&#x5D4C;&#x5408;&#x5C0F;&#x9F20;&#x548C;&#x6709;&#x52A9;&#x4E8E;&#x4F53;&#x5185;&#x7684;&#x80DA;&#x82BD;&#x884C;&#x3002;&#x751F;&#x5316;&#x4E0E;&#x7EC6;&#x80DE;&#x5B9E;&#x9A8C;&#x8868;&#x660E; SC1 &#x5DE5;&#x7A0B;&#x901A;&#x8FC7; RasGAP &#x548C; ERK1 &#x7684;&#x53CC;&#x91CD;&#x6291;&#x5236;&#x4F5C;&#x7528;&#x3002;&#x8FD9;&#x79CD;&#x5206;&#x5B50;&#x4E0D;&#x4EC5;&#x53EF;&#x80FD;&#x4FC3;&#x8FDB;&#x5E72;&#x7EC6;&#x80DE;&#x7814;&#x7A76;&#x4E0E;&#x6CBB;&#x7597;&#xFF0C;&#x5728;&#x5B9E;&#x9645;&#x5E94;&#x7528;&#xFF0C;&#x8FD8;&#x63D0;&#x4F9B;&#x4EE5;&#x524D;&#x53D8;&#x79CD;&#x7684;&#x6D1E;&#x5BDF;&#x590D;&#x6742;&#x7684;&#x5E72;&#x7EC6;&#x80DE;&#x751F;&#x7269;&#x5B66;&#x3002;

&#x7531;&#x5C0F;&#x5206;&#x5B50;&#x7684;&#x80DA;&#x80CE;&#x5E72;&#x7EC6;&#x80DE;&#x7684;&#x81EA;&#x6211;&#x66F4;&#x65B0;&#x3002;

A cell-based screen of chemical libraries was carried out to identify small molecules that control the self-renewal of ES cells. A previously uncharacterized heterocycle, SC1, was discovered that allows one to propagate murine ES cells in an undifferentiated, pluripotent state under chemically defined conditions in the absence of feeder cells, serum, and leukemia inhibitory factor. Long-term SC1-expanded murine ES cells can be differentiated into cells of the three primary germ layers in vitro and also can generate chimeric mice and contribute to the germ line in vivo. Biochemical and cellular experiments suggest that SC1 works through dual inhibition of RasGAP and ERK1. Molecules of this kind may not only facilitate practical applications of stem cells in research and therapy, but also provide previously undescribed insights into the complex biology of stem cells.

Self-renewal of embryonic stem cells by a small molecule.

Un &#xE9;cran &#xE0; base de cellules de biblioth&#xE8;ques de compos&#xE9;s chimiques a &#xE9;t&#xE9; r&#xE9;alis&#xE9;e pour identifier de petites mol&#xE9;cules qui contr&#xF4;lent l&#x26;#39;auto-renouvellement des cellules souches embryonnaires. Un h&#xE9;t&#xE9;rocycle non caract&#xE9;ris&#xE9;e, SC1, a &#xE9;t&#xE9; d&#xE9;couvert qui permet de multiplier les cellules souches embryonnaires murines dans un indiff&#xE9;renci&#xE9;, &#xE9;tat pluripotent dans des conditions chimiquement d&#xE9;finis en l&#x26;#39;absence de cellules nourrici&#xE8;res, de s&#xE9;rum, et facteur inhibiteur de leuc&#xE9;mie. &#xC0; long terme SC1-expans&#xE9;es cellules ES murines peuvent se diff&#xE9;rencier en cellules des trois feuillets embryonnaires primaires in vitro et peut &#xE9;galement g&#xE9;n&#xE9;rer des souris chim&#xE8;res et de contribuer &#xE0; la lign&#xE9;e germinale in vivo. Exp&#xE9;riences biochimiques et cellulaires sugg&#xE8;rent que les SC1 &#x153;uvres par la double inhibition de ERK1 et RasGAP. Les mol&#xE9;cules de ce type peut non seulement faciliter les applications pratiques de cellules souches dans la recherche et la th&#xE9;rapie, mais aussi fournir des indications non encore r&#xE9;pertori&#xE9;es dans la biologie complexe de cellules souches.

L&#x26;#39;auto-renouvellement des cellules souches embryonnaires par une petite mol&#xE9;cule

Kleine Molek&uuml;le zu identifizieren, die die Selbsterneuerung von ES-Zellen Steuern wurde ein Zell-basierte Bildschirm mit chemischen Bibliotheken durchgef&uuml;hrt. Ein zuvor uncharakterisiertes Heterocyclus, SC1, entdeckt wurde, &uuml;ber das eines murine ES-Zellen in einem undifferenzierten, pluripotenten Zustand unter chemisch definierten Bedingungen in Ermangelung der Feeder-Zellen, Serum und Leuk&auml;mie hemmender Faktor verbreiten k&ouml;nnen. Langfristige SC1 erweiterten murine ES-Zellen k&ouml;nnen k&ouml;nnen in Zellen der drei prim&auml;re Keim Schichten in-vitro-unterschieden werden chimeric M&auml;use zu generieren und dazu beitragen, die in-vivo Keimbahn. Biochemische und zellul&auml;re Experimente deuten darauf hin, dass SC1 durch duale Hemmung der RasGAP und ERK1 funktioniert. Molek&uuml;le dieser Art k&ouml;nnen nicht nur erleichtern praktische Anwendungen von Stammzellen in der Forschung und Therapie, aber auch bisher unbeschriebene Einblicke in die komplexe Biologie der Stammzellen.

Selbsterneuerung von embryonalen Stammzellen durch ein kleines Molek&uuml;l.

Uno schermo cell-based di librerie chimiche &egrave; stato effettuato per identificare piccole molecole che controllano l&#39;auto-rinnovamento di cellule ES. Un heterocycle precedentemente atipici, SC1, fu scoperto che permette di propagare le cellule ES murine in uno stato indifferenziato, pluripotenti in condizioni chimicamente definite in assenza di cellule di alimentatore, siero e fattore inibitorio di leucemia. A lungo termine SC1-espanso murine cellule ES possono essere differenziate in cellule dei tre strati germinali primarie in vitro e anche possono generare topi chimerici e contribuire alla linea germinale in vivo. Esperimenti biochimici e cellulari suggeriscono che SC1 funziona attraverso la doppia inibizione di RasGAP ed ERK1. Molecole di questo tipo possono non solo facilitare le applicazioni pratiche delle cellule staminali nella ricerca e nella terapia, ma anche fornire approfondimenti in precedenza nuovo la complessa biologia delle cellule staminali.

Auto-rinnovamento delle cellule staminali embrionali da una piccola molecola.

