בשנת הזרקה תוך חדרי ברחם ו electroporation של E16 עוברים עכברוש

Summary

Abstract

ברחם-in-vivo הזרקת electroporation של הניאוקורטקס עכברוש עובריים מספק כלי רב עוצמה עבור מניפולציה של אבות בודדים לאורך הקירות של החדר לרוחב. טכניקה זו היא כעת בשימוש נרחב כדי לחקור את התהליכים המעורבים corticogenesis על ידי יתר להביע או דריסה גנים התבוננות על תופעות התפשטות ההגירה הסלולר, והבחנה. בהשוואה אסטרטגיות בנוקאאוט המסורתית, ב-ברחם electroporation מספק אמצעי מהיר כדי לתפעל אוכלוסייה של תאים במהלך חלון הזמני ספציפיים. בפרוטוקול זה וידאו, אנחנו המתאר את המתודולוגיה ניסיוני להכנת חולדות לניתוח, לחשוף את הקרניים דרך הרחם laporatomy, הזרקת DNA לתוך החדרים רוחבי של העובר המתפתח, electroporating דנ"א לתוך אבות המצפים את הקיר לרוחב, וטיפול בבעלי חיים שלאחר הניתוח. המעבדה שלנו משתמשת בפרוטוקול זה על ניתוחים על E15-E21 חולדות, אולם זה מבוצע לרוב על E16 כפי שמוצג בסרטון זה.