11.10 : כרומטוגרפיה ברובד דק (TLC)

כרמוטוגרפיה ברובד דק (TLC) היא שיטה כרומטוגרפית אשר מפרידה תרכובות על בסיס קוטביות. שיטה זו עושה שימוש לרוב בג'ל סיליקה, צורה של סיליקון דו-חמצני, בתור הפאזה הנייחת. לג'ל הסיליקה יש קבוצות הידרוקסיל (OH) על פני השטח, היוצרות קשרי מימן עם תרכובות קוטביות, ובכך משפיעות על הצמדותן לפאזה הנייחת.

בתחילת הניתוח, תערובת התרכובות ממוקמת כנקודה בקו ההתחלה על גבי לוח ה-TLC בעזרת רובד נימי דק. החלק התחתון של הלוח נטבל בפאזה הניידת, שלרוב מהווה ממס אורגני פחות קוטבי מהפאזה הנייחת. הממס נע במעלה הלוח באמצעות פעולה נימית ונושא איתו את הנקודה של התערובת. כאשר הממס עולה לאורך הלוח, רכיבי התערובת מתחלקים בין הפאזה הניידת לפאזה הנייחת. הרכיבים הקוטביים מקיימים אינטראקציה חזקה יותר עם הפאזה הנייחת הקוטבית, מה שגורם להם לנוע באיטיות ולעבור מרחק קצר בלבד על לוח ה-TLC. רכיבים פחות קוטביים בתערובת נמסים יותר בפאזה הניידת ונוטים לקיים אינטראקציה רבה יותר עם הפאזה הניידת, מה שמאפשר להם לנוע רחוק יותר במעלה הלוח.

הבנת הקוטביות של הרכיבים ושל הפאזה הניידת היא חיונית לחיזוי תוצאות ההפרדה. הפאזה הניידת (הממס) צריכה להיות קוטבית במידה מספקת כדי להזיז את התרכובת הקוטבית ביותר ביעילות, תוך שמירה על הפרדה טובה של התרכובות. מקדם העיכוב R_f מוגדר כיחס בין המרחק שעוברת תרכובת לבין המרחק שעוברת הפאזה הניידת. הבנת מושג זה חיונית בניתוח TLC. ה- R_f של תרכובת תלוי בפאזה הניידת שבה נעשה שימוש. תרכובות לא קוטביות יראו ערכי R_f גבוהים עם פאזה ניידת לא קוטבית. לעומת זאת, רכיבים קוטביים יראו ערכי R_f נמוכים עם פאזה ניידת לא קוטבית.