&#x5316;&#x5B66;&#x30E9;&#x30A4;&#x30D6;&#x30E9;&#x30EA;&#x30FC;&#x306E;&#x7D30;&#x80DE;&#x30D9;&#x30FC;&#x30B9;&#x306E;&#x753B;&#x9762;&#x304C;ES&#x7D30;&#x80DE;&#x306E;&#x81EA;&#x5DF1;&#x8907;&#x88FD;&#x3092;&#x5236;&#x5FA1;&#x3059;&#x308B;&#x5C0F;&#x5206;&#x5B50;&#x3092;&#x8B58;&#x5225;&#x3059;&#x308B;&#x305F;&#x3081;&#x306B;&#x5B9F;&#x65BD;&#x3057;&#x305F;&#x3002;&#x4EE5;&#x524D;&#x306F;&#x672A;&#x540C;&#x5B9A;&#x306E;&#x8907;&#x7D20;&#x74B0;&#x3001;SC1&#x306F;&#x3001;&#x4EBA;&#x306F;&#x30D5;&#x30A3;&#x30FC;&#x30C0;&#x30FC;&#x7D30;&#x80DE;&#x3001;&#x8840;&#x6E05;&#x3001;&#x767D;&#x8840;&#x75C5;&#x6291;&#x5236;&#x56E0;&#x5B50;&#x306E;&#x5B58;&#x5728;&#x4E0B;&#x3067;&#x5316;&#x5B66;&#x7684;&#x306B;&#x5B9A;&#x7FA9;&#x3055;&#x308C;&#x305F;&#x6761;&#x4EF6;&#x4E0B;&#x3067;&#x672A;&#x5206;&#x5316;&#x591A;&#x80FD;&#x6027;&#x306E;&#x72B6;&#x614B;&#x3067;&#x30DE;&#x30A6;&#x30B9;ES&#x7D30;&#x80DE;&#x3092;&#x4F1D;&#x64AD;&#x3059;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x3092;&#x53EF;&#x80FD;&#x306B;&#x767A;&#x898B;&#x3055;&#x308C;&#x307E;&#x3057;&#x305F;&#x3002;&#x9577;&#x671F;&#x7684;SC1-&#x62E1;&#x5F35;&#x3055;&#x308C;&#x305F;&#x30DE;&#x30A6;&#x30B9;ES&#x7D30;&#x80DE;&#x306F;&#x3001;in vitro&#x306E;3&#x3064;&#x306E;&#x4E3B;&#x8981;&#x80DA;&#x8449;&#x306E;&#x7D30;&#x80DE;&#x306B;&#x5206;&#x5316;&#x3059;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x304C;&#x3067;&#x304D;&#x3001;&#x307E;&#x305F;&#x3001;&#x30AD;&#x30E1;&#x30E9;&#x30DE;&#x30A6;&#x30B9;&#x3092;&#x4F5C;&#x88FD;&#x3057;&#x3001;in vivo&#x3067;&#x306E;&#x751F;&#x6B96;&#x7CFB;&#x5217;&#x306B;&#x5BC4;&#x4E0E;&#x3059;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x304C;&#x3067;&#x304D;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x751F;&#x5316;&#x5B66;&#x7684;&#x304A;&#x3088;&#x3073;&#x7D30;&#x80DE;&#x306E;&#x5B9F;&#x9A13;&#x3067;&#x306F;&#x3001;RasGAP&#x3068;ERK1&#x306E;&#x4E8C;&#x91CD;&#x963B;&#x5BB3;&#x3092;&#x4ECB;&#x3057;&#x3066;&#x305D;&#x306E;SC1&#x4F5C;&#x54C1;&#x3092;&#x304A;&#x52E7;&#x3081;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x3053;&#x306E;&#x7A2E;&#x306E;&#x5206;&#x5B50;&#x304C;&#x552F;&#x4E00;&#x306E;&#x7814;&#x7A76;&#x3068;&#x6CBB;&#x7642;&#x306B;&#x304A;&#x3051;&#x308B;&#x5E79;&#x7D30;&#x80DE;&#x306E;&#x5B9F;&#x7528;&#x5316;&#x3092;&#x4FC3;&#x9032;&#x3059;&#x308B;&#x3060;&#x3051;&#x3067;&#x306A;&#x304F;&#x3001;&#x5E79;&#x7D30;&#x80DE;&#x306E;&#x8907;&#x96D1;&#x306A;&#x751F;&#x7269;&#x5B66;&#x3001;&#x4EE5;&#x524D;&#x306B;&#x672A;&#x8A18;&#x8F09;&#x306E;&#x6D1E;&#x5BDF;&#x3092;&#x63D0;&#x4F9B;&#x3059;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x306F;&#x3067;&#x304D;&#x307E;&#x305B;&#x3093;&#x3002;

&#x5C0F;&#x5206;&#x5B50;&#x306B;&#x3088;&#x308B;&#x80DA;&#x6027;&#x5E79;&#x7D30;&#x80DE;&#x306E;&#x81EA;&#x5DF1;&#x8907;&#x88FD;

&#xD654;&#xD559; &#xB77C;&#xC774;&#xBE0C;&#xB7EC;&#xB9AC;&#xC758; &#xC140; &#xAE30;&#xBC18; &#xD654;&#xBA74; ES &#xC138;&#xD3EC;&#xC758; &#xC790;&#xCCB4; &#xC7AC;&#xC0DD;&#xC744; &#xC81C;&#xC5B4; &#xD558;&#xB294; &#xC791;&#xC740; &#xBD84;&#xC790;&#xB97C; &#xC2DD;&#xBCC4; &#xD558;&#xAE30; &#xC704;&#xD574; &#xC2E4;&#xC2DC; &#xB410;&#xB2E4;. &#xC774;&#xC804;&#xC5D0; &#xC0C8;&#xB86D;&#xAC70;&#xB098; heterocycle SC1, &#xC788;&#xB3C4;&#xB85D; &#xC804;&#xD30C; &#xD53C;&#xB354; &#xC138;&#xD3EC;, &#xD608; &#xCCAD;, &#xADF8;&#xB9AC;&#xACE0; &#xBC31;&#xD608;&#xBCD1; &#xC5B5;&#xC81C; &#xC694;&#xC778;&#xC758; &#xBD80;&#xC7AC;&#xC5D0; &#xD654;&#xD559;&#xC801;&#xC73C;&#xB85C; &#xC815;&#xC758; &#xB41C; &#xC870;&#xAC74; &#xD558;&#xC5D0;&#xC11C; undifferentiated, pluripotent &#xC8FC;&#xC5D0;&#xC11C; murine ES &#xC138;&#xD3EC;&#xB97C; &#xD558;&#xB098; &#xBC1C;&#xACAC; &#xD588;&#xB2E4;. &#xC7A5;&#xAE30; SC1 &#xD655;&#xC7A5; murine ES &#xC138;&#xD3EC; &#xCCB4; &#xC678; 3 &#xAC1C;&#xC758; &#xC8FC;&#xC694; &#xC138;&#xADE0; &#xCE35;&#xC758; &#xC138;&#xD3EC;&#xB85C; &#xBD84;&#xD654; &#xB420; &#xC218; &#xC788;&#xB2E4; &#xACE0;&#xB3C4; &#xC218; &#xC0DD;&#xC131; chimeric &#xB9C8;&#xC6B0;&#xC2A4; &#xBC0F; &#xC138;&#xADE0; &#xC120; &#xC0DD;&#xCCB4; &#xC870;&#xAC74;&#xC5D0; &#xAE30;&#xC5EC;. &#xC0DD;&#xD654;&#xD559; &#xBC0F; &#xC138;&#xD3EC; &#xC2E4;&#xD5D8; SC1 &#xB4C0;&#xC5BC; &#xC5B5;&#xC81C; RasGAP &#xBC0F; ERK1 &#xD1B5;&#xD574; &#xC791;&#xB3D9; &#xAC83;&#xC774; &#xC88B;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xC774;&#xB7F0;&#xC774; &#xC885;&#xB958;&#xC758; &#xBD84;&#xC790; &#xC218; &#xC788;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4; &#xBFD0;&#xB9CC; &#xC544;&#xB2C8;&#xB77C; &#xC904;&#xAE30; &#xC138;&#xD3EC; &#xC5F0;&#xAD6C;&#xC640; &#xCE58;&#xB8CC;&#xC5D0;&#xC11C;&#xC758; &#xC2E4;&#xC6A9;&#xC801;&#xC778; &#xC751;&#xC6A9; &#xD504;&#xB85C;&#xADF8;&#xB7A8;&#xC744; &#xC6A9;&#xC774; &#xD558; &#xAC8C; &#xD558;&#xC9C0;&#xB9CC; &#xB610;&#xD55C; &#xC904;&#xAE30; &#xC138;&#xD3EC;&#xC758; &#xBCF5;&#xC7A1; &#xD55C; &#xC0DD;&#xBB3C;&#xD559;&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xC774;&#xC804;&#xC5D0; undescribed &#xD1B5;&#xCC30;&#xB825;&#xC744; &#xC81C;&#xACF5; &#xD569;&#xB2C8;&#xB2E4;.

&#xC791;&#xC740; &#xBD84;&#xC790;&#xC5D0; &#xC758;&#xD574; &#xBC30;&#xC544; &#xC904;&#xAE30; &#xC138;&#xD3EC;&#xC758; &#xC790;&#xCCB4; &#xC7AC;&#xC0DD;.

Una pantalla a base de c&#xE9;lulas de quimiotecas se llev&#xF3; a cabo para identificar peque&#xF1;as mol&#xE9;culas que controlan la autorrenovaci&#xF3;n de las c&#xE9;lulas madre embrionarias. Un heterociclo previamente uncharacterized, SC1, se descubri&#xF3; que permite una para propagar c&#xE9;lulas murinas ES en un estado indiferenciado, pluripotente bajo condiciones qu&#xED;micamente definidas en la ausencia de c&#xE9;lulas alimentadoras, suero, y el factor inhibidor de la leucemia. A largo plazo SC1-expandidas c&#xE9;lulas ES murinas pueden diferenciarse en c&#xE9;lulas de las tres capas germinales primarias in vitro y tambi&#xE9;n puede generar ratones quim&#xE9;ricos y contribuir a la l&#xED;nea germinal en vivo. Experimentos bioqu&#xED;micos y celulares sugieren que SC1 obras a trav&#xE9;s de la inhibici&#xF3;n dual de RasGAP y ERK1. Las mol&#xE9;culas de este tipo no s&#xF3;lo puede facilitar la aplicaci&#xF3;n pr&#xE1;ctica de las c&#xE9;lulas madre en la investigaci&#xF3;n y la terapia, sino que tambi&#xE9;n proporcionan puntos de vista, no descritas anteriormente en la compleja biolog&#xED;a de las c&#xE9;lulas madre.

Auto-renovaci&#xF3;n de c&#xE9;lulas madre embrionarias por una peque&#xF1;a mol&#xE9;cula

&#x57FA;&#x56E0;&#x4FEE;&#x9970;&#x95F4;&#x5145;&#x8D28;&#x5E72;&#x7EC6;&#x80DE; (MSC) &#x53EF;&#x80FD;&#x4F5C;&#x4E3A;&#x7EC6;&#x80DE;&#x86CB;&#x767D;&#x66FF;&#x4EE3;&#x7597;&#x6CD5;&#x8F66;&#x8F86;&#x4E3A;&#x7EC6;&#x80DE;&#x548C;&#x57FA;&#x56E0;&#x6CBB;&#x7597;&#x57FA;&#x4E8E;&#x7684;&#x5E94;&#x7528;&#x7A0B;&#x5E8F;&#x63D0;&#x4F9B;&#x4E00;&#x4E2A;&#x6709;&#x524D;&#x9014;&#x7684;&#x5DE5;&#x5177;&#x3002;&#x7136;&#x800C;&#xFF0C;&#x4E3A;&#x4E86;&#x907F;&#x514D;&#x63D2;&#x5165;&#x7A81;&#x53D8;&#x7684;&#x98CE;&#x9669;&#xFF0C;&#x6709;&#x9488;&#x5BF9;&#x6027;&#x5730;&#x7684;&#x878D;&#x5165;&#x8F6C;&#x57FA;&#x56E0; &#39;&#x907F;&#x98CE;&#x6E2F;&#39; &#x8F68;&#x8FF9;&#x662F;&#x5174;&#x8DA3;&#x7684;&#x6781;&#x5927;&#x3002;

&#x9488;&#x5BF9;&#x57FA;&#x56E0;&#x52A0;&#x5165;&#x4EBA;&#x7C7B;&#x7684;&#x95F4;&#x5145;&#x8D28;&#x5E72;&#x7EC6;&#x80DE;&#x4F5C;&#x4E3A;&#x4E00;&#x4E2A;&#x57FA;&#x4E8E;&#x5355;&#x5143;&#x683C;&#x7684;&#x8840;&#x6D46;&#x53EF;&#x6EB6;&#x6027;&#x86CB;&#x767D;&#x4EA4;&#x4ED8;&#x5E73;&#x53F0;&#x3002;

Gene-modified mesenchymal stromal cells (MSC) provide a promising tool for cell and gene therapy-based applications by potentially acting as a cellular vehicle for protein-replacement therapy. However, to avoid the risk of insertional mutagenesis, targeted integration of a transgene into a 'safe harbor' locus is of great interest.

Targeted gene addition to human mesenchymal stromal cells as a cell-based plasma-soluble protein delivery platform.

Gene-modifi&#xE9;s cellules stromales m&#xE9;senchymateuses (CSM) de fournir un outil prometteur pour la th&#xE9;rapie g&#xE9;nique des cellules et des applications bas&#xE9;es sur par potentiellement agir comme v&#xE9;hicule pour la prot&#xE9;ine cellulaire th&#xE9;rapie de remplacement. Toutefois, pour &#xE9;viter le risque de mutagen&#xE8;se insertionnelle, l&#x26;#39;int&#xE9;gration cibl&#xE9;e d&#x26;#39;un transg&#xE8;ne dans une locus &#x26;quot;safe harbour&#x26;quot; est d&#x26;#39;un grand int&#xE9;r&#xEA;t.

Ajout du g&#xE8;ne cibl&#xE9; &#xE0; l&#x26;#39;homme cellules stromales m&#xE9;senchymateuses comme une cellule &#xE0; base de plasma soluble Delivery Platform prot&#xE9;ines

Gen-modifizierte Mesenchymale Stromale Zellen (MSC) ein viel versprechendes Hilfsmittel f&uuml;r Zell- und gen-Therapie-basierte Anwendungen von zur Verf&uuml;gung potenziell zellul&auml;re Vehikel f&uuml;r Protein-Ersatz-Therapie. Sie vermeiden das Risiko muss Mutagenese, ist die gezielte Integration ein Transgen in eine &#39;safe Harbor&#39; Locus jedoch von gro&szlig;em Interesse.

Gezielte gen zus&auml;tzlich zu menschlichen mesenchymal stromal Zellen als ein Plasma-l&ouml;sliches Protein zellbasierte-Delivery-Plattform.

Gene modificato stromale cellule mesenchimali (MSC) forniscono uno strumento promettente per applicazioni basate su terapia cellulare e genica agendo potenzialmente come un veicolo per la terapia sostitutiva della proteina cellulare. Tuttavia, per evitare il rischio di mutagenesi inserzionale, integrazione mirata di un transgene in un locus &#39;safe harbor&#39; &egrave; di grande interesse.

Targeting per aggiunta di gene in cellule stromale mesenchimali umane come una piattaforma di distribuzione di proteine solubili in plasma cell-based.

&#x907A;&#x4F1D;&#x5B50;&#x6539;&#x5909;&#x9593;&#x8449;&#x7CFB;&#x5E79;&#x7D30;&#x80DE;&#xFF08;MSC&#xFF09;&#x306F;&#x3001;&#x6F5C;&#x5728;&#x7684;&#x306B;&#x30BF;&#x30F3;&#x30D1;&#x30AF;&#x8CEA;&#x88DC;&#x5145;&#x7642;&#x6CD5;&#x306E;&#x305F;&#x3081;&#x306E;&#x643A;&#x5E2F;&#x624B;&#x6BB5;&#x3068;&#x3057;&#x3066;&#x4F5C;&#x7528;&#x3059;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x306B;&#x3088;&#x308A;&#x3001;&#x7D30;&#x80DE;&#x3084;&#x907A;&#x4F1D;&#x5B50;&#x6CBB;&#x7642;&#x30D9;&#x30FC;&#x30B9;&#x306E;&#x30A2;&#x30D7;&#x30EA;&#x30B1;&#x30FC;&#x30B7;&#x30E7;&#x30F3;&#x306E;&#x305F;&#x3081;&#x306E;&#x6709;&#x671B;&#x306A;&#x30C4;&#x30FC;&#x30EB;&#x3092;&#x63D0;&#x4F9B;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x3057;&#x304B;&#x3057;&#x3001;&#x633F;&#x5165;&#x5909;&#x7570;&#x306E;&#x5371;&#x967A;&#x6027;&#x3092;&#x907F;&#x3051;&#x308B;&#x305F;&#x3081;&#x306B;&#x3001; &#x26;quot;&#x30BB;&#x30FC;&#x30D5;&#x30CF;&#x30FC;&#x30D0;&#x30FC;&#x26;quot;&#x907A;&#x4F1D;&#x5B50;&#x5EA7;&#x306B;&#x5C0E;&#x5165;&#x907A;&#x4F1D;&#x5B50;&#x306E;&#x6A19;&#x7684;&#x3068;&#x306E;&#x7D71;&#x5408;&#x306F;&#x975E;&#x5E38;&#x306B;&#x8208;&#x5473;&#x6DF1;&#x3044;&#x3067;&#x3059;&#x3002;

&#x30BB;&#x30EB;&#x30D9;&#x30FC;&#x30B9;&#x306E;&#x200B;&#x200B;&#x8840;&#x6F3F;&#x53EF;&#x6EB6;&#x6027;&#x30BF;&#x30F3;&#x30D1;&#x30AF;&#x8CEA;&#x306E;&#x914D;&#x4FE1;&#x30D7;&#x30E9;&#x30C3;&#x30C8;&#x30D5;&#x30A9;&#x30FC;&#x30E0;&#x3068;&#x3057;&#x3066;&#x30D2;&#x30C8;&#x9593;&#x8449;&#x7CFB;&#x5E79;&#x7D30;&#x80DE;&#x3078;&#x306E;&#x6A19;&#x7684;&#x907A;&#x4F1D;&#x5B50;&#x306E;&#x8FFD;&#x52A0;

&#xC720;&#xC804;&#xC790; &#xC218;&#xC815; &#xC911;&#xAC04; &#xC5FD; &#xAE30;&#xC9C8; &#xC138;&#xD3EC; (MSC&#xB294;) &#xC7A0;&#xC7AC;&#xC801;&#xC73C;&#xB85C; &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8; &#xB300;&#xCCB4; &#xC694;&#xBC95;&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xC140;&#xB8F0;&#xB7EC; &#xCC28;&#xB7C9;&#xC73C;&#xB85C; &#xC5ED;&#xD560; &#xD558; &#xC5EC; &#xC138;&#xD3EC; &#xBC0F; &#xC720;&#xC804;&#xC790; &#xCE58;&#xB8CC;&#xC5D0; &#xAE30;&#xCD08;&#xB97C; &#xB454; &#xC751;&#xC6A9;&#xC744; &#xC704;&#xD55C; &#xC720;&#xB9DD;&#xD55C; &#xB3C4;&#xAD6C;&#xB97C; &#xC81C;&#xACF5; &#xD569;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xADF8;&#xB7EC;&#xB098;, insertional mutagenesis&#xC758; &#xC704;&#xD5D8;&#xC744; &#xBC29;&#xC9C0; &#xD558;&#xB824;&#xBA74; &#xB300;&#xC0C1;&#xB41C; &#xD1B5;&#xD569; &#xD55C; transgene&#xC758; &#39;&#xD558;&#xBC84;&#39; &#xB85C;&#xCEE4; &#xC2A4;&#xC5D0; &#xD070; &#xAD00;&#xC2EC;&#xC785;&#xB2C8;&#xB2E4;.

&#xD50C;&#xB77C;&#xC988;&#xB9C8; &#xC6A9; &#xD574; &#xB2E8;&#xBC31;&#xC9C8; &#xC140; &#xAE30;&#xBC18; &#xC804;&#xB2EC; &#xD50C;&#xB7AB;&#xD3FC;&#xC73C;&#xB85C; &#xC778;&#xAC04; &#xC911;&#xAC04; &#xC5FD; &#xAE30;&#xC9C8; &#xC138;&#xD3EC; &#xC720;&#xC804;&#xC790; &#xBFD0;&#xB9CC; &#xC544;&#xB2C8;&#xB77C; &#xB300;&#xC0C1;.

Modificados Gene-c&#xE9;lulas mesenquimales del estroma (MSC) proporcionar una herramienta prometedora para la terapia a base de c&#xE9;lulas y los genes de aplicaciones mediante la posibilidad de actuar como un veh&#xED;culo para la terapia celular, la prote&#xED;na de reemplazo. Sin embargo, para evitar el riesgo de mutag&#xE9;nesis de inserci&#xF3;n, integraci&#xF3;n selectiva de un transg&#xE9;n en un lugar &#x26;quot;puerto seguro&#x26;quot; es de gran inter&#xE9;s.

La adici&#xF3;n dirigida de genes a las c&#xE9;lulas mesenquimales del estroma Como base de c&#xE9;lulas de plasma soluble en plataforma de distribuci&#xF3;n de la prote&#xED;na

&#x6211;&#x4EEC;&#x63D0;&#x51FA;&#x6211;&#x4EEC;&#x7684;&#x7ECF;&#x9A8C;&#x4E0E;&#x5C01;&#x5835;&#x5BA4;&#x95F4;&#x9694;&#x7F3A;&#x635F;&#x4E0E;&#x52A8;&#x8109;&#x7624;&#x7684;&#x4E24;&#x4E2A;&#x9009;&#x9879;&#x3002;&#x5BA4;&#x95F4;&#x9694;&#x7F3A;&#x635F;&#x4E0E;&#x52A8;&#x8109;&#x7624;&#xFF0C;14 &#x5C81;&#x81F3; 42 &#x5C81;&#xFF0C;&#x4E09;&#x5341;&#x56DB;&#x4E2A;&#x60A3;&#x8005;&#x672F;&#x4E0E;&#x6539;&#x6027;&#x53CC;&#x76D8;&#x5C01;&#x5835;&#x5668;&#x5C01;&#x5835;&#x3002;&#x9798;&#x88AB;&#x7528;&#x6765;&#x8FD0;&#x9001;&#x540E;&#x5EFA;&#x7ACB;&#x4E00;&#x4E2A;&#x7A33;&#x5B9A;&#x7684;&quot;&#x52A8;&#x9759;&#x8109;&#x5FAA;&#x73AF;&quot;&#x900F;&#x89C6;&#x4E0B;&#x7684;&#x5C01;&#x5835;&#x5668;&#x3002;&#x5FC3;&#x7535;&#x56FE;&#x548C;&#x80F8;&#x8D85;&#x58F0;&#x5FC3;&#x52A8;&#x56FE;&#x7528;&#x4E8E;&#x540E;&#x7EED;&#x5DE5;&#x4F5C;&#x3002;&#x4F46; 1 &#x75C5;&#x4EBA;&#x90FD;&#x6709;&#x7684;&#x7ECF;&#x5386;&#x6210;&#x529F;&#x5C01;&#x5835;&#x5BA4;&#x95F4;&#x9694;&#x7F3A;&#x635F;&#x3001; &#x52A8;&#x8109;&#x7624;&#x672F;&#x65F6;&#x5C01;&#x5835;&#x5668;&#x90FD;&#x4F7F;&#x7528; 2 &#x4E2A;&#x4E0D;&#x540C;&#x804C;&#x4F4D;&#x3002;&#x5171;&#x6709; 19 &#x8FDB;&#x6C34;&#x53E3;&#x52A8;&#x8109;&#x7624;&#x88AB;&#x5173;&#x95ED;&#x5176;&#x90E8;&#x5BA4;&#x95F4;&#x9694;&#x7F3A;&#x635F;&#x7684;&#x60A3;&#x8005;&#x548C; 15 &#x4F8B;&#xFF0C;&#x5176;&#x7F3A;&#x9677;&#x5728;&#x51FA;&#x53E3;&#x5C01;&#x95ED;&#x3002;&#x516B;&#x540D;&#x75C5;&#x4EBA;&#x7684;&#x8FC7;&#x7A0B;&#xFF0C;&#x5728;&#x540E;&#x7EED;&#x671F;&#x95F4;&#x5931;&#x8E2A;&#x540E;&#x7ACB;&#x5373;&#x6709;&#x6B8B;&#x4F59;&#x5206;&#x6D41;&#x3002;&#x4E00;&#x4F4D;&#x60A3;&#x8005;&#x5236;&#x5B9A;&#x6B21;&#x8981;&#x4E3B;&#x52A8;&#x8109;&#x8FD4;&#x6D41;&#x3002;&#x8868;&#x73B0;&#x4E3A;&#x4E0D;&#x540C;&#x7C7B;&#x578B;&#x7684;&#x5BFC;&#x7535;&#x5757;&#x7684;&#x56DB;&#x4E2A;&#x75C5;&#x4EBA;&#x90FD;&#x7684;&#x7EC4;&#x7684;&#x672F;&#x540E;&#x52A8;&#x8109;&#x7624;&#x5165;&#x53E3;&#x5C01;&#x95ED;&#x3002;&#x5728;&#x540E;&#x7EED;&#x671F;&#x95F4;&#x89C2;&#x5BDF;&#x5230;&#x6CA1;&#x6709;&#x5176;&#x4ED6;&#x5E76;&#x53D1;&#x75C7;&#x3002;&#x6211;&#x4EEC;&#x63A8;&#x65AD;&#x8BE5;&#x90E8;&#x5BA4;&#x5BA4;&#x95F4;&#x9694;&#x7F3A;&#x635F;&#x4F34;&#x52A8;&#x8109;&#x7624;&#x53EF;&#x4EE5;&#x7528;&#x6539;&#x6027;&#x53CC;&#x76D8;&#x5C01;&#x5835;&#x5668;&#x6210;&#x529F;&#x5173;&#x95ED;&#x3002;&#x6BCF;&#x4E2A; 2 &#x7684;&#x9009;&#x9879;&#xFF0C;&#x6211;&#x4EEC;&#x63D0;&#x51FA;&#x4E86;&#x5C01;&#x5835;&#x5BA4;&#x95F4;&#x9694;&#x7F3A;&#x635F;&#x4E0E;&#x52A8;&#x8109;&#x7624;&#x672F;&#x6709;&#x5176;&#x4F18;&#x70B9;&#x548C;&#x7F3A;&#x70B9;&#x3002;&#x6700;&#x7EC8;&#xFF0C;&#x75C5;&#x53D8;&#x90E8;&#x4F4D;&#x7684;&#x914D;&#x7F6E;&#x5E94;&#x51B3;&#x5B9A;&#x7684;&#x7C7B;&#x578B;&#x548C;&#x4F4D;&#x7F6E;&#x7684;&#x8BBE;&#x5907;&#x3002;

&#x819C;&#x90E8;&#x5BA4;&#x95F4;&#x9694;&#x7F3A;&#x635F;&#x4E0E;&#x52A8;&#x8109;&#x7624;&#xFF1A; &#x5C01;&#x5835;&#x7684;&#x4E24;&#x4E2A;&#x9009;&#x9879;&#x3002;

We present our experience with 2 options for device closure of perimembranous ventricular septal defect with aneurysm. Thirty-four patients with perimembranous ventricular septal defect with aneurysm, aged from 14 to 42 years, underwent transcatheter closure with modified double-disk occluders. A sheath was used to deliver the occluder after establishment of a stable "arteriovenous loop" under fluoroscopy. Electrocardiography and transthoracic echocardiography were used for follow-up. All but 1 patient experienced successful transcatheter closure of perimembranous ventricular septal defect with aneurysm, when occluders were used in 2 different positions. There were 19 patients whose perimembranous ventricular septal defects were closed at the inlet of the aneurysm and 15 patients whose defects were closed at the outlet. Eight patients had a residual shunt immediately after the procedure, which disappeared during follow-up. One patient developed minor aortic regurgitation. Four patients who manifested different types of conductive block were all in the group that underwent closure at the inlet of the aneurysm. No other complications were observed during follow-up.We infer that perimembranous ventricular septal defect with aneurysm can be successfully closed with modified double-disk occluders. Each of the 2 options that we have presented for transcatheter closure of perimembranous ventricular septal defect with aneurysm has its advantages and disadvantages. Ultimately, the configuration of the lesion should decide the type and position of the device.

Perimembranous ventricular septal defect with aneurysm: two options for transcatheter closure.

Nous pr&#xE9;sentons notre exp&#xE9;rience avec 2 options pour dispositif de fermeture de d&#xE9;faut ventriculaire septale p&#xE9;rimembraneuse avec an&#xE9;vrisme. Trente-quatre patients atteints de d&#xE9;faut ventriculaire septale p&#xE9;rimembraneuse avec an&#xE9;vrisme, &#xE2;g&#xE9;s de 14 &#xE0; 42 ans, a subi la fermeture percutan&#xE9;e avec modifi&#xE9;s double disque de dispositifs d&#x26;#39;occlusion. Une gaine a &#xE9;t&#xE9; utilis&#xE9; pour fournir le dispositif d&#x26;#39;occlusion apr&#xE8;s l&#x26;#39;&#xE9;tablissement d&#x26;#39;un gouvernement stable &#x26;quot;boucle art&#xE9;rio-veineuse&#x26;quot; sous fluoroscopie. &#xC9;lectrocardiographie et &#xE9;chocardiographie transthoracique ont &#xE9;t&#xE9; utilis&#xE9;s pour le suivi. Tous, sauf 1 patient fermeture percutan&#xE9;e exp&#xE9;riment&#xE9; avec succ&#xE8;s de d&#xE9;faut ventriculaire septale p&#xE9;rimembraneuse avec an&#xE9;vrisme, lorsque obturateurs ont &#xE9;t&#xE9; utilis&#xE9;s dans 2 positions diff&#xE9;rentes. Il y avait 19 patients dont p&#xE9;rimembraneuse malformations septales ventriculaires ont &#xE9;t&#xE9; ferm&#xE9;es &#xE0; l&#x26;#39;entr&#xE9;e de l&#x26;#39;an&#xE9;vrisme et 15 patients dont les d&#xE9;fauts ont &#xE9;t&#xE9; ferm&#xE9;s &#xE0; la sortie. Huit patients avaient un shunt r&#xE9;siduel imm&#xE9;diatement apr&#xE8;s la proc&#xE9;dure, qui a disparu au cours du suivi. Un patient a d&#xE9;velopp&#xE9; une insuffisance aortique mineure. Quatre patients qui manifestent diff&#xE9;rents types de bloc conducteur &#xE9;taient tous dans le groupe qui a subi la fermeture &#xE0; l&#x26;#39;entr&#xE9;e de l&#x26;#39;an&#xE9;vrisme. Aucune autre complication n&#x26;#39;a &#xE9;t&#xE9; observ&#xE9;e au cours du suivi up.We d&#xE9;duire que le d&#xE9;faut ventriculaire septale p&#xE9;rimembraneuse avec an&#xE9;vrisme peut &#xEA;tre conclu avec succ&#xE8;s avec modifi&#xE9;s double disque de dispositifs d&#x26;#39;occlusion. Chacune des 2 options que nous avons pr&#xE9;sent&#xE9;s pour la fermeture percutan&#xE9;e de d&#xE9;faut ventriculaire septale p&#xE9;rimembraneuse avec an&#xE9;vrisme a ses avantages et ses inconv&#xE9;nients. En fin de compte, la configuration de la l&#xE9;sion doit d&#xE9;cider du type et de la position de l&#x26;#39;appareil.

D&#xE9;faut ventriculaire septale p&#xE9;rimembraneuse avec l&#x26;#39;an&#xE9;vrisme: Deux options pour la fermeture percutan&#xE9;e

Wir pr&auml;sentieren unsere Erfahrung mit 2 Optionen f&uuml;r Ger&auml;t Schlie&szlig;ung des Perimembranous Ventrikelseptumdefekt mit Aneurysma. 34 Patienten mit Perimembranous Ventrikelseptumdefekt mit Aneurysma, im Alter von 14 bis 42 Jahren unterzog Transkatheter-Verschluss mit modifizierten Doppel-Disk-Occluders. Eine Scheide wurde verwendet, um die Occluder nach Errichtung eines stabilen &quot;arterioven&ouml;se Schleife&quot; unter Fluoroskopie zu liefern. Elektrokardiographie und trans&ouml;sophageal Echokardiographie dienten f&uuml;r Follow-up. Alle aber 1 Patient erlebt erfolgreiche Transkatheter-Schlie&szlig;ung der Perimembranous Ventrikelseptumdefekt mit Aneurysma, wenn Occluders in 2 verschiedenen Positionen verwendet wurden. Wurden 19 Patienten, deren Perimembranous VSD geschlossen wurden, am Einla&szlig; der Aneurysma, und 15 Patienten, deren M&auml;ngel am Ausgang geschlossen wurden. Acht Patienten hatten einen residualen Shunt sofort nach dem Eingriff, die w&auml;hrend der Follow-up verschwunden. Ein Patient entwickelte kleinere Aortenklappe Aufsto&szlig;en. Vier Patienten, die verschiedene Arten von leitf&auml;higen Block manifestiert wurden alle in der Gruppe, die Schlie&szlig;ung am Einla&szlig; der Aneurysma unterzog. Keine andere Komplikationen wurden w&auml;hrend der Follow-up beobachtet.Wir folgern, dass Perimembranous Ventrikelseptumdefekt mit Aneurysma kann erfolgreich mit modifizierten Doppel-Disk-Occluders geschlossen werden. Jede 2 Optionen, die wir, Transkatheter-Verschluss des Perimembranous Ventrikelseptumdefekt mit Aneurysma vorgelegt haben hat seine vor- und Nachteile. Die Konfiguration der L&auml;sion sollte letztlich die Art und die Position des Ger&auml;tes entscheiden.

Perimembranous Ventrikelseptumdefekt mit Aneurysma: zwei Optionen f&uuml;r Transkatheter-Verschluss.

Vi presentiamo la nostra esperienza con 2 opzioni per la chiusura del dispositivo di difetto del setto ventricolare perimembranous con aneurisma. Trentaquattro pazienti con difetto del setto ventricolare perimembranous con aneurisma, et&agrave; da 14 a 42 anni, ha subito chiusura transcatetere con modificato occluders doppio-disco. Una guaina &egrave; stata utilizzata per fornire l&#39;occlusione dopo l&#39;istituzione di una stabile &quot;artero-ciclo&quot; sotto fluoroscopia. Elettrocardiografia ed ecocardiografia transtoracica furono utilizzate per il follow-up. Tutti tranne 1 paziente ha sperimentato chiusura transcatetere successo di difetto del setto ventricolare perimembranous con aneurisma, quando occluders sono stati utilizzati in 2 diverse posizioni. C&#39;erano 19 pazienti cui difetti del setto ventricolare perimembranous sono stati chiusi all&#39;ingresso dell&#39;aneurisma e 15 pazienti cui difetti sono stati chiusi in uscita. Otto pazienti hanno avuti uno shunt residuo immediatamente dopo la procedura, che scomparve durante il follow-up. Un paziente ha sviluppato insufficienza aortica minore. Quattro pazienti che manifestano diversi tipi di blocco conduttiva erano tutti nel gruppo che ha subito la chiusura all&#39;ingresso dell&#39;aneurisma. Altre complicazioni sono stati osservati durante il follow-up.Siamo dedurre che perimembranous difetto del setto ventricolare con aneurisma pu&ograve; essere chiuso con successo con occluders doppio-disco modificato. Ognuna delle 2 opzioni che abbiamo presentato per chiusura transcatetere del difetto del setto ventricolare perimembranous con aneurisma ha i suoi vantaggi e svantaggi. In ultima analisi, la configurazione della lesione dovrebbe decidere il tipo e la posizione del dispositivo.

Difetto del setto ventricolare Perimembranous con aneurisma: due opzioni per la chiusura transcatetere.

&#x6211;&#x3005;&#x306F;&#x3001;&#x52D5;&#x8108;&#x7624;&#x3068;perimembranous&#x5FC3;&#x5BA4;&#x4E2D;&#x9694;&#x6B20;&#x640D;&#x306E;&#x30C7;&#x30D0;&#x30A4;&#x30B9;&#x9589;&#x9396;&#x306E;&#x305F;&#x3081;&#x306E;2&#x3064;&#x306E;&#x30AA;&#x30D7;&#x30B7;&#x30E7;&#x30F3;&#x304C;&#x6211;&#x3005;&#x306E;&#x7D4C;&#x9A13;&#x3092;&#x63D0;&#x793A;&#x3057;&#x307E;&#x3059;&#x3002; 14&#x304B;&#x3089;42&#x6B73;&#x304B;&#x3089;&#x6B73;&#x306E;&#x52D5;&#x8108;&#x7624;&#x3068;perimembranous&#x5FC3;&#x5BA4;&#x4E2D;&#x9694;&#x6B20;&#x640D;&#x75C7;&#x3068;&#x4E09;&#x5341;&#x56DB;&#x306E;&#x60A3;&#x8005;&#x306F;&#x3001;&#x5909;&#x66F4;&#x3055;&#x308C;&#x305F;&#x4E8C;&#x91CD;&#x30C7;&#x30A3;&#x30B9;&#x30AF;&#x906E;&#x853D;&#x3068;&#x30AB;&#x30C6;&#x30FC;&#x30C6;&#x30EB;&#x306E;&#x9589;&#x9396;&#x3092;&#x65BD;&#x884C;&#x3057;&#x305F;&#x3002;&#x30B7;&#x30FC;&#x30B9;&#x306F;&#x3001;X&#x7DDA;&#x900F;&#x8996;&#x4E0B;&#x3067;&#x5B89;&#x5B9A;&#x3057;&#x305F; &#x26;quot;&#x52D5;&#x9759;&#x8108;&#x30EB;&#x30FC;&#x30D7;&#x26;quot;&#x306E;&#x78BA;&#x7ACB;&#x5F8C;&#x306B;&#x906E;&#x853D;&#x3092;&#x63D0;&#x4F9B;&#x3059;&#x308B;&#x305F;&#x3081;&#x306B;&#x4F7F;&#x7528;&#x3055;&#x308C;&#x3066;&#x3044;&#x307E;&#x3057;&#x305F;&#x3002;&#x5FC3;&#x96FB;&#x56F3;&#x3068;&#x200B;&#x200B;&#x7D4C;&#x80F8;&#x58C1;&#x5FC3;&#x30A8;&#x30B3;&#x30FC;&#x691C;&#x67FB;&#x306F;&#x30D5;&#x30A9;&#x30ED;&#x30FC;&#x30A2;&#x30C3;&#x30D7;&#x306E;&#x305F;&#x3081;&#x306B;&#x4F7F;&#x7528;&#x3055;&#x308C;&#x305F;&#x3002;&#x3059;&#x3079;&#x3066;&#x304C;1&#x4EBA;&#x306E;&#x60A3;&#x8005;&#x3067;&#x306F;&#x3001;&#x906E;&#x853D;&#x304C;2&#x3064;&#x306E;&#x7570;&#x306A;&#x308B;&#x4F4D;&#x7F6E;&#x3067;&#x4F7F;&#x7528;&#x3055;&#x308C;&#x3066;&#x3044;&#x305F;&#x52D5;&#x8108;&#x7624;&#x3068;perimembranous&#x5FC3;&#x5BA4;&#x4E2D;&#x9694;&#x6B20;&#x640D;&#x75C7;&#x306E;&#x6210;&#x529F;&#x3057;&#x305F;&#x30AB;&#x30C6;&#x30FC;&#x30C6;&#x30EB;&#x306E;&#x9589;&#x9396;&#x3092;&#x7D4C;&#x9A13;&#x3057;&#x307E;&#x3057;&#x305F;&#x3002;&#x305D;&#x306E;perimembranous&#x5FC3;&#x5BA4;&#x4E2D;&#x9694;&#x6B20;&#x640D;&#x3001;&#x6B20;&#x9665;&#x51FA;&#x53E3;&#x9589;&#x9396;&#x3055;&#x308C;&#x305F;&#x52D5;&#x8108;&#x7624;&#x3068;15&#x4EBA;&#x306E;&#x60A3;&#x8005;&#x306E;&#x5165;&#x53E3;&#x306B;&#x9589;&#x9396;&#x3055;&#x308C;&#x305F;&#x60A3;&#x8005;19&#x4F8B;&#x304C;&#x3042;&#x3063;&#x305F;&#x3002; 8&#x4F8B;&#x306F;&#x30D5;&#x30A9;&#x30ED;&#x30FC;&#x30A2;&#x30C3;&#x30D7;&#x4E2D;&#x306B;&#x884C;&#x65B9;&#x4E0D;&#x660E;&#x306B;&#x306A;&#x3063;&#x305F;&#x76F4;&#x5F8C;&#x306B;&#x624B;&#x9806;&#x306E;&#x5F8C;&#x306B;&#x6B8B;&#x5B58;&#x77ED;&#x7D61;&#x3092;&#x6301;&#x3063;&#x3066;&#x3044;&#x305F;&#x3002;&#x4E00;&#x4EBA;&#x306E;&#x60A3;&#x8005;&#x306F;&#x8EFD;&#x5FAE;&#x306A;&#x5927;&#x52D5;&#x8108;&#x5F01;&#x9006;&#x6D41;&#x3092;&#x958B;&#x767A;&#x3057;&#x307E;&#x3057;&#x305F;&#x3002;&#x5C0E;&#x96FB;&#x6027;&#x30D6;&#x30ED;&#x30C3;&#x30AF;&#x306E;&#x7570;&#x306A;&#x308B;&#x7A2E;&#x985E;&#x3092;&#x660E;&#x3089;&#x304B;&#x306B;4&#x4F8B;&#x304C;&#x52D5;&#x8108;&#x200B;&#x200B;&#x7624;&#x306E;&#x5165;&#x53E3;&#x9589;&#x9396;&#x3092;&#x65BD;&#x884C;&#x3057;&#x305F;&#x30B0;&#x30EB;&#x30FC;&#x30D7;&#x5185;&#x306E;&#x3059;&#x3079;&#x3066;&#x3060;&#x3063;&#x305F;&#x3002;&#x4ED6;&#x306E;&#x5408;&#x4F75;&#x75C7;&#x306F;&#x52D5;&#x8108;&#x7624;&#x3068;perimembranous&#x5FC3;&#x5BA4;&#x4E2D;&#x9694;&#x6B20;&#x640D;&#x304C;&#x6B63;&#x5E38;&#x306B;&#x5909;&#x66F4;&#x3055;&#x308C;&#x305F;&#x4E8C;&#x91CD;&#x30C7;&#x30A3;&#x30B9;&#x30AF;&#x906E;&#x853D;&#x3067;&#x9589;&#x9396;&#x3059;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x304C;&#x3067;&#x304D;&#x308B;&#x30D5;&#x30A9;&#x30ED;&#x30FC;up.We&#x63A8;&#x8AD6;&#x4E2D;&#x306B;&#x89B3;&#x5BDF;&#x3055;&#x308C;&#x306A;&#x304B;&#x3063;&#x305F;&#x3002;&#x6211;&#x3005;&#x306F;&#x52D5;&#x8108;&#x7624;&#x3068;perimembranous&#x5FC3;&#x5BA4;&#x4E2D;&#x9694;&#x6B20;&#x640D;&#x306E;&#x7D4C;&#x30AB;&#x30C6;&#x30FC;&#x30C6;&#x30EB;&#x9589;&#x9396;&#x306E;&#x305F;&#x3081;&#x306B;&#x63D0;&#x793A;&#x3055;&#x308C;&#x3066;&#x3044;&#x308B;&#x3053;&#x3068;&#x306E;2&#x3064;&#x306E;&#x30AA;&#x30D7;&#x30B7;&#x30E7;&#x30F3;&#x306E;&#x305D;&#x308C;&#x305E;&#x308C;&#x306E;&#x9577;&#x6240;&#x3068;&#x77ED;&#x6240;&#x304C;&#x3042;&#x308A;&#x307E;&#x3059;&#x3002;&#x6700;&#x7D42;&#x7684;&#x306B;&#x3001;&#x75C5;&#x5909;&#x90E8;&#x306E;&#x69CB;&#x6210;&#x306F;&#x3001;&#x30C7;&#x30D0;&#x30A4;&#x30B9;&#x306E;&#x7A2E;&#x985E;&#x3068;&#x4F4D;&#x7F6E;&#x3092;&#x6C7A;&#x5B9A;&#x3059;&#x308B;&#x5FC5;&#x8981;&#x304C;&#x3042;&#x308A;&#x307E;&#x3059;&#x3002;

&#x52D5;&#x8108;&#x7624;&#x3068;Perimembranous&#x5FC3;&#x5BA4;&#x4E2D;&#x9694;&#x6B20;&#x640D;&#xFF1A;&#x30AB;&#x30C6;&#x30FC;&#x30C6;&#x30EB;&#x306E;&#x9589;&#x9396;&#x306E;&#x305F;&#x3081;&#x306E;2&#x3064;&#x306E;&#x30AA;&#x30D7;&#x30B7;&#x30E7;&#x30F3;

Perimembranous &#xB3D9;&#xB9E5;&#xACFC; &#xC2EC; &#xC2E4; septal &#xACB0;&#xD568;&#xC758; 2 &#xC635;&#xC158; &#xC7A5;&#xCE58; &#xD3D0;&#xC1C4;&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xC6B0;&#xB9AC;&#xC758; &#xD658;&#xACBD;&#xC744; &#xC18C;&#xAC1C;. 30-4 &#xD658;&#xC790; perimembranous 42 &#xB144; 14&#xC5D0;&#xC11C; &#xC138; &#xB3D9;&#xB9E5;&#xACFC; &#xC2EC; &#xC2E4; septal &#xACB0;&#xD568; &#xC218;&#xC815;&#xB41C; &#xB354;&#xBE14; &#xB514;&#xC2A4;&#xD06C; occluders&#xC640; &#xD568;&#xAED8; &#xAC04; &#xD3D0;&#xC1C4;&#xB97C; &#xBC1B;&#xC558;&#xB2E4;. &#xCE7C; &#xC9D1; &#xC548;&#xC815; &#xD22C;&#xC2DC; &#xC544;&#xB798; &quot;arteriovenous &#xB8E8;&#xD504;&quot;&#xC758; &#xC124;&#xB9BD; &#xD6C4;&#xC5D0; occluder&#xB97C; &#xC81C;&#xACF5; &#xD558;&#xB294; &#xB370; &#xC0AC;&#xC6A9;&#xD55C;. &#xC2EC;&#xC804;&#xB3C4; transthoracic &#xCD08;&#xC74C;&#xD30C; &#xCD94;&#xAC00; &#xC791;&#xC5C5;&#xC744; &#xC704;&#xD574; &#xC0AC;&#xC6A9; &#xB418;&#xC5C8;&#xB2E4;. 1 &#xD658;&#xC790;&#xB97C; &#xC81C;&#xC678;&#xD55C; &#xBAA8;&#xB4E0; &#xACBD;&#xD5D8;&#xC774; &#xC131;&#xACF5;&#xC801;&#xC778; &#xAC04; &#xD3D0;&#xC1C4;, &#xB3D9;&#xB9E5; &#xB958;&#xC640; perimembranous &#xC2EC; &#xC2E4; septal &#xACB0;&#xD568;&#xC758; occluders 2 &#xB2E4;&#xB978; &#xC704;&#xCE58;&#xC5D0; &#xC0AC;&#xC6A9; &#xD558;&#xB294; &#xACBD;&#xC6B0;. &#xB204;&#xAD6C;&#xC758; perimembranous &#xC2EC; &#xC2E4; septal &#xACB0;&#xD568;&#xC740; &#xB3D9;&#xB9E5;&#xC758; &#xC785;&#xAD6C;&#xC5D0;&#xC11C; &#xB9C8;&#xAC10; &#xD588;&#xB2E4; 19 &#xD658;&#xC790; 15 &#xD658;&#xC790; &#xB204;&#xAD6C;&#xC758; &#xACB0;&#xD568; &#xCF58;&#xC13C;&#xD2B8; &#xB9C8;&#xAC10; &#xD588;&#xB2E4; &#xD588;&#xB2E4;. 8 &#xD658;&#xC790; &#xC808;&#xCC28; &#xC18D; &#xD589; &#xB3D9;&#xC548; &#xC0AC;&#xB77C;&#xC9C4; &#xC9C1;&#xD6C4; &#xC794;&#xC5EC; &#xC6B0;&#xD68C;&#xB85C; &#xD588;&#xB2E4;. &#xD55C; &#xD658;&#xC790;&#xAC00; &#xBD80; &#xB300;&#xB3D9;&#xB9E5; &#xC5ED;&#xB958; &#xAC1C;&#xBC1C;. &#xC804;&#xB3C4;&#xC131; &#xBE14;&#xB85D;&#xC758; &#xC885;&#xB958;&#xB97C; &#xAC01; &#xC131; &#xD558;&#xB294; 4 &#xBA85;&#xC758; &#xD658;&#xC790; &#xADF8;&#xB8F9; &#xD3D0;&#xC1C4;&#xB294; &#xB3D9;&#xB9E5;&#xC758; &#xC785;&#xAD6C;&#xC5D0;&#xC11C; &#xC218;&#xC220;&#xC744; &#xBAA8;&#xB450; &#xD588;&#xB2E4;. &#xB2E4;&#xB978; &#xD569;&#xBCD1;&#xC99D;&#xC740; &#xCD94;&#xAC00; &#xC791;&#xC5C5; &#xD558;&#xB294; &#xB3D9;&#xC548; &#xAD00;&#xCC30; &#xD588;&#xB2E4;.&#xC6B0;&#xB9AC;&#xB294; perimembranous &#xCD94;&#xB860; &#xB3D9;&#xB9E5;&#xACFC; &#xC2EC; &#xC2E4; septal &#xACB0;&#xD568; &#xC218;&#xC815;&#xB41C; &#xB354;&#xBE14; &#xB514;&#xC2A4;&#xD06C; occluders &#xC131;&#xACF5;&#xC801;&#xC73C;&#xB85C; &#xB9C8;&#xAC10; &#xB420; &#xC218; &#xC788;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xC6B0;&#xB9AC;&#xAC00; &#xAC04; perimembranous &#xB3D9;&#xB9E5;&#xACFC; &#xC2EC; &#xC2E4; septal &#xACB0;&#xD568;&#xC744; &#xD3D0;&#xC1C4;&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xC81C;&#xC2DC; 2 &#xC635;&#xC158; &#xB9C8;&#xB2E4; &#xC7A5;&#xC810;&#xACFC; &#xB2E8;&#xC810;&#xC774; &#xC788;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4;. &#xAD81;&#xADF9;&#xC801;&#xC73C;&#xB85C;, &#xBCD1; &#xBCC0; &#xAD6C;&#xC131; &#xC720;&#xD615; &#xBC0F; &#xC7A5;&#xCE58;&#xC758; &#xC704;&#xCE58;&#xB97C; &#xACB0;&#xC815; &#xD574;&#xC57C; &#xD569;&#xB2C8;&#xB2E4;.

Perimembranous &#xB3D9;&#xB9E5;&#xACFC; &#xC2EC; &#xC2E4; septal &#xACB0;&#xD568;: &#xAC04; &#xD3D0;&#xC1C4;&#xC5D0; &#xB300; &#xD55C; &#xB450; &#xAC00;&#xC9C0; &#xC635;&#xC158;&#xC774; &#xC788;&#xC2B5;&#xB2C8;&#xB2E4;.

Presentamos nuestra experiencia con 2 opciones para el dispositivo de cierre de defecto septal ventricular perimembranosa con el aneurisma. Treinta y cuatro pacientes con defecto septal ventricular perimembranosa con aneurisma, con edades de 14 a 42 a&#xF1;os, fueron sometidos a cierre percut&#xE1;neo a la actualizaci&#xF3;n de disco doble oclusores. Una vaina se utiliza para entregar el dispositivo de oclusi&#xF3;n despu&#xE9;s del establecimiento de un Estado estable &#x26;quot;asa arteriovenosa&#x26;quot; bajo fluoroscopia. Electrocardiograf&#xED;a y ecocardiograf&#xED;a transtor&#xE1;cica se utiliza para el seguimiento. Todos menos un paciente experiment&#xF3; cierre percut&#xE1;neo con &#xE9;xito de la comunicaci&#xF3;n interventricular perimembranosa con aneurisma, cuando oclusores se utilizaron en 2 posiciones diferentes. Hubo 19 pacientes con defectos septales ventriculares perimembranosa fueron cerradas a la entrada del aneurisma y 15 pacientes cuyos defectos fueron cerrados a la salida. Ocho pacientes tuvieron un cortocircuito residual inmediatamente despu&#xE9;s del procedimiento, que desapareci&#xF3; durante el seguimiento. Un paciente desarroll&#xF3; insuficiencia a&#xF3;rtica leve. Cuatro pacientes que manifiestan diferentes tipos de bloque conductora estaban todos en el grupo que se someti&#xF3; el cierre en la entrada del aneurisma. No hay otras complicaciones se observaron durante el seguimiento up.We inferir que el defecto septal ventricular perimembranosa con aneurisma puede ser cerrado con &#xE9;xito a la actualizaci&#xF3;n de disco doble oclusores. Cada una de las 2 opciones que hemos presentado para el cierre percut&#xE1;neo de comunicaci&#xF3;n interventricular perimembranosa con aneurisma tiene sus ventajas y desventajas. En &#xFA;ltima instancia, la configuraci&#xF3;n de la lesi&#xF3;n debe decidir el tipo y la posici&#xF3;n del dispositivo.

Shuyuan Yao

Research and Development

Stemgent

The use of SC1 (Pluripotin) to Support mESC Self-renewal in the Absence of LIF

Generation of Induced Pluripotent Stem Cells by Reprogramming Human Fibroblasts with the Stemgent Human TF Lentivirus Set